肠集聚性大肠埃希菌分离株脉冲场凝胶电泳分析

目的 对我国散发腹泻患者肠集聚性大肠埃希菌(EAEC)分离株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析,以了解其分子流行病学特征并初步建立我国EAEC菌株的基础数据库。 方法 参照PulseNet大肠埃希菌O157:H7的PFGE实验方法对52株EAEC分离株进行分析,并使用BioNumerics软件进行聚类。 结果 在限制性内切酶XbaⅠ和PulseNet推荐的电泳参数下,菌株基因组酶切片段分布均匀,条带易于识别。52株EAEC分离株产生了48种PFGE带型,初步聚类为A~N 14个群,不同地区来源及不同HEp-2细胞黏附表型的菌株广泛分布在不同PFGE聚类群中。 结论 我国散发腹泻患者EAEC分离株呈现高度多态性,PFGE电泳参数和限制性内切酶XbaⅠ适用于我国EAEC菌株的分析。     

安徽省马鞍山市2014-2018年腹泻患者中致泻性大肠埃希菌病原学及流行特征分析

目的了解安徽省马鞍山市腹泻患者中致泻性大肠埃希菌（DEC）的感染情况、毒力基因、耐药性以及分子分型,为DEC的防治提供依据。方法2014 — 2018年,对马鞍山市三家哨点医院门诊急性腹泻患者粪便标本进行DEC的分离、鉴定与毒力基因检测,并对阳性菌株进行药敏试验及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型。结果1 711份腹泻粪便标本中有120份检出阳性,共分离得到123株DEC,标本检出阳性率为7.01%。 DEC阳性病例年龄分布以0～5岁的婴幼儿及20～39岁青壮年为主;病例集中在夏季（6 — 8月）。 DEC分型中以肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）和肠致病性大肠埃希菌（EPEC）为主,分别占58.54%和31.71%。 123株DEC菌株的药敏试验结果显示,超广谱β-内酰胺酶（ESBL）阳性菌株耐药严重,所有菌株耐≥6种药物。 PFGE分子分型产生119种带型,带型相对分散,相似度为49.7%～97.7%。结论2014 — 2018年马鞍山市腹泻患者DEC的感染类型以ETEC和EPEC为主,存在年龄及季节分布特征,本地分离DEC菌株的耐药程度较为严重,PFGE带型分散,应控制抗生素的滥用,重点关注ETEC或EPEC的流行风险。     

2015年北京市昌平区致泻性大肠埃希菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究

目的 了解2015年北京市昌平区致泻性大肠埃希菌耐药状况并对其进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型研究。方法 药敏实验按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）推荐的K-B纸片法进行24种抗生素的敏感性分析;PFGE实验参照PulseNet PFGE实验方法。结果 药敏结果显示,致泻性大肠埃希菌对头孢比肟、亚胺培南完全敏感;对阿米卡星、妥布霉素、米诺环素耐药率极高,分别为94.6%、97.3%和97.3%。耐药谱分析显示,致泻性大肠埃希菌同时耐受抗生素种类为2～7种。PFGE分析发现,33株致泻性大肠埃希菌具有31种PFGE带型,菌株之间的相似系数为68.0%～100.0%,其中2株ETEC和2株EPEC有一致的PFGE带型。结论 昌平区引起腹泻的致泻性大肠埃希菌耐受抗生素的种类多、多重耐药严重且PFGE带型呈高度多态性。     

复发性尿路感染患者致病性大肠埃希菌分子分型、毒力基因及药物敏感性分析

目的 分析复发性尿路感染（rUTI）患者致病性大肠埃希菌分子分型、毒力基因和耐药性。方法收集分离自上海市第六人民医院60例rUTI患者的大肠埃希菌菌株,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）、多位点序列分型（MLST）和种系发育分型方法进行克隆分型,采用聚合酶链反应（PCR）和测序法分析其常见毒力基因（feoB、chuA、iutA、iroN、ireA、fimH、foc、sfa、aer和cnf）,并分析大肠埃希菌对13种常用抗菌药物的耐药性。结果 根据PFGE结果,将60例rUTI患者分为复发组和再感染组,纳入分离自复发组的30株和再感染组的60株大肠埃希菌。纳入菌株的主要MLST型别为ST131型和ST405型,主要种系发育分型为B2型和D型。在10种毒力基因中,feoB所占比例最高（98.8%）,其次是fimH(93.3%)。复发组iutA携带率高于再感染组（P=0.020）。2个组临床分离菌株抗菌药物耐药性模式无明显差异（P>0.05）。结论 ST131和ST405是上海市第六人民医院rUTI患者致病性大肠埃希菌的主要MLST型别,常见毒力基因为feoB和fimH,iutA在复发患者...     

大肠埃希菌ESBLs的检出及耐药性比较

目的为了解苏大附二院近3年大肠埃希菌产ESBLs株的检出情况及与非ESBLs株的耐药性比较。方法采用WHONET5.1分析统计软件对2003年至2005年的大肠埃希菌及其对17种抗生素的药敏结果进行回顾统计分析。结果产ESBLs大肠埃希氏菌三年总感染率为35.1%,各类头孢菌素及氨曲南、哌拉西林在ESBLs株均有严重的耐药性,耐药率几乎均大于90%,而三、四代头孢菌素在非ESBLs株仍保持较低的耐药性,耐药率为10.6%～39.7%,亚胺培南及含酶抑制剂的药物均有较好的抑菌作用。结论ESBLs株与非ESBLs株药敏结果存在显著差异,但检出比例有逐年降低的趋势。     

大肠埃希菌临床分离株耐药性分析

目的：监测近5年来大肠埃希菌临床分离株的耐药性变迁，指导临床合理使用抗生素。方法：常规方法进行菌株分离，采用VITEK-32全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验，超广谱β内酰胺酶采用双纸片确认试验和仪器检测相结合的方法，对近5年来我院大肠埃希菌的耐药谱进行回顾性调查分析。结果：近5年从各种临床标本中共分离到大肠埃希菌488株，大肠埃希菌对青霉素类及第一代头孢菌素耐药率最高。2002年，对氨苄西林、替卡西林和头孢噻吩耐药率均高达98％，对亚胺培南耐药率最低，5年耐药率均为零。对培氟沙星和替卡西林耐药率上升最快，分别上升了28和26个百分点，对呋喃妥因耐药率有所下降，对庆大霉素和妥布霉素耐药率趋于稳定。产ESBLs菌株有明显上升趋势，从1998年的17％上升到2002年的36％。结论：大肠埃希菌在临床标本中的检出率、耐药性及多重耐药性均有逐年上升的趋势。     

大肠埃希菌耐药性分析

目的：了解大肠埃希菌对常用抗生素的耐药性以及不同来源大肠埃希菌耐药性的差异，以指导临床合理用药。方法：应用WHONET5分析我院2000年1月-2002年7月临床分离的430株大肠埃希菌的药敏结果。结果：大肠埃希菌对氨苄西林、哌拉西林、阿莫西林-克拉维酸、复方磺胺甲嗯唑、环丙沙星、庆大霉素、头孢唑啉和头孢呋辛的耐药率分别为87％、78％、80％、67％、65％、53％、55％和42％；对头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶和氨曲南的耐药率分别为23％、18％、4％和18％；对哌拉西林-三唑巴坦、头孢吡肟、头孢西丁、亚胺培南、阿米卡星和呋喃妥因的耐药率分别为22％、15％、22％、0、15％和20％。痰液标本中的大肠埃希菌耐药率显著高于其他各类标本中分离者。结论：大肠埃希菌对青霉素类、磺胺类、喹诺酮类和庆大霉素，第一代、第二代头孢菌素等均已高度耐药，临床不宜选用；哌拉西林-三唑巴坦、第四代头孢菌素、头霉素类、碳青霉烯类、阿米卡星和呋喃类耐药率较低，临床可选用；不同来源的大肠埃希菌耐药率存在差异，痰标本中细菌耐药率最高，其余无明显差别。     

132株大肠埃希菌耐药性监测

目的 通过本院临床标本中培养分离的大肠埃希菌对20种抗生素的耐药性分析,为临床医生合理应用抗生素提供理论依据.方法 对2005年1月至2007年4月临床送检培养标本,由DaDe MicroScal Panl微生物半自动鉴定系统进行鉴定和药敏试验,得到的132株大肠埃希菌进行分析.结果 在132株大肠埃希菌中,有49株产超广谱内酰胺酶(ESBLs),阳性率为37.12%.在药物敏感试验中,以哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁最敏感,敏感率均为88.33%.其次为阿米卡星、亚胺培南、头孢他啶,敏感率分别为86.67%、81.12%、73.33%.结论 大肠埃希菌对青霉素类、复方新诺明、环丙沙星、庆大霉素耐药率较高,在常用头孢类抗生素中,除头孢西丁、头孢他啶敏感性高外,其余耐药率在50%～61.67%之间.临床医生在治疗时应结合细菌培养的药敏结果合理使用抗生素,以达到有效治疗,减少耐药菌株的产生.     

泌尿生殖道分离大肠埃希菌的耐药性分析

泌尿系感染是最常见的感染性疾病之一,大肠埃希菌是引起泌尿系感染最常见的病原菌,我们就我院分离的80株大肠埃希菌进行了分析。     

尿路感染大肠埃希菌临床分布及耐药性分析

目的了解尿路感染大肠埃希菌的耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供试验依据。方法对该院泌尿系感染者分离出348株病原菌进行鉴定和体外药物敏感试验,采用法国生物梅里埃公司ATB鉴定系统对菌株进行鉴定,采用纸片扩散法(K-B)进行抗菌药敏感性试验。结果医院尿路感染标本分离的大肠埃希菌对常用抗菌药物表现出不同程度的耐药性,大肠埃希菌对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美洛培南敏感率为100.0%;对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛和哌拉西林耐药率较高;对氟喹诺酮类抗菌药物环丙沙星、左氧氟沙星耐药率也大于60.0%。结论大肠埃希菌耐药率呈逐年上升趋势;临床应该重视病原菌的培养和药物敏感试验,根据药敏结果合理应用抗菌药物。     

2013-2019年北京市顺义区腹泻病例分离致泻性大肠埃希菌耐药特征分析

目的 对2013-2019年北京市顺义区2家哨点腹泻病例分离的致泻性大肠埃希菌(DEC)进行耐药特征分析.方法 收集2013-2019年北京市顺义区2家哨点医院腹泻病例粪便标本,进行DEC分离培养、生化鉴定与分型鉴定,抗菌药敏感性试验使用微量肉汤法,耐药特征分析包括耐药率、非敏感率、多重耐药率和耐药谱分析.结果 腹泻病...     

Antibiotic resistance of faecal Escherichia coli from healthy volunteers from eight developing countries

OBJECTIVES: To determine the prevalence of antibiotic-resistant faecal Escherichia coli from adult volunteers from urban (U) areas in Kenya, Mexico, Peru and the Philippines, and non-urban (NU) locations in Curacao, Mexico, Venezuela, Ghana, Zimbabwe and the Philippines. METHODS: Faecal samples of adult volunteers (n=1290) were analysed in one laboratory for the presence of antimicrobial-resistant E. coli using Eosin Methylene Blue agar plates containing, respectively, ampicillin, oxytetracycline, cefazolin, ciprofloxacin, gentamicin, chloramphenicol and trimethoprim at breakpoint concentrations. RESULTS: The mean age of the volunteers was approximately 35 years; most of them were female. Ciprofloxacin resistance was in the range 1%-63%: the highest percentages were found in the urban populations of Asia and South America. In Peru and the Philippines (U and NU), the prevalence of gentamicin resistance was >20%. Cefazolin resistance was the highest in the urban Philippines (25%). Higher prevalences for ampicillin, oxytetracycline and trimethoprim were found for urban areas compared with non-urban ones of Asia, Africa and South America, respectively (P<0.05). CONCLUSIONS: In the populations studied, antibiotic resistance in faecal E. coli from adult volunteers was emerging for cefazolin, gentamicin and ciprofloxacin and was high for the older drugs ampicillin, oxytetracycline, trimethoprim and chloramphenicol.     

Screening the enteroaggregative Escherichia coli activity and detection of the aggA,aafA, and astA genes with novel PCR primers for the Escherichia coli isolates from diarrhea cases in Taiwan

Enteroaggregative Escherichia coli (EAggEC) are emerging enteropathogens associated with human diarrhea diseases and food poisoning cases. They show distinctive aggregative pattern of adherence to cultured human epithelial cells. However, EAggEC strains are diverse and not all of them have the aggregative adherence fimbria I (AAF/I), AAF/II and heat-stable enterotoxin 1 (EAST1) genes. We attempted to determine the incidence of EAggEC in E. coli isolates from diarrhea patients in Taiwan and to characterize these EAggEC strains. We used three activity assays including HeLa cell adhesion, human blood hemagglutination and bacterial clumping tests and polymerase chain reaction (PCR) primers designed from an aggregative adherence pattern associated plasmid (pCVD432) to screen the EAggEC strains in 403 E. coli isolates including 63 laboratory isolates and 340 clinical isolates obtained from diarrheal disease cases. All these 403 E. coli strains were also assayed with novel PCR primers designed from AAF/I (aggA), AAF/II (aafA) and EAST1 (astA) genes. Results showed that except for the three EAggEC reference strains, only three clinical isolates were identified as EAggEC strains. Including the reference strains, all the E. coli strains with EAggEC activity generated positive PCR results to the aggA gene based primers, but not to the aafA and astA gene targeted primers.     

急性感染性腹泻病原菌的分布及耐药性分析

目的：监测肠道感染患者病原菌的分布及耐药状况，为临床合理用药提供依据。方法：以我院肠道门诊急性腹泻患者为研究对象：通过对粪便标本培养出致病菌后，进一步鉴定种、群及血清型；对所鉴定细菌进行药敏试验。结果：在506例急性腹泻患者粪便标本中，共检测出178株致病菌，总分离率为35．2％。其中弧菌属56株(31．5％)，变形杆菌36株(20．2％)；志贺菌23株(4．6％)。药敏试验结果表明，弧菌属及变形杆菌对药物最敏感，而气单胞菌属和大肠埃希菌耐药率较高。细菌对青霉素类和磺胺类药物耐药率较高，喹诺酮类、第三代头孢菌素以及亚胺培南等药物抗菌活性较强。结论：致病性弧菌在肠道门诊急性腹泻患者检出率已超过志贺菌属，成为第1位病原菌，应根据肠道病菌菌型变迁的耐药性监测结果合理应用抗菌药物。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性和基因型分布

目的了解广州地区腹腔感染产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型分布。方法采用纸片扩散法(K-B法)对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行抗菌药物的敏感性试验,通过PCR法分析其所产生基因型。结果产ESBLs菌株对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶和哌拉西林-三唑巴坦的敏感率为42.1%～76.3%,而对其他抗菌药物敏感率较低,对头孢噻肟的敏感率仅为0%～2.6%;基因型分析显示有35株产TEM型酶,14株产SHV型酶,29株产CTX-M型酶。结论腹腔感染产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药严重,CTX-M型ESBLs多见。     

杭州地区2010~2011年急性腹泻患儿病原诺如病毒基因型及分子特征研究

摘要:目的：探讨杭州地区2010~2011年婴幼儿急性腹泻病原诺如病毒(NV)基因型及其分子特征。 方法：用多重RT-PCR方法对325份5岁以下急性腹泻患儿粪便标本进行NV检测,选择阳性扩增片段进行基因测序,并对序列进行系统进化分析。 结果：杭州地区急性腹泻患儿感染NV的阳性率为13.85%（45/325）,NV GⅠ型7株,GⅡ型38株;序列结果分析显示3株NV GⅠ型与AB522407.1、EU085525.1、EU085523.1和FJ383829.1的同源性达93.2%～100%,进化树显示其亲缘关系较近;进化树显示12株属于GⅡ-4型,且与GQ845367.2、AB291542.2、JQ934814.1和JQ613509.1的同源性高达94.7%～100%;4株GⅡ-3型与JF896130.1和EU400377.1同源性高达97.9%～100%;1株GⅡ-4型与GQ380647.1的同源性仅为93.6%。 结论：NV是2010~2011年导致杭州地区儿童急性腹泻的重要病原之一,以NV GⅡ-4型为主,可能是流行优势株。     

Antibiotic resistance in diarrheagenic Escherichia coli and Shigella strains isolated from children in Hanoi, Vietnam

The MICs for 162 diarrheagenic Escherichia coli strains and 28 Shigella strains were determined on the basis of NCCLS guidelines. More than 75% of the strains were resistant to ampicillin, chloramphenicol (53.6% of Shigella strains), and trimethoprim-sulfamethoxazole. Multiresistance was detected in 89.5% of E. coli strains and 78.6% of Shigella strains.