老年系统性红斑狼疮患者血清干扰素调节因子的检测及意义

目的探讨老年系统性红斑狼疮(SLE)患者血清干扰素调节因子4(IRF4)的水平及其与临床相关资料相关性。方法比较SLE组82例与正常组68例、活动性指数(SLEDAI)≥6与SLEDAI<6组、狼疮性肾炎(LN)组与非LN组间的IRF4水平差异,分析IRF4水平与SLE患者的炎性相关指标,包括SLEDAI、C-反应蛋白(CRP)、血细胞沉降率(ESR)、白细胞计数(WBC)、实验室指标包括ANA滴度、抗ds-DNA、抗SM抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体的相关性。结果 SLEDAI≥6的SLE患者的IRF4水平显著低于SLEDAI<6的患者(t=2.793,P<0.01);IRF4水平与SLEDAI、CRP、ESR、WBC均无明显相关性(P均>0.05);抗ds-DNA增加的SLE患者IRF4水平显著低于抗ds-DNA未增加患者(t=3.443,P<0.01);抗SSA抗体阳性患者的IRF4水平显著高于阴性患者(t=2.012,P=0.039)。结论 IRF4与老年患者SLE的发生有着密切的联系,且其水平与SLEDAI、抗ds-DNA增加与否、抗SSA抗体有着一定的关系。     

系统性红斑狼疮患者外周血IFN-α表达及其与疾病活动性的关系

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血干扰素(IFN)-αmRNA和蛋白表达水平,并分析IFN-α的表达与疾病活动性的关系,以探讨IFN-α在SLE发病中的作用。方法SYBR green dyeⅠ实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测外周血白细胞IFN-α的表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清IFN-α的表达。结果SLE患者外周血IFNA1 mRNA的表达(2．8±3．5)显著低于对照组(12．7±10．7,P=0．000)；未用激素治疗的患者(1．9±1．8)与已经用激素治疗的SLE患者IFNA1表达量(2．8±3．5)差异无统计学意义；血清IFN-α水平明显高于正常对照组(P=0．003)；血清IFN-α水平与SLEDAI积分和抗dsDNA抗体水平呈正相关,与补体C3、C4和白细胞数量呈负相关：血清IFN-α水平与患者发热和面部红斑有关。结论SLE患者IFN-α水平与疾病活动性之间有明显的相关性,IFN-α可能在SLE发病中发挥重要作用。     

淋巴细胞趋化因子受体mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的探讨淋巴细胞趋化因子受体(XCR1)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,及其与疾病的相关性。方法收集93例确诊的SLE患者和30名健康对照组,收集PBMC,提取RNA。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测研究对象XCR1mRNA表达水平。结果!"XCR1mRNA在PBMC中表达水平,患者组(1.57±0.84)与正常对照组(0.19±0.14),两者差异无统计学意义(P>0.05)。活动期(2.09±1.38)与对照组比较,两者差异有统计学意义(t=2.392,P=0.02);活动期与非活动期(0.31±0.24)比较,差异有统计学意义(t=3.091,P=0.003);非活动期与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。"#SLE患者组XCR1mRNA水平与疾病活动度评分(SLEDAI)关系:SLE患者组PBMC中XCR1mRNA表达水平与SLEDAI作直线相关性分析,XCR1mRNA水平与SLEDAI(r=0.540,t=5.445,P=0.000)呈正相关。"$SLE患者PBMC中XCR1mRNA表达与临床表现及实验室检查相关性:SLE抗SSA抗体阳性患者(17/68,1.4±1.2)比阴性患者(51/68,3.5±4.9),其XCR1mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(t=2.78,P=0.007)。结论XCR1mRNA表达水平在PBMC中活动期SLE患者比非活动期及对照组增高,与疾病的活动性(SLEDAI)正相关,非活动期与对照组差异无统计学意义。SLE抗SSA抗体阳性患者比阴性患者,其XCR1mRNA表达水平降低,两组均较健康对照组增高。提示XCR1参与疾病的发展,与疾病的活动性相关,XCR1可能参与抗SSA抗体的形成过程,造成组织损伤。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞微小RNA-206表达水平

目的检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)微小RNA-206(microRNA-206,miRNA-206)表达水平,探讨其在SLE发病机制中的作用。方法选择2012年12月至2013年11月在沭阳县人民医院确诊的SLE患者,SLE活动性判断采用SLE疾病活动指数(systemic lupus erythematosus diease activity index,SLEDAI);将所纳入SLE患者分为非活动组(SLEDAI≤9分)和活动组(SLEDAI9分)。采集SLE患者及健康对照者外周血标本,分离PBMC。用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中miRNA-206及锌指样转录因子4(Kruppel-like factor 4,KLF4)和孤儿核受体γt(orphan nuclear receptorγt,RORγt)mRNA相对表达量。统计学处理采用t检验和Spearman相关分析。结果共纳入27例SLE患者(非活动组12例,活动组15例)和20名健康对照者。SLE患者PBMC中miRNA-206表达水平显著低于健康对照组,差异有统计学意义[(0.066±0.021)vs.(0.143±0.059),P0.01];SLE活动组(0.034±0.015)显著低于非活动组(0.125±0.038)与健康对照组,差异均有统计学意义(均P0.01)。SLE患者KLF4和RORγt mRNA表达水平显著高于健康对照组[(0.637±0.186)vs.(0.104±0.028),P0.01;(0.575±0.263)vs.(0.065±0.014),P0.01]。SLE活动组KLF4 mRNA(0.973±0.231)显著高于非活动组(0.131±0.056)与健康对照组,且RORγt mRNA(0.968±0.316)显著高于非活动组(0.094±0.019)与健康对照组,差异均有统计学意义(均P0.01)。直线相关分析显示,miRNA-206与SLEDAI呈负相关(r=-0.654,P0.01),KLF4 mRNA与SLEDAI呈正相关(r=0.673,P0.01),RORγt mRNA与SLEDAI呈正相关(r=0.719,P0.01);SLE患者miRNA-206与KLF4、RORγt mRNA相对表达量均呈负相关(r=-0.627,P0.01;r=-0.853,P0.01),KLF4与RORγt mRNA呈正相关(r=0.684,P0.01)。结论:SLE患者PBMC中miRNA-206表达水平下降,KLF4和RORγt mRNA表达水平升高,并与疾病活动性密切相关,提示miRNA-206可能在SLE发生发展中起重要作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中微管相关蛋白轻链3和溶酶体相关膜蛋白2基因表达及其临床意义

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中巨自噬标志性分子微管相关蛋白轻链3 (LC3)和分子伴侣介导的自噬(CMA)标志性分子溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因表达,探讨其与SLE发病的关系。方法纳入2017年11月至2018年3月在川北医学院附属医院风湿免疫科诊治的88例SLE患者(SLE),采用密度梯度离心法分离外周血单个核白细胞(PBMCs);采用实时荧光定量PCR法测定患者PBMCs中LC3和LAMP-2在mRNA水平的表达量;采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分判断疾病活动度,分析LC3和LAMP-2表达与SLE患者临床特点及病情活动度的相关性。同期纳入年龄匹配的40例健康体检者作为正常对照组。结果正常对照组受检者PBMCs中LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA相对表达量分别为1. 021±0. 551和1. 015±0. 667,SLE组患者分别为0. 783±0. 435和2. 402±2. 233,组间比较差异均有统计学意义(P=0. 020、0. 000)。SLE患者PBMCs中LAMP-2 mRNA表达水平与SLEDAI呈明显正相关(rs=0. 312,P=0. 003),LC3mRNA表达水平与SLEDAI无明显相关性(rs=-0. 175,P=0. 103)。LAMP-2 mRNA表达量升高患者肾脏损害发生率明显高于非升高患者(40. 7%vs. 16. 3%),LC3 mRNA表达量降低患者的血液系统受累率明显高于无LC3 mRNA表达降低患者(65. 2%vs. 32. 3%),差异均有统计学意义(P=0. 013、0. 006)。不同LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA表达水平组实验室检查指标和治疗效果的患者分布差异均无统计学意义(均P0. 05)。结论 SLE患者LC3 mRNA表达水平下调,LAMP-2 mRNA表达水平上调,提示SLE患者存在巨自噬功能不足。SLE患者CMA功能增强,并且与肾脏和血液系统受累有关。     

系统性红斑狼疮患者干扰素调节因子IRF1 IRF4 IRF8基因表达的研究

目的研究干扰素调节因子(IRF)家族中IRF1、IRF4、IRF8基因的实时定量表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)的关联性。方法收集45例SLE患者与37名正常对照人群的临床资料,取外周血抽提总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法在ABI PRISM 7900 HT实时定量PCR仪上检测患者组和对照组的IRF1、IRF4、IRF8的mRNA定量表达水平(以-ΔΔCt值表示)的差异。结果正常人外周血IRF1 mRNA、IRF4 mRNA、IRF8 mRNA的表达分别是-3．90±0．19、-8．04±0．25和3．60±0．15。与正常人相比,SLE患者组IRF1 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0．05),而IRF4 mRNA的表达明显增高(-8．82±0．18,P=0．011)、IRF8 mRNA表达低于正常人(3．09±0．13,P=0．012)。结论SLE患者外周血存在IRF表达异常。     

干扰素指数在系统性红斑狼疮诊断和活动性判断中的应用价值

目的 选择5个干扰素诱导基因人黏液病毒抗性蛋白1(MX1);2',5'-寡腺苷酸样合成酶(OASL);2'5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1);α-干扰素诱导蛋白15(ISG15)、淋巴细胞抗原6复合体E(LY6E)作为系统性红斑狼疮(SLE)候选基因进行表达研究并探讨干扰素诱导基因在SLE中的表达情况以及对SLE诊断的临床价值.方法 收集68例SLE患者、50例其他自身免疫性疾病患者和26名健康者外周血细胞,提取RNA,以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术进行检测,观察各组间基因表达量的差异及各组间干扰素(IFN)指数的差异;应用受试者工作曲线(ROC)分析软件评价干扰素诱导基因在SLE诊断中的价值,Spearman相关分析法分析干扰素指数与SLE疾病活动度指标[SLEDAI积分和尿蛋白定量(24 h)]的相关性.采用t检验和秩和检验进行统计学分析.结果 ①SLE患者外周血细胞MX1、OASL、OAS1、ISG15、LY6E基因的表达水平均显著高于疾病对照组和健康对照组,差异有统计学意义(P值均＜0.01).②SLE患者干扰素指数(17.9±29.1)显著高于疾病对照组(3.0±8.1)和健康对照组(0±3.3),差异有统计学意义(P值均＜0.01).③在SLE诊断中,干扰素指数ROC曲线下的面积(AUCROC)为0.846,当干扰素指数取2.56时,对SLE患者诊断的敏感性为82.4%,特异性为76.3%.④SLE患者干扰素指数水平与SLEDAI积分(r=0.256,P＜0.01)和尿蛋白定量(24 h)水平(r=0.337,P＜0.01)呈显著正相关.⑤合并肾脏损害的SLE患者、抗Sm与抗dsDNA抗体阳性SLE患者干扰素指数显著升高,差异有统计学意义(P值均＜0.05).结论 干扰素诱导基因MX1、OASL、OAS1、ISG15和LY6E在SLE患者中呈高表达,干扰素指数的升高对于SLE的诊断及疾病活动性判断具有参考价值.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞趋化因子受体4、5 mRNA的表达

目的探讨趋化因子受体CCR4及CCR5在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,与疾病的相关性.方法收集93例确诊的SLE患者和30名正常对照,通过外周血单个核细胞(PBMC),提取RNA.应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测研究对象CCR4、CCR5 mRNA表达水平.结果趋化因子受体CCR4 mRNA在SLE患者PBMC中的表达水平,患者组(1.57±0.70)与正常对照组(0.19±0.18)比较,两者差异有显著性(t=3.012,P=0.003);活动期(2.03±1.04)非活动期(0.26±0.19)及对照组比较,两者差异有显著性;非活动期与对照组比较,差异无显著性(P＞0.05).趋化因子受体CCR5 mRNA在PBMC中表达水平,患者组(0.56±0.44)与对照组(0.37±0.14)比较,两者差异有显著性(t=3.262,P=0.002);活动期(0.53±0.51)与非活动期(0.59±0.34)比较,差异无显著性(P＞0.05);活动期与对照组比较(t=2.039,P=0.045)及非活动期与对照组比较(t=3.461,P=0.001),两者差异有显著性.SLE患者组CCR4及CCR5 mRNA水平与疾病活动度评分关系CCR4 mRNA水平与SLEDAI(r=0.376,t=3.851,P=0.000)呈正相关.CCR5 mRNA水平与疾病的活动性(SLEDAI)(r=0.062,t=-0,589,P=0.557)不相关.结论CCR4 mRNA表达水平在患者组比对照组表达增高,活动期比对照组表达水平增高,与疾病的活动性(SLEDAI)呈正相关.CCR5 mRNA表达在患者组比对照组增高,差异有显著性,与SLEDAI不相关.     

系统性红斑狼疮患者磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2表达的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中磷脂酶C-γ1、磷脂酶C -γ2的表达水平及其与SLE疾病活动性的相关性.方法 运用半定量聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测30例SLE患者与25名健康对照人的磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达水平,并采用Pearson相关性检验分析它们与补体C3、C4、抗双链DNA (dsDNA)抗体及SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分的相关性.结果 ①SLE组与健康对照组相比,磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达显著增高(分别为P＜0.01);②磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2 mRNA表达水平之间呈正相关(r=0.726,P＜0.01);③SLE组磷脂酶C-γ1 mRNA表达水平与补体C3、C4、抗dsDNA抗体均无相关性,而与SLEDAI积分呈正相关(r=0.002,P＜0.05).磷脂酶C-γ2与补体C3、C4呈显著负相关(r=-0.914,P＜0.01;r=-0.829,P＜0.05),与抗dsDNA抗体正相关(r=0.171,P＜0.05),与SLEDAI积分相关性不明显.结论 本研究发现SLE患者磷脂酶C-γ1与磷脂酶C-γ2的表达水平在SLE患者中增高,磷脂酶C-γ1与SLEDAI积分呈正相关,磷脂酶C-γ2与补体C3、C4呈负相关,与抗dsDNA抗体正相关,可能对SLE患者的诊断和病情评估有较大价值.     

系统性红斑狼疮患者外周血白细胞介素-17与辅助T细胞17的检测及其意义

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞介素(IL)-17蛋白和mRNA水平、辅助T细胞(Th17)细胞表达比例,探讨其临床意义.方法 用酶联免疫吸附试验检测SLE患者及对照者血浆中IL-17的蛋白水平;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测2组外周血中IL-17 mRNA表达水平;运用流式细胞术检测SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞比例,进一步分析IL-17/Th17细胞与SLE临床实验室指标的相关性.计量资料组间比较采用t检验,相关性分析采用Spearman秩和相关分析.结果 SLE组患者血浆IL-17含量明显高于健康对照组,SLE组患者外周血IL-17 mRNA表达水平[(28.3±11.7)×10-5]高于对照组[(9.8±2.2)×10-5](P均＜0.01).SLE患者PBMCs中Th17细胞比例(2.5±1.5)%及IL-17荧光强度(1937±1022)显著高于对照组[(1.5±0.7)%,(1245±413)],且SLE活动期患者Th17细胞百分比高于非活动组,SLE肾病组Th17细胞比例较无肾病组明显升高(P均＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平、Th17细胞数与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)呈正相关(r=0.681,P＜0.01;r=0.426,P=0.034).结论 SLE患者体内IL-17蛋白分泌及基因表达水平存在明显异常,外周血Th17细胞比例亦显著升高,且与疾病活动性有明显相关,提示IL-17/Th17细胞可能在SLE发病中起着重要作用.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞B细胞刺激因子的异常表达及其临床意义

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中B淋巴细胞刺激因子(Blys)的表达情况,并探讨Blys的转录水平与狼疮活动性和狼疮肾炎(LN)的关系,分析Blys在狼疮发病中的作用。方法应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测活动期组(26例)和缓解期组(22例)SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)BlysmRNA的表达水平,以健康志愿者(20例)作为对照;同时将BlysmRNA的表达水平与患者临床检验指标进行相关分析;采用流式细胞仪技术检测20例SLE患者和16例健康对照膜结合型Blys蛋白水平。结果SLE患者PBMCsB1ysmRNA的表达明显高于正常人(P<0.01),活动期患者的表达高于缓解期(P<0.05);BlysmRNA的表达与狼疮活动指数(SLEDAl)和蛋白尿呈正相关,与补体C3、C4水平呈负相关;抗dsDNA抗体阳性和尿蛋白阳性的SLE患者BlysmRNA的表达高于阴性患者(P<0.05);而且SLE患者PBMCs中Blys的平均荧光强度也显著增加(P<0.05)。结论SLE患者PBMC的膜Blys和BlysmRNA表达均增强,且与狼疮活动性及尿蛋白呈正相关,提示Blys可能参与SLE及狼疮肾炎的发病过程,且有望成为临床观察和疗效评价的新指标。     

转化生长因子βⅡ型受体在狼疮肾炎患者外周血单个核细胞表达的意义

目的 探讨狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMCs)转化生长因子βⅡ型受体(TβR Ⅱ) mRNA表达水平及其与疾病活动性的关系.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测44=例LN患者(均为活动期患者)、21例其他非LN患者和40名健康对照组PBMCs中TβRⅡ mRNA的表达水平,LN患者中未使用与使用激素和(或)免疫抑制剂患者分别为16例和28例.结果 LN患者PBMC中T13R H mRNA水平1.7±1.0显著低于非LN组4.0±3.1及健康对照组4.1±2.5(P<0.01);LN患者中未使用激素和(或)免疫抑制剂组T13R H mRNA的表达水平1.3±1.0低于用药组2.0+0.9(P<0.05);LN患者PBMCs中的T13RII mRNA表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评分标准(r-0.309,P<0.05)及抗双链DNA抗体(r-0.401,P<0.01)呈显著负相关,与补体C3呈显著正相关(r=0.621,P<0.01).结论 LN患者PBMCs中的TβRⅡmRNA表达水平降低,TβRⅡ参与了LN的发病过程,并与疾病的活动性显著相关;应用激素和(或)免疫抑制剂可以提高TTβRⅡ mRNA的表达,减轻炎症损害.     

IKB激酶在系统性红斑狼疮患者中表达及与干扰素-α产生的关系

目的 研究系统性红斑狼疮(SEE)患者外周血白细胞中IKB激酶(IKK-α)、干扰素(IFN)-αmRNA的表达,并检测血浆中IFN-α的水平,以探讨SLE患者中IKK-α在IFN-α产生中的作用.方法 SYBR green dye I实时定量聚合酶链反应(PCR)方法检测外周血白细胞IKK-α和IFN-α的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清IFN-α的水平.结果 ①SLE患者外周血IKK-α mRNA表达高于对照组(P<0.05);在活动组SLE患者中IKK-α mRNA的表达高于非活动组SLE患者(P<0.01).②SLE患者IFN-αmRNA的表达低于对照组(P<0.01),IFN-α mRNA的表达在非活动组SLE患者中低于活动组SLE患者(P<0.01).③SLE患者血清中IFN-α的水平高于对照组(P<0.01),其中,活动组SLE患者血浆IFN-α水平显著高于非活动组患者(P<0.05);SLE患者血浆中IFN-α浓度与抗双链DNA(dsDNA)抗体呈正相关(P=0.001),与补体C3水平呈负相关(P=0.005).④SLE患者IKK-α mRNA的表达与血浆中IFN-α的水平呈正相关(P=0.001).结论 SLE患者IKK-α mRNA的表达明显增高,且与血浆中IFN-α的水平呈正相关;而血浆中IFN-α的水平与SLE的发病及病情活动相关,提示IKK-α可能在SLE的发病中发挥重要的作用.     

Activated peripheral blood mononuclear cells detected in lupus patients using cDNA coding for proliferating cell nuclear antigen

 The expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) mRNA in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with systemic lupus erythematosus (SLE) was measured by dot blot hybridization using a PCNA cDNA, and correlated with the percentage of PCNA-positive cells detected immunohistochemically using a monoclonal anti-PCNA antibody. PCNA-positive PBMCs were detected in 72.2% of SLE patients (n = 36), which is significantly more than among healthy controls. In addition, among those in whom PCNA expression was detected, the percentage of PBMCs expressing PCNA was significantly higher in SLE patients (mean 2.5% vs. 0.15%). The level of PCNA mRNA was increased in PBMCs from 83.3% of SLE patients, and was significantly correlated with the percentage of PCNA-positive cells (r = 0.54, P < 0.01) and with the disease activity score (r = 0.56, P < 0.01). A longitudinal study of two SLE patients confirmed that PCNA mRNA expression and the percentages of PCNA-positive cells varied in parallel with disease activity. Thus, an analysis of activated PBMCs from SLE patients using PCNA cDNA may be a useful method by which to estimate SLE disease activity. Received: January 25, 2002 / Accepted: March 30, 2002 Acknowledgments This work was supported in part by a 1999 research grant from the Mixed Connective Tissue Disease Research Committee of Japan, Ministry of Health and Welfare, and a 1999 Grant-in-Aid for Scientific research (C) (2), Ministry of Education. Correspondence to: Y. Takasaki     

Coordinate overexpression of interferon-alpha-induced genes in systemic lupus erythematosus

OBJECTIVE: To study the contribution of interferon-alpha (IFNalpha) and IFNgamma to the IFN gene expression signature that has been observed in microarray screens of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with systemic lupus erythematosus (SLE). METHODS: Quantitative real-time polymerase chain reaction analysis of healthy control PBMCs was used to determine the relative induction of a panel of IFN-inducible genes (IFIGs) by IFNalpha and IFNgamma. PBMCs from 77 SLE patients were compared with those from 22 disease controls and 28 healthy donors for expression of IFIGs. RESULTS: Expression of IFNalpha-inducible genes was significantly higher in SLE PBMCs than in those from disease controls or healthy donors. The level of expression of all IFIGs in PBMCs from SLE patients with IFNalpha pathway activation correlated highly with the inherent responsiveness of those genes to IFNalpha, suggesting coordinate activation of that cytokine pathway. Expression of genes preferentially induced by IFNgamma was not significantly increased in SLE PBMCs compared with control PBMCs. IFNalpha-regulated gene-inducing activity was detected in some SLE plasma samples. CONCLUSION: The coordinate activation of IFNalpha-induced genes is a characteristic of PBMCs from many SLE patients, supporting the hypothesis that IFNalpha is the predominant stimulus for IFIG expression in lupus.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞CD226基因表达的研究

目的 研究CD226基因在系统性红斑狼疮(SLE)患者与健康人外周血单个核细胞(PBMCs)的表达及其与CD226-Gly307Ser多态性、疾病活动度的相关性.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应检测SLE患者组90例及健康对照组30名PBMCs CD226 mRNA表达水平,同时应用单因素方差分析CD226基因表达量在3种基因之间是否存在差异,并且探讨其与临床指标的相关性以及CD226-Gly307Ser多态性的3种基因型进行Pearson相关性分析.结果 SLE组与健康对照组相比,CD226基因表达水平明显降低(P＜0.01);SLE组3种基因型之间的CD226 mRNA表达量差异无统计学意义(6.8±1.1与26.5±6.7,P＞0.05);红细胞沉降率、尿蛋白定量(24 h)、抗核抗体滴度、SLE疾病活动指数(SLEDAI)及血清补体C3水平与CD226基因表达均没有相关性.结论 在中国湖北汉族人群中,CD226-Gly307Ser多态性与SLE发病相关;T危险等位基因未影响CD226的mRNA表达水平,CD226分子在自身免疫性疾病中作用需进一步探讨.

Abstract：

Objective To investigate the expression level of CD226 mRNA in the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and explore the relation between the gene expression and disease activity, and the relation between the gene expression and Gly307Ser polymorphism of CD226 was also examined. Methods CD226 gene was measured with real-time polymerase chain reaction (qRT- PCR) in PBMCs. The expression levels of CD226 gene in PBMCs were compared between 90 SLE patients and 30 healthy individuals. One-way ANOVA and pearson correlation were used for statistical analysis. Results The expression level of CD226 in the PBMCs of SLE patients (6.8±1.1) was significantly decreased compared to healthy individuals (26.5±6.7) (P＜0.01), while there was no association between mRNA level and genotype (P＞0.05). No correlation between ESR, CRP, ANA, SLEDAI scores, C3 and the expression level of CD226 gene was discovered. Conclusion In Hubei Chinese Han population, CD226-Gly307Ser locus is associated with the development of SLE, while T allele does not impact the expression of CD226 gene, thus the role of CD226 gene in autoimmune diseases should be explored in the future.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞端粒保护蛋白TPP1及POT1基因表达的研究

目的 研究端粒保护蛋白TPP1及POT1基因在系统性红斑狼疮(SEE)患者与健康人外周血单个核细胞(PBMCs)的表达及其与SEE肾损、疾病活动度的相关性.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应检测SEE患者活动组28例、缓解组20例及健康对照组30例PBMCs TPP1、POT1 mRNA表达水平,并且与SEE患者临床指标进行相关性分析.结果 SLE组与健康对照组相比,TPP1及POT1基因表达明显降低(P均<0.01),活动组与缓解组均显著低于健康对照组(P均<0.05);POT1基因在活动组的表达显著低于缓解组(P<0.05);TPP1及POT1基因在肾损组的表达低于无肾损组(P<0.01),在SLE肾损患者中,尿蛋白定量与TPP1及POT1基因的表达水平呈负相关(P<0.05),尿白细胞与POT1基因呈负相关(P<0.05);红细胞沉降率、C反应蛋白、抗核抗体与TPP1、POT1基因的表达及SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分没有相关性;POT1 mRNA的表达与血清IsG、SLEDAI评分呈负相关(P<0.05,P<0.01),与补体C3呈正相关(P<0.01);TPP1 mRNA的表达与血清IgG、SLEDAI评分及C3没有相关性.结论 端粒保护蛋白TPP1和POT1基因在SLE的发病中发挥重要作用,其参与了SLE肾脏损害的病理过程,POT1可作为SEE疾病活动的有效的评判指标.     

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞DcR3 mRNA表达研究

目的研究凋亡相关基因诱骗受体3(DcR3)在系统性红斑狼疮患者(SLE)外周血单个核细胞(PBMCs)中的mRNA表达水平。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测38例SLE患者(21例活动期,17例缓解期)和15例正常人PBMCs中DcR3 mRNA的表达水平,分析其与狼疮活动指数(SLEDAI)的相关性。结果SLE患者PBMCs中,DcR3mRNA表达水平明显高于正常人(P<0.01),但疾病不同病期(活动期与缓解期)其表达水平无统计学差异(P>0.05);DcR3 mRNA表达与SLEDAI不相关(r=-0.024,P>0.05)。结论SLE患者PBMCs DcR3 mRNA表达增加,提示DcR3可能与SLE免疫细胞凋亡异常和免疫调节的紊乱有关,参与了SLE的发病过程。