肺癌淋巴结微转移分子学检测的预后价值

目的 :探讨RT PCR法检测淋巴结肺癌微转移的预后价值 .方法 :同时运用RT PCR法和常规病检法对 4 0例原发性肺癌患者区域性淋巴结 (n =2 6 1 )转移灶进行测定 ,并且分析两种检测结果对术后无瘤生存期的影响 .生存分析用Kaplan Meier法 ,预后分析用COX比例风险模型 .结果 :通过2 6 (4～ 6 0 )mo的中位观察期发现 ,存在淋巴结微转移的患者术后无瘤生存期显著短于无微转移者 (P <0 .0 1 ) .多因素分析显示有无淋巴结微转移 (mN)可作为一项独立的预后因素(P <0 .0 1 ) ,而病检法测定结果 (pN)对预后无显著影响 (P >0 .0 5 ) .结论 :淋巴结微转移灶的存在具有预后提示作用 .淋巴结微转移灶的分子学检测可作为肺癌分期的补充     

非小细胞肺癌患者淋巴结分子分期的临床病理研究

目的探讨逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测非小细胞肺癌淋巴结微转移的可行性。方法术中将每枚淋巴结平均分成两半,一半淋巴结进行HE染色病理检查;另一半淋巴结,按区域混合,用于RT-PCR。如果一枚淋巴结HE染色证实有显性转移,该患者同一区域的其他淋巴结不再接受RT-PCR。结果（1）25例肺癌患者中共195枚淋巴结接受了HE染色检查,9例共30枚淋巴结中发现有显性转移,无一枚淋巴结检出微转移。（2）39组HE染色阴性的区域淋巴结混合组织中,11组RT-PCR呈阳性。（3）16例常规病理PN现了0期患者中,6例肺门淋巴结出现了微转移;另9例常规病理PN1期患者中,5例出纵隔淋巴结的微转移,差异有统计学意义（x^2=54．063,P=0．0043）。结论（1）HE染色病理能准确地检测出非小细胞肺癌淋巴结中的显性转移灶,而不易发现隐匿性微转移灶。（2）RT-PCR能提高非小细胞肺癌淋巴结微转移的检出率,并可对部分Ⅰ、Ⅱ期患者重新进行分子分期。     

VEGF在Ⅰ期非小细胞肺癌患者淋巴结表达及临床意义

目的通过检测Ⅰ期非小细胞肺癌（NSCLC）患者淋巴结中血管内皮生长因子（VEGF）的表达,确定微转移灶的存在及其与肿瘤复发、转移和预后的关系。方法选择1999～2007年大连市第五人民医院胸外科经过根治性手术（肺叶或全肺切除、系统性淋巴结清扫术）的常规病理检查证实为Ⅰ期NSCLC患者33例的246枚淋巴结。所有患者术前均未接受过放疗、化疗,均有详细完整的临床随访资料。本次研究采用LSAB免疫组化VEGF染色,进行光镜病理学检查。结果33例患者246枚淋巴结中有10例（30．3％）患者的12枚（4．9％）淋巴结中VEGF阳性表达。有或无VEGF阳性表达的患者复发转移率差异有统计学意义（80．0％vs26．1％,χ^2=7．015,P=0．016）,VEGF阳性表达患者的中位生存期显著短于VEGF阴性表达者（21个月vs．60个月,P=0．016）;Cox单因素风险模型（P=0．004）和多因素风险模型（P=0．004）均显示存在淋巴结微转移的Ⅰ期NSCLC患者预后不良。结论VEGF免疫组化染色检测淋巴结微转移与Ⅰ期NSCLC复发转移相关,有助于更加精确的分期,可以作为Ⅰ期NSCLC患者根治术后的一个预后指标,并为其综合治疗提供理论依据。     

RT-PCR法检测食管鳞癌患者淋巴结微转移的预后意义

目的 评价逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测淋巴结食管癌微转移的预后意义。方法 同时运用RT—PCR法和常规病检法对23例食管鳞癌患者区域淋巴结(n=104)转移灶进行测定，并且分析两种检测结果对术后生存的影响。生存分析用Kaplan—Meier法，预后分析用COX比例风险模型。结果 寿命表法估计术后5年生存率，mN阴性者为57．14％，mN阳性者为15．38％(P=0．0103)。通过30个月(2～60个月)的中位观察期发现，存在淋巴结微转移的患者术后无瘤生存期显著短于无微转移者(Log-rank时序检验，P=0．0016)。多因素分析显示有无淋巴结微转移(mN)可作为一项独立的预后因素(P=0．0210)，病检法测定结果(pN)对预后无显著影响(P=0．1031)。结论 RT-PCR法检测淋巴结微转移结果对食管鳞癌患者术后生存有显著影响，同时为术后辅助治疗提供依据。     

转移性非小细胞肺癌患者不同生存期预后分析

目的 通过比较晚期非小细胞肺癌不同生存期的患者一般特征,分析影响晚期非小细胞肺癌的长期生存的因素.方法 回顾性分析浙江省肿瘤医院2005～2010年初诊为晚期非小细胞肺癌的251例患者.对生存期＜6个月与生存期＞2年的两组患者年龄、性别、吸烟、病理分型、治疗方法、TN分期、转移部位数、PS评分、是否脑转移、并发症等方面进行Logistic回归分析.应用Kaplan-Meier法及Log-rank检验进行生存比较.COX多因素分析对全组251例患者进行多因素分析.结果 251例患者中位生存时间为10.48个月,1年生存率、2年生存率、5年生存率分别为17.53％、10.4％、2.79％.共44例(17.53％)患者生存期超过2年,其中超过5年的患者为7例(2.79％),74例(29.48％)患者生存期短于6个月.生存期＜6个月与＞2年的患者在性别、病理、治疗方法、N分期、转移部位数、PS评分、脑转移方面差异具有显著性.COX多因素分析显示,淋巴结转移为NO或N1 (P=0.000),PS评分为0～1(P=0.000),多学科治疗(P=0.01),单发肺内或骨转移(P=0.00),非吸烟(P=0.019)是患者长期生存的有利因素.结论 淋巴结转移为N0或N1、PS评分为0～1、单一肺内或骨转移、接受多种治疗方法、女性、腺癌可能作为预测晚期非小细胞肺癌长期生存的因素.     

胃癌淋巴结微转移的意义

目的 :研究胃癌淋巴结微转移的意义。方法 :用常规 HE和免疫组化 CK1 9检测 10 0例胃癌淋巴结转移。结果 :10 0例胃癌中 ,76例淋巴结明显转移 ,6例淋巴结微转移 ,18例无转移。在 P2 7Kip1 和 P5 3表达及 5年生存期上胃癌淋巴结微转移组与转移组比较差异均有显著性 (P<0 .0 5 ) ;相反 ,微转移组与无转移组比较差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :胃癌淋巴结微转移对预后因子 P2 7Kip1 和 P5 3蛋白表达和 5年生存期影响不大 ,依据免疫组化检测胃癌淋巴结微转移灶方法敏感可行 ,但对胃癌患者的临床治疗与预后意义不大。     

增殖细胞核抗原和p53在肺癌组织中的表达及临床意义

目的 研究增殖细胞核抗原（PCNA）和p53在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学SABC法检测肺癌患者肿瘤组织中PCNA和p53的表达，并探讨其与肿瘤发生及恶性行为之间的关系。结果 肺癌组织中p53蛋白阳性表达率为70％，较正常组有显著性差异（P＜0．01），p53蛋白阳性表达率在淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者（P＜0．01），在不同组织学分级和病理分期的肺癌组织间p53的表达无差异性。肺癌组织PCNA标记指数随组织学分级和病理分期的增高而增高（P＜0．01），有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高（P＜0．01），p53阳性表达者PCNA标记指数显著高于p53表达阴性者（P＜0．01）。结论 p53蛋白表达与肺癌的发生和淋巴结转移密切相关；PCNA与肺癌的生长及恶性行为有关。     

检测非小细胞肺癌患者纵隔淋巴结微转移的临床意义

目的:采用分子生物学方法检测非小细胞肺癌(Non-small Cell Lung Cancer,NSCLC)患者纵隔淋巴结微转移情况,分析其与患者临床特征之间的关系,为临床合理的纵隔淋巴结廓清范围提供依据,使术后外科病理分期更加精确,以更好地拟定术后治疗方案。方法:随机选取2006年11月~2007年12月间在内蒙古医科大学附属医院胸心外科行肺癌根治术后的37例NSCLC患者为对象,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测其术后常规病理学检查阴性的纵隔淋巴结中MUC1 mRNA基因的表达,以明确是否存在微转移灶。分析非小细胞肺癌患者纵隔淋巴微转移与原发肿瘤大小、年龄、性别、吸烟、肿瘤位置、组织学类型、分化程度、外科病理分期(P-FNM)、淋巴结大小、淋巴结融合之间的相关性。结果:在37例患者常规病理学检查阴性的50枚纵隔淋巴结中,13例患者的20枚淋巴结检出微转移灶,阳性率为35.1%(13/37),其中P-N0期纵隔淋巴结微转移率为29.2%(7/24),P-N1期为46.2%(6/13)。微转移与原发肿瘤大小、年龄、性别、吸烟之间无明显相关性(P>0.05),但与肿瘤位置、组织学类型、分化程度、分期、淋巴结大小、淋巴结融合情况等有一定的相关性(P<0.05)。外科病理分期(p-TNM)与分子TNM分期方法之间总符合率为64.9%,两者之间有统计学差异(P<0.05)。结论:RT-PCR方法检测纵隔淋巴结MUClmRNA基因对非小细胞肺癌患者的预后及指导术后治疗有临床应用价值,并有望成为非小细胞肺癌患者手术后精确TNM分期一个重要的手段,可使目前的肿瘤TNM分期更加精确。     

胃癌淋巴结微转移的临床研究

目的　研究胃癌淋巴结微转移的情况及意义。方法　应用免疫组化方法 ,细胞角蛋白CK检测阴性淋巴结。结果　 4 6例胃癌患者周围阴性淋巴结 6 2 4枚 ,4例患者 8枚淋巴结发现CK阳性细胞。弥漫型胃癌微转移率 (5 0 % )明显高于肠型胃癌 (4 76 % ) ,2者差异有显著性 (P <0 0 5 )。淋巴结微转移与肿瘤分期、浸润深度、部位、淋巴结转移、肿瘤大小及预后无关。结论　 (1)胃癌周围阴性淋巴结存在微转移灶 ,为准确的临床分期和制定辅助治疗方案提供可能 ;(2 )微转移与预后无明显关系。     

肺癌组织及淋巴结转移灶中P-糖蛋白的表达

目的 :探讨P 糖蛋白 (P gp)在非癌肺组织、肺癌原发灶及肺癌淋巴结转移灶中的表达及相互关系。方法 :用免疫组织化学方法检测 4 0例术前未进行化疗的肺癌原发灶、肺癌淋巴结转移灶及 10例非癌肺组织P 糖蛋白的表达。结果 :4 0例肺癌原发灶P 糖蛋白阳性表达 2 3例 ,其淋巴结转移灶P 糖蛋白阳性表达 18例 ,阴性表达 5例 ;肺癌原发灶P 糖蛋白阴性表达 17例 ,其淋巴结转移灶均无阳性表达。 10例正常肺组织P 糖蛋白的表达均阴性。肺癌原发灶P 糖蛋白的表达与淋巴结转移灶P 糖蛋白表达有关 (P <0 0 1) ,与肺癌组织学分型无关(P >0 0 5 )。结论 :肺癌原发灶与肺癌淋巴结转移灶中P 糖蛋白的表达有关。非癌肺组织中P 糖蛋白的表达阴性。     

Clinical pathology of nodal micrometasteses in non-small cell lung cancer

ObjectiveTo explore whether the conventional pathologic stages of some non-small cell lung cancer (NSCLC) patients were underestimated.Methods195 lymph node samples were taken from 25 NSCLC patients during the operations. Firstly, each resulting tissue block was processed for routine paraffin embedding. Then the 6～10 serial sections were chosen, each 5 μm thick, from every paraffin block of the lymph node. Finally, the first and the second last sections of each lymph node were stained by hematoxylin eosin (HE), and the other serial sections were used for the immunohistochemical (IHC) staining examination with the monoclonal antibody against cyokeratin 19.ResultsWith HE staining, 30 of the 195 regional lymph nodes revealed dominant nodal metastases, and none showed micrometastases. IHC staining was performed on 135 lymph nodes that were identified as free of metastases by HE staining, 31 showed micrometastases; none showed gross nodal metastases. There was a significant difference between HE staining staging and IHC staining staging (P<0.05).ConclusionConventional HE staining can accurately detect gross nodal metastases in the lymph nodes of NSCLC patients, but is unfit for detecting lymph nodal micrometastases. IHC staining analysis can significantly facilitate the detection of occult micrometastatic tumor cells in lymph nodes, and its assessment of nodal micrometastases can provide a refinement of TNM stage for NSCLC patients. Our results provide a rationale for extensive lymph nodes sampling.     

免疫组织化学和RT-PCR法检测胃癌淋巴结微转移的临床研究

目的：评价胃癌淋巴结微转移的临床意义。方法：对55例胃癌根治性手术切除的淋巴结转移资料进行回顾性分析，共切取淋巴结1225枚，每例平均切除13～49枚。采用免疫组织化学（IHC）法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法同步检测细胞角蛋白20（CK20）和癌胚抗原（CEA）的表达，对比分析胃癌淋巴结微转移与临床病理参数和预后的关系。结呆：IHC和RT-PCR法检测淋巴结的转移率从HE染色的74．5％分别上升为83．6％和90．9％；IHC和RT-PCR法检测微转移度分别为7．4％和17．3％；经IHC和RT-PCR法检测重新分期率分别为20．0％和40．0％；淋巴结微转移的发生与肿瘤大小、部位无关，与肿瘤Lauren分型和浸润深度密切相关；肿瘤Lauren分型为独立预后因素。结论：IHC和RT-PCR法是检测胃癌淋巴结微转移的有效手段，能够准确判断临床分期，为制定治疗方案提供依据；微转移与胃癌的预后无明显关系。     

肺癌淋巴结微转移诊断的对比研究

目的探索检测非小细胞肺癌淋巴结微转移的新途径。方法术中将25例非小细胞肺癌患者共195枚淋巴结平均分成两半,一半淋巴结用于常规病理和免疫组织化学染色;另一半淋巴结,按区域混合,用于逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）。如果一枚淋巴结常规病理证实有显性转移,该患者同一区域的其他淋巴结不再接受免疫组织化学染色或RT-PCR检测。结果135枚常规病理阴性的淋巴结接受了免疫组织化学染色,31枚淋巴结显现肿瘤微转移。39组常规病理阴性的区域淋巴结混合组织中,11组RT-PCR检测呈阳性。免疫组织化学染色和RT-PCR检测肺癌淋巴结微转移,结果间存在一致性（U=7．682,P=0．0001）。结论免疫组织化学染色能提高非小细胞肺癌淋巴结微转移的检出率,并可对部分Ⅰ、Ⅱ期患者重新进行TNM分期。RT-PCR在检测肺癌淋巴结微转移方面,与免疫组织化学染色价值相当。RT-PCR可以简化淋巴结微转移的检测。     

肝外胆管癌淋巴结微转移的检测及其对预后的影响

目的 观察CK19和CK20在肝外胆管癌(EHCC)淋巴结微转移中的表达,探讨淋巴结微转移与临床病理特征和CA19-9、癌胚抗原(CEA)的关系,以及淋巴结微转移对预后的影响.方法 选取59例行手术切除EHCC患者的279枚淋巴结,分别以CK19、CK20单克隆抗体进行免疫组化染色和常规HE染色,确定有无淋巴结转移与微转移,并与各病例的临床病理及随访资料进行比较,分析微转移与临床病理因素的关系及对生存率的影响.结果 59例患者的淋巴结转移率,HE诊断仅23.72%(14/59),而CK诊断为35.59%(21/59,P<0.05);淋巴结转移发生率由HE染色的5.37%提高到CK染色的13.98%(P<0.05);在常规HE染色诊断没有淋巴结转移的45例患者中,微转移的发生率为15.56%(7/45).淋巴结微转移术前血清CA19-9浓度显著高于无淋巴结微转移者(对照组)(P<0.05);淋巴结微转移与血清CA19-9浓度呈正相关(r_s=0.371,P<0.05).对12个因素进行Logistic回归分析,结果显示肿瘤的组织学类型和淋巴浸润对淋巴结微转移有重要影响(P<0.05).结论 CK免疫组化染色能检测出HE染色阴性淋巴结中隐匿的癌细胞,淋巴结微转移能够更准确地判断EHCC患者的预后.     

多株单克隆抗体检测胃癌阴性淋巴结微转移的研究及临床意义

目的:探讨单克隆抗体联检在诊断胃癌阴性淋巴结微转移中的应用价值。方法:选择鼠抗人细胞角蛋白(CK)-19单克隆抗体,鼠抗人上皮膜抗原(EMA)单克隆抗体,鼠抗人癌抗原CA72-4(TAG-72)单克隆抗体采用免疫组化法对65例可切除性胃癌患者的385枚阴性淋巴结进行微转移阳性表达检测,对相关临床病理因素及预后进行统计。结果:三种单克隆抗体联检出17例(26.2%)胃癌的33枚(8.6%)淋巴结有微转移。弥漫型胃癌的淋巴结微转移度(38.9%)明显高于肠型胃癌(10.4%)。淋巴结微转移与肿瘤侵袭胃壁深度有关。有微转移的5年生存率(65.3%)明显低于无转移者(87.4%),预后较差。结论:单克隆抗体联检可以提高胃癌淋巴结微转移检出度,提高临床病理分期准确性,指导术后综合治疗,判断预后。     

非小细胞肺癌区域淋巴结中肺组织特异性基因的表达与预后的关系

目的：探讨非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer,NSCLC）区域淋巴结人肺组织特异性基因（lunx mRNA）的表达与预后的关系。方法：应用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）用以检测74例NSCLC手术切除区域淋巴结Lunx mRNA的表达,对入选患者进行为期3年的随访观察,并对6个可能影响NSCLC患者预后的因素进行Cox回归模型分析。结果：手术切除区域淋巴结Lunx表达率与年龄、营养指数、3年内的复发或转移率之间有相关性（P＜0.01, P＜0.01, P＜0.05）,而患者的性别、肺癌病理类型、分期与手术切除区域淋巴结Lunx表达率之间无相关性（P＞0.05）;NSCLC患者的生存时间与术后辅助治疗及与Lunx表达有统计学意义（P＜0.05, P＜0.01）。结论：NSCLC患者Lunx mRNA表达与其生存时间显著相关, 提示Lunx mRNA可作为NSCLC淋巴微转移的分子标志物及监测患者3年预后的指标之一;同时术后辅助治疗是延长患者生存时间的一项重要措施;荧光实时RT-PCR相对定量方法可应用于NSCLC淋巴微转移的检测,该方法可能有助于早期肺癌转移的诊断。     

免疫组化检测胃癌淋巴结微转移的临床意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移与临床病理参数关系及临床意义。方法 采用免疫组织化学方法,选用细胞角蛋白CK19、细胞角蛋白CK20及CD44v6检测43例常规病理检查未发现的胃癌周围转移淋巴结453枚。结果 43例胃癌患者中16例有淋巴结微转移(37.2％)。微转移与浸润深度有关(P<0.05),且PT3、PT4患者微转移阳性率明显高于PT1、PT2患者。低分化程度癌微转移阳性率明显高于高分化程度癌(P<0.05)。微转移检测使28.1％的胃癌重新分期。结论 对常规检查淋巴结为阴性胃癌的微转移检测有助于临床准确分期、指导临床治疗及对预后的估计。     

卵巢癌淋巴结微转移的检测及临床意义

目的：检查卵巢癌患者淋巴结内有无微小转移。方法：33例原发性卵巢癌共获淋巴结187个，将石蜡包埋癌组织块和淋巴结连续切片2张，分别作H－E染色及用抗细胞角蛋白（cytokeratin,CK）单克隆抗体进行免疫组化染色。结果：34例中33例原发灶呈CK阳性反应，CK染色发现33例187例淋巴结中12例（36.4%）31个淋巴结（16.6%）CK阳性，有微转移者12例（36.4%）17个淋巴结（8.0%）；而H－E 色仅发现7例（21.2%）14个淋巴结转移（7.5%），其中有微转移者仅2例（6.1%）2个淋巴结（1.1%）（P＜0.01），H－E阳性者CK全部阳性，H－E阴性的32例中用CK－IHS检出5例有淋巴结微转移。淋巴结微转移与卵巢癌患者的临床期别、细胞分化和生存时间有关。结论：CK染色可大大提高淋巴结微转移的检出率，对卵巢癌患者具有预后意义。