抗—HBs阳性等四种模式的意义探讨

乙肝病毒(ＨＢＶ)的抗原抗体系统(下称乙肝三系)中,乙肝表面抗体(抗-ＨＢｓ)是ＨＢＶ唯一的中和抗体,能使机体对ＨＢＶ产生保护性免疫力。抗-ＨＢｓ是机体受ＨＢＶ表面抗原(ＨＢｓＡｇ)刺激后产生的特异性抗体。笔者在１９９７年１月～１９９８年１２月乙肝三系检测中发现的抗-ＨＢｓ阳性结果,都同时伴有ＨＢＶ其他免疫指标的阳性,其主要模式有四种。现报告如下。方法与结果一、标本来源５６９例抗-ＨＢｓ阳性病例标本均来自我院。二、试剂来源检测ＨＢｓＡｇ、抗-ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗-ＨＢｅ、抗-ＨＢｃ、抗-ＨＢｃ-ＩｇＭ的试剂盒均由…     

捕获ELISA检测人巨细胞病毒IgM抗体

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)属疱疹病毒科 ,其感染极为普遍 ,在免疫抑制患者及孕妇中常可导致严重后果。本实验采用重组ＨＣＭＶ (ｒｈＣＭＶ) ｇｐ5 2蛋白[1] 作抗原和辣根过氧化物酶(ＨＲＰ)标记的鼠抗 ｇｐ5 2单克隆抗体[2 ] ,建立了捕获ＥＬＩＳＡ ,检测血清中的ＨＣＭＶＩｇＭ抗体。现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　抗原浓度的确定　ｒｈＣＭＶ ｇｐ5 2蛋白[1] 纯度达 95 %。在捕获ＥＬＩＳＡ检测程序中加入不同浓度的ｇｐ5 2抗原 ,每个浓度重复 3孔 ,将同一抗原浓度的 3个阳性血清Ａ值分别除以 3份阴性血清的平均Ａ值 ,求得Ｐ/Ｎ值…     

人巨细胞病毒糖蛋白gp52的原核表达及初步应用

目的探讨以表达人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）中抗原性较强的蛋白片断代替全病毒抗原建立ＨＣＭＶＩｇＭ检测试剂盒的可行性。方法以聚合酶链反应扩增ＨＣＭＶ聚合酶辅助糖蛋白（ｇｐ５２）的有效抗原基因序列，导入带有高效转录启动子ｐＴｒｃ和６个串联组氨酸的原核表达载体ｐＴｒｃＨｉｓ，在大肠杆菌中表达，经金属鏊和亲和层析（ＩＭＡＣ）法纯化后，用酶联免疫吸附法检测新生儿血清，并与全病毒抗原检测进行比较。结果重组ｇｐ５２占大肠杆菌总蛋白的４０％，ＩＭＡＣ纯化后纯度达９４．５％。在４３份疑似ＨＣＭＶ感染的新生儿血清中阳性检出率为５１．２％，而用全病毒抗原检测阳性率只有２５．９％。结论ＨＣＭＶｇｐ５２蛋白具有良好的抗原性，可用于建立新一代的检测试剂盒。     

免疫酶法检测鼻咽癌病人血清IgA/gp125抗体

建立了用表达Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒壳抗原ｇｐ１２５的重组痘苗病毒感染细胞为抗原，检测ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体的免疫酶法，并检测了鼻咽癌病人血清其它肿瘤病人和正常人的ＩｇＡ／ｇｐ１２５抗体，其灵敏度远远高于ＩｇＡ／ＥＡ，接近于８ｇＡ／ＭＡ和ＩｇＡ／ＶＣＡ，特异性高于ＩｇＡ／ＭＡ和ＩｇＡ／ＣＶＡ，接近于ＩｇＡ／ＥＡ。     

人巨细胞病毒糖蛋白gp52的原核表达及初步应用

目的 探讨以表达人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）中抗原性较强的蛋白片断代替全病毒抗原建立ＨＣＭＶ ＩｇＭ检测试剂盒的可行性。方法 以边反应扩增ＨＣＭＶ聚合酶辅助糖蛋白（ｇｐ５２）的有效抗原基因序列，导入带有高效转录启动子ｐＴｒｃ和６个串联组氨酸的原核表达载体ｐＴｒｃＨｉｓ，在大肠杆菌中表达，经金属鏊和亲和层析（ＩＭＡＣ）法纯化后，用酶联免疫吸附法检测新生儿血清，并与全病毒抗原检测进行比较。结果 重组ｇｐ５     

人工合成HEV抗原多肽的抗原性筛选及HEV抗体检测的ELISA法

利用固相合成法，参考已克隆和测序了的ＨＥＶ病毒基因组序列，通过计算机对ＨＥＶ抗原结构的模拟分析，设计合成了６个ＨＥＶ抗原的多肽片段，再用间ＥＬＩＳＡ法筛选出抗原性好、专一性强的肽段。ＣＥＰ５为主肽，加及ＥＰ４和ＥＰ２混合包被酶标板，建立检测ＨＥＶ抗体的ＥＬＩＳＡ方法。本方法通过与Ｇｅｎｅｌａｂｓ公司的ＤＢ－抗ＨＥＶＥＬＩＳＡ检测试剂盒的对比研究和临床标本检测，阳性血清的检出符合率为９６．８％，阴性     

乙型肝炎病毒感染的抗病毒治疗

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染的抗病毒治疗在 2 0世纪的最后 10年内取得了重大突破 ,α 干扰素 (ＩＦＮ α)及核苷类似物的临床应用 ,改善了ＨＢＶ相关肝脏疾病的自然病史和预后 ,近年来已在抗病毒治疗领域积累了初步的经验 ,并对今后的研究方向有了新的认识。1　抗病毒治疗的研究现状1.1　ＩＦＮ α　人们对抗病毒治疗的研究始于ＩＦＮ α的单药应用。超过 10年的治疗研究证实 ,ＩＦＮ α是慢性乙肝治疗的有效药物 ,其抗病毒的机制包括激活体内特异和非特异杀伤细胞 ,促进病毒抗原和Ｉ型主要组织相容性 (抗原 )复合物的表达 ,增强机体的免疫…     

EB病毒LMP-1、BCL-2和p53在霍奇金病中的表达及其相关性研究

近年来 ,与淋巴瘤有关的ＥＢ病毒、ＢＣＬ 2 (Ｂ ＣｅｌｌＬｙｍｐｌｏ ｍａ/Ｌｅｕｋａｅｍｉａ 2ｏｎｃｏｇｅｎｅ)原癌基因和抑癌基因ｐ5 3已成为淋巴瘤研究中的热点。针对以上研究 ,本文应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测并分析了ＥＢ病毒 (ｅｐｓｔｅｉｎ ｂａｒｒｖｉｒｕｓ,ＥＢＶ)ＬＭＰ 1(Ｌａｔｅｎｔｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ 1)、ＢＣＬ 2、ｐ5 3在霍奇金病 (ＨＤ)中的表达 ,尤其对ＥＢＶ在ＨＤ中诱发肿瘤的可能机制做初步探讨。1　材料与方法1.1　材料　选取内蒙古医学院病理教研室外检ＨＤ标本 47例 ,男 2 5例 ,女 2 2例 ,平…     

丁型肝炎问答

丁型肝炎的传染源与传播途径如何?其实验室诊断研究进展如何?　　丁型肝炎病毒(ＨＤＶ)是一种缺陷病毒。其外壳为ＨＢｓＡｇ,故常发生ＨＢＶ和ＨＤＶ联合感染或重叠感染。如既往未感染过ＨＢＶ,而且同时暴露于ＨＢＶ和ＨＤＶ,则发生联合感染。如既往已感染ＨＢＶ,现为ＨＢｓＡｇ无症状携带者或慢性乙肝患者,再感染ＨＤＶ则发生ＨＤＶ重叠感染。联合感染可表现为重症肝炎。急性和慢性的丁型肝炎病人以及ＨＤＶ携带者是本病的传染源。传染途径主要有两方面:①经血或血制品传播。此为主要传播途径;②日常生活密切接触传播。通过隐性经皮肤或粘…     

进一步控制经输血传播的病毒感染

输血所致病毒感染一直是国内外输血界所关注的。近 10年来 ,各国对献血者乙型肝炎 (乙肝 )病毒(ＨＢＶ)、丙型肝炎 (丙肝 )病毒 (ＨＣＶ)和人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)进行了免疫筛查 ,使经输血传播的病毒感染率有了显著下降。但因病毒基因型的变异、检测试剂的敏感性以及新病毒的发现 ,经输血传播病毒感染依然存在。因此 ,与输血相关的病毒感染的危险性及基因扩增技术 (ＧＡＴ)筛查献血者的价值已成为医学领域中一个研究热点[1] 。一、输血致ＨＢＶ感染的危险性与献血者的筛查ＨＢＶ感染的免疫诊断有乙肝表面抗原 (ＨＢｓＡｇ) /抗 ＨＢｓ…     

新型多抗原肽检测丙型肝炎病毒基因高变区1抗体

目的 寻求一种新的检测丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）感染血清中抗高变区１（ＨＶＲ１）抗体的方法,并探讨其与病毒血症的关系。方法 分别采用合成的ＨＣＶ－ＢＪ株（１ｂ型）ＨＶＲ１３９０～４１１ａａ序列共２２个氨基酸的线性表位多肽（ＬＰ）及多抗原肽（ＬＰ）及多抗原肽（ＭＡＰ,对称８分支）为抗原,以间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）,检测５９份丙肝患者血清及７５份其他类型肝炎患者血清中相应抗体;结合对血清Ｈ     

嗜肝DNA病毒感染模型及其在消毒研究中的应用

嗜肝ＤＮＡ病毒 (Ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｕｓｅｓ)是一类以肝细胞为靶细胞的嗜肝性ＤＮＡ病毒 ,主要包括乙型肝炎病毒 (ＨｅｐａｔｉｔｉｓＢＶｉｒｕｓ,ＨＢＶ)、地松鼠肝炎病毒(ＧｒｏｕｎｄＳｑｕｉｒｒｅｌＨｅｐａｔｉｔｉｓＶｉｒｕｓ ,ＧＳＨＶ)、土拨鼠肝炎病毒 (ＷｏｏｄｃｈｕｃｋＨｅｐａｔｉｔｉｓＶｉｒｕｓ,ＷＨＶ)和鸭乙型肝炎病毒 (ＤｕｃｋＨｅｐａｔｉｔｉｓＢＶｉｒｕｓ,ＤＨＢＶ)。1 嗜肝ＤＮＡ病毒的感染模型 :1 970年Ｄａｎｅ’ｓ等首先从人血清中分离到ＨＢＶ (当时称Ｄａｎｅ’ｓ颗粒 ) ,在以后的研究中发现 ,ＨＢ…     

MHC-Ⅰ~(pep)四聚体技术检测人类巨细胞病毒特异性细胞免疫功能的新进展

人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属疱疹病毒β亚科,人群的感染率为80%~90%。大量研究表明,机体感染HCMV的后果主要决定于机体的免疫功能,尤其是特异性T细胞的功能对HCMV感染的控制和恢复起主要作用。多个研究小组研究发现,当接受异体干细胞移植者外周血HCMV特异性CD8+T细胞的数量超过1×107/L时,能有效地阻止潜伏病毒的感染性激活。由此可见,细胞毒性T细胞(Tc)通过T细胞受体(TCR)识别、结合主要组织相关Ⅰ类抗原(MHC-Ⅰ)-抗原肽而破坏感染的靶细胞,可有效地抗病毒感染。那么了解宿主针对HCMV的特异性免疫功能将有…     

抗丙肝病毒核心抗原单克隆抗体的研制与初步鉴定

用基因工程重组技术获得的丙肝病毒（ＨＣＶ）核心蛋白抗原与鼠血清白蛋白交联后免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,用杂交瘤技术成功地建立了四株稳定分泌抗核心抗原单克抗体的杂交瘤细胞。试验结果表明,该４株ＭｃＡｂ与免疫抗原及核心区Ｃ３３肽,ＣＰ９、ＣＰ１０抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶ ＮＳ３,ＮＳ４、ＮＳ５无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。４株ＭｃＡｂ中３株为ＩｇＧ２ａ亚     

沈阳地区病毒性脑炎患儿单纯疱疹病毒和柯萨奇B组病毒特异性IgM抗体的检测

近年来病毒性脑炎成为小儿神经系统的常见疾病 ,多种病毒都可引起本病 ,单纯疱疹病毒(ＨＳＶ)和柯萨奇Ｂ组 (ＣｏｘＢ)病毒引起的该病较多。本文应用酶联免疫吸附方法 (ＥＬＩＳＡ)对我院住院的5 3例病毒性脑炎患儿的脑脊液 (ＣＳＦ)标本进行了ＨＳＶ和ＣｏｘＢ特异性ＩｇＭ抗     

MHC-肽四聚体技术在造血干细胞移植中的应用

MHC-肽四聚体技术是一种直接监测抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的新方法,具有较强的特异性和敏感性。本文就MHC-肽四聚体技术在造血干细胞移植后巨细胞病毒特异性CTL、次要组织相容性抗原(mHags)特异性CTL以及肿瘤抗原特异性CTL的检测及其意义进行综述。     

新生儿乙肝疫苗的接种

世界卫生组织曾提出要在 2 0 1 0年内实现全球消灭急性肝炎和慢性肝炎 ,作为乙型肝炎 (ＨＢＶ)高流行的国家 ,我国在新生儿预防接种中实行了乙肝疫苗接种的“1 0 μｇ三针免疫法”。该方法虽然对于预防ＨＢＶ病毒感染和控制ＨＢＶ起到了作用 ,但研究表明对于阻断新生儿的母婴围生期ＨＢＶ传播效果欠佳。我国目前可以预防ＨＢＶ的制剂有乙肝免疫球蛋白 (ＨＢＩＧ)和乙肝疫苗二种。乙肝免疫球蛋白是一种专门针对乙肝病毒的表面抗体 ,它可以中和体液中的ＨＢＶ病毒 ,并逐步清除ＨＢＶ病毒 ,对于已经附着于肝脏靶细胞的ＨＢＶ病毒 ,ＨＢＩＧ则没…     

乙型肝炎病毒变异与临床的关系

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）是一种高变异病毒,由于它在复制过程中,必须经过ＲＮＡ中间体的逆转录复制,在这一逆转录复制过程中,因ＤＮＡ聚合酶和逆转录酶缺乏校正功能,使病毒基因在复制过程中,可发生一个核苷酸（点突变）和多个核苷酸的变异。发生变异的病毒常引起其生物学特性的改变,尤其是ＨＢＶ编码蛋白如抗原蛋白等发生变异。近年发现ＨＢＶ感染的不同疾病谱和血清学表现的不典型均与病毒变异有关。阅读有关文献,对ＨＢＶ变异所引起的临床、血清学表现、防治等方面的变化,作如下归纳。一、ＨＢＶ变异的原因ＨＢＶ变异可以在慢性持…     

造血干细胞移植后移植物抗宿主病患者CD158的表达

杀伤细胞抑制物受体 (Ｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ＫＩＲ)主要表达于ＮＫ和Ｔ细胞表面 ,可与靶细胞ＭＨＣⅠ类分子特异性识别并产生负性信号 ,抑制对靶细胞的细胞毒活性[1 ,2 ] 。已在小鼠和人同种造血干细胞移植 (ＨＳＣＴ)中观察到ＮＫ细胞、Ｔ细胞表达ＫＩＲ与移植物抗宿主病 (ＧＶＨＤ)有关[3 ,4] 。外周血造血干细胞移植 (ＰＢＳＣＴ)和脐血移植 (ＵＢＣＴ)中 ,尽管是供受者间ＨＬＡ全相合 ( Ａ、 Ｂ、 ＤＲ、 ＤＱ) ,ＧＶＨＤ仍是同种ＨＳＣＴ的主要障碍。因此 ,探讨ＨＬＡ Ｃ位点特异性识别分子ＣＤ1…     

丙型肝炎病毒抗体的ELISA检测

根据丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）分子结构特点，简述了目前检测和确诊ＨＣＶ的主要方法和用于检测抗－ＨＣＶ试剂的抗原来源，着重阐述了抗－ＨＣＶ第一代ＥＬＩＳＡ和第二代ＥＬＩＳＡ试剂的灵敏度和特异性，ＨＣＶ分子不同区域各抗原的反应特点，ＥＬＩＳＡ反应强度与ＨＣＶ感染的关系以及ＥＬＩＳＡ阳性与血清ＡＬＴ和抗－ＨＢｃ的关系。