膝骨性关节炎UTE分级与关节液MMP-13表达水平的相关性研究

目的研究膝骨性关节炎（KOA）患者的关节软骨MRI超短波长序列（UTE）分级与关节液中基质金属蛋白酶（MMP）-13表达水平的相关性。方法收集66例KOA患者的病历资料,进行MRI检查,对股骨内侧髁软骨行UTE分级,同时抽取患者关节液,采用ELISE方法测定MMP-13表达水平,并进行相关性分析。结果在股骨内侧髁UTE分级为0级（对照组）与Ⅰ级时,MMP-13表达水平无明显统计学差异（P＞0.05）,UTE分级升高至Ⅱ级及Ⅲ级时,MMP-13表达水平较0级有明显升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。相关性分析显示股骨内侧髁软骨UTE分级与关节液中MMP-13的表达水平存在显著正相关（r=0.85,P＜0.01)。结论KOA患者MRI检查UTE分级越高,MMP-13表达水平越高。     

壮药龙钻通痹方对类风湿关节炎大鼠模型MMP-13的影响

目的：观察壮药龙钻通痹方对关节炎大鼠模型致炎因子MMP-13的影响.方法：采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎大鼠模型,以甲氨喋呤作对照,用酶联免疫分析法检测大鼠模型各组血清MMP-13的表达.结果：壮药龙钻通痹方能显著降低大鼠血清MMP-13水平（P＜0.05）.结论：壮药龙钻通痹方能下调关节炎大鼠血清MMP-13水平,提示这可能是其治疗类风湿关节炎的作用机理之一.     

温针灸对兔膝关节退变模型血清MMP-1和MMP-13水平的影响

目的观察温针灸治疗兔膝关节退变模型前后血清基质金属蛋白酶1、13（MMP-1,MMP-13）及软骨形态的变化,探讨温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理。方法 30只雄性兔随机分为模型组、温针灸组和西药组,每组10只,采用右后肢伸直位固定制作兔膝关节退变模型。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测造模前、治疗前和治疗后兔血清中MMP-1,MMP-13水平,参考彭太平法观察膝关节组织形态学变化。结果治疗2周后,大体和光镜观察模型组膝关节软骨变薄,出现明显的关节软骨损伤,温针灸组可明显改善关节软骨组织学结构。各组治疗前较造模前血清MMP-1、MMP-13的浓度均显著升高（P〈0.05）;治疗两周后,与模型组比较,温针灸组MMP-1、MMP-13水平降低（P〈0.05）,但与西药组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论温针灸能治疗KOA的软骨损伤,可能与降低MMP-1和MMP-13表达有关。     

通痹汤治疗膝骨性关节炎伴关节积液24例

近年来 ,跟随导师于光华教授运用自拟的通痹汤治疗膝关节骨性关节炎伴关节积液 2 4例 ,取得满意疗效 ,现报道如下。1　临床资料2 4例均为门诊病人 ,男 9例 ,女 1 5例 ;年龄 1 7～ 76岁 ,平均 49.5岁 ;单膝发病 1 6例 ,双膝发病者8例 ;病程最短 2 5d,最长 1 0年。2　治疗方法通痹汤药物组成 :苍术 1 2 g,茯苓 1 2 g,泽泻1 2 g,冬瓜皮 2 0 g,车前子 1 2 g,萆 1 2 g,金银花1 5g,蒲公英 1 5g,红花 1 2 g,赤芍 1 2 g,丹参 1 5g,牡丹皮 9g,甘草 6g。水煎分早晚两次服 ,日 1剂 ,连服 6剂 ,服药期间停服其他药物 ,卧床休息 ,限制活动。3　疗效标准…     

锌对SD大鼠膝骨关节炎早中期关节软骨的作用及对MMP-13表达的影响

目的探讨不同剂量的锌对SD大鼠膝骨关节炎早中期软骨的作用及对MMP-13表达的影响。方法 64只SD大鼠均行改良Hult法复制骨关节炎（OA）模型,随机分为对照组、低锌组、中锌组和高锌组,于术后第2天开始每天分别灌胃给予生理盐水、锌5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg,用药干预直到实验处死。分别于术后4周、8周光镜下对HE染色软骨组织标本行组织形态学观察及行Mankin评分比较,术后8周对软骨组织MMP-13免疫组化染色切片的灰度值行半定量分析。结果术后4周与8周,对照组术侧的软骨损伤明显比对照组健侧严重,Mankin评分比较差异有显著性（P〈0.05）;术后4周,低锌组术侧、中锌组术侧和高锌组术侧软骨损伤与对照组术侧比较无明显差异,均为轻度软骨损伤,Mankin评分比较无统计学意义;术后8周,高锌组术侧的软骨损伤轻于对照组术侧,Mankin评分比较差异有显著性（P〈0.05）,MMP-13免疫组化染色切片的灰度值比较差异有显著性（P〈0.05）,其它各组在软骨损伤及MMP-13灰度值比较均无统计学意义。结论 SD大鼠膝骨关节炎造模成功;高剂量锌（每天20 mg/kg）给予8周对SD大鼠OA软骨具有保护作用,且能减少软骨组织MMP-13的表达。     

IL-1α对兔软骨细胞增殖及其Ⅰ、Ⅱ胶原 mRNA表达的影响

目的探讨IL-1α对体外兔软骨细胞增殖及胶原基因表达的影响.方法在成功分离培养软骨细胞后,以MTT法检测软骨细胞活性并绘制其生长曲线图;将浓度为1×104U/L、1×105U/L、1×106U/L的IL-1α作用于贴壁后的软骨细胞,以原位杂交方法检测软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA表达情况.结果 IL-1α可促使软骨细胞向成纤维样细胞形态转化,抑制软骨细胞分裂、增殖,诱导非特异性Ⅰ型胶原表达,抑制其特异性Ⅱ型胶原表达.结论 IL-1α是介导软骨细胞变性的重要因素.     

活血止痛膏对兔骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:观察活血止痛膏剂对兔骨骼肌钝挫伤后内源性IIb型肌球蛋白重链(MHC)、Ⅰ型及III型胶原mRNA表达的影响。方法:63只大白兔随机分为活血止痛膏高、中、低剂量组与青鹏膏对照组、外伤对照组,每组12只。另取3只为正常对照组。各实验组采用"重物自由落体打击法"制作大白兔骨骼肌急性钝挫伤模型。受伤第1天即于伤处贴敷相应药物。各组伤后3、10、20、27天各处死大白兔3只,取腓肠肌标本,共6个。RT-PCR技术检测内源性Ⅱb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA。结果:①伤后第3、10、20天活血止痛膏高、中剂量组和青鹏膏组内源性Ⅱb型MHCmRNA表达量高于外伤组和低剂量组(P<0.05);第10、20天活血止痛膏高剂量组内源性IIb型MHCmRNA表达高于中剂量组(P<0.05);②内源性I型胶原mRNA表达量:第3天各组比较无统计学意义(P>0.05);第10、20天活血止痛膏高、中剂量组和青鹏膏组表达量低于外伤组、低剂量组(P<0.05);第10、20天中剂量组高于高剂量组(P<0.05)。③内源性Ⅲ型胶原mRNA表达量:第3、10、20天活血止痛膏高、中剂量组和青鹏膏组内源性Ⅲ型胶原mRNA表达低于外伤组和低剂量组(P<0.05);第3、10、20天高剂量组和青鹏膏组表达量明显少于中剂量组(P<0.05)。三个检测指标各个时间点青鹏膏组和高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:活血止痛膏可有效促进骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型MHCmRNA表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,其作用与青鹏膏相当。     

跌打通痹膏对兔膝骨关节炎退变关节软骨细胞MMP-1、MMP-3表达的影响

目的观察跌打通痹膏对兔膝骨关节炎模型关节液中MMP-1、MMP-3表达的影响,研究跌打通痹膏治疗膝骨关节炎的作用机制,为跌打通痹膏临床应用的推广提供实验与理论依据。方法随机将61只月龄8月、体重1.5~2.5 kg健康新西兰大白兔分成空白组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组12只,另1只为改良型Hulth造模法造模后的模型验证兔。空白组不做任何处理,模型组、跌打痛痹膏组、骨通贴组采用改良型Hulth造模法,假手术组打开关节腔后直接缝合。术后第5周造模验证成功后,进入实验处理部分。空白组、假手术组不予治疗,模型组用普通医用胶带固定,跌打通痹膏组用跌打通痹膏贴敷,骨通贴组用骨通贴膏贴敷。胶带、跌打通痹膏、骨通贴膏经计算后均裁剪为2 cm×4 cm大小,固定于右膝关节,按照使用说明每日1次,每日8 h后取掉,连续4周。第5周后观察实验兔行为变化、X线下关节软骨改变情况,检测关节软骨中MMP-1、MMP-3的表达。结果全部实验兔均成活至观察时间且无一出现过敏现象;右膝关节X线正侧位提示跌打通痹膏组、骨通贴组两组经治疗后较模型组改善。关节软骨观察:1肉眼观察评分:跌打通痹膏组、骨通贴组评分较模型组低(P0.05)。2光镜下关节软骨评分:跌打通痹膏组、骨通贴组评分较模型组低(P0.05)。MMP-1、MMP-3检测:模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组与空白组比较,MMP-1、MMP-3表达显著提高(P0.01),跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较,MMP-1、MMP-3表达降低(P0.01)。结论通过改良型Hulth造模法可成功复制兔KOA模型,跌打通痹膏和骨通贴对KOA均有治疗作用,可延缓KOA的病程,但不能治愈KOA。     

活血化瘀膏对早中期膝骨性关节炎关节液NO和MMP-13的影响研究

[目的]观察活血化瘀膏对早中期膝关节骨性关节炎的一氧化氮(NO)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)含量的影响及临床疗效,并与扶他林乳胶剂组做对照。[方法]将60例患者分成治疗组和对照组,活血化瘀膏为治疗组,用扶他林乳胶剂作对照,治疗1周及2周后,分别观察患者的美国特种外科医院膝关节评分(HSS)总分、疼痛积分,并进行计分对比研究,同时测定治疗组治疗前后关节液中NO和MMP-13含量,评价其临床疗效进行疗效观察。[结果]通过统计学分析,治疗组治疗1周及治疗2周后与治疗前进行HSS量表中HSS总分、疼痛积分,P<0。05;治疗组按疗程治疗前后关节液中NO含量经配对T检验,P<0。05。[结论]活血化瘀膏对早中期膝关节骨性关节炎有较好的治疗作用。     

助阳通痹颗粒对博莱霉素致肺纤维化模型大鼠肺组织MMP-9和MMP-13活性的影响

目的 研究助阳通痹颗粒对肺纤维化动物模型大鼠肺组织中MMP-9、MMP-13含量的影响,明确助阳通痹颗粒治疗间质性肺疾病及改善相关指标的药效学作用.方法 根据供试品助阳通痹颗粒的功能及主治,采用气管内一次性注射博莱霉素方法复制肺纤维化动物模型,分别于造模后第7、14、28天3个时间点每组随机选取10只动物做相关指标检测.以醋酸泼尼松片作为阳性对照药物.结果 助阳通痹颗粒在肺纤维化早期阶段阻止了肺组织内MMP-9、MMP-13含量的增多,抑制肺泡间隔增厚,延缓肺纤维化进程;晚期阻止了肺组织内MMP-9含量的增多,以及MMP-13含量的降低,抑制肺间质胶原的增多,降低了肺纤维化的损伤程度.结论 助阳通痹颗粒可明显抑制肺纤维化造成的肺实变,可阻止博莱霉素所致的肺纤维化的进程,对其造成的损伤有一定抑制作用.     

消瘀接骨散对兔膝骨关节炎模型关节液中MMP-1、MMP-3表达的影响

目的 观察消瘀接骨散对兔膝骨关节炎模型中关节软骨病理改变及关节液中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-1、MMP-3表达的影响。 方法 将24只新西兰大耳白兔分为正常组、模型组、用药组,每组8只。采用膝关节石膏制动方法复制膝骨关节炎模型,模型复制成功后,正常饲养并驱赶1周,给予用药组家兔消瘀接骨散外敷,给予模型组和正常组家兔相同大小药棉、绷带、胶布固定。光镜下观察膝关节软骨退变情况,采用酶联免疫吸附法测定关节液中MMP-1、MMP-3表达水平。 结果 用药组家兔膝关节软骨损伤较模型组明显减轻,关节软骨表面较正常组粗糙,滑膜增厚、稍有肿胀,镜下可见细胞排列规律尚可,偶见少量细胞簇集现象,关节软骨细胞有轻度变性,潮线尚完整。用药组家兔膝关节软骨的Mankin评分及关节液中MMP-1、MMP-3表达水平明显低于模型组（P<0.05）。 结论 消瘀接骨散外敷治疗兔膝骨关节炎的机制与其降低关节液中MMP-1、MMP-3的表达水平有关。     

MMP-13、TIMP-1在兔骨关节炎模型的表达及其意义

目的 评价切断家兔膝关节内侧副韧带、前交叉韧带,切除内侧半月板制作骨关节炎模型的方法的可行性;研究MMP-13、TIMP-1在软骨退变过程中的病理作用.方法 30只实验家兔随机平均分成3组,左侧膝关节仅打开后缝合作为自身对照,右侧膝关节制作骨关节炎模型.分别在术后4w、8w、12w处死动物,观察关节软骨的病理变化并按照标准给予评分.检测MMP-13、TIMP-1的蛋白表达.结果 三组模型的实验侧关节软骨退变程度随造模时间延长而逐渐加重.MMP-13、TIMP-1分别在术后4w、8w表达最强.MMP-13、TIMP-1积分光密度值比值逐渐减小.结论 MMP-13、TIMP-1在骨关节炎软骨退变过程中起着重要的作用.MMP-13/TIMP-1比值的大小与软骨退变程度成负相关,可以作为反映软骨退变程度的参考指标.     

氯胺酮与氟哌啶复合麻醉用于兔膝骨性关节炎模型

目的探索氯胺酮、氟哌啶应用于兔麻醉后对呼吸系统的影响并进行麻醉效果评价。方法32只健康新西兰兔随机分为两组,氯胺酮、氟哌啶组(KD组);氯胺酮组(K组)。KD组以(100 mg氯胺酮 5 mg氟哌啶)/kg体重肌内注射;K组以100 mg氯胺酮/kg体重肌内注射,均进行兔膝骨性关节炎模型的建立。于麻醉后15 min时抽取耳中央动脉血做血气分析,评价麻醉效果、记录持续时间、死亡率。结果KD组麻醉前与麻醉后15 min时比较:酸碱度(pH)、碱剩余(BE(B))差异有显著性(P<0.01);标准碳酸氢盐(SB)、细胞外液缓冲碱(Beecf)、氧饱和度(SO2)差异有显著性(P<0.05)。K组麻醉前与麻醉后15 min时比较:pH、二氧化碳分压(PaCO2)差异有显著性(P<0.01);SB、Beecf、BE(B)差异有显著性(P<0.05)。KD组与K组在麻醉后15 min时比较:实际碳酸氢盐(HCO3ˉ)、总二氧化碳(TCO2)差异有显著性(P<0.01);Beecf BE(B)总血红蛋白(THBc)差异有显著性(P<0.05)。KD组的麻醉效果为优75%、良25%、差0%,死亡率0%,麻醉有效时间(45±5)min。K组的麻醉效果为优0%、良31%、差69%,死亡率0%,麻醉有效时间(20±5)min。结论用氯胺酮、氟哌啶联合应用于兔麻醉效果优于单纯氯胺酮麻醉。     

小鼠膝关节骨关节炎细胞因子的表达

目的 初步探讨实验性骨关节炎小鼠不同时间不同免疫应激情况下细胞因子的表达. 方法 8周龄健康清洁级C57小鼠随机分为实验组和对照组2组.实验组小鼠激活免疫系统,1周后实验组和对照组小鼠同时行右侧膝关节DMM手术(即手术部分切除右侧膝关节内侧半月板).分别于术后4,8周取膝关节病理标本,进行关节组织切片番红O快绿染色和mankin评分,免疫组织化学技术检测MMP13表达情况,RT qPCR检测滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子以及X型胶原的表达. 结果 与对照组比较,手术后4,8周,实验组mankin评分、各细胞因子mRNA表达和X型胶原mRNA表达均高于对照组(P＜0.05). 结论 免疫应激条件下,关节组织中胶原及细胞因子呈现差异性表达.     

IL-15在兔膝创伤性关节炎模型中的表达研究

目的观察兔膝创伤性关节炎早期白介素15(IL-15)炎性因子的表达及其变化,以进一步探讨创伤性关节炎的发生机制。方法将48只健康新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,每组24只。实验组行左后膝关节前后交叉韧带切断和内侧半月板切除术;对照组行单侧膝关节切开术作为假手术对照。2组分别在术后6、12、24h,1、2、3、4周7个时间点抽取关节液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定关节液中IL-15含量表达。组织学观察其关节软骨和滑膜的变化。结果48只大白兔中进入结果分析29只。2组术后6h兔膝关节液中IL-15含量较其他时间点明显增高(P<0.05);术后1周IL-15表达较术后24h明显降低(P<0.05);术后1、2、3、4周4个时间点的IL-15表达成升高趋势;实验组术后各时间点IL-15含量均高于对照组(均P<0.05)。实验组术后4周,关节软骨失去原有的光泽,呈灰黄色,有裂纹,HE染色见表层略不平整,有小裂隙,纤维组织增生,玻璃样变性,局灶性软骨基质异染性减弱,软骨细胞减少,软骨基质纤维化。结论创伤后兔膝创伤性关节炎早期IL-15高表达,关节软骨及滑膜退变,创伤性关节炎早期与IL-15关系密切。     

隔物温和灸对膝骨性关节炎家兔软骨细胞及滑膜组织病理学的影响

目的研究隔物温和灸对膝骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)家兔软骨细胞及滑膜组织病理学改变的影响,探讨其治疗膝OA的作用机制。方法以36只家兔作为实验动物,随机分为正常组、模型组、药物组和隔物温和灸组。正常组不予处理,模型组、药物组和隔物温和灸组均采用关节制动的方法建立膝OA模型。模型组造模后不予处理,药物组给予仙灵骨葆胶囊的药粉混入饲料中定量喂饲,隔物温和灸组采用隔物温和灸治疗,观察各组治疗后软骨细胞及滑膜组织病理学的改变。结果在软骨积分方面,隔物温和灸组明显优于药物组(P0.01);在软骨及滑膜组织病理学方面,隔物温和灸组和药物组均能有效减轻膝OA家兔软骨退行性改变及滑膜炎症,抑制软骨细胞的增生及炎性细胞浸润。结论隔物温和灸及仙灵骨宝胶囊均能改善膝OA家兔软骨退行性改变及滑膜炎症,起到治疗膝OA的作用,其作用机制可能与减轻软骨细胞的增生及炎性细胞浸润有关,但以隔物温和灸疗效较显著。     

针灸治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效观察

目的：观察针灸治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法：将93例患者随机分为艾灸组36例、电针组36例和西乐葆组21例。艾灸组给予艾灸治疗（取穴：神阙、内膝眼、外膝眼、血海、梁丘穴）,电针组给予电针治疗（取穴：内膝眼、外膝眼、血海、梁丘穴）,西乐葆组给予西乐葆药物治疗,疗程均为28 d。观察患者的膝关节疼痛VAS评分及膝关节功能积分。结果：治疗后7 d、14 d、28 d,三组患者的膝关节疼痛VAS评分较治疗前均显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,且治疗后28 d,西乐葆组患者的VAS评分较艾灸组和电针组亦显著降低（P〈0.05）。治疗后7 d、14 d、28 d,三组患者的膝关节功能积分较治疗前均显著升高（P〈0.05,P〈0.01）,且治疗后28 d,艾灸组和电针组患者的膝关节功能积分较西乐葆组亦显著升高（P〈0.05）。结论：艾灸、电针、西乐葆治疗均能有效改善膝关节骨性关节炎患者的临床症状,改善膝关节功能。