凋亡相关基因Survivin、Caspase-3、Caspase-9和Cyclin B1在胃癌组织中的表达

目的 观察凋亡相关基因Survivin、Caspase-3、Caspase-9和Cyclin B1在胃癌组织中的表达以及探讨Survivin与Caspase-3、Caspase-9和Cyclin B1的关系。方法 RT-PCR方法检测Survivin、Caspase-3、Caspase-9和Cyclin B1在30例胃癌组织、10例正常胃组织标本中的表达。结果 30例胃癌组织中20例Survivin mRNA表达阳性，10例正常胃组织无Survivin mRNA表达；30例胃癌组织和10例正常胃组织均有Caspase-3和Caspase-9以及Cyclin B1的mRNA表达，但胃癌组织Caspase-3和Caspase-9及Cyclin B1的mRNA表达水平明显低于正常胃组织；在20例Survivin mRNA表达阳性的胃癌组织中，Caspase-3和Cyclin B1的mRNA表达水平明显低于10例Survivin mRNA表达阴性的胃癌组织，而Caspase-9mRNA表达水平却与10例Survivinm RNA表达阴性的胃癌组织相差不大。结论 Survivin、Caspase-3、Caspase-9和Cyclin B1在胃癌组织中均存在表达，且Survivin的表达与Caspase-3和Cyclin B1表达呈负相关，与Caspase-9表达不相关。     

Dapper1在胃癌组织中的表达及其对survivin介导的细胞凋亡的调控

目的 研究Dapper1(Dpr1)在胃癌组织中的表达及其对survivin介导的细胞凋亡的调控.方法 用RT-PCR方法检测30例患者胃癌及癌旁正常组织中Dpr1 mRNA的表达情况;用RT-PCR检测SGC7901细胞转染pcDNA3.1-Dpr1质粒前后Dpr1和survivin mRNA表达的变化;用Western blot检测转染前后Dvl-2、β-catenin及survivin蛋白表达的变化;用流式细胞术检测转染后SGC7901细胞凋亡率的变化. 结果本组30例胃癌组织中17例Dapperl mRNA表达下调,发生率为57%,且与胃癌的浸润深度和分化程度相关(P＜0.05);转染pcDNA3.1-Dpr1后SGC7901细胞中Dpr1 mRNA表达水平上调,survivin mRNA表达水平下调;Dvl-2、β-catenin以及Survivin蛋白表达量降低;转染pcDNA3.1-Dpr1质粒后SGC7901细胞的凋亡率升高. 结论 Dpr1能够通过经典WNT通路抑制凋亡相关蛋白survivin的表达,在胃癌细胞的凋亡中发挥重要作用.     

肿瘤相关凋亡诱导配体、Survivin、Caspase-3和NF-κB在大肠癌中的表达

肿瘤相关凋亡诱导配体（TRAIL）与FasL有较高的同源性，其选择性地诱导肿瘤细胞发生凋亡，从而使正常细胞逃逸其杀伤作用。有研究结果表明，许多肿瘤对TRAIL并不敏感．Sunivin、NF-κB和Caspase．3是TRAIL诱导细胞凋亡通路中三个关键性的影响因子。我们通过其在大肠癌中的表达的研究以期阐明TRAIL的效能与Survivin、Caspase．3和NF-κB表达的关系。     

基因Survivin、Caspase-3在胃癌发生中的作用

目的通过观察凋亡相关基因Survivin和Caspase-3在胃癌组织中的表达来探讨Survivin和Caspase-3在胃癌发生中的作用。方法采用RT-PCR方法检测Survivin和Caspase-3 mRNA在30例胃癌组织、10例正常胃组织标本中的表达。结果30例胃癌组织中20例Survivin mRNA表达阳性，10例正常胃组织中无Survivin mRNA表达；30例胃癌组织和10例正常胃组织均有Caspase-3 mRNA表达，20例Survivin mRNA表达阳性的胃癌组织Caspase-3 mRNA表达水平明显低于10例Survivin mRNA表达阴性的胃癌组织和正常胃组织，10例Survivin mRNA表达阴性的胃癌组织Caspase-3 mRNA表达水平明显低于10例正常胃组织。Suvivin阳性表达与胃癌的临床分期、腹膜和(或)远处转移有关，而与患者性别、年龄及胃癌附近淋巴结转移无关。结论Survivin在胃癌组织中的表达与Caspase-3表达水平呈负相关，Survivin在胃癌组织中的高表达及Caspase-3在胃癌组织中的低表达与胃癌发生、发展有关。     

基因Survivin、Caspase-3在胃癌发生中的作用

目的　通过观察凋亡相关基因Survivin和Caspase 3在胃癌组织中的表达来探讨Survivin和Caspase 3在胃癌发生中的作用。 方法　采用RT PCR方法检测Survivin和Caspase 3mR NA在 30例胃癌组织、10例正常胃组织标本中的表达。结果　 30例胃癌组织中 2 0例SurvivinmR NA表达阳性 ,10例正常胃组织中无SurvivinmRNA表达 ;30例胃癌组织和 10例正常胃组织均有Caspase 3mRNA表达 ,2 0例SurvivinmRNA表达阳性的胃癌组织Caspase 3mRNA表达水平明显低于 10例SurvivinmRNA表达阴性的胃癌组织和正常胃组织 ,10例SurvivinmRNA表达阴性的胃癌组织Caspase 3mRNA表达水平明显低于 10例正常胃组织。Suvivin阳性表达与胃癌的临床分期、腹膜和 (或 )远处转移有关 ,而与患者性别、年龄及胃癌附近淋巴结转移无关。结论　Survivin在胃癌组织中的表达与Caspase 3表达水平呈负相关 ,Survivin在胃癌组织中的高表达及Caspase 3在胃癌组织中的低表达与胃癌发生、发展有关     

AEG-1、NF-κB在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨AEG-1、NF-κB在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学法检测84例胃癌患者AEG-1、NF-κB表达情况,观察两个指标之间的相互关系及其与患者临床病理特征及预后的关系。使用SPSS16.0统计软件进行统计分析,计量数据使用均数±标准差(x珋±s)表示,采用方差分析进行多组间比较,两组间比较采用独立样本t检验;Spearman等级相关分析AEG-1、NF-κB表达的相关性,用COX回归分析模型进行多因素分析,P0.05为差异具有统计学意义。结果胃癌组织中AEG-1的阳性表达率为75.00%,其阳性表达的PU值明显高于癌旁胃组织(t=12.206,P0.01);其阳性表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P0.05)。NF-κB在胃癌组织中的阳性表达率为80.95%,其阳性表达的PU值明显高于癌旁胃组织(t=11.997,P0.01);其阳性表达与分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关(P0.05)。胃癌组织中AEG-1、NF-κB阳性表达呈正相关。COX模型多因素分析显示,AEG-1表达情况、淋巴结是否转移及临床TNM分期是影响胃癌术后生存率的指标中最为重要的3个指标(P0.05)。结论胃癌组织中可能存在AEG-1、NF-κB信号通路。检测胃癌组织中AEG-1、NF-κB的表达,有利于判断胃癌的发生、发展、浸润、转移并可评价胃癌的预后。     

促肝细胞再生磷酸酶3基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨促肝细胞再生磷酸酶3(PRL-3)蛋白与胃癌的侵袭转移及预后的关系。方法采用免疫组化方法检测121例胃癌原发灶和95例淋巴结转移灶中PRL-3的表达,分析其表达水平与临床病理资料的关系及其对胃癌预后的影响。结果PRL-3在胃癌原发灶中表达的阳性率为71.9%,其中伴淋巴结转移原发灶的表达率(77.9%)明显高于无淋巴结转移的原发灶者(50.0%),两者之间差异有统计学意义(P=0.005);淋巴结转移灶中PRL-3的表达率(91.6%)明显高于原发灶(77.9%),两者之间差异有统计学意义(P=0.009)。另外,PRL-3的表达与胃癌的淋巴管侵犯、淋巴结转移程度、TNM分期密切相关,并且与患者的预后呈负相关。结论PRL-3与胃癌的浸润转移密切相关,与患者的预后相关。     

FRZB基因在胃癌组织中的表达和胃癌细胞内定位及其意义

目的研究FRZB基因在胃癌中的表达和在细胞内的定位及其意义。方法通过免疫组织化学（免疫组化）链霉菌抗生物素蛋白．过氧化酶连接法（SP法）对90例胃癌组织及正常胃黏膜组织FRZB基因的表达进行分析。通过定量PCR和Western印迹检测胃癌细胞株和胃上皮细胞株GES-1的FRZB表达，并用免疫荧光技术对FRZB的细胞内定位进行研究。结果FRZB在胃癌中的表达高于正常胃黏膜，在胃癌组织中，FRZB表达阳性率为92．2％，而正常胃黏膜中除了1例（10．0％）为弱阳性表达外，其余均为阴性。FRZB在胃癌组织中的表达与分化程度（P=0．220）和Lauren分型（P〈0．01）相关，与其他的临床病理参数不相关。免疫荧光和Western印迹结果显示，FRZB在细胞核和细胞质中均有表达。定量PER结果显示，在胃癌细胞株中FRZB表达高于GES-1。结论FRZB与胃癌的分化和肠型及弥漫型的发生相关，FRZB在细胞核的定位可能与其在胃癌中的作用相关。     

RASSF1A在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨抑癌基因RASSF1A在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生、发展的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测58例胃癌组织及癌旁正常组织RASSF1A基因产物的表达水平。结果癌旁正常组织RASSF1A全部表达,而胃癌组织的表达率为46.5%。TNM分期Ⅲ期表达缺失率为74.3%,显著高于Ⅰ、Ⅱ期的27.3%、31.3%(P<0.05)。低分化腺癌表达缺失率为65.6%,显著高于高分化腺癌的38.5%(P<0.05)。RASSF1A基因表达与性别、年龄无明显关系(P>0.05)。结论RASSF1A表达缺失在胃癌的发生、发展中起重要的作用。     

DYX1C1基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织中DYX1C1基因mRNA的表达与肿瘤浸润、转移的关系。方法采用RT-PCR法检测10例正常胃组织和40例癌旁组织及癌组织中DYX1C1基因mRNA的表达。结果 DYX1C1基因V2剪切体在正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中的阳性表达率分别为10.0%,32.5%,72.5%,V3剪切体在上述3种组织中的阳性表达率分别为0%,20.0%及40.0%;V2,V3剪切体在各组表达差异均有统计学意义(P<0.05)。DYX1C1基因V2剪切体与胃癌的临床病理分期有关,与肿瘤细胞分化无关;V3剪切体与胃癌的临床病理分期及肿瘤细胞分化均无关。结论 DYX1C1基因mRNA的过度表达可能在胃癌的发生和发展中起重要作用。     

肝癌缺失基因在胃癌中的表达及启动子甲基化

目的探讨肝癌缺失基因(DLC1)与胃癌及其临床分期、分化程度等关系,DLC1mRNA表达与启动子甲基化的关系。方法用半定量逆转录聚合酶链反应方法检测34例原发性胃癌及癌旁正常组织中DLC1mRNA表达;用甲基化特异聚合酶链反应法(MSP)检测启动子甲基化。结果正常组织中DLC1mRNA均正常表达,胃癌组织DLC1mRNA低表达或表达缺失;正常组织0.62±0.11,胃癌组织0.24±0.17,差异有统计学意义(P<0.01)。DLC1mRNA表达与淋巴结转移和肿瘤分化程度有关,与性别、肿瘤大小和临床分期无关。正常组织中未发现DLC1基因启动子甲基化;胃癌组织中DLC1启动子甲基化阳性12例,甲基化率35.3%。启动子甲基化与无甲基化患者间DLC1mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论DLC1与胃癌存在明显相关性,是重要的抑癌基因。启动子甲基化与DLC1mRNA表达抑制密切相关,可能是影响DLC1在胃癌中低表达的最主要因素,DLC1是胃癌甲基化谱中主要成员。     

人肠凝集素-1真核表达载体的构建及其在胃癌细胞中的表达

目的 构建人肠凝集素-1( ITLN-1)基因的真核表达载体,观察其在胃癌细胞中的表达.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增ITLN-1 cDNA,定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1,测序鉴定;在脂质体的介导下,重组质粒瞬时转染人胃癌细胞株SGC-7901 72 h后,Western blot法检测细胞培养上清中ITLN-1表达,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、Transwell小室实验检测癌细胞增殖、侵袭活性.结果 真核表达载体pEGFP-ITLN-1转染SGC-7901细胞72 h后,ITLN-1 蛋白表达上调5.72倍(P＜0.01),细胞增殖活性降低52.8％ (P＜ 0.01),细胞侵袭能力下调58.1％ (P＜0.01).结论 成功构建人ITLN-1真核表达载体,转染胃癌细胞过表达后,能抑制癌细胞的增殖和侵袭活性.     

凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-Xl和BaX Mrna在大鼠缺血预处理脑组织中的表达

目的 检测脑缺血预处理大鼠脑组织中凋亡调控基因Ｂｃ１－２、Ｂｃ１－ｘ１和Ｂａｘ的表达。方法 假手术对照组、预处理对照组、预处理缺血组和缺血组Ｗｉｓｔａｒ大鼠分别再灌２４ｈ，４８ｈ和７２ｈ，采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和原位分子杂交（ＩＳＨ）方法对脑组织Ｂｃ１－２、Ｂｃ１－ｘ１和Ｂａｘ ｍＲＮＡ的表达进行检测。结果 半定量ＲＴ－ＰＣＲ显示：与假手术对照组相比，预处理对照组大鼠再灌２４     

凋亡相关基因survivin、caspase-3及cyclin-B1在胃癌发生、发展中的作用

目的 检测凋亡相关基因survivin、caspase-3和cyclin—B1在胃癌组织中的表达，探讨其表达在胃癌发生、发展中的作用。方法 采用RT—PCR方法检测survivin mRNA、caspase-3 mRNA和cyclin-B1 mRNA在30例胃癌组织、10例癌旁正常胃组织标本中的表达。结果 30例胃癌组织中有20例survivin mRNA阳性表达，10例正常胃组织中无survivin mRNA表达；30例胃癌组织和10例正常胃组织中均有caspase-3 mRNA和cyclin—B1 mRNA阳性表达；20例survivin mRNA阳性表达的胃癌组织中caspase-3 mRNA和cyclin-B1 mRNA表达水平明显低于lo例survivin mRNA阴性表达的胃癌组织（P〈0．01）和正常胃组织（P〈0．01）；10例survivin mRNA阴性表达的胃癌组织caspase-3 mRNA和cyclin—B1 mRNA表达水平亦明显低于10例正常胃组织（P〈0．01）。相关性分析表明，survivin的表达与caspase-3（r=-0．923，P〈0．01）和cyclin-B1（r=0．886，P〈0．01）表达呈负相关，caspase-3的表达与cyclin-B1表达呈正相关（r=0．892，p〈-0．01）。结论survivin促进胃癌发生、发展，caspase-3和cyclin-B1抑制胃癌发生、发展。     

DEC1和STAT3在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨DECl和S1-AT3在胃癌组织中的表达及其在胃癌发病机制中的作用.方法:利用免疫组织匕学方法检测59例胃癌组织中DEC1、STAr3 2种蛋白的表达情况,以19例癌旁正常组织作为对照.结果:DECl蛋白在胃癌组织中的阳性表达率为71.2%,高于癌旁正常组织的阳性表达率(26.3%.P<0.05).胃癌组织中的DECl表达与STAT3表达呈正相关,与肿瘤的分化程度有关,但与患者性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、浸润深度、有无淋巴结转移及远处转移无关;STAT3蛋白的表达与肿瘤的TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小及远处转移无关.结论:DEC1蛋白在胃癌组织中高表达,且与STAT3蛋白的表达相关.DECl和STAT3均为转录调节因子,二者的相互调节很可能在胃癌的发生发展中具有重要作用.     

吗啡对胃癌细胞Survivin和Caspase-9表达的影响

目的 观察吗啡对人胃癌MGC-803细胞Survivin和Caspase-9基因表达的影响.方法 胃癌MGC-803细胞分为两组:对照组和吗啡组.对照组不加任何药物,吗啡组将吗啡加入细胞培养液中使吗啡终质量浓度为0.1 μmol/L.孵育24h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测胃癌MGC-803细胞中Survivin和Caspase-9基因mRNA和蛋白的表达.结果 吗啡组胃癌细胞凋亡率为(17.20±2.95)％,明显高于对照组的凋亡率(11.40±2.86)％(P＜0.05);RT-PCR和Western blot结果显示,吗啡组胃癌细胞中Survivin mRNA和蛋白表达降低,而Caspase-9 mRNA和蛋白表达增高(P＜0.05).结论 0.1μmol/L吗啡通过抑制Survivin的表达、增强Caspase-9的活性而促进胃癌细胞的凋亡.     

胃癌组织中MMP-2和E-cadherin的表达及意义

目的检测胃癌组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和E-钙黏附素（E-cadherin）的表达，探讨其与胃癌侵袭转移的关系。方法对我科2003年12月至2004年4月30例胃癌手术患者，采用免疫组化染色检测胃癌组织中MMP-2和E-cadherin的表达情况。结果70％（21／30）的胃癌组织中MMP-2表达阳性。MMP-2表达阳性与浸润深度（P=0．022）、淋巴结转移（P=0．030）和肿瘤分化程度（P=0．043）密切相关，但与性别、年龄、肿瘤位置和直径、Lauren分型及淋巴管侵袭无关（P〉0．05）。46．7％（14／30）的胃癌组织中E-cadherin表达阴性。E-cadherin表达阴性与Lauren分型（P=0．026）、肿瘤分化程度（P=0．011）、淋巴结转移（P=0．038）和淋巴管侵袭（P：0．001）密切相关。结论胃癌组织中MMP-2表达上调和E-cadherin表达下移可能参与肿瘤侵袭转移的发生。     

FasL、B7-1联合基因修饰的胃癌细胞诱导抗胃癌主动免疫的研究

目的 探讨FasL、B7-1联合基因转移是否具有协同的抗肿瘤效应。方法 采用重组腺病毒载体将FasL、B7-1基因导入人胃癌细胞SGC-7901,G418阳性克隆筛选,流式细胞分析,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),显示FasL和B7-1的表达,并且通过Hoechst33342染色检测胃癌细胞凋亡;将携带 FasL和 B7-1基因的胃癌细胞(命名为 SGC-7901/FB-11)接种于 C57BL/6小鼠背部皮下,观测其致瘤性能;SGC-7901/FB-11致敏的小鼠对野生型瘤细胞是否具有免疫保护作用;用SGC-7901和 SGC-7901/FB-11细胞分别经腹腔免疫小鼠,得到腹腔浸润淋巴细胞及致敏脾细胞,MTT法检测其体外杀伤实验。结果 FasL和B7-1基因在胃癌细胞中获得高表达并可诱导胃癌细胞的凋亡,双基因转染的胃癌细胞的致瘤性明显下降;SGC-7901/FB-11诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对SGC-7901的杀伤活性显著高于野生型SGC-7901诱导的CTL对相同靶细胞的杀伤活性(P<0.05);SGC-7901/FB-11诱导的 CTL对 SGC-7901/FB-11的杀伤率显著高于对野生型 SGC-7901的杀伤率(P<0.05)。结论 FasL促进胃癌细胞凋亡,B7-1促进抗胃癌CTL的增殖、活化,在效应阶段两基因发挥着重要的协同作用。