脐血CD3AK细胞体外抗肿瘤活性的实验研究

目的　探讨抗ＣＤ３ 单克隆抗体（ＡｎｔｉＣＤ３ＭｃＡｂ）＋ 重组人白细胞介素２（ｒＩＬ２） 激活的脐血杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ） 细胞对白血病细胞株Ｋ５６２ 、ＨＬ６０ 的杀伤作用。方法　采用间接玫瑰花结法测定脐血单个核细胞表面分化抗原,ＥＬＩＳＡ双抗夹心法测定肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、ＩＬ６ 和ＩＬ８ ,用β液闪仪测定３Ｈ胸腺嘧啶核苷标记的靶细胞杀伤活性。结果　①经ＡｎｔｉＣＤ３ＭｃＡｂ＋ ｒＩＬ２ 激活的脐血单个核细胞免疫表型发生明显变化;②细胞因子水平较未激活组明显增高;③脐血ＣＤ３ＡＫ 细胞对Ｋ５６２、ＨＬ６０细胞均有杀伤作用,最佳杀伤条件：脐血单个核细胞浓度为１ ×１０６／ｍｌ,ＡｎｔｉＣＤ３ＭｃＡｂ １ μｇ／ｍｌ,ｒＩＬ２ １０００ Ｕ／ｍｌ,作用时间７２ 小时,效靶比１００∶１。结论　脐血单个核细胞能被ＡｎｔｉＣＤ３ ＭｃＡｂ＋ ｒＩＬ２ 激活为杀伤细胞,激活后有较强的细胞毒作用,且对白血病细胞株有明显的杀伤作用,该研究为应用活化脐血进行肿瘤的过继免疫治疗提供理论依据。     

急性白血病患者自体骨髓移植后的IL-2治疗

急性白血病患者自体骨髓移植后的ＩＬ２治疗韩明哲李成文冯四洲邱录贵韩俊领刘汉芝姜蓉严文伟白细胞介素２（ＩＬ２）是一种能扩增细胞毒性Ｔ淋巴细胞、增强自然杀伤（ＮＫ）细胞活性和激活ＬＡＫ细胞活性的细胞因子［１］，自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）后ＩＬ２治疗能...     

CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤活性研究

肿瘤的生物治疗（Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ）在当今被认为是除手术、放疗、化疗以外的第四种有效的肿瘤治疗手段。继八十年代后期的ＬＡＫ细胞和ＴＩＬ细胞后，抗ＣＤ３单克隆抗体（ＣＤ３ＭｃＡｂ）激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂＡｃｔｉｖａｔｅｄＫｉｌｅｒＣｅｌｓ，...     

白细胞介素2基因和白细胞介素3基因共转染白血病瘤苗的抗白…

目的：研究白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）基因共转染的白血病细胞瘤苗对白血病的小鼠的治疗效果。方法：用ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）和（或）ＩＬ－３重组腺病毒转染红白轿病细胞株ＦＢＬ－３，＾６０Ｃｏ射后制备成瘤苗对实验性白血病小鼠进行治疗，观察肿瘤生长，小鼠生存期及治疗后小鼠腹腔巨噬细胞，ＮＫ细胞，诱导杀伤性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤活性，并与低剂量环磷酰胺合用，观察其抗肿瘤     

维甲酸诱导HL-60细胞分化中对细胞周期素依赖性激酶活性的影响

目的探讨维甲酸（ＲＡ）对ＨＬ６０细胞的增殖抑制和诱导分化作用与细胞周期素依赖性激酶（ＣＤＫ）活性变化的相关性。方法用５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）或芳维甲（ＡＥ）处理ＨＬ６０细胞１～４天,在观察细胞生长、四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原实验以及细胞周期分析的基础上,用组蛋白Ｈ１激酶活性分析技术检测ＣＤＫ２的活性,免疫沉淀法分析结合于ＣＤＫ２和ＣＤＫ４上的相应的细胞周期素（ｃｙｃｌｉｎ）Ｅ和Ｄ的量。结果ＨＬ６０细胞在ＡＴＲＡ或ＡＥ作用下,细胞增殖减慢,对ＮＢＴ的还原能力明显增强,９０％左右的细胞被阻滞在Ｇ１／Ｇ０期;在Ｇ１到Ｓ期转换过程中起关键作用的ｃｙｃｌｉｎＥ／ＣＤＫ２的活性显著下降,结合于ＣＤＫ４上的ｃｙｃｌｉｎＤ１的量减少。结论ＲＡ抑制ＨＬ６０细胞增殖并诱导其分化可能与ＣＤＫ２和ＣＤＫ４的活性下降有密切关系     

白细胞介素2基因和白细胞介素3基因共转染白血病瘤苗的抗白血病作用的实验研究

目的：研究白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）基因共转染的白血病细胞瘤苗对白血病小鼠的治疗效果。方法：用ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）和（或）ＩＬ－３重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－３）转染红白血病细胞株ＦＢＬ－３，６０Ｃｏ照射后制备成瘤苗对实验性白血病小鼠进行治疗，观察肿瘤生长，小鼠生存期及治疗后小鼠腹腔巨噬细胞、ＮＫ细胞、诱导杀伤性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤活性，并与低剂量环磷酰胺（ＣＴＸ）合用，观察其抗肿瘤作用。结果：用ＩＬ－２或ＩＬ－３基因转染瘤苗治疗的白血病小鼠肿瘤生长明显减缓，生存期显著延长（Ｐ＜０．０５），用联合转染ＩＬ－２和ＩＬ－３基因的瘤苗治疗较单独转染ＩＬ－２或ＩＬ－３基因的瘤苗治疗效果更佳，与低剂量ＣＴＸ合用后抗肿瘤效果最佳。治疗后小鼠腹腔巨噬细胞、ＮＫ细胞、ＣＴＬ细胞杀伤活性显著增强。结论：ＩＬ－２、ＩＬ－３基因转染的瘤苗能够有效地通过诱导机体抗肿瘤免疫功能而发挥抗肿瘤作用，与低剂量ＣＴＸ合用后，抗肿瘤效果更佳。     

氦氖激光照射健康人单核细胞对诱生LAK细胞活性的影响

氦氖激光照射健康人单核细胞对诱生ＬＡＫ细胞活性的影响吴并生郭春霞作者单位：０３０００１太原，山西医科大学第二附属医院（吴并生）；山西省肿瘤研究所（郭春霞）淋巴因子激活的杀伤细胞（Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒｃｅｌｓ，ＬＡＫ细胞）能...     

白细胞介素8及其受体在急性白血病的表达及其意义

目的探讨白细胞介素８（ＩＬ８）及其Ａ、Ｂ受体（ＩＬ８ＲＡ、ＩＬ８ＲＢ）的表达与急性白血病（ＡＬ）的分型、疗效及并发症的关系。方法用酶联免疫夹心法检测７７例初诊ＡＬ患者外周血ＩＬ８含量,用间接免疫荧光及流式细胞术检测骨髓单个核细胞（ＭＮＣｓ）表达ＩＬ８Ｒ,并检测了１５例ＡＬ完全缓解（ＣＲ）期脑脊液（ＣＳＦ）中ＩＬ８水平。结果ＡＬ患者外周血ＩＬ８水平高于正常人,其中急性髓系白血病（ＡＭＬ）高于急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）,Ｍ４、Ｍ５高于Ｍ１～Ｍ３,ＢＡＬＬ高于ＴＡＬＬ（Ｐ＜０．０５）。ＡＬＬ中ＩＬ８＞１００ｎｇ／Ｌ组比≤１００ｎｇ／Ｌ组疗效差（Ｐ＜０．０５）;约３６．３６％的ＡＬ患者ＩＬ８Ｒ（＋）,ＩＬ８Ｒ（＋）者的外周血白细胞计数及幼稚细胞比例显著高于ＩＬ８Ｒ（－）者（Ｐ＜０．０５）;ＣＲ期患者ＣＳＦ中ＩＬ８水平与治疗前比较,差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,合并中枢神经系统白血病（ＣＮＳＬ）时明显升高。结论外周血和ＣＳＦ中ＩＬ８水平的检测及检测骨髓ＭＮＣｓ膜ＩＬ８Ｒ的表达有助于ＡＬ各亚型的鉴别及预后判断;ＣＮＳＬ发生时ＣＳＦ中ＩＬ８增高。     

自体LAK细胞对白血病细胞清除作用的实验研究

采用￣（５１）Ｃｒ４小时释放试验，细胞培养及组化分析技术，研究了２６例初诊急性髓细胞白血病患者（ＡＰｓ）和其中的１２例缓解期患者（ＲＰｓ）的ＬＡＫ细胞对自体白血病细胞（Ａｕｔｏ－ＬＢ）的清除作用。ＡＰｓ的外周血或骨髓通过双层Ｆｉｃｏｌｌ－Ｈｙｐａｑｕｅ分离所得富含淋巴细胞层中含２０％～５０％的Ａｕｔｏ－ＬＢ，在ｒＩＬ－２１０００Ｕ／ｍｌ的培养基中培养１～２周Ａｕｔｏ－ＬＢ消失。而￣（５１）Ｃｒ４小时释放试验的结果是ＡＰｓ－ＬＡＫ和ＲＰｓ－ＬＡＫ细胞胞对Ａｕｔｏ－ＬＢ的杀伤活性分别为１２．９％±１２．３％和２４．１％±１２．０％，均较其对Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性（３６．０％±３２．０％和６６．２％±１８．１％）显著减低（Ｐ＜０．０１），提示：Ａｕｔｏ－ＬＢ细胞表面能被ＬＡＫ细胞识别的决定簇较Ｒａｊｉ细胞系低。但体外培养过程中Ａｕｔｏ－ＬＢ能被清除。提示：清除机制除了有ＬＡＫ细胞的直接杀伤外，尚有其它机制参与，体外培养过程中Ａｕｔｏ－ＬＢ表面决定簇表达增加。     

肿瘤坏死因子对急性白血病LAK细胞抗肿瘤活性的增强作用

采用基因重组肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）与白细胞介素２（ＩＬ－２）联合诱导急性白血病患者外周血单个核细胞，结果表明：ＴＮＦ（５００Ｕ／ｍｌ）单独不能诱导出ＬＡＫ细胞活性，也不能进一步提高最适剂量ＩＬ－２（１０００Ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ细胞活性，但能显著增强亚适剂量ＩＬ－２（１０～１００Ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ细胞活性。抗ＴＮＦ单抗和抗ＩＬ－２受体β链（Ｐ＿（７５））单抗能显著抑制ＴＮＦ／ＩＬ－２对ＬＡＫ细胞活性的协同诱导作用。ＴＮＦ与ＬＡＫ细胞联合可显著增强对白血病细胞的杀伤活性。     

LAK细胞和活化NK细胞对小鼠骨髓造血功能影响的实验研究

目的 探讨淋巴细胞因子激活的杀伤细胞／ 活化自然杀伤细胞（ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞）与造血的关系及其对同基因骨髓移植小鼠造血重建的影响。方法 ①将同基因ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞与骨髓细胞一起置于体外半固体琼脂培养体系中,观察其对ＣＦＵＧＭ 形成的影响。②在小鼠同基因骨髓移植中, 联合注射同基因ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞, 观察其对移植后小鼠造血重建的影响。结果①当骨髓细胞置于有外源性集落刺激因子（ＣＳＦ） 的适宜培养体系中,同基因ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞抑制ＣＦＵＧＭ 形成;而当骨髓细胞置于无ＣＳＦ 不良培养体系中,同基因ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞促进ＣＦＵＧＭ 形成。②在小鼠同基因骨髓移植中,联合注射同基因ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞,能显著促进ＣＦＵＳ 和ＣＦＵＧＭ 增殖和显著升高白细胞和血小板数量。结论 ①同基因ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞对ＣＦＵＧＭ 形成有双向调节作用。②在小鼠同基因骨髓移植中,联合注射同基因ＬＡＫ 细胞／ 活化ＮＫ 细胞,能促进移植后小鼠造血重建。     

血小板第4因子及四肽AcSDKP的造血保护作用研究

目的了解血小板第４因子（ＰＦ４）和四肽Ｎ乙酰丝天赖脯（ＡｃＳＤＫＰ）对５氟尿嘧啶（５ＦＵ）处理后小鼠体内造血的作用。方法实验鼠用ＰＦ４（４０μｇ／ｋｇ）或ＡｃＳＤＫＰ（４μｇ／ｋｇ）注射２次,间隔６小时,第２次注射后２０小时再注射５ＦＵ（１５０ｍｇ／ｋｇ）。第６,８和１３天时,检查高增殖潜能的集落形成细胞（ＨＰＰＣＦＣ）、红系爆式集落形成单位（ＢＦＵＥ）、粒巨噬系集落形成单位（ＣＦＵＧＭ）、巨核系集落形成单位（ＣＦＵＭＫ）及巨核细胞（ＭＫ）。结果ＰＦ４或ＡｃＳＤＫＰ可促使６～８天的ＨＰＰＣＦＣ以及８天的ＢＦＵＥ和ＣＦＵＧＭ明显增加;ＰＦ４还能促进８天的ＣＦＵＭＫ和ＭＫ增加,但ＡｃＳＤＫＰ则无此作用。结论ＰＦ４和ＡｃＳＤＫＰ虽然对巨核祖细胞的作用不同,但它们均能加速体内ＨＰＰＣＦＣ、ＣＦＵＧＭ和ＢＦＵＥ的恢复,这两种分子有可能具有保护造血细胞抵抗化疗药物杀伤的作用。     

As2O3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响

目的　进一步阐明Ａｓ２Ｏ３ 诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为Ａｓ２Ｏ３ 在临床上的应用提供理论依据。方法　采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、生物化学及免疫荧光等方法研究了Ａｓ２Ｏ３对ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果　１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但０ ．１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;Ａｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸酶（ＰＴＰ） 活性未见明显影响;Ａｓ２Ｏ３ 下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达,但对ＳＴＡＴ１ 和ＳＴＡＴ２ 蛋白的表达以及ＳＴＡＴ１ 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;Ａｓ２Ｏ３ 亦不影响凋亡相关蛋白Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ／Ｓ、Ｂａｘ、ＩＣＨ１Ｌ、ｐ５３、ＰＡＲＰ的表达,Ａｓ２Ｏ３ 亦使Ｋ５６２ 细胞的ＰＭＬ蛋白降解。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化和（ 或）下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达而干扰ＢＣＲ／ＡＢＬ致癌信号的传导,引起Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长。     

不同培养时间的CD_3AK与LAK细胞对8株瘤细胞系的细胞毒活性分析比较

不同培养时间的ＣＤ_３ＡＫ与ＬＡＫ细胞对８株瘤细胞系的细胞毒活性分析比较刘军权，陈复兴，韩惠敏（江苏省徐州市９７医院，２２１００４）经抗ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＣＬＬＣＤ３ＭｃＡｂＡｃｔｉｖａｔｅｄＫｉｌｌｅｒｃｅｌｌ）即ＣＤ３ＡＫ细胞已经...     

不同rhIL—2浓度与CD3McAb诱导LAK细胞的协同作用

本研究表明，单纯使用不同浓度的人重组白细胞介－２（ｒｈＩＬ－２）培养诱导ＬＡＫ细胞，ＬＡＫ细胞的增殖与ｒｈＩＬ－２呈效应剂量关系，加入ＣＤ３－ＭｃＡｂ与不同浓度ｒｈＩＬ－２联合培养诱导ＬＡＫ细胞，效应剂量关系无明显差异。５０ｕ／ｍｌ ｒｈＩＬ２与ＣＤ３ＭｃＡｂ联合诱导ＬＡＫ细胞，其刺激指数及杀瘤活性非常显著高于单纯ｒｈＩＬ－２５００ｕ／ｍｌ诱导的ＬＡＫ细胞。ｒｈＩＬ－２与ＣＤ３ＭｃＡｂ联合诱导ＬＡ     

白细胞介素12单独或联合白细胞介素2对人脐血单个核细胞抗肿？…

目的 探讨白细胞介素１２（ＩＬ－１２）单独或联合白细胞介素２（ＩＬ－２）对人脐血单个核细胞（ＣＲＭＣ）抗肿瘤作用的影响。方法 采用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法测定经ＩＬ－１２和（或）ＩＬ－２刺激的ＣＢＭＣ和人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的抗肿瘤活性,及在电镜下观察激活的ＣＢＭＣ所杀伤的Ｋ５６２细胞的形态特征。结果 ①ＩＵ／ｍｌＩＬ－１２激活的ＧＢＭＣ即产生较强的杀伤活性,对Ｋ５６２及Ｒａｊｉ细胞的杀伤率分     

问题解答

问题解答问：何谓ＬＡＫ细胞？其活性如何测定？答：ＬＡＫ细胞是１９８２年命名的，全称为：淋巴因子活化的杀伤细胞（ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓ）。其形态属于大颗粒性淋巴细胞。密度梯度离心时，密度较ＮＫ细胞高，它无Ｔ细胞表面...     

白细胞介素6基因转移的白血病细胞体内诱导小鼠免疫功能的…

作观察了人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转移的、能高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病细胞对机体抗肿瘤免疫功能的影响。结果发现，高分泌ＩＬ－６的红白血病细胞接种到小鼠体内后，能显提高小鼠脾脏的细胞毒性Ｔ淋巴细胞、ＮＫ活性及ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ活性，小鼠脾细胞诱生的ＩＬ－２、肿瘤坏死因子和粒－巨噬细胞系集落刺激因子水平亦增高，腹腔巨噬细胞杀伤活性明显增强。结果表明，高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病     

应用生物疗法治疗骨转移癌一例的护理

应用生物疗法治疗骨转移癌一例的护理马俊葵，杜艾玲，霍秀英自１９８６年美国国立癌中心首先报道以ＬＡＫ（Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ－ａｃｔｉｖａｔｅｄＫｉｌｌｅｒＣｅｌｌｓ淋巴因子激活杀伤细胞）及ＩＬ－２（白细胞介素ＩＩ）进行过继性免疫治疗肿瘤以来，通过实验室...     

粘附LAK细胞的体外抗肿瘤活性

粘附ＬＡＫ细胞的体外抗肿瘤活性王志华史桂兰李殿俊田长富最近，Ｖｕｊａｎｏｖｉｃ等［１］根据对尼龙毛粘附的特点分离出一种新的淋巴细胞亚群，并命名为粘附性淋巴因子激活的杀伤细胞（Ａ－ＬＡＫ）。我们根据报道的方法进行了Ａ－ＬＡＫ细胞分离、扩增及抗肿瘤活性的...