188Re-Hepama-1单克隆抗体荷人肝癌裸鼠模型实验研究

目的 研究188Re-单克隆抗体(简称单抗)Hepama-1在荷人肝癌裸鼠体内生物学分布及肿瘤抑制,为放免治疗提供依据.方法 制备188Re-Hepama-1并测定其标记率及体外稳定性.将40只荷瘤裸鼠用完全随机法分为5组:生理盐水对照组、188ReO4-瘤内注射组、188Re标记健康小鼠IgG(188Re-mIgG)瘤内注射组、188Re-Hepama-1静脉给药组、188Re-Hepama-1瘤内注射组.注射后48 h每组各处死3只,测定肿瘤和肝等重要器官的放射性,用每克组织百分注射剂量率(%ID/g)表示;分别于治疗后1,2,3及4周计算肿瘤体积,与治疗前肿瘤体积进行对比;治疗后4周,每组各处死3只荷瘤裸鼠,观察肿瘤细胞超微结构改变及组织病理学改变.结果 188Re-Hepama-1标记率为85%,放化纯＞95%.注射后48h瘤内注射188Re-Hepama-1组肿瘤组织放射性摄取为11.53%ID/g,静脉注射188Re-Hepama-1组为2.79%ID/g;而瘤内注射188Re-Hepama-1组血、肝、肾等组织摄取均＜1.00%ID/g,明显低于静脉注射188R-Hepama-I组(均＞1.50%ID/g);静脉注射188Re-Hepama-1组和瘤内注射188Re-Hepama-1组的肿瘤体积与188ReO4-组及188Re-mIgG组的差异均具有统计学意义(P均＜0.05).形态学观察可见瘤内注射188Re-Hepama-1组和静脉注射188Re-Hepama-1组细胞凋亡,凋亡小体及变性坏死增多,而其余组少见.结论 静脉注射和瘤体内注射188Re-Hepama-1对裸鼠模型肝癌具有较好的治疗效应.静脉注射188Re-Hepama-1在临床肝癌的导向治疗方面有较好的应用前景.     

188Re-IGF-1类似物对胰腺癌细胞Patu8988的增殖抑制与诱导凋亡实验

目的 研究188 Re-IGF-1类似物(IGF-1A)对胰腺癌Patu8988细胞的增殖抑制效应和诱导凋亡作用.方法 (1)制备188 Re-IGF-1A,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测给药后细胞增殖情况,细胞按给药情况分为对照组、IGF-1A组(1、5、10、20 μg)、188ReO4-组(0.37、1.85、3.70、7.40 MBq)和188 Re-IGF-1A组(0.37、0.74、1.85 MBq).188ReO4-组和188Re-IGF-1A组分别在给药后1～7d,IGF-1A组分别在给药后1 ～6d,每天用MTT比色法测定其吸光度(A)值,计算细胞生存率和抑制率.(2)将1×106个细胞接种于培养瓶中,分188 ReO4-组和188 Re-IGF-1A组(均设1.85、3.70、7.40 MBq 3个剂量),在给药后3d用流式细胞仪检测细胞凋亡率.(3)36只荷人胰腺癌裸鼠,瘤内注射188Re-IGF-12.28-4.81 MBq,分别在15 min,1、4h,1、3和5d显像后处死裸鼠6只,计算各组织的％ID/g和每MBq活度的吸收剂量(mGy/MBq).对数据行单因素方差分析.结果 (1) IGF-1A和188Re-IGF-1A能抑制Patu8988细胞生长.加入188Re-IGF-1A后4d,1.85 MBq亚组抑制率达到(90.75±5.20)％,高于相同化学剂量的IGF-1A(5 μg)组或相同放射性活度的188ReO4-组[(49.50±2.39)％与(23.00±4.21)％],差异有统计学意义(F =554.724,P＜0.01).(2)给药1.85、3.70、7.40 MBq3 d后,188Re-IGF-1A组漂浮细胞比例分别为(16.56±0.95)％、(33.39±5.93)％和(43.76±1.38)％,漂浮细胞的凋亡率分别为(12.70±2.27)％、(17.80±1.51)％和(23.23±1.22)％.(3)荷瘤鼠瘤内注射188Re-IGF-1A后15 min和1、3、5d肿瘤内放射性摄取分别为(39.30±17.98)、(10.59±9.39)、(5.32±1.53)和(5.30±2.28) ％ID/g.肿瘤内吸收剂量为5165.8 mGy/MBq.结论 188Re-IGF-1A对胰腺癌细胞生长有明显的抑制作用,并可诱导细胞凋亡;瘤内注射后肿瘤部位摄取较高.     

人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系的建立及其生物学特性

目的 建立人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系并研究其生物学特性.方法 采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人鼻咽癌吉西他滨多药耐药细胞亚系CNE2/Gem,MIT法检测CNE2和CNE2/Gem对几种常用抗肿瘤药物的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),流式细胞术测定细胞周期及细胞内荧光药物罗丹明的蓄积,绘制细胞生长曲线,计算倍增时间并在光镜下观察细胞形态.结果 从生长曲线计算出(CNE2和CNE2/Gem的倍增时间分别为17.13和23.13h.CNE2和(CNE2/Gem对吉西他滨的IC50分别为2.84±1.63和42.95±7.53μg/ml,RI为23.61(P＜0.001),对顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)及长春新碱(VCR)的RI分别为15.00(P＜0.001)、6.98(P＜0.01)及12.80(P＜0.05),表明其具有多药耐药特征.流式细胞测定显示(CNE2/Gem内罗丹明的蓄积明显低于CNE2(3.56 vs 220.35).光镜下见CNE2/Gem胞体变圆,大小不一,胞质内有较多颗粒.结论 成功建立了稳定的人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系CNF2/Gem,且耐药性能显著,可作为进一步研究鼻咽癌吉西他滨耐药机制较为理想的模型.     

~(131)IBAC_5和CT-BAC_5联合应用对鼻咽癌CNE-2细胞微球的作用

目的　观察中华眼镜蛇膜毒素 (CT)和131I与抗鼻咽癌 (NPC)单克隆抗体BAC5的偶联物 ,对NPCCNE 2细胞微球的抑制或破坏作用。方法　采用氯胺 T法制备131I BAC5,并用异型双功能交联剂 (SPDP)偶联CT BAC5,分别或联合应用于NPCCNE 2细胞微球 ,观察微球生长的体积变化率和评价其受抑制或受破坏的情况。结果　CT和BAC5的偶联率为 32 .4% ,与对照组比较 ,CT对微球的生长无明显抑制作用 (P >0 .0 5 ) ,CT BAC5有明显的的抑制作用 (P <0 .0 5 ) ,131I BAC5、131I BAC5 CT BAC5有非常明显的破坏作用 (P <0 .0 1)。结论　肿瘤多细胞微球是一种用于体外研究肿瘤治疗效果的理想模型之一。CT BAC5和131I BAC5联合免疫导向治疗NPC比单项治疗效果更好。     

188Re-Herceptin-磁性纳米微粒的体外抗肿瘤作用

目的探讨^188Re—Herceptin-磁性纳米微粒在外置磁场下对HER-2／neu癌基因高表达的SKBR-3乳腺癌细胞的靶向结合性及抗癌作用。方法采用戊二醛交联法使人源性单克隆抗体Her—ceptin与磁性纳米微粒交联，用直接标记法制备^188Re—Herceptin及^188Re—Herceptin-磁性纳米微粒，用羰基铼标记法制备^188Re-磁性纳米微粒。肿瘤细胞体外抑制实验设4个组：^188Re—Herceptin-磁性纳米微粒组、^188Re—Herceptin组、^188Re-磁性纳米微粒组和^188ReO4^-组，各组均设3．7×10^4、18．5×10^4、37×10^4、55．5×10^4、74×10^4Bq／ml5个放射性剂量级别；另设生理盐水对照组。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定各组的抑瘤效应，计算相对抑制率，采用半数抑制放射性浓度（IC50）对各组抑瘤作用进行比较和评价。结果^188Re—Herceptin-磁性纳米微粒和^188Re—Herceptin组对SKBR-3细胞均有较强杀伤作用，且呈剂量依赖性；而^188Re-磁性纳米微粒和^188Re04组的杀伤作用较弱0188Re—Herceptin-磁性纳米微粒组的IC50（53．1×10^4Bq／L）明显低于^188Re—Herceptin组（76．1×10^4Bq／L）；^188Re一磁性纳米微粒组和^188ReO4组的IC50分别为169×10^4和175×10^4Bq／L，明显高于前2组。结论^188Re—Herceptin-磁性纳米微粒和^188Re—Herceptin均可明显抑制体外培养的SKBR-3乳腺癌细胞增殖，且前者的抑制作用较后者强。     

131I-BAC5和CT-BAC5联合应用对鼻咽癌CNE-2细胞微球的作用

目的 观察中华眼镜膜毒素（CT）和131I与抗鼻咽癌（NPC）单克隆抗体BAC5的偶联物，对NPC CNE－2细胞微球的抑制或破坏作用。方法 采用氯胺－T法制备131－I－BAC5，并用异型双功能交联剂（SPDP）偶联CT－BAC5，分别或联合应用于NPC CNE－2细胞微球，观察微球生长的体积变化率和评价其受抑制或受破坏的情况，结果 CT和BAC5的偶联率为32．4％，与对照组比较，CT对微球的生长无明显抑制作用（P＞0．05），CT－BAC5的偶联率为32．4％，与对照组比较，CT对微球的生长无明显抑制作用（P＞0．05），CT－BAC5有明显的抑制作用（P＜0．05），131I－BAC5，131I－BAC5＋CT－BAC5有非常明显的破坏作用（P＜0．01），结论 肿瘤多细胞微球是一种用于体外研究肿瘤治疗效果的理想模型之一，CT－BAC5和131I－BAC5联合免疫导向治疗NPC比单项治疗效果更好。     

抗人肝癌188Re-免疫磁性纳米微粒的生物学分布和肿瘤细胞抑制实验

目的探讨抗人肝癌188Re-免疫(Hepama-1)磁性纳米微粒免疫学活性、体内生物学分布、肝靶向性及抑瘤作用。方法对比188ReO4-、188Re-Hepama-1、188Re-磁性纳米微粒,研究尾静脉注射188Re-免疫磁性纳米微粒后4h、24h在昆明小鼠体内的分布情况;在肝区外加磁场及无磁场状态下,研究新西兰大白兔体内的肝磁靶向性;采用溴化四甲基唑法,研究4种188Re标记物对肝癌细胞株SMMC-7721的抑制效果。结果188Re-免疫磁性纳米微粒在肝内摄取量最大;在磁区肝组织放射活性较非磁区肝组织明显增加,二者的放射活性比值为1.87;对肝癌细胞株SMMC-7721半数抑制放射性活度仅为188ReO4-的1/4左右。结论188Re-磁性纳米微粒具有良好的磁感应性能、免疫活性及明显的肝靶向性。     

188Re/99Tcm-IGF-1类似物的制备及与胰腺癌细胞结合实验研究

目的 研究188Re/99Tcm标记胰岛素样生长因子1类似物(IGF-1A)的方法,及其与胰腺癌细胞的结合特点.方法 采用直接标记法标记经修饰的IGF-1A,标记条件设定:吐温-80用量2～10 μl;不同时间点测定标记率;SnClz·2H2O质量浓度变化为0.75～25 g/L;IGF-1A的用量20～100 μg;洗脱液的体积10～500 μl;通过实验确定最佳标记条件.测定标记物的体外稳定性及其与胰腺癌Patu8988细胞的结合率.荷瘤裸鼠尾静脉注射99Tcm-IGF-1A后显像,瘤内注射188Re-IGF-1A后平面显像.结果 最佳188Re标记条件为:100 μl SnCl2·2H2O(10 g/L)加入50 μl IGF-1A(2 g/L);300 μl Na3PO4和10 μl质量分数0.1%吐温-80,混匀后加人50 μl 188ReO4-新鲜洗脱液;在IGF-1A体系中加入洗脱液体系,混匀,室温下反应30 min;加入500 μl NaH2PO4,将pH值调至7.0左右,标记完成.最高标记率为(94.07±0.32)%,胶体含量为(5.50±1.50)%,与50 μl 5×106个胰腺癌细胞(Patu8988)的最高总结合率为(24.13±2.03)%,特异性结合率为12.68%.最佳99Tcm标记条件为:SnCl2·2H2O质量浓度为3 g/L,质量分数0.1%吐温-80用量为2 μl,IGF-1A用量为40 μl,余同188Re标记.最高标记率为(94.43±0.75)%,胶体含量为(3.47±0.71)%,与胰腺癌细胞最高总结合率为(22.95±3.94)%,特异性结合率为19.31%.99Tcm-IGF-1A显像6 h内肿瘤显影清晰,188Re-IGF-1A瘤内注射显像48 h内肿瘤显影清晰.结论 用直接标记法进行188Re/99Tcm标记IGF-1A,方法简便,具有较高标记率和良好稳定性,能与胰腺癌Patu8988细胞特异性结合.     

188 Re-HEDP对体外成骨细胞增殖及细胞周期的影响

目的 观察不同剂量188Re-羟基亚乙基二膦酸盐(HEDP)近距离作用对成骨细胞增殖和细胞周期的影响.方法 在体外培养的成骨细胞中加入不同放射性浓度(0,1.85,9.61,48.00,240.50,462.50,832.50和1110.00 kBq/ml)188 Re-HEDP,继续培养24 h后检测细胞的放射性计数,了解成骨细胞摄取188Re-HEDP的能力.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测成骨细胞增殖能力.测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,以明确成骨细胞分化功能.采用流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成骨细胞摄取188Re-HEDP的能力较强,188Re-HEDP≤1110.00 kBq/ml时未观察到结合平台期.受188.Re-HEDP刺激后成骨细胞生长增殖旺盛、分化加强,成骨细胞存活率为(113.67±3.22)%-(122.00±6.58)%,ALP值为(0.42±0.02)～(0.50±0.05)U/L;188Re-HEDP≥33.30 MBq/ml时成骨细胞凋亡率增加[(6.26±0.09)%]并随剂量增大.188Re-HEDP作用后处于合成期的成骨细胞百分率明显增加,为(22.32±2.31)%-(35.58±5.18)%.结论 188Re-HEDP可能刺激成骨细胞增殖和分化,使合成期的细胞百分率增高.188Re-HEDP超过33.30 MBq/ml时引起成骨细胞凋亡,且凋亡率与其放射性浓度呈正相关.     

188Re-胰岛素样生长因子1类似物在荷人胰腺癌裸鼠体内分布及其显像研究

目的 研究188Re标记胰岛素样生长因子l类似物(IGF-1A)在荷人胰腺癌裸鼠体内的分布及其显像.方法 ①直接法标记188Re-IGF-1A并测定标记率.②建立荷人胰腺癌Patu8988裸鼠模型.③188Re-IGF-1A经瘤内注射荷人胰腺癌裸鼠瘤内,分别于注射后15 min、1 h、4 h、24 h、3 d、5 d进行SPECT平面显像.④188ReO4-经瘤内注射后15 min、1 h、2 h、4 h、24 h进行显像,取各时间组裸鼠(n=4)脏器和肿瘤组织,计算每克组织百分注入剂量(%ID/g)及肿瘤/非肿瘤组织放射性摄取比值(T/NT).结果 ①188Re-IGF-1A标记率为(94.07±0.32)%.②瘤内注射188Re-IGF-1A后,肿瘤部位放射性积聚量4 h内差异无统计学意义(F=1.622,P＞0.05),且随时间延长,肿瘤与其他脏器的T/NT呈上升趋势,其中肿瘤/肌肉在5 d时最高,达到6531.79±4930.26.③瘤内注射188ReO4-后,在体内初始主要分布于甲状腺、胃、肿瘤、血液,随时间延长,肿瘤部位放射性计数迅速下降.④在24 h,瘤内注射188Re-IGF-1A组肿瘤及肾脏内%ID/g较188ReO4-组高,两者有统计学差异(t=5.877,t=13.287,P＜0.01);两组肿瘤内%ID/g比值在24 h达到最高,为74.10倍.⑤瘤内注射188Re-IGF-1A后,SPECT平面显像见瘤内浓聚,5 d时仅见肿瘤部位显影.结论 188Re-IGF-1A对胰腺癌具有良好的亲和力,在肿瘤部位有较高的T/NT,可望作为胰腺癌治疗的药物.     

MR对比剂荧光VEGF165-USPIO合成及其活性的体外实验

目的：探讨荧光 VEGF165-USPIO（血管内皮生长因子165-超顺磁性氧化铁）作为 MR 对比剂的可行性,检测该对比剂体外对 VEGF165抗原的靶向性。方法：通过氨基-羧基偶联方式将 VEGF165单克隆抗体和 USPIO 连接,然后将 Cy5．5标记到单克隆抗体表面,构建 Cy5．5-anti-VEGF165-USPIO 靶向对比剂。以离心和磁分离器的洗涤手段进行改良 ELISA 实验检测其体外活性,实验组加入0．25ml 的荧光-anti-VEGF165-USPIO,对照组加入相同量的荧光 USPIO,每组各设5个离心管,两样本为计量资料,采用独立 t 检验比较不同组间吸光值差异有无显著性。结果：通过分光光度计验证对比剂连接成功,VEGF165单克隆抗体偶联率达到了71．7％,CY5．5的偶联率为83．3％。ELISA 实验表明实验组和对照组各自吸光值差异有显著性意义（P ＜0．05）,实验组 OD（吸光值）明显高于对照组。结论：荧光 anti-VEGF165-US-PIO 体外有结合 VEGF165的活性,为进一步的 MR 肿瘤靶向对比剂研究奠定了实验基础。     

Gastrointestinal toxicity of 5-FU and 5-FUDR: radiographic findings.

The authors describe two patients who suffered gastrointestinal toxicity after receiving chemotherapy for unresectable lesions in the liver that metastasized from colonic carcinoma. One patient had severe ileitis caused by intravenous administration of 5-fluorouracil; the other had severe duodenitis caused by infusion of 5-floxuridine into the hepatic artery by an implanted pump. The type of toxicity that occurred was directly related to the route of administration of these chemotherapeutic agents. Cessation of the chemotherapy led to a dramatic clinical response in these patients.     

抗角蛋白单克隆抗体5 G 5对角质形成细胞增殖影响的实验研究

 目的 研究抗角蛋白单克隆抗体5G5治疗银屑病的作用机制。方法 腹腔注射乙烯雌酚有引起小鼠阴道上皮细胞增殖的作用,小鼠尾部表皮天然缺乏颗粒层,这两种特征与银屑病病理类似。不同组别的小鼠,以单抗5G5注射,观察其对角质形成细胞增殖的调节作用。结果 单抗5G5有较好的降低嗜银蛋白含量和小鼠阴道上皮细胞有丝分裂,以及促使角质形成细胞分化的作用。结论 抗角蛋白单克隆抗体5G5治疗银屑病的作用机制与调节角质形成细胞增殖有关。