双龙方对大鼠心肌缺血/再灌注后无复流影响的研究

目的探索双龙方对大鼠心肌缺血/再灌注后无复流的影响。方法将200只大鼠随机分为5组,每组40只:模型组、假手术组、双龙方5 g生药/kg组、双龙方2.5 g生药/kg组、双龙方1.25 g生药/kg组。各组大鼠在造模前连续灌胃5 d,模型组和假手术组灌胃同体积蒸馏水。给药结束后,对大鼠冠状动脉左前降支进行结扎,假手术动物只穿线不结扎。结扎后4 h,实施再灌注。再灌注4 h后,采用小动物高分辨率超声影像系统对各组大鼠行超声心动图检查和心肌声学造影;超声检查结束后,于腹主动脉取血,分离血清,测定血清cTnT、CRP、CK、LDH水平;大鼠取血完毕后,取出心脏,切片,分别用硫磺素S和硝基四氮唑蓝(N-BT)染色评估心肌无复流面积和梗死面积。结果与模型组比较,双龙方组的心肌无复流面积和梗死面积均明显减小(P<0.01或P<0.05);心脏B超显示心功能指标明显改善,左心室前壁缺血区厚度明显增加,收缩末期左心室内径和容积明显降低,短轴缩短率、射血分数和每搏输出量明显提高(P<0.01或P<0.05);心肌声学造影显示心肌血液灌注明显改善,左心室前壁心肌组织的微血管密度、血流速和血液灌注量明显增加(P<0.01或P<0.05);心肌损伤相关的血液学指标未见明显改善,血清cTnT、CRP、CK、LDH水平未见明显变化。结论双龙方可以明显减小大鼠的心肌梗死面积和无复流面积,可明显对抗心肌缺血/再灌注后的无复流,改善受损心肌组织的血液灌注,改善心功能,抑制心肌损伤。     

天香丹胶囊通过调节G蛋白偶联雌激素受体保护心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨天香丹胶囊(TXD)对预处理去卵巢雌性合并心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用与其可能机制。方法 将60只SD雌性大鼠摘去卵巢后随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、低、中、高3个剂量实验组，每组10只。阳性对照组灌胃0.8 mg·kg^-1雌二醇溶液，低、中、高剂量实验组分别灌胃给予0.2、0.4和0.8 g·kg^-1天香丹溶液，假手术组、模型组灌胃等量双蒸水。连续处理60 d。末次给药12 h后建立心脏缺血再灌注模型；其中假手术组只穿线不结扎，另取10正常SD雌性大鼠为正常组(不做任何处理)。用酶联免疫吸附试验法检测血清中大鼠心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、三磷酸肌醇(IP3)的含量；用微量法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH);用MTB微板法检测心肌组织中Ca²⁺浓度；用苏木精-伊红染色检测大鼠心肌组织病理变化；用蛋白质印迹法检测心肌组织中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)、磷脂酶C(PLC-β)、三磷酸肌醇受体(IP3R)以及肌浆网钙ATP酶(SERCA2)蛋白表达水平。结果 正常组、假手术组、模...     

阿托伐他汀对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的 观察短期应用阿托伐他汀对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法将48只SD大鼠随机等分为假手术组(0.9%氯化钠溶液2 ml/d)、缺血再灌注组(0.9%氯化钠溶液2 ml/d)、阿托伐他汀组(阿托伐他汀20 mg·kg-1·d-1)、阿托伐他汀+L-硝基精氨酸甲酯组(阿托伐他汀20 mg·kg-1·d-1、L-硝基精氨酸甲酯15 mg/kg).灌喂3 d后制作大鼠在体心肌缺血再灌注模型.L-硝基精氨酸甲酯于缺血前15 min尾静脉注射.再灌注后测定血清一氧化氮(NO)水平、心肌组织总超氧化物歧化酶(TSOD)活力及丙二醛(MDA)水平;Hoechst荧光染色观察凋亡细胞形态学变化;检测凋亡蛋白Fas表达及心肌细胞凋亡指数(AI).结果 阿托伐他汀组与缺血再灌注组比较,NO水平、TSOD活性、MDA水平、Fas蛋白阳性表达率及AI间差异均有统计学意义(P＜0.01).阿托伐他汀+L-硝基精氨酸甲酯组与阿托伐他汀组比较,NO水平、TSOD活性、MDA水平、Fas蛋白阳性表达率及AI间差异均有统计学意义(P＜0.01),与缺血再灌注组比较,NO、MDA水平间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 阿托伐他汀能够减轻缺血再灌注造成的心肌细胞损伤,短期应用阿托伐他汀可清除氧自由基,干预Fas蛋白表达,从而减少心肌细胞凋亡;一氧化氮合酶(NOS)-NO途径可能是阿托伐他汀抑制细胞凋亡的途径之一.     

黄连素对大鼠心肌缺血再灌注所致心肌损伤的保护作用

目的探讨黄连素对缺血再灌注所致心肌损伤的保护作用。方法 60只雄性健康SD大鼠随机分为5组,即对照组、模型组、阳性对照组及黄连素低[75 mg/(kg·d)]、高[150 mg/(kg·d)]剂量组。黄连素连续灌胃给药14 d后,除对照组外,其余各组结扎冠状动脉左前降支建立大鼠心肌缺血再灌注模型,监测心电图,记录心律失常评分;检测血浆中心钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、心肌肌钙蛋白-I(c Tn-I)浓度;HE染色与Masson染色方法检测心肌机构损伤情况。结果黄连素预防给药可缩短缺血再灌注所致心律失常恢复正常的时间,同时显著抑制血浆中ANP、BNP和c Tn-I水平的上升,改善心肌结构。结论黄连素对缺血再灌注所致的心肌损伤具有保护作用。     

氯氨酮对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡和Fas蛋白、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨氯胺酮作用下大鼠实验性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡与Fas及Bcl-2蛋白表达的变化及与心肌组织损伤的关系,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法:以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血再灌注模型。32只大鼠随机分成假手术组(假手术4.5 h)、缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4 h)、低剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4h)及高剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注个4 h)。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,S-P免疫组化法分别检测Fas与Bcl-2蛋白水平变化,做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果:心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数及Fas蛋白阳性染色指数与Bcl-2蛋白阳性染色指数均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少Fas和Bcl-2蛋白阳性细胞表达;心肌缺血再灌注后心肌组织呈大小不一的灶性坏死,坏死周围有炎性细胞浸润,氯胺酮作用后坏死减轻,低剂量氯胺酮作用更明显。结论:心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡、Fas基因的蛋白与Bcl-2蛋白表达量均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少细胞Fas和Bcl-2蛋白阳性表达,从而减轻心肌损伤,且低剂量氯氨酮作用更明显。     

氯沙坦对大鼠心肌缺血后心脏ACE2蛋白表达的影响

目的探讨氯沙坦对心肌缺血大鼠心肌组织中ACE2表达水平的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠60只(体重220²40 g),通过部分结扎冠状动脉前降支建立大鼠心肌缺血模型,将术后24 h存活的42只大鼠随机分为14 d模型组、28 d模型组、14 d氯沙坦大剂量组、14 d氯沙坦小剂量组、28 d氯沙坦大剂量组、28 d氯沙坦小剂量组、假手术组,每组6只。术后24 h开始灌胃给药,小剂量氯沙坦组10 mg/(kg·d)灌胃给药,大剂量氯沙坦组30 mg/(kg·d)灌胃给药,假手术组及模型组给予等量生理盐水灌胃;分别于用药14 d、28 d后,行HE染色,明确心肌组织缺血病变情况,Western blot法检测左心室缺血区心肌组织ACE2蛋白表达的水平。结果模型组大鼠缺血心肌组织中ACE2蛋白表达量较假手术组升高(P<0.01),呈时间依赖性。氯沙坦剂量依赖性增加ACE2蛋白的表达量(P<0.05)。结论氯沙坦可增加心肌缺血后大鼠心肌组织中ACE2的表达量,进一步改善心肌缺血状态。     

黄芪甲苷保护大鼠缺血/再灌注心脏的内质网应激机制研究

目的研究黄芪甲苷保护缺血/再灌注心脏的内质网应激(ERS)机制。方法建立离体心脏缺血/再灌注模型,♂Wistar大鼠结扎冠状动脉进行心肌缺血30 min/再灌注120 min,随机分成假手术组、缺血/再灌注组、ERS抑制剂牛磺熊脱氧胆酸(TUDCA)组、黄芪甲苷组;Western blot检测缺血期及再灌注期ERS分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达;激光扫描共聚焦显微镜免疫荧光化学染色法检测GRP78的表达;TTC法测定心肌梗死面积;HE染色观察心肌组织形态学改变。结果与假手术组相比,缺血期GRP78表达没有明显增加,再灌注期GRP78表达明显增加,黄芪甲苷能够模拟TUDCA明显抑制再灌注期GRP78的表达、减少心肌梗死面积、改善心肌组织的形态,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ERS发生于再灌注期而不是缺血期,黄芪甲苷通过抑制ERS保护大鼠缺血/再灌注心脏。     

冠心宁注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察冠心宁注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨冠心宁抗心肌缺血再灌注损伤的保护机理.方法:雄性SD大鼠30只随机分成假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、冠心宁治疗组(G组),建立大鼠在体心肌缺血再灌注模型:C组丝线穿过冠状动脉前降支但不结扎,I/R、G组通过结扎心脏左冠状动脉前降支40 min,再灌注60 min制作缺血再灌注损伤动物模型.缺血前30 min,G组经腹腔注射冠心宁注射液10.0 ml·kg-1,余两组注射等量0.9%氯化钠注射液.测定再灌注60 min后心肌超氧化物岐化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,同时取每组大鼠心肌检测梗死面积,电镜下观察缺血区心肌超微结构变化.结果:与I/R组相比,G组再灌注后60 min心肌MDA含量降低(P<0.01),SOD活性增高(P<0.01),梗死面积较小(P<0.01),心肌超微结构受损较轻.结论:冠心宁注射液对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用,其机制与其增强心肌抗氧化作用有关.     

参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤时Fas/FasL表达的影响

目的:探讨参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤(PIRI)时Fas/FasL配体(Fas/FasL)表达的影响。方法:采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔30只,随机分为假手术对照组(sham,n=10)、肺缺血-再灌注组(I-R,n=10)和肺缺血-再灌注加参麦注射液组(SM,n=10)。分别于再灌注3h取左肺组织,观察Fas/FasLmRNA定位表达、凋亡指数(AI)、肺组织湿干重比(W/D)、肺损伤组织学定量评价指标(IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果:SM组Fas/FasLmRNA在肺小动脉内(外)膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮呈弱阳性表达,明显低于I-R组(P<0.05);AI、W/D和IQA值显著低于I-R组(P<0.01和P<0.05);肺组织形态学异常改变程度减轻。结论:参麦注射液可下调肺组织Fas/FasLmRNA的表达而减轻细胞凋亡,对PIRI发挥积极的防治作用。     

橙皮苷对缺血再灌注损伤模型大鼠心肌组织保护作用的研究

目的:研究橙皮苷对缺血再灌注损伤模型大鼠心肌组织的保护作用。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,60只Wistar大鼠均分为对照、模型和橙皮苷高、中、低剂量组。光镜下观察心肌组织病理变化,通过免疫组化法检测Fas、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达情况。结果:光镜下对照组心肌组织无病理损伤;模型组心肌组织呈严重炎性细胞浸润,并见多处坏死;橙皮苷高、中、低剂量组心肌细胞变性坏死程度显著减轻。与对照组比较,模型组心肌组织Fas和Caspase-3蛋白表达显著增强(P<0.05);与模型组比较,橙皮苷高、中、低剂量组心肌组织Fas、Caspase-3蛋白表达均显著下降(P<0.05)。结论:橙皮苷预处理对大鼠冠状动脉结扎后再灌注心肌损伤具有一定的保护作用。     

雷米普利对实验性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和Fas Fas配体基因表达的影响

目的探讨实验性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡和心肌组织Fas、Fas配体(FasL)蛋白及信使核糖核酸(mRNA)表达的变化及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)干预的影响及意义。方法将30只健康Wistar大鼠,随机分为假手术组、慢性心力衰竭组和雷米普利组各10只。通过缩窄Wistar大鼠腹主动脉建立慢性心力衰竭模型,以雷米普利进行干预,对照观察血流动力学、心肌细胞凋亡、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达的变化。结果与假手术组相比,慢性心力衰竭组左心室舒张末压、心率显著升高(P<0.01);收缩压、舒张压、平均动脉压、左心室收缩压、左心室内压最大收缩率、左心室内压最大舒张率显著降低(P<0.01)。雷米普利组舒张压、左心室收缩压、左心室舒张末压、心率显著低于慢性心力衰竭组(P<0.01),左心室内最大收缩率、左心室内最大舒张率显著高于慢性心力衰竭组(P<0.01)。慢性心力衰竭组心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达水平显著低于慢性心力衰竭组(P<0.05)。结论慢性心力衰竭的发生、发展过程中有心肌细胞凋亡的变化及Fas/FasL系统的参与;心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas、FasL蛋白及其mRNA表达水平增高,雷米普利长期干预慢性心力衰竭,能够降低细胞凋亡及Fas、FasL基因的表达,可能与其减少Fas/FasL系统介导的细胞凋亡的发生、改善心功能有关。     

肾茶对UUO大鼠肾组织FaS、FasL表达的影响

目的：探讨肾荼对UUO大鼠肾组织Fas（Fas蛋白）、FasL（FasL蛋白）表达的影响。方法：将清洁级SD大鼠随机分为模型组、假手术组、肾茶组。模型组、肾茶组分离、结扎左侧榆尿管,并离断;假手术组只分离左侧榆尿管,不结扎、离断。肾茶组给予剂量为8g／kg的肾茶煎剂灌胃,模型组、假手术组给予等体积的生理盐水灌胃,分别于术后3d,7d,14d在每组大鼠中随机取8只,麻醉后心脏取血测定血尿素氮、血肌酐,处死大鼠,摘取左侧（术侧）肾脏后采用免疫组化方法检测大鼠肾组织中Fas和FasL的表达。结果：同模型组相比,术后3d、7d、14d肾茶组血尿素氮、血肌酐下降,肾问质纤维化程度减轻,Fas、FasL表达下调,各组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：肾茶能够延缓单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化程度,其疗效可能是使进行性纤维化的肾组织Fas、FasL的表达降低。     

Mitochondrial- and Fas-L-mediated pathways involved in quinestrol induced spermatogenic apoptosis in adult rat testes

The pathways involved in quinestrol-induced spermatogenic apoptosis were studied in adult male rat by using daily intragastric administration of 0.01?mg/kg, 0.1?mg/kg and 1?mg/kg body weight quinestrol for two consecutive weeks. The immunohistochemistry staining was performed to measure the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA), caspase-3, Bax, Bcl-2, Fas and FasL. The results showed that testes weights and the size of seminiferous tubule (ST) decreased as well as the organization of the ST changed significantly after treatment with 1?mg/kg quinestrol. The number of germ cells expressing caspase-3, Bax, Fas and FasL markedly increased whereas the numbers of cells expressing Bcl-2 and PCNA significantly decreased in the group treated with quinestrol at 1?mg/kg compared with the control. The results suggest that quinestrol induced abnormal spermatogenesis through the mitochondrial- and Fas-L-mediated pathways after quinestrol exposure in male rat.     

莪术醇对子宫内膜异位症模型大鼠炎症因子的影响

目的 研究莪术醇对子宫内膜异位症（EMS）模型大鼠腹腔液中炎症因子的影响，探讨本药对EMS的治疗 机制。方法 取成年雌性SD大鼠，以自体移植法制备EMS模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、莪术醇组（20 mg/kg），另设假手术组，每组10只。各组大鼠每日灌胃给药1次，连续4 周。末次给药后，大鼠麻醉，收集腹腔液，检 测其中巨噬细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、巨噬细胞游走抑制因子（MIF）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β 和IL-6含量，假手术组大鼠取在位子宫，EMS大鼠取异位子宫内膜组织，HE染色观察病理变化，并以免疫组化染色 检测内膜组织中TNF-α表达，Real-time PCR检测内膜组织中成纤维细胞生长因子2（FGF-2）mRNA表达。结果 与 模型组相比，莪术醇组大鼠异位内膜萎缩，腹腔液中MCP-1、MIF、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和内膜组织中TNF-α表 达、FGF-2 mRNA表达水平均明显降低（P＜0.05）。结论 莪术醇能够改善实验性大鼠EMS，其作用机制可能与抑制 腹腔微环境中炎症反应有关。     

p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中的作用研究

目的探讨p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在大鼠缺血性脑损伤中的作用。方法①制作大鼠全脑缺血模型,免疫印迹法检测假手术组、脑缺血复灌6 h、12 h、1 d、3 d组p-p38MAPK、p38MAPK蛋白表达。②免疫印迹法检测假手术组、缺血复灌组、溶剂对照组和SB203580组p-p38MAPK、p38MAPK、FasL、Fas和Caspase-3蛋白表达。结果①与假手术组相比,脑缺血再灌注6 h、12 h、1 d、3 d组p-p38MAPK蛋白表达水平逐渐升高,于1 d达高峰(P均<0.05)。②与缺血复灌组和溶剂对照组相比,SB203580组p-p38MAPK、FasL和Caspase-3表达水平显著降低(P均<0.05)。结论 p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中发挥了重要作用。     

康脑液对脑缺血大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响

目的观察康脑液对脑缺血再灌注损伤大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响。方法线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(2.7 mg·kg-1)、康脑液高、中、低(24,12,6 g·kg-1.d-1)剂量组;于缺血后2 h再灌注3,6,12,24,48 h后处死,用免疫组化法观察Fas、FasL蛋白的表达。结果与模型组比较,康脑液高、中、低剂量组均能明显下调Fas、FasL蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论康脑液可通过抑制Fas、FasL蛋白的表达,减轻脑缺血后神经功能损伤,从而保护脑组织。     

地塞米松对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL系统表达的影响

目的 探讨细胞凋亡与急性肺损伤的发生、发展的关系以及地塞米松在全身炎症反应及急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用机制及意义。方法 通过复制内毒素性大鼠ALI模型、采用TUNEL法、原位杂交、SaRT-PCR以及免疫组化等技术观察ALI肺组织细胞凋亡的变化、Fas/FasL系统mRNA和蛋白表达的改变以及地塞米松对细胞凋亡及Fas、FasL表达的影响。结果 ALI早期肺组织细胞凋亡明显增加:Fas、FasL mRNA和蛋白质表达明显上调,地塞米松可明显抑制大鼠ALI血清TNFα释放、抑制肺部炎症反应;明显抑制LPS诱导的肺组织细胞凋亡,并明显下调Fas、FasL mRNA和蛋白质的表达。结论 肺组织细胞凋亡及Fas/FasL系统表达上调,可能参与大鼠ALI早期的发病机制;地塞米松可通过抑制炎症介质释放,抑制Fas/FasL系统的活化,阻断、调控肺组织靶细胞调亡,而减轻肺组织损伤。     

Elevated serum soluble Fas ligand is a promising marker of testicular toxicity induced by epirubicin in rats

To investigate the role of the Fas/Fas ligand (Fas/FasL) system in testicular toxicity induced by epirubicin (Epi) and to correlate the system with the serum levels of soluble Fas and Fas ligand (sFas/sFasL), epirubicin was intraperitoneally administered to male Sprague–Dawley male rats at doses of 1.2 mg/kg once a week for 10 weeks, and genital organ weights and histopathology were examined. Fas and FasL expression in rat testis were examined by immunohistochemistry. Apoptosis was assessed by TUNEL assay. Expression levels of Fas and FasL were analyzed by RT-PCR and Western blotting. Serum sFas/sFasL levels were determined by ELISA. The results show that the testicular toxicity of Epi involved germ cell apoptosis. Fas and FasL protein expression levels were markedly increased in Epi-treated rat testes, as was expression of sFasL. In particular, increasing serum sFasL levels were positively correlated with elevated expression levels of FasL and sFasL in the testes of Epi-treated rats, revealing serum sFasL to be a promising marker of testicular toxicity after cytotoxic chemotherapy.