营养不良性肺水肿大鼠肺泡液体清除机制的研究

目的 探讨营养不良性肺水肿大鼠肺泡液体清除功能的变化及其机制.方法 制备营养不良性肺水肿大鼠动物模型,分别于48 h和120 h测定大鼠肺泡液体清除率(AFC)、总肺水量(TLW)和肺血管外水量(EVLW).将钠通道阻断剂氨氯吡咪、Na-K-ATP酶阻断剂哇巴因及β2受体激动剂特布他林分别灌注到正常及禁食120 h大鼠的肺泡腔内,测定AFC的变化.结果 大鼠禁食48 h AFC(19.7 ±3.22％)与正常大鼠AFC( 18.5±2.21％)比较没有明显变化;120 h时AFC(9.50±2.19％)明显降低.氨氯吡咪、哇巴因明显降低营养不良性肺水肿大鼠AFC (P ＜0.05),特布他林对营养不良性肺水肿大鼠AFC的作用与对照组大鼠比较差异无显著性(P＞0.05).结论 营养不良性肺水肿与钠通道及Na-K-ATP酶及的活性被抑制,导致肺泡液体清除能力降低有关.     

BRL-37344对离体人肺脏肺泡液体清除的作用

目的: 探讨β3肾上腺素能受体激动剂BRL-37344对离体人肺脏肺泡液体清除率(AFC)的作用及其机制。方法: 首先将10-4mol/L 到10-8mol/L的 BRL-37344分别灌注到离体人肺脏肺泡腔内,测定AFC的变化。然后将10-5mol/L BRL-37344分别与α受体阻滞剂酚妥拉明、β1受体阻滞剂阿替洛尔、β2受体阻滞剂ICI-118551、β3受体阻滞剂SR59230A、钠通道阻断剂氨氯吡咪、Na -K -ATP酶阻断剂哇巴因混合后灌注到离体人肺脏肺泡腔内,测定AFC的变化。结果: 10-8mol/L的BRL-37344对离体人肺脏肺泡液体清除率没有影响,10-7mol/L至10-4mol/L的BRL-37344能够显著提高离体人肺脏肺泡液体清除率。BRL-37344增加离体人肺脏AFC的作用能够被SR59230A、氨氯吡咪和哇巴因抑制。结论: BRL-37344主要通过调节Na -K -ATP酶的活性增加离体人肺脏肺泡液体清除能力,促进肺水肿液的吸收。     

高氧肺损伤肺泡液体清除率的变化及其意义

目的建立高氧致中度肺损伤大鼠动物模型，研究其肺泡液体清除率（AFC）的变化。方法高氧大鼠暴露于90％的氧浓度，分别于24和48h测定AFC、总肺水量和肺血管外肺水量。并检测氨氯吡咪、哇巴因及特布他林对高氧大鼠及正常对照组大鼠AFC的影响。结果与对照组大鼠比较，高氧大鼠总肺水量和肺血管外水量明显增加（P〈001），而AFC没有明显变化（P〉0．05）。氨氯吡咪、哇巴因明显降低AFC（P〈0．05），特布他林对高氧大鼠AFC的影响与对照组大鼠比较差异无显著性（P〉0．05）。结论轻、中度肺损伤时AFC没有明显变化。     

新鲜离体人肺中液体清除作用及其影响因素研究

目的:证实随着肺泡内灌注液的吸收,肺泡灌注液的蛋白浓度逐渐增加;观察β2-受体激动剂特布他林对新鲜离体人肺肺泡上皮细胞液体清除作用的影响;观察特布他林的这种上调作用是否被心得安所抑制。方法:选取42例胸外科住院肺癌患者,经适当的手术方式切除的段或叶肺组织,应用含有不同浓度的蛋白溶液灌注距离癌肿边缘15 cm的肺段,通氧气1 h后抽取灌洗液测量其蛋白浓度,用以检测肺泡液体清除率。结果:通过检测灌洗前后的蛋白浓度改变,测得A组1 h的肺泡液体清除率(ALC)为(3.43±1.52),B组1 h的ALC为(3.43±1.20),C组1 h的ALC为(5.43±1.51),D组1 h的ALC为(5.14±1.68),E组1h的ALC为(3.43±1.51),F组1 h的ALC为(3.43±1.20)。结论:β2-受体兴奋剂特布他林可以明显提高离体人肺的肺泡液体清除率,这种作用与肺泡内蛋白浓度无关且可被心得安部分抑制,特布他林通过缩短达到肺泡液体清除率峰值的时间来提高肺泡液体清除率,故在临床肺水肿患者适当应用β2-受体兴奋剂有利于肺水肿的清除,患者症状的缓解。     

苯肾上腺素对离体大鼠肺泡液体清除率的影响

目的 探讨α-肾上腺素能受体激动剂苯肾上腺素对离体大鼠肺泡液体清除率的影响及其影响的机制。方法应用5％等渗白蛋白溶液和不同的药物灌注到离体的大鼠的肺泡腔内，根据灌注前及其孵育1h后白蛋白浓度的变化来计算肺泡液体清除率。结果苯肾上腺素可以显著地提高离体大鼠的肺泡液体清除率，并且呈现剂量依赖性。α1-及其β1-,β2-肾上腺素能受体抑制剂可以显著地抑制苯肾上腺素引起的肺泡液体清除率的提高，但α2-肾上腺素能受体激动剂对苯肾上腺素提高肺泡液体清除率的作用没有影响。结论α-肾上腺素能受体激动剂苯肾上腺素可以显著提高离体大鼠的肺泡液体清除率，呈现剂量依赖性。并且可能是通过作用于α1-和β-肾上腺素能受体的结果。     

油酸诱导的急性肺损伤模型肺泡液体清除能力的实验研究

目的 探讨油酸诱导的急性肺损伤模型肺泡内液体的清除能力.方法 清洁级雄性大鼠51只随机分为正常组、急性肺损伤组和特布他林治疗组.油酸静脉注射复制急性肺损伤模型.动脉血气、肺组织病理学检测评估肺损伤程度,电镜下观察急性分离的肺泡Ⅱ型上皮细胞的变化,重力法测定血管外肺水量(EVLWI).结果 急性肺损伤组大鼠肺损伤评分为(6.37±1.26)分、血管外肺水量为(4.02±0.69)mL/g,显著高于正常组[(1.39±0.5)分和(2.73±0.50)mL/g],均P<0.05;特布他林治疗后大鼠肺损伤评分为(5.23±1.14)分,血管外肺水量为(3.50±0.45)mL/g,较急性肺损伤组显著下降(均P<0.05).电镜下观察急性肺损伤组肺泡Ⅱ型上皮细胞形状不规则,染色质边集,线粒体肿胀,板层小体排空及空泡化等;经特布他林治疗后,电镜观察大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体肿胀程度及板层小体排空程度较急性肺损伤组轻.结论 油酸致急性肺损伤大鼠肺泡液体清除能力下降,特布他林可以减轻肺组织及肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤,提高肺水清除能力.     

特布他林短时间作用增强急性肺损伤大鼠肺泡液清除的机制与αENaC的相关性

目的 探讨β2受体激动剂特布他林短时作用增强成体大鼠肺泡液清除的机制与肺泡上皮钠离子通道α亚基(αENaC)的相关性.方法 建立油酸急性肺损伤(ALI)大鼠模型;以PaO2、氧合指数,肺组织HE染色,血管外肺水含量(EVLW)为指标验证特布他林经气管给药作用1h促进ALI大鼠肺泡液重吸收的效果:通过实时荧光定量RT-PCR、Western blot测定各组大鼠肺组织的αENaC mRNA、αENaC蛋白的表达并比较它们的差异.结果 特布他林治疗组大鼠的PaO2、氧合指数、EVLW较ALI组有显著差异;各组大鼠αENaC mRNA、αENaC蛋白表达差异无统计学意义.结论 特布他林经气管给药作用1 h能显著促进ALI大鼠肺泡液重吸收;特布他林短时作用增强成体大鼠肺泡液清除没有通过αENaC基因表达实现.     

囊性纤维化跨膜传导调节体氯离子通道对大鼠肺泡液体清除率的影响

目的 探讨囊性纤维化跨膜传导调节体(Cystic fibrosis transmembrance conductance regulator,CFTR)氯离子通道在肺泡液体清除过程中的作用及其影响机制.方法 5%清蛋白等渗氯化钠溶液和不同药物混合后灌注到离体大鼠的肺泡腔内,根据灌注前及其孵育1 h后清蛋白浓度的变化来计算大鼠肺泡液体清除率(AFC).结果 对照组大鼠基础AFC为(8.16%±1.50%),β1-肾上腺素受体激动剂地诺帕明显著提高AFC,差异有统计学意义(P＜0.001).阿替洛尔(选择性β1-肾上腺素受体阻滞剂)可以完全抑制地诺帕明提高AFC的作用,AFC为(7.78%±2.26%).两种CFTR的抑制剂格列苯脲和CFTRinh-172可以部分抑制地诺帕明引起的AFC的提高,AFC分别为(10.71%±0.95%)和(12.96%±1.08%),与地诺帕明组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).CFTR氯离子通道的开放剂NS004可以提高AFC,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),钠离子通道的抑制剂氨氯吡咪和格列苯脲及CFTRinh-172可以完全抑制NS004提高AFC的作用,AFC分别为(7.48%±1.16%)、(7.98%±2.13%)和(7.56%±1.02%),与NS004组比较差异有统计学意义(P＜0.001).同时氨氯吡咪可以完全阻断地诺帕明提高AFC的作用,AFC为(8.04%±1.85%),与地诺帕明组比较差异有统计学意义(P＜0.001).结论 地诺帕明和NS004可以提高离体大鼠的AFC.两种CFTR的抑制剂格列苯脲和CFTRinh-172可以部分抑制地诺帕明对AFC的提高作用、完全抑制NS004对于AFC的提高作用.氨氯吡咪可以完全阻断地诺帕明对AFC的提高作用.地诺帕明对AFC的提高作用部分是通过CFTR氯离子通道调节的,CFTR氯通道的开放剂NS004对于AFC的调节作用是通过钠离子通道完成的.     

大鼠低氧肺损伤的超微结构及肺泡液体清除功能的变化

目的 研究肺损伤大鼠肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC)及肺脏超微结构的变化规律,并探讨二者的内在联系.方法 雄性Wistar大鼠120只,体重300～380 g,随机分成12组,低氧大鼠暴露于10%的氧浓度,分别于24、48和72 h测定基础AFC、特布他林作用后AFC、总肺水量(total lung water,TLW),并取病理切片观察肺脏超微结构的变化.结果 大鼠暴露于10%的氧浓度24 h后AFC(18.7±3.19%)与正常大鼠AFC(18.9±2.26%)比较没有明显变化,内皮细胞出现损伤改变,而上皮细胞并没有明显的结构变化;48 h时AFC(13.6±2.60%)明显降低,但肺泡上皮细胞的结构和上皮细胞紧密连接并无明显损伤;72 h AFC(9.93±1.95%)进一步降低,且经特布他林作用后AFC(12.7±2.64%)仍低于对照组基础AFC,肺泡上皮细胞的结构破坏.结论 当轻、中度损伤时,虽AFC降低,但肺泡上皮屏障的结构可以没有明显改变,对药物有较好的反应性.     

血小板激活因子所致的大鼠肺损伤依赖于细胞外钙离子的存在

血小板激活因子(PAF)1.8 ng/ml可引起离体大鼠灌注肺血管通透性升高,并使肺重量持续增加。无钙PAF灌注组的肺重量增加、液体滤过系数、标记白蛋白渗出血管外的量分别比有钙PAF灌注组低89.2％、70.9％和75.5％(35 min内),接近正常。肺毛细血管压和肺动脉压的变化幅度在35 min内分别从+0.725±0.389 kPa和+1.187±0.32 kPa下降至-0.708±0.315 kPa和-0.025±0.279 kPa。无钙灌注对未经PAF处理的大鼠离体肺也有轻度的影响。上述结果提示PAF所致的肺损伤依赖于细胞外钙离子的存在。     

精氨酸抗利尿激素对急性肺损伤大鼠肺水肿液的清除作用

目的探讨精氨酸抗利尿激素（AVP）对急性肺损伤肺水肿液清除作用。方法48只健康成年的雄性SD大鼠随机分为对照
组、模型组（ALI组）、AVP组,观察各组肺组织病理形态学、肺水含量、肺泡上皮通透性及肺泡液体清除率（AFC）变化,测定肺泡
上皮钠通道（ENaC）和钠/钾ATP 酶（Na+, K+-ATPase）表达情况。结果经AVP治疗后,模型组肺泡上皮通透性（0.27±0.15 vs
0.59±0.19）及肺水含量（5.01±1.59 vs 8.67±1.79）减轻,AFC 增加（23.56±4.51 vs 8.28±3.57）,α-ENaC（1.296±0.322 vs 0.349±
0.141）和α1-Na+,K+-ATPase表达增加（1.421±0.389 vs 0.338±0.186）,均有显著差异（P<0.05）。结论AVP能促进AFC,其作用途
径可能是上调α-ENaC和α1-Na+,K+-ATPase通道蛋白实现的。
     

甲型流感病毒对于在体大鼠肺泡上皮液体清除的影响

 目的探讨甲型流感病毒（A/PR/8/34 株,H1N1）对在体大鼠肺泡液体清除率（AFC）的影响,以及β1-肾上腺素能受体激
动剂地诺帕明对于在体大鼠AFC 的影响机制。方法将SD大鼠分为正常对照组、H1N1 感染模型组、感染后地诺帕明干预组。
研究H1N1 感染后AFC 的变化以及地诺帕明的调节作用,并应用ELISA 方法检测肺组织内环腺苷酸（cAMP）、环鸟苷酸
（cGMP）的水平。结果正常对照组AFC 为（17.25±1.01）%,肺干湿重比（W/D）为4.99±0.02;H1N1 感染组AFC 降为（9.15±
1.01）%,W/D升高至6.77±0.13。干预组可以显著地提高H1N1 感染后的AFC［（14.41±1.41）%］,W/D 为5.98±0.22。正常肺组织
内cAMP活性为（2.73±0.06）nmol·mg^-1·mg^-1,cGMP 的活性为（5.10±1.88）pmol·mg^-1·mg^-1。H1N1 感染组肺组织内的cAMP 明显
下降［（1.43±0.06）nmol·mg^-1·mg^-1］,cGMP 水平升高［（7.34±0.40）pmol·mg^-1·mg^-1］,应用地诺帕明可以提高肺组织内的cAMP 的
活性［（2.06±0.16）nmol·mg^-1·mg^-1］,cGMP的活性下降为［（6.16 ±1.36）pmol·mg^-1·mg^-1］。结论H1N1 感染可导致大鼠AFC 明显
下降、肺水肿加重。地诺帕明可以提高在体H1N1 感染大鼠模型的AFC、减轻肺水肿,并可以逆转感染组cAMP/cGMP 的下降。
说明β1-肾上腺素能受体激动剂提高AFC 及减低肺水肿可能是通过cAMP-PKA 信号转导途径完成。     

Effect of β3-adrenergic agonists on alveolar fluid clearance in hypoxic rat lungs

Background Recent research suggests that β2-adrenergic agonists increase alveolar fluid clearance （AFC） under physiologic and pathologic conditions. It is unknown whether β3-adrenergic agonists also increase AFC under pathologic conditions. The aim of this study was to investigate the effect of β3-adrenergic agonists on AFC following hypoxic lung injury and the mechanisms involved. Methods Hypoxic rats were exposed to 10% oxygen. BRL-37344 （133-adrenergic agonist） or CGP-12177 （selective β3-adrenergic agonist） alone or combined with β receptor antagonists, sodium channel blockers, or Na＋/＋~-ATPase blockers were perfused into the alveolar space of rats exposed to 10% oxygen for 48 hours. Total lung water content （TLW） and AFC were measured. Results AFC did not change for the first 24 hours but then decreased after 48-hour exposure to 10% oxygen. The perfusion of BRL-37344 or CGP-12177 significantly increased AFC in normal and hypoxic rats. The AFC-stimulating effect of CGP-12177 was lowered with amiloride （a Na＋ channel blocker） and ouabain （a Na~/K~-ATPase inhibitor） by 37% and 49%, respectively. Colchicine significantly inhibited the effect of CGP-12177. Conclusions These findings suggest that β3-adrenergic agonists can increase AFC during hypoxic lung injury in rats and accelerate the amelioration of pulmonary edema.     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的:通过建立大鼠肺缺血再灌注模型,观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠缺血再灌注损伤肺的保护作用,并探讨其作用机制.方法:随机将30只雌性SD大鼠分为3组(每组10只):假手术组(A组),左侧开胸后切断下肺韧带,于肺门处套绕阻断带,维持通气165 min;I/R组(B组),阻断左肺门45 min,开放再通气2 h;N...     

激活大麻素受体2可减轻实验性脓毒症大鼠的急性肺损伤

目的 探讨激活大麻素受体2(CB2)对大鼠脓毒症急性肺损伤的保护作用及机制。方法 将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、CB2激动剂组和P38 MAPK抑制剂组（12只/组）。对照组腹腔注射生理盐水,其余3组均腹腔注射脂多糖造模6 h;CB2激动剂组在注射脂多糖前30 min腹腔注射CB2激动剂JWH133(3 mg/kg),P38 MAPK抑制剂组在CB2激动剂组基础上提前30 min腹腔注射P38 MAPK抑制剂SB203580(5 mg/kg)。观察和检测肺组织病理学、含水率、液体清除率、炎症因子的变化情况,肺组织CB2、紧密连接的基因及蛋白表达情况以及P38 MAPK磷酸化情况。结果 与对照组相比,模型组大鼠的肺泡结构破坏严重,液体清除率、肺组织中CB2、occludin和ZO-1蛋白的mRNA及蛋白表达降低,肺组织含水率、P38 MAPK的磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β均增加,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,CB2激动剂组肺泡形态有所恢复,但仍有炎性浸润,肺组织含水率、P38 MAPK磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β降低,液体...     

Alveolar stability under different combinations of positive end-expiratory pressure and tidal volume: alveolar microscopy in isolated injured rat lungs

Background High positive end-expiratory pressure （PEEP） and low tidal volume （VT） ventilation is thought to be a protective ventilation strategy. It is hypothesized that the stabilization of collapsible alveoli during expiration contributes to lung protection. However, this hypothesis came from analysis of indirect indices like the analysis of the pressure-volume curve of the lung. The purpose of this study was to investigate isolated healthy and injured rat lungs by means of alveolar microscopy, in which combination of PEEP and VT is beneficial with respect to alveolar stability （I-E%）. Methods Alveolar stability was investigated in isolated, non-perfused mechanically ventilated rat lungs. Injured lungs were compared with normal lungs. For both groups three PEEP settings （5, 10, 20 cmH20） were combined with three VT settings （6, 10, 15 ml/kg） resulting in nine PEEP-VT combinations per group. Analysis was performed by alveolar microscopy. Results In normal lungs alveolar stability persisted in all PEEP-VT combinations （I-E% （3.2±11.0）%）. There was no significant difference using different settings （P 〉0.01）. In contrast, alveoli in injured lungs were extremely instable at PEEP levels of 5 cmH20 （mean I-E% 100%） and 10 cmH2O （mean I-E% （30.7±16.8）%）; only at a PEEP of 20 cmH20 were alveoli stabilized （mean I-E% of （0.2±9.3）%）. Conclusions In isolated healthy lungs alveolar stability is almost unaffected by different settings of PEEP and VT. In isolated injured lungs only a high PEEP level of 20 cmH2O resulted in stabilized alveoli whereas lower PEEP levels are associated with alveolar instability.     

麦门冬汤对间质性肺炎小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞自噬及肺水清除的作用机制研究

[目的]观察麦门冬汤对间质性肺炎小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞自噬及对肺水清除的影响,并探究其作用机制.[方法]将120只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6小鼠随机分为6组:正常组、模型组、强的松组及麦门冬汤高、中、低剂量组,每组20只.除正常组小鼠经鼻腔滴注0.9％氯化钠溶液之...     

δ阿片受体激动剂DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注肺水转运的作用

目的通过二血管阻断加低血压法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,观察δ阿片受体激动剂DADLE对大鼠肺水转运的作用,探讨其对全脑缺血再灌注肺损伤(ALI)的保护作用.方法健康雌性SD大鼠30只随机分为假手术组(Sham)、模型组(I/R)、DADLE处理组各10只.假手术组(Sham):只暴露血管而不夹闭;缺血再灌注组(I/R):采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型,缺血15min后给予再灌注120min;DADLE处理组:于再灌注前经由左侧颈静注射DADLE 5mg/kg,再灌注120min后,取右肺组织,常规HE染色观察其形态学改变,左肺叶组织湿质量/干质量(W/D)值.并与假手术组(Sham)、模型组(I/R)进行对照分析.结果成模后的肺脏表现为肺泡间隔增宽,毛细血管扩张充血,肺胞腔内及血管周围中性粒细胞浸润,气管壁部分上皮脱落,肺胞腔及气管腔均有浆液渗出.DADLE处理组肺脏充血减轻,中性粒细胞浸润有所减少.结论大鼠急性全脑缺血再灌注模型对肺有不同程度的损伤,DADLE可减少肺组织液体过量分泌,对ALI具有一定的保护作用.