云木香多糖的抗补体活性研究

目的从云木香中分离纯化出均一多糖,并研究其抗补体活性。方法采用水提醇沉方法得到了云木香的粗糖(APS),用DEAE-52色谱柱对云木香粗糖进一步纯化并得到了两种均一多糖,并测定了其理化性质和单糖组成。测定了这两种云木香多糖经典途径抗补体活性,旁路途径抗补体活性,并对其抗补体靶点进行了确定。结果从云木香中分离得到了两种均一多糖,其中一种为葡聚糖APS-1,另一种为葡甘聚糖APS-2。抗补体活性研究表明,APS-2表现出很好的抗补体活性,而APS-1没有明显的活性。结论云木香多糖APS-2具有很好的抗补体活性,有望成为免疫疾病治疗的药物。     

香椿果抗补体活性成分

目的:研究香椿果抗补体活性成分。方法:采用溶血法进行抗补体活性筛选,然后利用溶剂萃取和多种色谱技术分离纯化,以1H-NMR,13C-NMR波谱方法,结合文献数据,鉴定化合物结构。结果:香椿果提取物具有显著抗补体活性,经溶剂萃取,其中乙酸乙酯部位为活性部位,从中分离得到14个化合物,分别鉴定为没食子酸(1),没食子酸甲酯(2),6-O-没食子酰基-葡萄糖(3),1,2,3-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(4),1,2,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(5),1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(6),1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(7),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(8),芦丁(9),异鼠李素-3-O-β-半乳糖苷(10),槲皮素-3-O-β-半乳糖苷(11),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(12),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(13),槲皮素(14)。其中化合物3~14为首次从香椿果中分离得到,化合物5,10,11为首次从香椿中分离得到。化合物4~7有显著抗补体活性,半数抑制浓度(IC_(50))分别为88.3,76.2,13.9,9.6μmol·L~(-1)。结论:香椿果活性部位为乙酸乙酯萃取部位,活性成分为其中没食子酰基葡萄糖苷衍生物和黄酮苷,前者抗补体活性显著强于后者,并且其抗补体活性随着与葡萄糖羟基相连接的没食子酰基数目的增加而增强。     

麝香草叶中酸性多糖的精制和抗补体活性

麝香草Thymus vulgaris L.在南欧、西亚和北非均有栽培,其甲醇提取物有多种生物活性,但主要作为食用的热水提取物的生物活性未见报道。作者发现该植物叶热水提取物具抗补体活性,并对其进行了精制和鉴定。该植物用甲醇于室温提取5次,过滤后残余物再用热水提取。热水提取物(TV-O)分别用30％、75％和95％乙醇沉淀。75％乙醇     

天然产物中的抗补体活性成分

补体系统的非正常激活会引发类风湿性关节炎、老年性痴呆、急性呼吸窘迫综合征以及系统性红斑狼疮等多种疾病。目前临床上尚无高效、低毒、专一的补体抑制剂。国内外已完成部分天然产物的筛选,发现自然界中广泛存在的某些多糖、黄酮、甾类和萜类化合物具有显著的抗补体活性。本文对天然产物类抗补体活性成分的研究方法、已发现活性化合物的化学结构以及体内外药理研究概况进行综述,并分析了天然产物类补体抑制剂的应用前景。     

蓝萼香茶菜的抗补体活性成分研究

目的:在前期研究基础上,深入研究蓝萼香茶菜的化学成分及其抗补体活性.方法:通过溶血试验,对蓝萼香茶菜各部位进行抗补体活性测试,以抗补体活性作为导向分离手段,运用多种色谱方法分离纯化蓝萼香茶菜中的化学成分,采用现代谱学技术进行结构鉴定,确定抗补体活性成分.结果:蓝萼香茶菜的正丁醇部位活性较强,从蓝萼香茶菜中分离得到11个化合物,分别为豆甾醇(1),豆甾醇-9(11)-烯-3-醇(2),蓝萼丁素(3),尾叶香茶菜丙素(4),山楂酸(5),科罗索酸(6),minheryins Ⅰ (7),香叶木素(8),咖啡酸乙烯酯(9),咖啡酸(10),牡荆苷(11).抗补体活性实验表明,化合物9,10以及前期分离得到的异槲皮苷、芦丁、槲皮素、槲皮素-3-甲醚、木犀革素、木犀草素-7-甲醚和芹菜素对经典途径的补体激活具有不同程度的抑制作用.结论:化合物2,4,6～9,11为首次从该植物中获得,咖啡酸的抗补体活性最强,CH50为0.041 g·L-1.     

连钱草多糖的结构表征及抗补体活性研究

目的分离纯化具有抗补体活性的连钱草均一多糖并表征其结构。方法水提醇沉得连钱草粗多糖,DEAE-52、SephadexG-100柱色谱抗补体活性导向分离得到均一多糖,采用HPGPC、IR、GC、甲基化及核磁等方法对均一多糖进行结构表征,并测定均一多糖的抗补体活性。结果分离所得连钱草均一多糖GLP-1和GLP-2,相对分子质量分别为5370和20 040,均主要由阿拉伯糖和半乳糖组成的杂多糖,阿拉伯糖和半乳糖的物质的量比分别为1∶6.3和1∶4.9,GLP-1和GLP-2均具有较强的抗补体活性。结论连钱草均一多糖的结构表征为进一步阐明其抗补体活性的药效物质基础提供了研究基础,同时也为筛选天然补体抑制剂提供了基础。     

UPLC-Q-TOF-MS法分析平卧菊三七抗补体活性及活性部位

目的运用UPLC-Q-TOF-MS技术分析平卧菊三七的抗补体活性及其活性部位。方法采用经典的体外抗补体活性测定方法对平卧菊三七70%醇提物的乙酸乙酯萃取部位和水部位进行抗补体活性测定。平卧菊三七甲醇提取物的分析采用Welch Ultimate UHPLC XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min。质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据。结果平卧菊三七乙酸乙酯萃取部位具有较强的抗补体活性,其CH_(50)为(0.003 5±0.000 3)mg/mL。鉴定了22个化合物,其中包括有机酸类10个、黄酮类7个、其他类5个。结论该方法简单,快速,可为进一步确定平卧菊三七抗补体活性的作用机制及作用靶点提供参考。     

人参皂苷对人参幼苗生长发育的影响

目的 考察人参总皂苷(total ginsenosides,TGS)和人参皂苷Rg1、Rb1、Re的生态活性.方法 从四年生的人参根中提取TGS并进一步分离出3种单体皂苷,考察了不同质量浓度(25、50、100 mg/L)的TGS和人参皂苷Re、Rg1、Rb1对人参幼苗生长发育的影响.结果 TGS和人参皂苷Rb1处理对人参的幼苗和幼根的生长发育表现出明显的高质量浓度抑制而低质量浓度促进作用,而人参皂苷Rg1和Re却对人参幼苗的各项生长指标总体表现为微弱的促进作用,4种化合物的抑制效应依次为人参皂苷Rb1＞TGS＞人参皂苷Rg1＞人参皂苷Re,其中TGS和人参皂苷Rb1处理组人参生长的变化趋势相近.人参幼苗叶绿素的合成随着各皂苷质量浓度的升高而降低,但高质量浓度处理的叶绿素量仍然都高于对照.透射电镜观察到人参幼根细胞在100 mg/L TGS和人参皂苷Rb1处理后,发生了质壁分离和细胞器降解,液泡膜也逐渐分解,核膜变得模糊不清.人参根尖在高质量浓度的人参皂苷处理后因细胞功能受损而不能完成正常的生理活动.结论 TGS和3种单体皂苷对人参幼苗生长发育的作用效应不同,TGS和人参皂苷Rb1有较明显的化感活性.     

广藿香的抗补体活性成分

采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱方法对广藿香进行抗补体活性导向分离与鉴定,从乙酸乙酯部位和正丁醇部位共分离鉴定了15个黄酮、1个三萜和2个酚酸类成分,包括5-羟基-3,7,3',4'-四甲氧基黄酮(1)、5-羟基-7,3',4'-三甲氧基-二氢黄酮(2)、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮(3)、5-羟基-3,7,4'-三甲氧基黄酮(4)、5,4'-二羟基-7,3'-二甲氧基黄酮(5)、木犀草素(6)、槲皮素-7,3',4'-三甲醚(7)、岳桦素(8)、3,5,7-三羟基-3',4'-二甲氧基黄酮(9)、槲皮素(10)、芹菜素(11)、山柰酚(12)、5-羟基-7,3',4'-三甲氧基黄酮(13)、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(14)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(15)、齐墩果酸(16)、香草酸(17)、对甲基苄醇(18),其中化合物5,7,8,12~15,18均为首次从唇形科刺蕊草属植物中分离得到。对所得单体化合物进行经典和旁路途径的体外抗补体活性测定,并利用补体缺失血清鉴定活性最强化合物的抗补体作用靶点,结果表明,化合物3,7,10,12,16对经典和旁路途径的补体激活均有抑制作用(CH₅₀ 0.072~1.08 g·L^-1,AP₅₀ 0.39~0.49 g·L^-1),而化合物5,6仅对经典途径有抑制活性;活性最强的槲皮素-7,3',4'-三甲醚(7)作用于补体系统的C1q,C2,C5和C9组分,值得深入研究。     

肺纤维化抗补体活性道地药材筛选研究

目的:筛选具有抗补体活性的东北道地药材。方法:采用细胞溶血法。结果:供试药材溶血抑制率均未达到相应浓度肝素的溶血抑制率。结论:苍术活性较好。     

清开灵注射液对人血清补体和RBL-2 H3细胞影响的体外研究

目的 体外研究清开灵注射液对人血清补体和RBL-2 H3细胞的影响.方法 采用ELISA法检测清开灵注射液对人血清补体末端复合物SC5 b-9含量的影响.将不同批号、不同浓度的清开灵注射液与RBL-2 H3细胞共孵育,作用45min后,显微镜下观察细胞脱颗粒,显色法测定β-氨基己糖苷酶释放度和ELISA法测定组胺释放量.结果 清开灵注射液能使人血清中SC5 b-9含量降低,与PBS组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);能刺激RBL-2 H3细胞释放组胺和β-氨基己糖苷酶,与阴性组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 清开灵注射液不能引起补体系统激活,可以直接刺激肥大细胞脱颗粒释放组胺和β-氨基己糖苷酶.其在临床引起的不良反应可能为非补体激活相关的类过敏反应.     

Modulation of human complement activation and the human neutrophil oxidative burst by different root extracts of Picrorhiza kurroa

Different root extracts of Picrorhiza kurroa Royle ex Benth. (Scrophulariaceae), prepared by boiling or by extraction at 4°C with a series of four solvents, were screened for their influence on complement-mediated hemolysis and on the production of luminol-dependent chemiluminescence (CL_lum) by activated human neutrophils. All extracts exhibited dose-dependent inhibitory effects. A methanol extract, whether prepared by boiling or under cold conditions, and a cold aqueous extract showed the most potent action on classical and alternative pathway dependent hemolysis, respectively. In both cases the effects were induced by interference with the complement activation cascade. Feasible artefacts like stabilization of the target eryrthrocytes in the complement-assay and chelation of essential bivalent cations were excluded as a mode of action. A Soxhlet ethyl acetate extract showed the strongest inhibition of CL_lum production. This effect was not based on nonspecific toxicity towards neutrophils nor was it likely to be caused by interference with receptor stimulation by zymosan.     

白虎加桂枝汤对热痹模型大鼠特征性甲基化基因表达的影响

考察湿热环境下热痹模型大鼠特征性甲基化基因及白虎加桂枝汤对热痹特征性甲基化基因的调控作用。采用大鼠足底注射CFA并复合湿热环境制备热痹大鼠模型。造模后第15天给予白虎加桂枝汤干预治疗30 d。造模后每隔4 d检测足容积,第45天采用HE染色法检测大鼠踝关节组织病理学,Me DIP-Seq测序法检测大鼠膝关节滑膜甲基化水平并以取差集的方法筛选热痹模型特征性甲基化基因,悬浮芯片检测血清中IL-1β,IL-17,TNF-α,EGF,IL-12p70,IL-4,IL-6及IFN-γ含量水平,qRT-PCR检测大鼠滑膜特征性甲基化基因mRNA相对表达水平。实验发现,与完全弗氏佐剂性关节炎(AA)模型组比较,热痹模型组足肿胀度和病理严重程度仅轻微增加;与空白组比较,2个模型组全基因Cp G岛均呈低甲基化状态,热痹模型组甲基化水平最低,且AA模型组共705个差异性甲基化基因,热痹模型组共2 418个差异性甲基化基因;与AA模型组比较,热痹模型组存在1 287个差异性甲基化基因,其中共974个差异性基因甲基化下调,这些差异性基因显著分布于32个KEGG Pathway中(P0.05),此外启动子区上热痹特征性甲基化基因共52个,其中36个甲基化下调基因,16个甲基化上调基因;药物干预后,白虎加桂枝汤显著改善热痹模型组足肿胀度和病理损伤,且明显降低IL-1β,TNF-α,EGF,VEGF,IL-17,IL-12p70的含量水平(P0.05),还能抑制热痹特征性甲基化下调基因Ahcy及Rpl3 mRNA的表达,促进热痹特征性甲基化上调基因Agxt mRNA的表达水平。可见,热痹模型滑膜基因存在独特的甲基化水平变化,而白虎加桂枝汤可能针对性回调热痹特征性基因的甲基化水平,达到治疗热痹的作用。     

Complement activation by carotenoid derived aldehydes in cultured human vein epithelial cells

This study was designed to determine the complement activation effects of carotenoid‐derived aldehydes (CDA) on cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). A dose‐dependent complement activation upon incubation of HUVEC with CDA was observed. Interestingly, the data showed that the alternative pathway was not activated. In addition, upon CDA treatment a significant number of apoptotic cells was also observed. The results revealed that CDA could activate the complement by way of the classical pathway. The study suggests that high carotenoid supplementation for the treatment of coronary heart disease should be used cautiously. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

补阳还五汤对高血压前期大鼠T淋巴细胞亚群的影响

[目的]通过观察补阳还五汤对高盐所致高血压前期大鼠T淋巴细胞亚群比例及γ-干扰素(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨补阳还五汤在调节高血压前期T细胞免疫中的作用机制。[方法]选取7周龄盐敏感大鼠(DS)与盐抵抗大鼠(SS)各20只,SS大鼠随机分为正常组和正常给药组,DS大鼠随机分为模型组和治疗组。各组大鼠适应性喂养后,改用高盐饲料喂养,同时监测大鼠尾动脉收缩压,待其血压值升高至120~139/80~89 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)这一范围时,确定为高血压前期大鼠模型,并以补阳还五汤灌胃治疗。治疗结束后大鼠腹主动脉取血,以流式细胞术检测全血中T淋巴细胞CD4~+与CD8~+的百分率,并计算CD4~+/CD8~+的比值。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清中INF-γ、TNF-α的含量。[结果]补阳还五汤可以下调CD4~+T淋巴细胞及CD8~+T淋巴细胞百分率,上调CD4~+/CD8~+的比值,降低TNF-α、INF-γ的含量。[结论]补阳还五汤可能是通过下调CD4~+T淋巴细胞与CD8~+T淋巴细胞的百分率以及INF-γ、TNF-α细胞因子的表达,改善高血压前期机体T细胞免疫功能及其炎症反应,延缓高血压前期的发展进程。     

桃红四物汤抗血小板活化作用及机制研究

目的:探讨桃红四物汤(Taohong Siwu decoction,TSD)的抗血小板活化作用及机制。方法:采用旋转玻球法测定血小板黏附率;比浊法测定ADP,Adr诱导的血小板聚集率;建立血瘀模型,RIA法测定血浆TXB2,6-keto-PGF1α含量,ELISA法测定血浆VWF,GMP-140含量。结果:TSD能有效降低大鼠血小板黏附率,对ADP,Adr所诱导的大鼠血小板聚集具有明显抑制作用,对于血瘀大鼠,TSD显著降低血瘀大鼠血浆中TXB2,VWF,GMP-140水平,有增强6-keto-PGF1α血浆水平的趋势。结论:TSD具有较好的抗血小板活化的作用,且显示出多途径、多靶点的特点。     

栀子大黄汤配伍变化对枳实中总柚皮素和总橙皮素药动学的影响

采用HPLC-UV测定枳实和栀子大黄汤灌胃后大鼠血浆中总柚皮素和总橙皮素浓度,血浆样品通过液液萃取法进行提取,通过酸水解的方式将柚皮素、橙皮素缀合物转化为游离柚皮素、橙皮素。Phecda C₁₈色谱柱 （4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相0.1%磷酸-甲醇,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。采用DAS 2.0 数据处理软件及SPSS 16.0 统计软件分别进行药动学参数计算及比较。枳实组（ZS）和栀子大黄汤组（ZZDHD）中总柚皮素、总橙皮素的药动学参数存在显著性差异,ZS组中总柚皮素的C_max,AUC_0-t分别比ZZDHD组的高出73.5%,65.9%,ZS组中总橙皮素的C_max,AUC_0-t分别比ZZDHD组的高出63.5%,119.1%。说明栀子大黄汤中其余成分对枳实中总柚皮素、总橙皮素的药动学特征具有显著影响,经配伍后其C_max,AUC_0-t显著降低。该方法简便准确、灵敏度高、特异性好,可以应用于血浆中总柚皮素和总橙皮素含量测定。     

定心方对高血脂症大鼠低密度脂蛋白受体的影响

目的探讨定心方的降脂作用机制,为中药新药的研究提供科学依据。方法将大鼠随机分为正常对照组,模型组,定心方大剂量组、中剂量组、小剂量组以及血脂康组。采用ELISA法测定各组大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达情况。结果与模型组相比,定心方各组和血脂康组LDLR的表达增强,其中定心方大剂量组效果最佳。结论定心方可以增强高血脂症大鼠肝脏LDLR的含量,从而增强肝脏对血脂的代谢功能,起到调控血脂水平的作用。     

三七总皂苷对脑出血患者神经功能及血清C3水平的影响

目的观察三七总皂苷对急性期脑出血患者神经功能及血清补体C3的影响。方法 52例脑出血患者随机分为对照组24例和治疗组28例,均给予调控血压、血糖、颅内压等基础治疗。治疗组加用三七总皂苷250 mg,每日1次静脉滴注,疗程14 d。观察发病第1、15、28天神经功能评分,测定发病1、2、3、4、5、6、7 d的补体C3含量。结果第28天时治疗组神经功能评分较对照组明显降低(P<0.05);第4天开始C3水平较对照组下降(P<0.05)。结论三七总皂苷能促进脑出血患者神经功能恢复,并可抑制补体C3持续升高。     

补体系统在青光眼视神经保护中的研究进展

青光眼是世界范围内导致不可逆失明的主要疾病,发病率逐年升高,视网膜神经节细胞(RGC)凋亡被认为是青光眼病变的最早形式。补体失调是青光眼早期视神经损害的特征改变,抑制补体系统能够阻止多种危险因素对RGC的损伤,可以在眼内压持续升高的情况下保护视网膜神经元树突和突触的完整性,阻止神经损伤进一步发展,是近年来青光眼视神经保护药物研发的热点。中草药来源的抗补体活性成分开发成本低,并可以直接在体内被利用,而且其对补体的调控是多成分,多途径的,因此,具有良好的应用前景。本文综述了补体系统在青光眼视神经损害中的病理机制和干预效应的研究进展,为进一步研究补体调控在视神经保护中的作用提供参考。