HSV-TK基因导入正常人T淋巴细胞的实验研究

我们利用逆转录病毒介导的基因转染方法将含有自杀基因ＨＳＶＴＫ与潮霉素抗性基因Ｈｙ的融合基因ＨｙＴＫ导入正常人Ｔ淋巴细胞，以期利用自杀基因的作用底物来减少受者体内供者Ｔ细胞的数量，从而达到防治移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）而保留移植物抗白血病（ＧＶＬ）的目的。为探索一种有效的、更切合实际的预防ＧＶＨＤ的方案提供实验基础。材料和方法１　产逆转录病毒的包装细胞ＰＡ３１７／ＨｙＴＫ的建立　利用脂本课题受国家杰出青年科学基金（３９８２５１１１）资助作者单位：１００８５０　北京，军事医学科学院放射医学研究所（…     

HSV—TK基因转移治疗移植物抗宿主病

异基因骨髓移植的并发症－移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）是影响移植成功的主要障碍之一。用基因转移技术将单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶ－ＴＫ）基因导入供髓Ｔ淋巴细胞并随造血干细胞一起输入受者的疗法，既可保持Ｔ细胞的ＧＶＬ作用等优点，又可在ＧＶＨＤ发生时将Ｔ细胞去除以减轻ＧＶＨＤ。本文综述了ＨＳＶ－ＴＫ基因用于基因治疗的原理及在治疗ＧＶＨＤ研究中的进展。     

供鼠的活化自然杀伤细胞对小鼠异基因骨髓移植的影响

目的　研究供鼠的活化自然杀伤细胞（ Ｎ Ｋ 细胞） 对小鼠异基因骨髓移植的影响。方法　将荷瘤鼠照射后,于输注骨髓细胞（ 含 Ｔ细胞） 之前４ 小时或之后７２ 小时,注射供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞,观察荷瘤鼠 Ｃ Ｆ Ｕ Ｓ、 Ｃ Ｆ Ｕ Ｇ Ｍ、生存期、体重、病理组织学和双肺瘤结节等指标。结果　输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ细胞能显著促进荷瘤鼠 Ｃ Ｆ Ｕ Ｓ和 Ｃ Ｆ Ｕ Ｇ Ｍ 增殖。输注骨髓细胞前４ 小时输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞能显著提高荷瘤鼠生存率,减轻移植物抗宿主病（ Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ） 的病理损伤程度,并使肺瘤结节数量减少;而输注骨髓细胞后７２ 小时输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞能显著加重 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 病理损伤程度。结论　①在小鼠异基因骨髓移植的初始阶段,输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞能促进造血重建,预防 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 并同时增强移植物抗肿瘤（ Ｇ Ｖ Ｔ） 效应;输注骨髓细胞之后,输注供鼠的活化 Ｎ Ｋ 细胞则起到加重 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 的不良作用;② Ｇ Ｖ Ｔ和 Ｇ Ｖ Ｈ Ｄ 是能够被分开的。     

小鼠T细胞HSV-tk基因转移及其对GCV敏感性的实验研究

移植物抗宿主病(ＧＶＨＤ)是造血干细胞移植后的严重并发症之一。ＧＶＨＤ的发生与供体Ｔ细胞的数量有关。近年研究表明带有单纯疱疹病毒胸苷激酶(ＨＳＶｔｋ)基因的Ｔ细胞,既有Ｔ细胞的功能,又对抗病毒感染药物———更昔洛韦(ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ,ＧＣＶ)敏感。将带有ｔｋ基因的Ｔ细胞与造血干细胞一起移植,不影响患者造血和免疫重建,当发生ＧＶＨＤ时,给予ＧＣＶ可以诱导此类Ｔ细胞“自杀”,从而减少Ｔ细胞量,控制ＧＶＨＤ的严重程度。我们将ＨＳＶｔｋ基因体外转导小鼠Ｔ淋巴细胞,并测定其对ＧＣＶ的敏感性,为应用基因治疗原理防治Ｇ…     

移植物抗白血病作用

移植物抗白血病（ＧＶＬ）作用对降低造血干细胞移植后的复发率起重要作用。异基因骨髓移植（ａｌｌｏＢＭＴ）比自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）复发率低的主要原因是ＡＢＭＴ缺乏ＧＶＬ作用。外周血干细胞作为造血干细胞来源越来越多地用于临床并逐渐代替骨髓细胞,其原因之一为异基因外周血干细胞能增强ＧＶＬ作用,而不加重急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）［１］。ＧＶＬ最直接的证据为应用供体淋巴细胞输注（ＤＬＩ）治疗慢性髓系白血病（ＣＭＬ）患者移植后的复发,其缓解率达７０％［２］。越来越多的科研机构致力于ＧＶＬ的研究并应用于…     

环孢菌素A诱导同基因或自身移植物抗宿主病研究现状

同基因骨髓移植或自身骨髓移植后用环孢菌素Ａ治疗，可以产生一种自身免疫综合征－同基因移植物抗宿主病或自身ＧＶＨＤ，该综合征在动物及人已初步显示出抗瘤作用。本文介绍该综合征产生需要的条件，发病机理及体内，体外的抗瘤效果，并指出ＡＢＭＴ或ＳＢＭＴ后应用ＣＳＡ诱导ＳＧＶＨＤ或ＡＧＶＨＤ可能是提高ＳＢＭＴ或ＡＢＭＴ疗效的一种新途径。     

造血干细胞移植后移植物抗宿主病患者CD158的表达

杀伤细胞抑制物受体 (Ｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ＫＩＲ)主要表达于ＮＫ和Ｔ细胞表面 ,可与靶细胞ＭＨＣⅠ类分子特异性识别并产生负性信号 ,抑制对靶细胞的细胞毒活性[1 ,2 ] 。已在小鼠和人同种造血干细胞移植 (ＨＳＣＴ)中观察到ＮＫ细胞、Ｔ细胞表达ＫＩＲ与移植物抗宿主病 (ＧＶＨＤ)有关[3 ,4] 。外周血造血干细胞移植 (ＰＢＳＣＴ)和脐血移植 (ＵＢＣＴ)中 ,尽管是供受者间ＨＬＡ全相合 ( Ａ、 Ｂ、 ＤＲ、 ＤＱ) ,ＧＶＨＤ仍是同种ＨＳＣＴ的主要障碍。因此 ,探讨ＨＬＡ Ｃ位点特异性识别分子ＣＤ1…     

清除小鼠特异性活化淋巴细胞预防急性移植物抗宿主病的研究

试图通过消除异基因Ｔ细胞中能够识别宿主主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）的Ｔ细胞克隆细胞，以抑制移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）．异基因供者经宿主来源的细胞特异性致敏后，用ＩＬ－２Ｒ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）联合补体杀伤骨髓移植物中活化Ｔ细胞，能明显抑制供者淋巴细胞在宿主脾脏中的增殖，并使异基因骨髓移植受体小鼠生存时间明显延长。本研究结果证明，清除特异活化的Ｔ细胞可以有效地预防ＧＶＨＤ。     

环孢霉素A诱导红白血病同基因骨髓移植的移植物抗宿主病一例

环孢霉素Ａ诱导红白血病同基因骨髓移植的移植物抗宿主病一例黄宁，迟翠芳，葛林阜，孔凡盛，周兰月同基因骨髓移植（Ｓｙｎ－ＢＭＴ）存在较高的复发率。为诱导Ｓｙｎ－ＢＭＴ的移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ），以产生移植物抗白血病（ＧＶＬ）的效果，我们对１例红白血病患...     

移植物抗白血病

本文从移植物抗白血病（ＧＶＬ）与移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）、ＧＶＬ与Ｔ细胞、ＧＶＬ与ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋Ｔ细胞亚群、ＧＶＬ与ＩＬ－２以及ＧＶＬ与移植后免疫抑制治疗等的关系方面，对ＧＶＬ的作用机制和影响因素进行了综述。     

混合骨髓移植的实验研究

目的：探讨在异基因骨髓移植治疗白血病中既控制移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）又同时保留移植物抗白血病（ＧＶＬ）作用的移植方案。方法：采用近交系小鼠移植模型，在异基因骨髓、脾细胞移植物中混合一定比例的同基因脾细胞，观察移植后受鼠ＧＶＨＤ死亡率、脾结节数、移植后不同时间骨髓造血重建细胞来源以及受鼠脾脏淋巴细胞对供、受鼠双方来源的刺激细胞增殖反应；采用Ｌ６１５小鼠白血病模型观察混合移植对荷瘤小鼠生存时间及死亡原因的影响。结果：混合移植可以有效减轻ＧＶＨＤ，异基因造血免疫细胞在受鼠体内一过性存留并发挥移植物抗宿主反应，使荷瘤小鼠生存时间明显延长。结论：异基因骨髓、脾细胞移植物中混合一定比例的同基因脾细胞使移植受鼠体内既具有主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）不合的免疫活性细胞发挥一过性ＧＶＬ作用，同时减轻了异基因骨髓移植的严重ＧＶＨＤ。     

细胞因子在急性移植物抗宿主病中的作用

急性移植物抗宿主病（ａＧＶＨＤ）是异基因造血干细胞移植的主要发症,严重限制其应用。细胞因子网络在ａＧＶＨＤ的发病中起重要作用,其作用机制在小鼠模型中已经得到清楚的阐述,而类ａＧＶＨＤ的发病机制尚需进一步探讨。动态监测移植后血清细胞因子ｓＩＬ－２４,ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－γ等的表达或检测移植前细胞因子的基因表达可以对ａＧＶＨＤ进行预测,从而有助于采取针一的预防措施。ＧＶＨＤ有移植物抗白血病作用（ＧＶＬ）。ＧＶＨＤ和ＧＶＬ是可分的,细胞因子ＩＬ－２,ＩＬ－１２,ＩＬ－１１,ＫＧＦ和Ｇ－ＣＳＦ有降低ＧＶＨＤ保存ＧＶＬ的作用。     

影响外周血单个核细胞产生TNF-α、IFN-γ及IL-4因素的实验研究

我们根据急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）的发病机制,选取肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）作为早期激活及效应期的标志,γ干扰素（ＩＦＮγ）代表Ｔｈ１细胞因子,白细胞介素４（ＩＬ４）代表Ｔｈ２细胞因子,以酶联免疫分析（ＥＬＩＳＡ）为检测手段,观察照射、植物血凝素（ＰＨＡ）、粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＣＳＦ）、甲基泼尼龙（ＭＰ）等对外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清液中ＴＮＦα、ＩＦＮγ、ＩＬ４生成的影响,为开展防治ＧＶＨＤ的动物实验及临床实验提供依据。材料和方法１　细胞来源　健康成人外周…     

免疫效应细胞在血液系统肿瘤自体造血干细胞移植？…

自体造血干细胞移植（autologors hematopoietic stem cell transplantaion ,ＡＨＳＣ Ｔ）在血液系统肿瘤的治疗中已广泛应用，但是ＡＨＳＣＴ的复发率高于异基因骨髓移植，原因除缺乏移植物抗白血病反应（graft-versus-leukemia effect,ＧＶＬ）外，还与自体移植物中残存的肿瘤细胞有关。本对免疫效应细胞在ＡＨＳＣＴ体外净化中的应用的研究进展进行综述。     

移植物抗白血病效应的研究进展

1　移植物抗白血病 (ＧＶＬ)的概念　ＧＶＬ(ｇｒａｆｔｖｅｒｓｕｓｌｅｕｋｅ ｍｉａ)特指对恶性血液疾病进行异基因干细胞移植 (ａｌｌｏ ＳＣＴ)后所产生的一种重要的免疫介导现象。这种反应能有效清除微小残留病灶 ,从而大大减少肿瘤的复发率 ,使患者得以持续缓解甚至完全治愈。自从开展骨髓移植治疗恶性血液病以来 ,逐渐观察到以下现象 :与自体或同基因骨髓移植相比 ,异基因骨髓移植后白血病复发的危险性明显减少 ,但移植物抗宿主病 (ＧＶＨＤ)发生率相应增高 ;应用Ｔ淋巴细胞剔除或环孢菌素对ＧＶＨＤ进行预防性强烈抑制后 ,白血病的…     

一例慢性移植物抗宿主病患者TCR Vβ细胞分布和克隆性的研究

目的 了解非血缘关系骨髓移植后生移植特抗宿主病（ｃＧＶＨＤ）患者的Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）ＶβＴ细胞的分布和克隆性。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增１例非血缘关系骨髓移植后ｃＧＶＨＤ患者的外周血单个核细胞的ＴＣＲ Ｖβ２４个亚家族的ＣＤＲ３。了解患者ＴＣＲ ＶβＴ细胞的分布情况,ＰＣＲ产物进一步经基因扫描分析确定Ｔ细胞克隆性。结果 患者存在８个ＴＣＲ Ｖβ亚家族Ｔ细胞;其中Ｖβ２、Ｖ     

慢性髓细胞白血病骨髓的体外净化

慢性髓细胞白血病骨髓的体外净化王立生综述裴雪涛吴祖泽审校慢性髓细胞白血病（ＣＭＬ）是一种造血干细胞起源的恶性血液疾病。异基因骨髓移植（ａｌｌｏ－ＢＭＴ）虽可根治ＣＭＬ，但由于供者来源困难及移植后严重移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）的产生等原因使其应用受到一...     

重组人粒细胞集落刺激因子在异基因骨髓移植后的应用

重组人粒细胞集落刺激因子在异基因骨髓移植后的应用黄晓军郭乃榄范韫明张耀臣陈欢张晓明刘开彦陆道培重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）在异基因骨髓移植（ａｌｏ－ＢＭＴ）后的应用是否会加重移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）及其对白血病复发影响的报道较少。我们...     

GVHD的发生机制及其防治措施

移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）是异基因造血干细胞移植后的主要并发症,移植物中的免疫活性细胞启动移植物抗宿主反应,这一现象最初是在给被照射小鼠输注正常鼠脾细胞后认识的。１９６６年,Ｂｉｌｌｉｎｇｈａｍ曾提出发生ＧＶＨＤ的３个基本要素：（１）移植物中应含有免疫活性细胞;（２）受者无免疫能力,对移植物无反应;（３）受者须有供者不表达的组织抗原,即供、受者间存在ＨＬＡ差异。但后来也观察到,即使供、受者间无ＨＬＡ差异,基因完全相同的种系和个体间也存在ＧＶＨＤ。１　ＧＶＨＤ发生机制急性ＧＶＨＤ的发生,首先与预处…     

移植物抗宿主病研究的进展

本文就对移植抗宿主病（ＧＶＨＤ）的研究历史进行了简要的回顾，并综述了ＧＶＨＤ研究中的主要问题，Ｔ细胞亚群的功能，细胞因子网络，移植物抗白血病效应与ＧＶＨＤ关系等方面研究的进展。对ＧＶＨＤ研究中所应用的实验系统地进行了述评。