IL13修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体的制备及其抑制BT325细胞作用

目的制备白介素13(IL13)修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体,并评价其对人脑胶质瘤细胞BT325的抑制作用。方法薄膜分散法制备脂质体,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)水相缩合法将IL13锚定在粒子表面,考察其形态、粒径、Zeta电位、IL13修饰密度的质量分数、包封率、体外释放。以药脂比(雷公藤红素/卵磷脂)、胆脂比、水合时间、IL13投料比为影响因素,粒径、Zeta电位、聚合物分散性指数(PDI)为评价指标,正交试验优化制备工艺。荧光定性和胞内药物定量法评价BT325细胞摄取行为,MTT法和流式细胞仪法分别测定脂质体抗肿瘤和诱导细胞凋亡作用。结果最佳条件为药脂比1∶20,胆脂比1∶4,水合时间45 min,IL13投料比0.6%。所得脂质体均一圆整,粒径分布较窄,平均粒径(118.3±3.2)nm,Zeta电位(-38.3±3.4)m V,IL13修饰密度的质量分数0.3%,雷公藤红素和人参总皂苷包封率分别为(82.3±2.9)%和(71.2±3.2)%,24 h累计释放度分别为(42.5±4.9)%和(24.3±2.1)%。它可显著促进BT325细胞摄取,IC50为(2.8±0.3)μg/m L(以雷公藤红素计),低于IL13未修饰脂质体和物理混合物(雷公藤红素-人参总皂苷)。当雷公藤红素质量浓度为10μg/m L时,它还能诱导84.3%的BT325细胞发生凋亡。结论 IL13修饰雷公藤红素/人参总皂苷脂质体在体外表现出明显的人脑胶质瘤细胞BT325靶向性和体外抗肿瘤作用。     

靶向性蒿甲醚脂质体的构建及体外靶向性研究

目的构建靶向性蒿甲醚脂质体并评价其对C6脑胶质瘤细胞的体外靶向性。方法以氨基蝶呤(APGA)为靶向性分子,采用化学法合成靶向性功能材料氨基蝶呤-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺共聚物(APGA-PEG2000-DSPE),以薄膜分散法制备靶向性蒿甲醚脂质体,构建血脑屏障(BBB)-C6脑胶质瘤肿瘤球共培养模型,以香豆素为荧光探针,以共聚焦荧光显微镜观察靶向性脂质体跨越BBB及穿透肿瘤球的能力,以流式细胞仪检测C6细胞对脂质体的摄取情况来评价制剂的靶向性能,采用SRB法考察靶向性脂质体对C6脑胶质瘤细胞的生长抑制作用。结果合成的APGA-PEG2000-DSPE的相对分子质量为3 150,与预测的相对分子质量相吻合;共培养模型显示靶向性脂质体可以更好地跨越BBB并穿透肿瘤球,对于C6脑胶质瘤细胞,靶向性蒿甲醚脂质体、蒿甲醚脂质体、游离蒿甲醚对C6脑胶质瘤细胞的IC50值分别为42、82、95μmol/L。结论构建的靶向性蒿甲醚脂质体可以有效跨越BBB,并靶向运输至脑胶质瘤肿瘤球内部,且具有很强的杀伤脑胶质瘤细胞活性。     

透明质酸修饰的中药提取物咖啡酸脂质体的制备及初步细胞学研究

目的:制备透明质酸(HA)修饰的中药提取物咖啡酸(CA)脂质体(HA-CA脂质体)并考察其对透明质酸受体(CD44)高表达A549及透明质酸受体(CD44)低表达HepG2细胞的增殖抑制作用。方法:合成HA-DOPE;通过薄膜分散法制备HA-CA脂质体并用动态光散射粒径分析仪测定粒径;采用HPLC法建立绿原酸体外含量测定方法并测定HA-CA脂质体的包封率;采用MTT法考察游离CA、CA脂质体及HA-CA脂质体对A549细胞和HepG2细胞的增殖抑制作用;采用荧光细胞摄取实验验证HA脂质体的靶向性。结果:HA-CA的平均粒径为210.5 nm,PDI=0.17;包封率(88.87±1.32)%;MTT法结果显示,HA-CA脂质体对A549细胞的增殖抑制作用明显大于CA脂质体,且CA脂质体大于游离CA;CA脂质体和HA-CA脂质体对HepG2细胞的增殖抑制作用则基本相当,均大于游离CA;A549细胞对载6-香豆素HA脂质体(HA-C脂质体)的摄取高于HepG2细胞组。结论:MTT实验结果显示,HA-CA脂质体对A549细胞的增殖抑制作用最强。细胞摄取实验研究显示,HA-C脂质体与高表达的HA受体细胞特异性结合,达到肿瘤主动靶向效果。以HA为主动靶向配体制备的HA-CA脂质体可通过配体-受体特异性结合的机制将药物递送至靶部位,提高药物对肿瘤细胞的增殖抑制作用。     

薄荷醇修饰紫杉醇阳离子脂质体处方优选及体外靶向性评价

目的 制备薄荷醇修饰紫杉醇阳离子脂质体(Men-PCLPs)并优化处方,评价Men-PCLPs体外靶向性。方法 采用薄膜分散法制备Men-PCLPs。使用Box-Benhken响应面法选出Men-PCLPs最优处方工艺。评价各组脂质体对C6细胞存活率的影响。用流式细胞仪检测C6和bEnd.3细胞对不同脂质体的摄取情况。结果 脂质体最优处方为磷脂106 mg、人参皂苷Rh₂ 20 mg、PTX 2.200 mg、DC-Chol5 mg,总处方量5 mL,紫杉醇的平均包封率为(93.800±0.006)%。紫杉醇阳离子脂质体和Men-PCLPs能明显抑制C6细胞的生长,且Men-PCLPs对C6细胞和bEnd.3细胞的靶向性显著增强。结论 优化后的Men-PCLPs具有较好的主动靶向性,对C6细胞有一定的抑制作用。     

刺五加皂苷脂质体的制备及对肝癌移植瘤的抑制作用

目的:制备刺五加皂苷脂质体并研究其对肝癌移植瘤的抑制作用。方法:采用薄膜分散-超声法制备刺五加皂苷脂质体并检测其理化性质,用流式细胞仪检测此载药脂质体对HepG2肝癌细胞周期和凋亡的影响,并观察刺五加皂苷脂质体荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果:所制备的脂质体封率为63.43%,刺五加皂苷脂质体组与游离刺五加皂苷组均使肝癌细胞G0/G1期和S期比例明显下降,并观察到细胞凋亡,高剂量刺五加皂苷脂质体组荷瘤小鼠的抑瘤率(62.21%)显著高于低剂量组(45.23%)和游离刺五加皂苷组(46.16%,P均<0.05),而低剂量刺五加皂苷脂质体组与游离刺五加皂苷组无明显差异(P>0.05)。结论:刺五加皂苷脂质体能抑制肝癌细胞Hep G2增殖和诱导细胞凋亡,对小鼠肝癌移植瘤的生长有明显抑制作用。     

圣和散对脑胶质瘤细胞诱导分化的研究

目的观察圣和散对脑胶质瘤C6细胞株体外生长及诱导分化的作用。方法用圣和散处理脑胶质瘤C6细胞,采用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测圣和散对C6细胞增殖的抑制作用,以免疫组化SABC法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和c-myc表达。结果圣和散可显著抑制C6细胞体外增殖,并呈现时间、剂量依赖性。在终浓度为5 mg/ml和10 mg/ml时,对C6增殖的抑制率达(49.62±1.13)%和(69.38±1.42)%,明显优于对照组(P<0.01)。免疫组化可见SHP组较对照组GFAP表达明显增强,c-myc表达下降。结论圣和散对胶质瘤C6细胞系的增殖有明显的抑制作用,能通过诱导分化降低脑胶质瘤细胞恶性程度。     

载As2O3 pH敏感钙砷复合物脂质体的制备及体外评价

目的制备pH敏感释药的As₂O₃脂质体,并进行体外评价。方法采用薄膜分散法制备含钙离子脂质体,然后用离子沉淀法孵育制备钙砷复合物脂质体(CaAs-LP)。测定CaAs-LP的粒径、Zeta电位及多分散系数(PDI);透射电子显微镜观察脂质体的形态;电感耦合等离子体发射光谱仪测定纳米药物的载药量与包封率;透析袋法考察其体外释药特性。噻唑蓝(MTT)法考察未载药脂质体及CaAs-LP对人源性乳腺癌MCF-7细胞、人源性脑胶质瘤U87细胞和人源性肝癌HepG2细胞的毒性;共聚焦显微镜考察U87细胞对CaAs-LP的摄取效率。结果制备的CaAs-LP呈规整类球型,粒径约为(117.16±1.94)nm,包封率和载药量分别为(74.31±2.11)%、(8.31±0.13)%。体外释放研究表明,CaAs-LP具有明显的缓释以及pH响应释药特征。未载药的脂质体在MCF-7、U87、HepG2和L02细胞中的生物相容性良好;CaAs-LP抑制肿瘤细胞生长的作用较原药有所上升,半数抑制浓度(IC₅₀)值分别为11.91、4.90、19....     

榄香烯增强卡巴他赛抗胶质瘤作用考察及其双靶向阳离子脂质体的制备优化与体外药效学评价

目的 探究榄香烯（ELE）增强卡巴他赛（CTX）抗胶质瘤疗效,制备一种共载ELE/CTX的双靶向阳离子脂质体（LIP）用于胶质瘤的治疗研究,并达到增加药效、减少不良反应的作用,经体外药效学试验揭露其优势及作用机制。方法 采用高速剪切法联合探头超声法制备脂质体ELE/CTX@LIP,并采用纳米粒径电位仪对其粒径及电位进行表征,采用高效液相色谱法（HPLC）测定ELE/CTX包封率及载药量;采用细胞增殖与活性检测法（CCK-8）检测ELE/CTX体外细胞增殖抑制活性;通过JMP Pro 16软件,以包封率为指标优化脂质体（ELE/CTX@LIP）工艺参数;通过体外细胞增殖抑制活性和体外细胞摄取,筛选最佳阳离子材料种类、含量与配比,在此基础上制备双靶向阳离子脂质体并表征其形态、粒径稳定性等,验证其对RG2胶质瘤细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 ELE/CTX抗胶质瘤活性结果显示ELE/CTX分别对C6、RG2细胞具有更强的细胞增殖抑制活性;体外细胞增殖抑制活性和体外细胞摄取结果显示阳离子材料用量为总含量的0.10%;T7、精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列（cRGD）与磷脂最佳配比为1∶1∶50。T7/cRGD-ELE/CTX@CLIP［1,2-二油酰氧基-3-二甲基氨基丙烷（Dlin-MC3-DMA）］、T7/cRGD-ELE/CTX@CLIP［二肉豆蔻酰甘油-聚乙二醇2000（DMG-PEG2000）］呈现多层次球状纳米结构,粒径分别为146.0 nm和111.3 nm,血清稳定性良好;体外细胞增殖抑制结果显示,与单靶向脂质体或双靶向非阳离子脂质体比较,T7/cRGD-ELE/CTX@CLIP在体外对胶质瘤细胞具有更高的细胞增殖抑制活性;T7/cRGD-ELE/CTX@CLIP影响胶质瘤细胞凋亡及周期,结果显示,ELE/CTX联用能通过脂质体载体能更加有效的激活细胞凋亡通道抑制胶质瘤细胞增殖,且使用T7/cRGD短肽及阳离子修饰后,增强了细胞凋亡诱导能力,ELE/CTX能有效将胶质瘤细胞周期阻滞于G₂/M期,且经T7/cRGD靶向修饰后,效果增强。结论 ELE可以增强CTX抗胶质瘤疗效,ELE/CTX@LIP制备工艺参数稳定可行,结合体外药效试验初步揭示了T7/cRGD-ELE/CTX@CLIP抗胶质瘤作用机制。     

唾液酸修饰绿原酸脂质体制备及其体外抗肿瘤活性研究

目的响应面设计制备唾液酸(sialic acid,SA)修饰的绿原酸(chlorogenic acid,CA)脂质体(CA-SAL),考察其体外细胞毒性和摄取。方法采用改良逆相乙醇注入法制备CA-SAL,以葡聚糖凝胶G-50柱离心法分离脂质体和游离药物,并通过HPLC法测定药物质量浓度,计算包封率。以包封率和载药量为考察指标,通过Box-Behnken响应面设计实验优化CA-SAL的处方和工艺,MTT法评价其对人肺癌A549细胞的细胞毒性,倒置荧光显微镜观察A549细胞对CA-SAL的摄取情况。结果优化后的CA-SAL制备条件:氢化大豆磷脂与绿原酸的质量比为15∶1,水化温度60℃,超声功率400W。CA-SAL平均粒径为(90.13±0.51)nm,多分散指数(PDI)为0.16±0.01,Zeta电位为(-25.3±0.5)mV;包封率为57.8%,RSD为0.1%。MTT实验结果显示,CA-SAL对A549细胞的增殖抑制作用显著强于绿原酸脂质体(CA-CL),细胞摄取实验表明A549细胞对唾液酸修饰脂质体的摄取更高。结论通过响应面优化制备的CA-SAL粒径小、性质稳定。经唾液酸修...     

巨噬细胞膜仿生白蛋白纳米体系的构建及其胶质瘤靶向递药性能评价

目的 构建包载WEE1激酶抑制剂adavosertib的巨噬细胞膜仿生白蛋白纳米粒(MM-BSA/Ada),体外评估其作为胶质瘤靶向递药体系的可行性。方法 制备MM-BSA/Ada并筛选最佳膜-核比和最佳药-载比,检测其载体安全性和对C6胶质瘤细胞抗增殖活性,考察其体外细胞摄取、跨血脑屏障转运和跨膜后摄取的能力。结果 MM-BSA/Ada具有良好的稳定性,CCK-8结果初步显示,未载药纳米粒在体外细胞实验中对脑血管内皮细胞呈低毒性;与未包膜纳米粒和游离药物相比,MM-BSA/Ada给药后的体外抗胶质瘤细胞增殖活性(P＜0.001)、胶质瘤细胞摄取量(P＜0.001)、体外血脑屏障透过量(P＜0.01)及跨膜后摄取量(P＜0.001)均显著提高。结论 MM-BSA/Ada有较好的胶质瘤靶向递药性能,有望为胶质瘤提供新的放射增敏策略。     

具有线粒体靶向性的雷公藤甲素TPP-PEG-PCL脂质体的制备及其促肝肿瘤细胞凋亡研究

目的成功制备雷公藤甲素(3-丙羧基)三苯基溴化膦(TPP)-聚乙二醇-b-聚己内脂(PEG-PCL)脂质体(Tr@TPP/Lip),评价其靶向性及促肝肿瘤细胞凋亡效果。方法采用正交试验优选Tr@TPP/Lip的制备工艺,再研究该载药系统的粒径、Zeta电位、载药量、包封率和多分散系数及透射电镜微观形态,评价Tr@TPP/Lip的稳定性、溶血性、释放情况;采用荧光试验,研究脂质体与肝肿瘤细胞的融合情况、线粒体靶向性和肝脏靶向性;在等剂量给药条件下,评价Tr@TPP/Lip促肝癌细胞凋亡效果。结果正交试验优选的Tr@TPP/Lip粒径为(113.5±17.6)nm,Zeta电位(12.6±0.7)m V,包封率为(71.3±3.2)%,载药量为(3.9±1.1)%,多分散系数为0.12±0.04;透射电子显微镜图片显示Tr@TPP/Lip呈规则圆球形,该脂质体稳定性良好,具有较小的溶血率和良好的缓释药物性能;荧光试验结果显示,TPP阳离子能促进脂质体与肿瘤细胞的融合,并靶向线粒体,还能提高药物在肝肿瘤部位的靶向和滞留效果;细胞药效结果显示,Tr@TPP/Lip具有良好的促肝肿瘤细胞凋亡效果...     

转铁蛋白修饰的姜黄素脂质体的制备及体外抗肿瘤活性

目的 制备转铁蛋白（transferrin,Tf）修饰的姜黄素（curcumin,Cur）脂质体（Tf-Cur-Lip）,并研究其理化性质和体外抗肿瘤活性。方法 采用薄膜分散法制备Tf-Cur-Lip,对其形态、粒径、多分散性指数、包封率、载药量、体外释放等进行表征;以人前列腺癌DU154细胞为模型进行细胞抑制率实验与细胞摄取实验。结果 所制得的Tf-Cur-Lip呈类球形,大小分布均匀,平均粒径为（68.27±0.36）nm,多分散指数为0.194±0.050,平均包封率与载药量分别为（98.13±0.38）%与（2.94±0.38）%。体外释放研究表明,Tf-Cur-Lip相比游离姜黄素具有一定缓释效果。MTT实验结果表明Tf-Cur-Lip对DU145细胞的抑制作用显著高于游离姜黄素,与非靶向姜黄素脂质体（Cur-Lip）相比,转铁蛋白的修饰明显增加了DU145细胞对脂质体的摄取效率。结论 成功制备了Tf-Cur-Lip,该脂质体能够提高肿瘤靶向性,具有一定的抗肿瘤活性。     

具有线粒体靶向功能的穿心莲内酯TPP-PEG-PE脂质体的制备及其作用于胃癌模型小鼠的机制研究

目的 制备穿心莲内酯(andrographolide,AP)(3-丙羧基)三苯基溴化膦[(3-carboxy propyl)triphenylphosph-onium bromide,TPP]-聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)-聚乙烯(polyethylene,PE)脂质体(AP@TPP-PE...     

多烯紫杉醇主动靶向脂质体对S180肉瘤细胞小鼠移植瘤生长的影响

目的:研究叶酸受体多烯紫杉醇主动靶向脂质体(FA-PDCT-L)对S180肉瘤细胞小鼠移植瘤的抑制作用及体内毒性。方法:利用自制两亲性嵌段共聚物叶酸-聚乙二醇-聚胆固醇氰基丙烯酸脂(FA-PEG-PCHL)修饰FA-PDCT-L,采用激光共聚焦显微镜检测脂质体与MCF-7细胞的结合机制;建立S180肉瘤细胞小鼠皮下移植瘤动物模型,随机分为DCT注射液(DCT-I)、未修饰DCT脂质体(DCT-L)和FA-PDCT-L和模型组(生理盐水),按10 mg·kg-1·d-1尾静脉注射给药,观察小鼠移植瘤生长变化并计算抑瘤率;采用TUNEL法测定细胞凋亡;观察各组动物肝功能及骨髓抑制血液生化指标。结果:FA-PDCTL与MCF-7细胞的结合量明显高于其他试验组。与模型相比,DCT-I,DCT-L和FA-PDCT-L组小鼠瘤体积均减少,其中FAPDCT-L的作用最为显著,抑瘤率79.03%,凋亡指数(45.7±3.4)%。FA-PDCT-L组动物的肝功能及骨髓抑制生化指标均与空白组无显著差异。结论:FA-PDCT-L通过FA-PEG-PCHL介导的细胞内化使脂质体进入细胞,显示出了比市售DCT-I更好的抗肿瘤疗效和更低的毒性。     

皂角刺含药血清诱导直肠癌细胞SW-480凋亡 及其对Bcl-2/Bax mRNA表达的影响

目的: 采用血清药理学方法探讨皂角刺含药血清诱导肠癌细胞凋亡的作用机制。方法: 制备皂角刺药液,50只健康SD大鼠分为皂角刺高中低剂量组(每1 mL分别含有生药2 000,1 000, 500 mg),环磷酰胺阳性对照组(50 mg·kg^-1)和生理盐水空白对照组5个组,按20 mL·kg^-1大鼠体质量给药,以制备含药血清。取含药血清培养液在体外作用于SW-480细胞(密度为1×10⁶/mL),分别在24, 48, 72 h后,采用MTT法检测含药血清对SW-480增殖的影响;加入药物血清培养液处理细胞24 h后,采用流式细胞仪检测SW-480凋亡率,RT-PCR检测各组含药血清对细胞B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)/Bel-2相关x蛋白(Bax)基因表达的影响。结果: 与空白对照组比较,皂角刺含药血清培养液作用细胞的吸光度(A)在20,40,60 h均明显低于空白组(0.370±0.005)%,(0.624±008)%,(1.078±0.038)%( P<0.01);皂角刺高、中、低剂量含药血清培养液诱导SW-480凋亡依次为(37.386±0.163)%,(35.834±0.092 3)%,(27.572±1.193)%显著高于空白对照(5.036±0.378)%(P<0.01);皂角刺含药血清培养液对SW-480细胞的Bcl-2表达(0.258±0.037, 0.442±0.024和0.652±0.072)明显低于空白对照组(0.936±0.047)(P<0.01),随灌胃给药的药物剂量增加Bcl-2表达而增加,而Bax表达(1.946±0.017,1.810±0.023和1.810±0.023)明显高于空白对照组(1.260±0.029)(P<0.01), Bax表达反而减少。结论: 皂角刺含药血清对能抑制SW-480生长和诱导其凋亡,Bcl-2 mRNA基因表达减少与Bax mRNA基因表达增多可能是皂角刺诱导肠癌细胞凋亡的机制之一。     

苦参碱抑制神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖作用研究

目的: 观察苦参碱对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。 方法: 取对数生长期SK-N-SH细胞,用磺酰罗丹明B（SRB）法检测苦参碱（0.5,1.0,2.0 g·L^-1）作用24,48,72 h后 SK-N-SH细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blot 检测半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-9和Caspase-3蛋白的表达。 结果: 苦参碱对 SK-N-SH细胞增殖具有明显抑制作用,且表现出剂量和时间依赖性。0.5,1.0,2.0 g·L^-1苦参碱作用24,48,72 h后SK-N-SH细胞的抑制率分别为（19.06±3.17）%,（30.18±3.02）%,（38.55±6.12）%;（45.12±4.02）%,（60.45±5.51）%,（71.38±7.91）%;（58.91±4.36）%,（73.44±8.17）%,（88.37±4.57）%。流式细胞仪检测对照组及各浓度组凋亡率分别为（2.45±0.49）%,（12.56±2.21）%,（19.44±4.32）%,（30.12±3.35）%,与对照组比较,苦参碱组的凋亡率均显著性增高（P<0.001）;细胞周期结果显示苦参碱作用SK-N-SH细胞48 h后G₀/G₁期细胞明显增多（P<0.01）,S期细胞明显减少（P<0.01）。苦参碱可显著上调Caspase-9和Caspase-3蛋白表达（P<0.01,P<0.01）。 结论: 苦参碱对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的增殖具有抑制作用,这种作用与其阻滞细胞周期和激活Caspase-9和Caspase-3表达进而诱导产生细胞凋亡有关。     

重组蜂毒肽对C6胶质瘤细胞的抑制作用及对 VEGF,Flt-1,MMP-9表达的影响

目的： 探讨重组蜂毒肽作用于大鼠C6胶质瘤细胞后,对细胞生长的抑制作用及对血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体（Flt-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法： 对大鼠C6胶质瘤细胞进行体外培养后,分为对照组及重组蜂毒肽低、中、高剂量治疗组,治疗组分别给予相应浓度的重组蜂毒肽（20,50,80 mg·L^-1）,采用MTT法于24,48,72 h分别测定C6胶质瘤细胞的生长情况;并采用Western blot法测定不同浓度重组蜂毒肽作用72 h后C6胶质瘤细胞VEGF,Flt-1,MMP-9的表达情况。结果： 与对照组比较,不同浓度的重组蜂毒肽作用于细胞24 h后,细胞生长情况无明显变化,但48,72 h后,低、中、高浓度治疗组的细胞的增殖活性均有不同程度的降低、生长抑制率增高（P<0.01或P<0.05）;同时中、高浓度重组蜂毒肽作用72 h后,胶质瘤细胞的VEGF,Flt-1,MMP-9表达水平均有不同程度的降低（P<0.01或P<0.05）。结论： 重组蜂毒肽对C6胶质瘤细胞的生长和VEGF,Flt-1,MMP-9的表达均有明显的抑制作用,因此重组蜂毒肽可能通过抑制VEGF,Flt-1,MMP-9的表达来抑制胶质瘤的生长。     

甘草次酸修饰的人参皂苷Rh2脂质体的制备及其体外评价

目的:制备由甘草次酸修饰的人参皂苷Rh2脂质体,评价其体外理化性质和对人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用。方法:采用薄膜分散法制备普通的人参皂苷Rh2脂质体(Rh2-L)和甘草次酸修饰的人参皂苷Rh2脂质体(GA-Rh2-L),利用UPLC测定人参皂苷Rh2的含量,流动相乙腈-水(28∶72),流速0.3 m L·min-1,检测波长203 nm。考察脂质体的包封率、粒径、体外释放率及Zeta电位,运用噻唑蓝(MTT)法评价人参皂苷Rh2溶液,Rh2-L和GA-Rh2-L对SMMC-7721细胞体外增殖的抑制作用。结果:与Rh2-L相比,GA-Rh2-L的包封率、粒径、体外释放率及Zeta电位等理化性质均无显著性差异。Rh2-L和GARh2-L的包封率分别为(91.67±1.05)%,(95.54±2.23)%,粒径(138.6±45.8),(146.5±48.9)nm,Zeta电位-(12.75±0.34),-(14.79±0.67)m V,72 h的体外释放率(84.67±7.23)%,(89.03±8.61)%。人参皂苷Rh2溶液在12 h内释药率达(91.23±5.17)%。细胞用药2 d后,GA-Rh2-L对SMMC-7721的半抑制率(IC50)分别为人参皂苷Rh2和Rh2-L的0.524,0.596倍,并呈浓度和时间以依赖关系。结论:甘草次酸修饰不会影响人参皂苷Rh2脂质体得理化性质,还可增加其对细胞的靶向性,增加了细胞毒性,为肝肿瘤的靶向治疗提供了新思路。     

槲皮素和白藜芦醇共载磁性固体脂质纳米粒的制备及其抑瘤作用评价

目的:制备槲皮素和白藜芦醇共载磁性固体脂质纳米粒(QR-MSLN),探索合理表征方法并考察其对小鼠肝癌H22移植性肿瘤的抑瘤作用。方法:制备油酸表面修饰的磁性Fe_3O_4(OA-Fe_3O_4),采用红外光谱分析进行结构确证;采用乳化超声分散法制备QR-MSLN,分别采用透射电子显微镜、纳米粒径-Zeta电位测定仪观测其形态与粒径,邻二氮菲分光光度法测定制剂中铁含量,超滤离心法测定2种成分的包封率,振动样品磁强计测定其饱和磁化强度,透析法研究其体外释药行为;建立小鼠肝癌细胞(H22)移植瘤模型,评价在外加磁场下QR-MSLN对移植瘤的抑制作用。结果:QR-MSLN形态圆整,内部可见载有黑色磁性微粒,粒径(171. 9±2. 2) nm,铁质量浓度(1. 40±0. 46) g·L~(-1),饱和磁化强度7. 75 A·m2·kg~(-1),具有超顺磁性。槲皮素和白藜芦醇的包封率分别为99. 10%,80. 83%。与槲皮素和白藜芦醇原药、载药固体脂质纳米粒相比,QRMSLN的肿瘤抑制率显著增高(P 0. 01)。结论:制得的QR-MSLN粒径均匀、磁响应性好,对小鼠H22移植瘤具有明显的抑制作用。     

载三氧化二砷脑胶质瘤靶向纳米递药系统i RGD/TGN-PEG-PAMAM/ATO的构建及体外研究

目的以树状大分子为载体材料并修饰血脑屏障(blood brain barrier,BBB)靶向短肽TGN和肿瘤靶向短肽i RGD构建脑胶质瘤靶向递药系统(i RGD/TGN-PEG-PAMAM/ATO),旨在解决三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3,ATO)在治疗脑胶质瘤过程中分布缺乏特异性、透BBB难等问题,使其具有更好抗脑胶质瘤作用。方法核磁共振图谱(1H-NMR)、透射电子显微镜(TEM)等考察载体的理化性质;电感耦合等离子发射光谱(ICP)、透析袋法分析其包封率及体外释放情况;通过激光共聚焦及流式细胞仪分析i RGD、TGN对细胞摄取的影响;MTT法考察纳米载体对脑微血管内皮细胞(HBMEC)和脑胶质瘤U87细胞的毒性及BBB模型中递药系统抑制U87细胞生长的情况。结果成功合成了i RGD/TGN-PEG-PAMAM载体,其形态规整,大小均匀,测得其粒径(24.87±0.84)nm,电位(17.26±1.64)m V;该载体对HBMEC和U87细胞均具有较小的毒性;递药系统i RGD/TGN-PEG-PAMAM/ATO的包封率为(71.92±1.17)%,体外释放表明ATO经载体包载后呈现一种缓慢释放趋势,且在酸性条件下更有利于ATO的释放;细胞摄取结果提示iRGD/TGN的修饰有利于U87细胞对递药系统的摄取;体外跨BBB抑制U87细胞生长实验结果表明,i RGD/TGN-PEG-PAMAM/ATO组具有更好的跨BBB抑制U87细胞生长效果。结论 i RGD/TGN-PEG-PAMAM/ATO脑胶质瘤靶向递药系统具有较好的体外跨BBB抑制U87细胞生长的效果,为脑胶质瘤治疗提供了新的策略。