转铁蛋白受体mRNA在MEL细胞中表达的调节

转铁蛋白受体(TfR)的主要功能是调节细胞的铁摄取量。它的表达除受细胞内铁含量影响外,在红系细胞还与血红素的合成和细胞的增殖状态有关,但在非红系细胞,则仅与细胞的增殖状态相关。本实验通过对小鼠红白血病(MEL)细胞在二甲基亚砜(DMSO)诱导分化前后、不同的铁状态和不同的血红素合成条件下,采用Northern印迹方法,观察TfR mRNA含量的变化。结果为:①在未诱导的MEL细胞,随着细胞的增殖,TfR mRNA含量增加;诱导的MEL细胞,虽然随着细胞分化成熟而丧失增殖能力,但当存在血红素合成时,TfR mRNA含量也增高,且增高幅度较非诱导组高。②在未诱导的MEL细胞,降低细胞内铁含量(培养液中加入去铁胺式抗TfR单克隆抗体),可刺激TfR mRNA表达;增加细胞内铁含量(培养液中加入转铁蛋白),则抑制TfR mRNA的表达;在诱导的MEL细胞,采用相同条件的铁状态时,细胞内TfR mRNA水平发生类似的改变,但变化的程度较小。③在未诱导的MEL细胞,加入血红素合成抑制剂(培养液中加入异烟肼),不改变TfR mRNA的表达;在诱导的MEL细胞,血红素合成抑制剂既抑制红系细胞的分化,也抑制TfR mRNA的表达。④当培养液中加入EPO,则促进诱导的MEL细胞内TfR mRNA的表达。上述结果提示,在红系细胞,TfR mRNA的表达除受细胞内铁调节外,也受细胞内血红素合成的     

体外观察MEL细胞系中铁螯合酶mRNA表达的调节

铁螫合酶是参与血红素生物合成过程中的最后一步的酶,催化将铁原子引入卟啉原IX内的反应。它存在于所有的细胞,但在红系细胞内含量尤其丰富。目前已经清楚,铁螫合酶的mRNA有两种形式:2.9kb和2.2kb,其中2.9kb的mRNA主要存在于非红系细胞内,2.2kb的mRNA则主要存在于红系细胞内。采用1.5kbcDNA作为探针,观察小鼠红白血病(murine erythroleukemia,MEL)细胞在二甲基亚枫(DMSO)诱导分化前、后不同的铁状态和不同的血红素合成条件下铁螫合酶mRNA表达的变化。观察结果:①在未诱导的MEL细胞,虽然细胞增生旺盛,但铁螫合酶mRNA表达无变化;②在诱导的MEL细胞,铁螯合酶mRNA表达显著增加;③在诱导和未诱导的MEL细胞,铁对铁螯合酶mRNA表达的影响均较弱;④在诱导的MEL细胞中血红素合成受抑制,铁螯合酶mRNA表达降低。     

急性白血病患儿血清转铁蛋白受体与铁参数变化的研究

血清转铁蛋白受体 (ｓＴｆＲ)是细胞转铁蛋白受体 (ＴｆＲ)的可溶性片段 ,一定程度上可反映细胞ＴｆＲ的数量。已知ＴｆＲ在红系细胞、高度增殖细胞 (包括肿瘤细胞 )和低分化细胞表达较高 ,我们结合铁指标观察了白血病患者ｓＴｆＲ的变化水平。对象和方法1　对象　 2 0 0 0年 9月～ 2 0 0 1年 7月我院住院急性白血病患儿 4 8例 ,其中男 2 8例 ,女 2 0例 ,平均年龄 7.2岁。急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 37例 ,其中Ｌ1 型 30例 ,Ｌ2 型 7例。初治者2 4例 ,其中入院治疗 4周内骨髓缓解者 14例 ,10例进行了动态检测至化疗第 8周末。已完全缓解 6…     

急性白血病患儿外周血白血病细胞TfR表达与细胞增殖力和铁代谢的关系

目的探讨急性白血病患儿外周血白血病细胞转铁蛋白受体表达与细胞增殖力和铁代谢的关系。方法采用放射性配体结合分析法测定细胞转铁蛋白受体（ＴｆＲ）位点数及解离常数Ｋｄ值。结果和结论急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）ＴｆＲ位点数为（７．８２６±６．０５４）×１０４／细胞,Ｋｄ为（６４６８±４．７７７）ｎｍｏｌ／Ｌ;急性髓系白血病（ＡＭＬ）ＴｆＲ为（２０．４０６±１７．８７６）×１０４／细胞,Ｋｄ为（８．６８３±４８９０）ｎｍｏｌ／Ｌ,两组间Ｋｄ值差异无显著性。完全缓解组ＴｆＲ位点数明显低于复发、死亡组。两组白血病细胞和经植物血凝素刺激的外周血单个核细胞ＴｆＲ位点均与细胞３ＨＴｄＲ掺入值呈正相关,说明ＴｆＲ表达与细胞增殖力有关。ＡＬＬ和ＡＭＬ组血清铁蛋白（ＳＦ）、细胞内铁蛋白（ＣＦ）均较对照组高（Ｐ＜０．０５）,Ｔｆ、铁结合力较对照组低,血清铁水平变化不大。ＴｆＲ位点与ＳＦ和ＣＦ均呈正相关,与Ｔｆ呈负相关。     

甲状腺激素T3影响K562细胞转铁蛋白受体和铁蛋白表达的分子机制研究

目的 探讨甲状腺激素T3对白血病细胞K562转铁蛋白受体(TfR)和铁蛋白(Fn)表达的调控作用及其可能的机制。方法 采用流式细胞术和放射免疫法分别检测TfR和Fn的表达水平，用RNA/蛋白带移动分析法测定铁调节蛋白(IRP)与铁反应元件(IRE)的结合活性。应用RT—PCR方法半定量分析TfR和Fn的mRNA水平。结果 T3对K562细胞TfR的表达无明显作用，而以不同浓度的T3处理细胞后使Fn的表达增加，其中当T3为100nmol/L和200nmol/L时，与空白对照组相比，差异有显性(P＜0．05)。T3能减少IRP/IRE的结合活性，且以T3为50nmol/L时减少最为明显。不同浓度的T3在不同的作用时间内均能提高H—FnmRNA水平，而对TfRmRNA水平无显影响。结论 T3可增加细胞Fn的表达，而对TfR的表达无明显调控作用，其机制除包含转录后的调节外，可能还具有转录水平的调控作用。     

急性白血病患者糖皮质激素受体及其mRNA的研究

为了从糖皮质激素受体（ＧＲ）及转录水平了解ＧＲ的质量改变与化疗疗效的关系，并为进一步研究ＧＲ提供新的线索，采用放射配体结合分析法并以人ＧＲｃＤＮＡ为探针的分子杂交技术对４２例急性白血病患者白细胞ＧＲ及ＧＲｍＲＮＡ变化进行了研究。结果发现：①急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）ＧＲ及ＧＲｍＲＮＡ水平与化疗效果呈正相关；②初发ＡＬＬ化疗前ＧＲ及ＧＲｍＲＮＡ水平高于化疗后。提示外源性糖皮质激素对ＧＲ及ＧＲｍＲＮＡ有下调节作用     

阿魏酸钠对HepG2细胞低密度脂蛋白受体mRNA表达的影响

目的探讨阿魏酸钠(Sodium ferulate,SF)对HepG2细胞低密度脂蛋白受体(low density lipoproteinreceptor,LDLR)mRNA表达的影响。方法培养HepG2细胞,不同浓度阿魏酸钠干预后,通过RT-PCR技术,半定量检测LDLR mRNA的表达。结果阿魏酸钠100μg/ml可上调HepG2细胞LDLR mRNA表达26%,200μg/ml可上调46%。结论阿魏酸钠具有上调LDLR mRNA表达的作用,且呈量效依赖关系。     

转铁蛋白受体指数对儿童贮存铁减少的诊断价值

目的探讨转铁蛋白受体指数[血清转铁蛋白受体（sTfR）／Log血清铁蛋白（SF）]对儿童贫血早期贮存铁减少（IDS）诊断的有效性。方法检测568例武汉地区来我院的就诊儿童和96名健康儿童的锌原卟啉（ZPP）、血红蛋白（Hb）、血清铁蛋白（sF）、血清转铁蛋白受体（sTfR）水平。依评价标准,分为铁正常、IDS、红细胞生成缺铁（IDE）与缺铁性贫血（IDA）4组。统计IDS儿童数量,并计算其sTfR／LogSF。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析sTfR、sTfR／LogSF诊断儿童IPS的效率。结果筛查出的102例IDS儿童与健康儿童相比,血清sTfR和sTfR／LogSF均显著增加（P〈0．05）。但对贫血早期儿童IDS的诊断而言。sTfR／LogSF的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值均高于sTfR。经ROC曲线分析,sTfR诊断IDS的效率为0．79,而sTfR／LogSF诊断IDS的效率达0．93。结论sTfR／LogSF能有效反映儿童早期贮存铁的情况,可作为筛查儿童IDS的可靠指标。     

血清促红细胞生成素水平和血清转铁蛋白受体水平联合测定的临床意义

人血清促红细胞生成素浓度能反映体内促红细胞生成素的生成能力,并受病理情况下体内产生的细胞因子和红系造血前体总量的影响,而血清转铁蛋白受体水平能反映骨髓红系造血活性和机体铁代谢状况。联合测定sEPO和sTfR水平可反映多种病理情况下,体内红系造血的病理生理机制,指导临床治疗并监测外源性EPO的滥用。     

两种不同消化方法对表皮细胞表面抗原α6整合素和转铁蛋白受体表达的干预

目的：采用单纯胰酶和中性蛋白酶联合胰酶两种不同的消化方式，观察表皮细胞表面抗原α6整合素和转铁蛋白受体CD71表达的变化，为荧光激活细胞分选术分选表皮干细胞选择合适的消化方法。 方法：选取中山大学附属第一医院外科门诊包皮环切手术患者的皮肤标本10份，患者均知情同意，年龄14～22岁。每份标本均分为2份，分别用胰酶、中性蛋白酶联合胰酶进行消化，共20份，分为胰酶组、中性蛋白酶联合胰酶组，10份／组。胰酶组将皮条放入质量浓度为2．5g／L的胰酶中，4℃消化过夜。次日撕除表皮角质层，以弯镊轻刮皮肤上皮面，获得表皮基底层细胞；电性蛋白酶联合胰酶组将皮条放入质量浓度为2．5g／L的中性蛋白酶中,4℃消化过夜。次日轻撕下皮肤表皮层，将其剪成1mm&;#215;1mm大小的碎块，以质量浓度为2．5g／L的胰酶消化5min，获得表皮基底层细胞。分别取两组细胞悬液300μL，加入碘化丙啶标记死亡细胞，流式细胞仪检测死亡细胞百分率，计算细胞活力。以荧光标记的毗整合素和CD71抗体标记细胞表面抗原，通过流式细胞术检测抗原表达。剩余细胞以表皮细胞培养液重悬，移入预先铺有100mg／L Ⅳ型胶原的培养瓶中，接种密度为5&;#215;10^4／cm^2，3d换液1次，观察两组细胞的生长情况。 结果：实验纳入包皮环切手术患者的皮肤标本10份，每份标本分别用胰酶、中性蛋白酶联合胰酶进行消化，共20份，全部进入结果分析。①不同酶消化后两组细胞活力的比较：中性蛋白酶联合胰酶组细胞活力明显高于胰酶组[（86&;#177;1．81）％，（82&;#177;1．48）％，P〈0．01]。②不同酶消化后两组细胞抗原的表达：胰酶组时α6^bimCD71^bim细胞占（8．00&;#177;1．69）％，α6^bimCD71^bim细胞占（36．00&;#177;18．03）％，α6^bim细胞占（40．00&;#177;10．08）％；中性蛋白酶联合胰酶组3种细胞所占比例依次为（30．00&;#177;8．59），（8．00&;#177;1．63），（38．00&;#177;8．72）％，两组各抗原的表达基本相似（P〉0．05）。③不同酶消化后两组细胞形态学观察结果：胰酶组细胞贴壁及伸展较中性蛋白酶联合胰酶组稍迟0．5-1．0h，此后培养过程中生长增殖情况无明显差异，一般7d左右接近融合，传代。培养第7天，表皮细胞体积小，核浆比例大，可见夹杂有成纤维细胞。中性蛋白酶联合胰酶组细胞30min内基本贴壁，并有少量细胞伸展，60min后大部分细胞伸出短小伪足，胞质展开，折光率减低。培养第7天，表皮细胞体积小，核浆比例大，未见夹杂有成纤维细胞。 结论：从对表面抗原表达影响的角度来看，单纯胰酶消化与中性蛋白酶联合胰酶消化后α6^bimCD71^bim，α6^bimCD71^bim，α6^bim这3种表皮细胞的检出率基本相似，两种消化方法可根据习惯选用。但中性蛋白酶联合胰酶消化对细胞活力影响小，消化时机容易掌握，对细胞损伤相对小，适用于荧光激活细胞分选术分选表皮干细胞。     

WT1反义寡核苷酸对白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解ＷＴ１反义寡核苷酸对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法 应用ＷＴ１基因的反义寡核苷酸（ＷＴ１ＡＳＯ）处理Ｋ５６２、Ｕ９３７、ＨＬ－６０细胞系,白血病患以及正常人骨髓细胞,然后以台盼蓝拒染法、细胞集落法及流式细胞仪检测法确定白血病细胞的增殖和凋亡。结果 ＷＴ１ ＡＳＯ能够抑制ＷＴ１表达阳性的Ｋ５６２细胞生长,对ＷＴ１表达阴性的Ｕ９３７细胞则无抑制作用;ＷＴ１ ＡＳＯ对８例急性髓系白血病患     

CXCR4在急性白血病细胞中的表达及其对髓外浸润的意义

目的　研究急性白血病细胞中的细胞趋化因子受体 4 (CXCR4 )表达及其对髓外浸润的临床意义。方法　应用流式细胞术测定 73例初治急性白血病患者骨髓白血病细胞及白血病细胞株CXCR4的表达 ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测正常人骨髓基质细胞和脑膜组织基质细胞衍生因子 (SDF 1α)的表达 ,进行了白血病细胞株体外黏附、迁移、浸润实验。结果　 32例急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者中 2 1例为CXCR4阳性表达 (6 5 .6 % )。 4 1例急性髓系白血病 (AML)中 7例为阳性表达 (17.1% )。K5 6 2、U937、NB4细胞株荧光阳性细胞分别占 0 .2 %、4 1.0 %、5 2 .0 %。ALL中 ,CX CR4阳性组发生髓外浸润率明显高于阴性组 (分别为 6 1.9%和 18.2 % ,P <0 .0 5 ) ;AML中 ,CXCR4阳性组外周血幼稚细胞计数低于阴性组 (P <0 .0 5 )。体外实验中SDF 1α能够诱导高表达CXCR4的白血病细胞黏附、促进迁移、增强浸润能力。结论　急性白血病细胞过量表达CXCR4 ,可能是其浸润髓外组织的分子机制之一     

RNA干扰技术抑制急性白血病细胞THP-1中SALL4基因表达的研究

目的 抑制SALL4基因在急性白血病细胞THP-1中的表达,探讨其在白血病发病机制中的作用.方法 将表达SALL4干扰序列的质粒载体转染至急性白血病细胞THP-1中,分为4组:(1)空白对照组:不加处理;(2)转染对照组:加入空pRS质粒载体;(3)转染一组:加入SALL4-shRNA-pRS-1干扰质粒的转染复合体;(4)转染二组:加入SALL4-shRNA-pRS-2干扰质粒的转染复合体.采用实时荧光定量PCR和WB技术观察THP-1细胞中SALL4基因mRNA及蛋白表达的变化,建立抑制SALL4表达的体系.实时荧光定量PCR检测SALL4受抑后Wnt/β-catenin信号通路中C-myc、Cyclin D1、β-catenin基因的表达改变,采用流式细胞术分析THP-1细胞凋亡情况.结果 实时荧光定量PCR结果 显示,转染一组、转染二组、转染对照组、空白对照组SALL4基因的表达水平分别为(36.0±4.3)%、(32.0±2.4)%、(102.0±6.5)%、(100.0±2.6)%,差异有统计学意义(F=226.3,P<0.05);转染一组、转染二组的SALL4基因表达水平显著低于空白对照组,差异有统计学意义(t值分别为19.7、19.1,P<0.05);转染对照组SALL4基因表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义(t=1.1,P＞0.05).WB检测结果 显示,转染一组、转染二组SALL4蛋白表达与空白对照组和转染对照组相比明显下降.以上基因和蛋白表达水平均提示SALL4干扰效率良好.SALL4基因抑制表达后,转染一组C-myc基因、β-catenin基因、Cyclin D1基因的表达分别为(44.0±6.2)%、(44.0±5.1)%和(107.0±13.6)%,转染二组为(22.0±4.5)%、(25.0±3.5)%和(48.0±7.6)%,转染对照组为(42.0±3.5)%、(59.0±3.7)%及(79.0±5.6)%.转染一组、转染二组C-myc基因表达水平显著低于空白对照组的(103.0±7.5)%,差异有统计学意义(t值分别为10.1、9.5,P均<0.05);转染一组、转染二组β-catenin基因的表达显著低于空白对照组的(100.0±4.1)%,差异有统计学意义(t值分别为23.3、22.9,P均<0.05);转染一组、转染二组Cyclin D1基因的表达显著低于空白对照组的(102.0±6.0)%,差异有统计学意义(t值分别为17.4、12.4,P均<0.05).SALL4基因被抑制后,转染一组、转染二组、转染对照组及空白对照组的细胞凋亡率分别为(57.2±9.1)%、(34.4±8.6)%、(14.4±3.6)%及(14.8±4.8)%,差异有统计学意义(F=42.5,P<0.05).转染一组、转染二组细胞凋亡率显著高于空白对照组(t值分别为9.7、4.5,P均<0.05).结论 抑制急性白血病细胞THP-1中SALL4基因表达后,Wnt/β-catenin信号通路的C-myc、Cyclin D1及β-catenin基因的表达随之下调,并促进了细胞凋亡.     

淀粉样前体蛋白基因在急性髓系白血病的表达及其生物学行为研究

目的 探讨淀粉样前体蛋白(APP)基因在急性髓系白血病(AML)细胞的表达及其生物学行为.方法 应用实时定量PCR方法(2-ΔCt)检测85例初诊AML和20例非恶性血液病患者(对照)骨髓细胞APP mRNA的表达,并研究其表达水平对AML患者的临床特征和治疗反应的影响;应用实时定量PCR和Western blot方法检测APP基因和蛋白在AML细胞株的表达,并与AML原代细胞亚型的结果相比较;化学合成针对APP基因的小干扰RNA(siRNA),利用脂质体转染HL-60细胞,下调APP基因表达.RNA干扰24、48、72 h后,采用MTT法及锥虫蓝拒染细胞计数检测细胞增殖;瑞特-姬姆萨染色观察细胞形态;PI染色流式细胞术分析细胞周期;Annexin V/PI双染色流式细胞术及Hoechst染色检测细胞凋亡;RNA干扰48 h,Western blot法检测凋亡相关蛋白NF-κB、bcl-2和caspase-3的表达;MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性.结果 APP mRNA表达在AML亚型间差异有统计学意义(P=0.019),伴t(8;21)的M2b表达最高(中位值0.1080),其次是AML-未定型(0.0467)、M3(0.0266)、M2a(0.0221)、M4a(0.0167)、M5b(0.0151)、M4b(0.0025),两两比较分析显示,M2b患者APPmRNA表达显著高于M5b患者(P=0.000).APP mRNA表达水平对AML亚型以外患者临床特征及治疗反应无显著影响(P＞0.05).Kasumi-1细胞APP基因表达显著高于U937细胞(P＜0.05),与AML各亚型原代细胞中的结果相一致.APP-siRNA转染HL-60细胞后,其APP mRNA表达下凋64%,在培养24、48及72 h后检测HL-60细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期及对阿霉素敏感性均无明显变化(P＞0.05).结论 伴t(8;21)异位的M2型白血病高表达APP mRNA,单核细胞白血病低表达APPmRNA.APP基因表达沉默对HL-60细胞的生物学作用无显著影响.     

急性淋巴细胞白血病患儿血管内皮生长因子及其受体的表达与临床相关性的初步研究

目的观察不同危险程度分组的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血管内皮生长因子(VEGF)及其受体F lt-1和KDR的表达及与临床表现、疗效的关系。方法采用ELISA、RT-PCR方法检测正常儿童志愿者(20名)及ALL低危组(29例)、难治组(10例)、缓解组(20例)患儿VEGF及其受体表达,同时对不同分组ALL患儿的临床特点和指标进行参照对比分析。结果难治组患儿VEGF表达[(574.37±208.45)ng/L]高于低危组[(387.93±175.86)ng/L],后者又高于缓解组[(135.80±111.28)ng/L]和正常对照组[(91.16±41.34)ng/L],缓解组与正常对照组比较,差异无统计学意义;VEGF受体mRNA的RT-PCR检测结果从高至低依次为难治组、低危组、缓解组、正常对照组;不同分组VEGF及其受体表达结果与临床表现相吻合。结论高表达VEGF及其受体的患儿往往肿瘤负荷增高,尤其是在难治性ALL患儿中尤为明显,因此VEGF及其受体表达检测可能成为疾病预后的指标之一。     

全反式维甲酸和三氧化二砷诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化前后微小RNA表达变化

目的 研究急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞分化前后微小RNA(miRNA,miR)表达变化.方法 采用全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3)诱导APL细胞系NB4 细胞分化,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志CD11b的表达,用实时定量RT-PCR检测miRNA表达谱miR-15b、miR-16、miR-34a、miR-107、miR-124a、miR-146、miR-155、miR-181a、miR-223、miR-342、let7c等miRNA的表达水平,用2-△△Ct法计算miRNA相对表达水平.收集15例APL初诊和15例APL缓解期患者骨髓单个核细胞(MNC),用RT-PCR检测MNC miRNA 的表达水平,用2-△Ct法计算miRNA表达水平.结果 ATRA作用NB4细胞96 h,miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平均显著上调,分别为对照组的3.40、4.22、5.41、20.03和5.29倍,As2O3作用NB4细胞96 h,miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223、miR-342表达水平也显著上调,分别为对照组的3.62、2.49、2.58、4.27和1.94倍,除miR-15b外,ATRA处理组miR-16、miR-107、miR-223和miR-342表达水平上调程度均高于As2O3处理组,其中尤以miR-223为甚.ATRA和As2O3治疗后缓解期APL患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223和miR-342表达水平(2-△Ct值)分别为0.4137、0.6367、0.1260、0.0522、0.6611和0.0280,而APL初诊患者miR-15b、miR-16、miR-107、miR-181a、miR-223、miR-342表达水平分别为0.0751、0.2022、0.0425、0.3064、0.1733和0.0090,APL缓解期miR-15b、miR-16、miR-107、miR-223和miR-342表达水平高于APL初诊者(P值均<0.05),而APL缓解期miR-181a表达水平低于APL初诊者(P<0.05).结论 特定miRNA参与APL细胞分化过程.     

急性髓系白血病细胞p16基因结构及转录水平表达

目的：了解ｐ１６基因在急性髓系白血病（ＡＭＬ）发病中的意义。方法：用聚合酶链反应－单链ＤＮＡ构象多态性、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法分析１６例ＡＭＬ细胞ｐ１６基因结构及转录水平表达。结果：１６例均无ｐ１６基因的缺失、突变。初治和复发的１２例ＡＭＬ的ｐ１６ｍＲＮＡ表达水平明显低于４例长期缓解者及正常对照。１例ｐ５３基因突变ＡＭＬ的ｐ１６ｍＲＮＡ有明显升高。结论：ｐ１６基因在ＡＭＬ发病中可能不占重要地位，而在ＡＭＬ病态造血的维持中起一定作用，在ｐ５３突变时其表达反馈性升高，显示一种反馈环路失衡，提示在研究单个基因的基础上观察细胞周期检测点功能具有重要意义。