芪黄汤治疗免疫性血小板减少症的疗效及对细胞相关因子和外周血T淋巴细胞程序性死亡受体-1/程序性死亡配体-1的影响

目的 观察芪黄汤治疗免疫性血小板减少症(ITP)的疗效及对细胞相关因子和外周T血淋巴细胞程序性死亡受体-1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)的影响。方法 将90例ITP患者按照随机数字表法分为2组，对照组45例予糖皮质激素治疗，治疗组45例在对照组治疗基础上加芪黄汤治疗，2组均治疗2个月。比较2组疗效；观察2组治疗前后ITP出血评分；比较2组治疗前后血小板(PLT)计数、血小板相关抗体(PAIg)G、PAIgM;比较2组治疗前后干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-17水平变化；比较2组治疗前后外周血T淋巴细胞PD-1/PD-L1水平变化。结果 治疗组总有效率86.67%(39/45),复发率10.26%(4/39);对照组总有效率68.89%(31/45),复发率29.03%(9/31)。治疗组疗效优于对照组(P<0.05),复发率低于对照组(P<0.05)。2组治疗后ITP出血评分均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组降低更明显(P<0.05)。2组治疗后PLT计数较治疗前升高(P<...     

解毒通络生津方对阴虚型干燥综合征患者外周血PD-1及其配体表达影响的临床研究

目的观察解毒通络生津方联合西药治疗阴虚型干燥综合征的临床疗效及其对外周血单核细胞程序性死亡分子-1(PD-1)和配体表达的影响。方法将60例阴虚型干燥综合征患者随机分为治疗组与对照组,每组30例。对照组予醋酸泼尼松加羟基氯喹治疗,治疗组在对照组治疗措施基础上,加用解毒通络生津方。两组疗程均为3个月,观察中医证候积分、疾病损害评分、疾病活动度评分、生活质量评分及外周血单核细胞PD-1、PD-L1、PD-L2、CD20的表达情况。结果 1治疗前后组内比较,两组中医证候积分差异均有统计学意义(P0.05);治疗组治疗前后中医证候积分的差值大于对照组(P0.05)。2治疗前后组内比较,两组SSDDI评分差异均有统计学意义(P0.05);组间治疗后比较,SSDDI评分的差值差异无统计学意义(P0.05)。3治疗前后组内比较,两组ESSDAI评分差异均有统计学意义(P0.05);组间治疗后比较,ESSDAI评分差异无统计学意义(P0.05)。4治疗前后组内比较,两组生活质量评分总分(PCS)差异均有统计学意义(P0.05);组间治疗前后,PCS评分差值差异无统计学意义(P0.05)。5治疗前后组内比较,对照组PD-1、PD-L1、PD-L2、CD20的差异无统计学意义(P0.05),而治疗组有统计学意义(P0.05);组间PD-1、PD-L1、PD-L2、CD20治疗前后差值差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P0.05)。结论解毒通络生津方联合西药治疗阴虚型干燥综合征,可显著改善患者的临床症状,可能与提高外周血单核细胞PD-1及其配体表达有关。     

补肾温阳法诱导Foxp3+调节性T细胞在哮喘免疫治疗中的作用

目的探讨补肾温阳中药通过诱导转录因子Foxp3活化、调控调节性T细胞,而发挥对变应性哮喘的免疫治疗作用。方法80只BALB/c(白变种实验室老鼠)小鼠随机分成4组:对照组、哮喘组、中药干预组及中药+抗体干预组,用屋尘螨(HDM)变应原经腹腔注射致敏、滴鼻激发复制变应性哮喘样肺部炎症模型。中药干预组、中药+抗体干预组每只小鼠给予补肾温阳中药(用淫羊藿、巴戟天免煎颗粒配制500 ul灌胃qod,对照组给予500 ul NS。观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果;检测各组BALF上清细胞因子IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度及血清Ig E水平;分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Treg细胞;用实时荧光定量PCR检测Foxp3-m RNA。结果正常对照组、中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度分别高于哮喘模型组(P0.01)和中药+抗体干预组(P0.05);中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度低于正常对照组(P0.05);哮喘模型组BALF上清细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)浓度高于中药+抗体干预组(P0.05)。血清Ig E水平正常对照组、中药干预组均分别低于哮喘模型组(均为P0.01)及中药+抗体干预组(均为P0.05);中药干预组血清Ig E水平低于正常对照组(P0.05)。哮喘模型组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平较正常对照组、中药干预组均明显减低,差异有统计学意义(分别为P0.01,P0.05)。与哮喘模型组、中药+抗体干预组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平显著增高,差异有统计学意义(均为P0.05)。与正常对照组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平较低,差异有统计学意义(P0.01)。与哮喘模型组比较,中药+抗体干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、Foxp3-m RNA表达水平降低,差异有统计学意义(均为P0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3-m RNA、细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)均参与了支气管哮喘的发病过程,补肾温阳中药可通过上调CD4+CD25+调节性T细胞数量、诱导Foxp3-m RNA的表达与活化、降低血清Ig E水平及增加IL-10、IFN-γ、TGF-β1含量等机制来达到减轻哮喘炎症的作用。     

防风通圣汤对乙肝慢加急性肝衰竭早期血清内毒素及程序性死亡因子-1/配体-1的影响

目的:明确防风通圣汤对乙肝慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)早期的血清内毒素(ET)及程序性死亡因子-1/配体-1(PD-1/PD-L1)的影响,深入了解防风通圣汤治疗乙肝慢加急性肝衰竭早期的作用机制。方法:入组69例HBV-ACLF早期患者,均给予常规抗病毒、护肝退黄及支持治疗。将患者随机分配至口服防风通圣汤的观察组35例,服用安慰剂的对照组34例,观察期3周。检测患者治疗前及治疗后1,2,3周的血清ET水平,血清CD4+,CD8+T细胞的PD-1/PD-L1的表达,肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),白蛋白(Alb),总胆红素(TBIL),直接胆红素(DBIL)]及凝血功能[凝血酶原时间(PT),凝血酶原活动度(PTA)],前后比较以明确防风通圣汤作用效果。结果:与本组治疗前比较,两组患者在治疗3周后均出现血清ET显著下降(P0.01),血清CD4+PD-1+,CD4+PD-L1+,CD8+PD-1+,CD8+PD-L1+表达显著下降(P0.01),ALT,AST,TBIL,DBIL,PT显著下降(P0.01),Alb及PTA显著升高(P0.01)。与对照组同时间点比较,观察组治疗后第1,2,3周血清ET更低(P0.01);观察组第2,3周血清CD4+PD-1+,CD4+PD-L1+,CD8+PD-1+,CD8+PD-L1+表达降低(P0.05,P0.01);观察组第1,2,3周血清ALT,AST,TBIL,DBIL水平降低(P0.05,P0.01);观察组第2,3周血清PT明显下降(P0.05),观察组第2,3周PTA显著升高(P0.01)。结论:防风通圣汤可能通过降低患者血清ET水平和血清CD4+,CD8+T细胞PD-1/PD-L1表达水平,从而达到治疗HBV-ACLF早期作用。     

疏风凉血补肾方对ITP模型小鼠免疫调控的影响

目的:观察疏风凉血补肾方对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠外周血血小板(PLT),干扰素γ(IFN-γ),CD80,CD86及程序性细胞死亡基因(PD-1)的表达变化的影响。方法:制备豚鼠抗小鼠血小板血清(APS),连续注射小鼠,复制小鼠ITP模型,疏风凉血补肾方高、中、低剂量灌胃给药(112.5,75,37.5 g·kg-1·d-1),强的松组灌胃强的松(10 mg·kg-1·d-1),对照组、模型组给予生理盐水,连续给药7 d。应用血细胞分析仪测定PLT,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞因子IFN-γ,流式细胞仪检测外周血淋巴细胞CD80,CD86及PD-1的表达。结果:模型小鼠外周血PLT数持续减低,IFN-γ,CD80,CD86及PD-1明显增高,给予疏风凉血补肾方治疗后模型小鼠外周血PLT数明显增高(P<0.05),IFN-γ,CD80,CD86,PD-1明显降低(P<0.05)。结论:疏风凉血补肾方能升高ITP模型小鼠PLT,降低IFN-γ,CD80,CD86及PD-1的表达,改善细胞免疫的失衡,达到治疗ITP的作用。     

不同灸法对环磷酰胺所致免疫抑制兔脾组织程序性死亡因子-1及其配体表达的影响

目的观察不同灸法对环磷酰胺所致免疫抑制兔脾组织程序性死亡因子-1(PD-1)及其配体PD-L1表达的影响。方法大耳白兔32只随机分为空白组、模型组、隔药饼灸组、艾灸组。除空白组外,其余3组腹腔注射环磷酰胺制备免疫抑制兔模型,连续7 d。成模后,隔药饼灸组和艾灸组分别给予隔药饼灸、艾灸干预,隔日灸,共灸10次。治疗结束后次日动物麻醉,摘取脾脏。采用RT-qPCR检测PD-1、PD-L1m RNA表达,免疫组化检测PD-1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组兔脾组织PD-1、PD-L1m RNA表达明显升高(P0.01);与模型组比较,隔药饼灸组兔脾组织PD-1、PD-L1m RNA表达明显降低(P0.01),艾灸组兔脾组织PD-L1 mRNA表达明显降低(P0.05),PD-1 mRNA表达虽有降低趋势但差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示,兔脾组织棕褐色PD-1阳性表达主要在细胞浆、细胞膜或间质,与空白组比较,模型组兔脾组织PD-1蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,隔药饼灸组和艾灸组兔脾组织PD-1蛋白表达显著降低(P0.01,P0.05)。结论不同灸法对免疫抑制兔免疫功能均有明显改善作用,隔药饼灸较艾灸更具优势。     

补肾解毒方调控IL-12、IFN-γ水平对辐射后小鼠免疫防护作用研究

目的:探讨补肾解毒方对辐射后小鼠血清白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平的影响。方法:将90只小鼠随机分为空白组、辐射组、氨磷汀组、补肾解毒方防治结合组和补肾解毒方预防组,每组18只,并建立各组小鼠模型。在实验开始后第11天,除空白组外所有小鼠均接受一次性4Gy 60Coγ射线全身辐照,并于辐射后第1天、第7天、第14天每组随机抽取6只进行眼球取血,分离血清,应用ELISA法检测血清中IL-12、IFN-γ水平。结果:辐射后第1天,氨磷汀组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),各组间IFN-γ水平无差异;辐射后第7天,防治组IL-12水平高于辐射组(P<0.05),防治组IFN-γ水平高于辐射组与氨磷汀组(P<0.01,P<0.05),预防组IFN-γ水平高于辐射组(P<0.05),空白组IFN-γ水平高于辐射组和氨磷汀组(P<0.05);辐射后第14天,各组IL-12、IFN-γ水平均无差异。结论:辐射后补肾解毒方可通过提高分泌血清中IL-12和IFN-γ的水平,起到增强辐射后小鼠免疫系统防护作用。     

补肾固表颗粒对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的观察补肾固表颗粒对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响,探讨其作用机制。方法将60只ICR雄性小鼠随机分为空白对照组、模型组、玉屏风组和补肾固表高、中、低剂量组,除空白对照组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺50 mg/(kg2d),连续3 d,建立免疫抑制动物模型,各给药组给予相应药物,连续28 d。末次给药后眼球取血,脱颈处死小鼠后无菌取出脾脏,MTT法检测脾淋巴细胞增殖,LDH法检测NK细胞活力,ELISA检测血清白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果与空白对照组比较,模型组小鼠脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞活力、IL-2和IFN-γ水平均明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,补肾固表各剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞活力、IL-2和IFN-γ水平均明显增强(P0.05,P0.01,P0.001),脾脏质量及营养状况亦有改善。结论补肾固表颗粒通过增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞转化和杀伤能力,提高血清IL-2和IFN-γ分泌水平,从而改善机体的免疫功能。     

基于PD-1/PD-L1信号通路观察丹参川芎嗪对乙型肝炎病毒性肝炎模型大鼠肝功能的保护作用

目的:探讨丹参川芎嗪对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)性肝炎的肝功能保护作用机制及在程序性死亡分子-1/配体(PD-1/PD-L1)信号通路的调节机制。方法:将48只8～10周龄的SPF级雄性SD大鼠随机分为4组(n=12):正常对照组、模型组、丹参川芎嗪组、PD-1抗体组。将HBV稀释至5×10~6/mL,以5 mL/kg尾静脉注射进模型组、丹参川芎嗪组、PD-1抗体组大鼠体内,2次/w,连续3 w,正常对照组大鼠注射等体积生理盐水;模型构建成功后,丹参川芎嗪组、PD-1抗体组大鼠分别每日尾静脉注射10 mg/kg剂量的丹参川芎嗪、PD-1单克隆抗体,正常对照组、模型组尾静脉注射等体积生理盐水。连续给药8 w后进行18F-FDG microPET-CT显像,提取各组大鼠血清进行肝功能指标和肝纤维化指标检测完毕后处死大鼠。HE染色、免疫组化法、染色质免疫共沉淀法、Western blot检测各组大鼠肝组织病理学改变、HBsAg表达、病毒载量、HBsAg、PD-1、PD-L1蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肝组织1 8F-FDG摄取值、肝功能指标(ALT、AST)和肝纤维化指标(HA、LN)、HBsAg、PD-1、PD-L1表达水平及病毒载量显著升高(P0.05),与模型组比较,丹参川芎嗪组和PD-1抗体组大鼠肝组织18F-FDG摄取值、肝功能指标和肝纤维化指标、HBsAg、PD-1、PD-L1表达水平及病毒载量显著降低(P0.05)。丹参川芎嗪组和PD-1抗体组各观察指标差异无统计意义(P0.05)。结论:丹参川芎嗪于通过抑制PD-1/PD-L1信号通路,改善乙型病毒性肝炎模型大鼠的肝功能。     

圣愈汤联合放射治疗对人宫颈癌荷瘤小鼠脾脏 DCs 细胞功能的影响

目的:探讨圣愈汤联合放疗对人宫颈癌荷瘤小鼠脾脏DCs分泌细胞因子及CTLs对肿瘤细胞杀伤活性的影响。方法:建立小鼠皮下Hela宫颈癌细胞模型,随机分为对照组、圣愈汤组、放疗组、圣愈汤联合放疗组。治疗后7 d取各组小鼠脾脏制备细胞悬液,部分体外培养,ELISA法检测上清IFN-γ的分泌情况;BD磁珠分选系统分离CD_8~+CTLs,与Hela宫颈癌细胞共培养,LDH法检测脾脏CD_8~+CTLs杀伤活性。结果:圣愈汤组、放疗组、圣愈汤联合放疗组脾脏DCs细胞活化数量较对照组升高,圣愈汤联合放疗组升高更明显(P<0.05)。圣愈汤组、放疗组、圣愈汤联合放疗组小鼠脾脏IFN-γ分泌水平、脾脏CD_8~+ CTLs杀伤活性均较对照组升高,且以圣愈汤联合放疗组升高最为明显(P<0.05)。结论:圣愈汤可促进荷瘤小鼠脾DC的分化、成熟,增加INF-γ分泌,诱导T淋巴细胞向CTLs的分化,增强CTLs杀伤活性,进而提高小鼠抗肿瘤免疫。     

金复康口服液对Lewis肺癌荷瘤小鼠PD-1、PD-L1表达及相关免疫因子的影响

目的:观察金复康口服液对Lewis肺癌小鼠肿瘤微环境中程序性死亡受体1(PD-1)、配体(PD-L1)表达及相关免疫因子的影响。方法:采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,而后随机分为模型组、中药低、中、高剂量组每组8只; 实验第1天开始中药低、中、高剂量组小鼠分别按15、30、60 g/(kg·d)灌胃给药,模型组按照等量生理盐水给药,1次/d,连续给药14 d; 称取各组小鼠的瘤质量,计算抑瘤率; 荧光定量PCR检测荷瘤小鼠肿瘤组织中PD-1和PD-L1的mRNA,Western blot法检测肿瘤组织PD-1、PD-L1的蛋白表达水平,HE染色观察肺组织,同时ELISA法检测血清中免疫因子IFN-γ和IL-12表达量。结果:与模型组比较,金复康口服液中、高剂量组能够抑制肺癌移植瘤生长,抑瘤率分别是36.35%和28.59%; 金复康口服液中、高剂量组能明显降低肿瘤组织 PD-1、PD-L1 mRNA含量,抑制PD-1、PD-L1蛋白表达; HE染色显示中、高剂量组肺组织形态完整,未见明显癌巢; 中剂量组明显增加血清中IFN-γ和IL-12的含量。结论:金复康口服液对肺癌移植瘤的生长有一定抑制作用,机制可能与降低肿瘤微环境中PD-1、PD-L1水平并增加血清中免疫因子IFN-γ和IL-12的含量有关。     

补肾温阳中药对哮喘小鼠Foxp3-mRNA表达及CD4~+CD25~+调节性T细胞水平的影响研究

目的建立哮喘样气道炎症小鼠动物模型。观察补肾温阳中药对哮喘小鼠Foxp3-mRNA表达与活化以及对CD4+CD25+调节性T细胞的数量、分化与功能的影响,探讨补肾温阳法在防治过敏性哮喘气道炎症的作用机制。方法 100只BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组、哮喘模型组、中药干预组及中药+抗体干预组,除正常对照组外,其余各组均以卵白蛋白(OVA)致敏激发方法建立小鼠哮喘模型,中药+抗体干预组小鼠于激发前30min事先给予抗IL-10&抗TGF-β抗体滴鼻。同时,中药干预组组、中药+抗体干预组于实验的第1天至第21天,每只小鼠给予补肾温阳中药(用淫羊藿、巴戟天、补骨脂免煎颗粒配制500μl)灌胃qod,哮喘模型组、正常对照组予等量的生理盐水作对照。观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果;取小鼠左肺组织作病理切片观察炎症改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组BALF上清细胞因子IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度及血清IgE水平;分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Treg细胞比例;用RT-PCR方法检测转录因子Foxp3-mRNA的表达。结果哮喘模型组、中药+抗体干预组小鼠BALF中细胞总数以及淋巴细胞、中性粒细胞和EOS百分比分别均高于正常对照组、中药干预组(分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05和P<0.01),而巨噬细胞百分比与正常对照组、中药干预组相比较,则分别有所降低(P<0.05)。正常对照组、中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度分别高于哮喘模型组(P<0.01)和中药+抗体干预组(P<0.05);中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度低于正常对照组(P<0.05);哮喘模型组BALF上清细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)浓度高于中药+抗体干预组(P<0.05)。血清IgE水平正常对照组、中药干预组均分别低于哮喘模型组(均为P<0.01)及中药+抗体干预组(均为P<0.05);中药干预组血清IgE水平低于正常对照组(P<0.05)。哮喘模型组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平较正常对照组、中药干预组均明显减低,差异有统计学意义(分别为P<0.01,P<0.05);与哮喘模型组、中药+抗体干预组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平显著增高,差异有统计学意义(均为P<0.05);与正常对照组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.01);与哮喘模型组比较,中药+抗体干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞、FoxP3-mRNA、细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)均参与了支气管哮喘的发病过程,补肾温阳中药可通过上调CD4+CD25+调节性T细胞数量、诱导FoxP3-mRNA的表达与活化、降低血清IgE水平及增加IL-10、IFN-γ、TGF-β1含量等机制来达到减轻哮喘炎症的作用。     

补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ及NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖的影响

目的探究补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ、TNF-α、NK细胞及脾淋巴细胞增殖的影响。方法将60只ICR雄性小鼠随机分成6组,即空白对照组,模型组,玉屏风组,补肾固表颗粒高、中、低剂量组。除空白对照组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺50 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续3 d,建立免疫抑制动物模型。各组给予相应药物灌胃,连续28 d。采用MTT比色法检测脾淋巴细胞增殖情况,LDH法检测NK细胞杀伤活性,ELISA法检测血清IL-2和IFN-γ水平。结果与模型组比较,补肾固表颗粒可增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖能力(P0.05),提高脾淋巴细胞杀伤率(P0.001),使血清IL-2、IFN-γ和TNF-α含量显著升高(P0.01)。结论补肾固表颗粒可以增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞转化和杀伤能力,提高血清IL-2、IFN-γ和TNF-α分泌水平,从而改善机体的免疫功能。     

兰紫解毒糖浆抗甲型H1N1流感病毒作用的机理研究

目的探讨兰紫解毒糖浆抗甲型H1N1流感病毒作用机理研究。方法将2016年6月—2018年6月收治的62例甲型H1N1流感患者随机分为对照组和试验组,每组31例。对照组予磷酸奥司他韦胶囊75 mg,1次/d口服;试验组加用兰紫解毒糖浆,每次5～30 m L,每日3次,饭后口服。两组均维持治疗5 d。检测肺损伤标志物[细胞因子Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)、肺表面活性蛋白D(SP-D)]、外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群、细胞因子[白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)]变化。结果与治疗前,两组血清KL-6、SP-D降低(P0.01),外周血NK、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+升高(P0.05),IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4降低(P0.01);与对照组比较,试验组血清KL-6、SP-D较低(P0.01),外周血NK、CD_4~+、CD_8~+、CD_4~+/CD_8~+较高(P0.05),IFN-γ、IFN-γ/IL-4较低(P0.01),IL-4较高(P0.01)。结论兰紫解毒糖浆可通过调节外周血T淋巴细胞表达、纠正Th1/Th2失衡发挥抗甲型H1N1流感病毒作用。     

补肾解毒方对慢性HBV携带者免疫耐受的临床研究

目的观察补肾解毒方对慢性HBV携带者的血清HBV-DNA、HBsAg定量、HBeAg定量及IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的影响。方法采用随机、双盲、安慰剂对照的临床研究方法,对符合中医药干预标准的75例慢性HBV携带者,按照2:1比例随机分为两组,治疗组50例,予以补肾解毒中药方治疗,对照组25例,使用安慰剂治疗,疗程48周。治疗前后分别检测患者血清HBV-DNA、HBsAg及HBeAg定量及IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的变化,进行疗效评价。结果48周治疗后治疗组患者血清HBV-DNA、HBsAg定量、HBeAg定量下降幅度大于对照组(P0.05),IFN-γ、IL-2明显上升,IL-4、IL-10明显下降(P0.05)。结论补肾解毒方对HBV-DNA及HBsAg、HBeAg有一定的抑制作用,并可提高机体的细胞免疫功能。     

王老吉凉茶对拘束应激负荷小鼠脾脏CTL活性的影响

目的研究王老吉凉茶(Wanglaoji Herbal Tea,WHT)对拘束应激诱发小鼠脾脏细胞毒性T细胞(CTL)活性的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、致敏对照、应激对照组、125及500mg/kg王老吉凉茶给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群和CTL对P815细胞杀伤活性,同时检测小鼠脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3的表达量。结果拘束应激明显降低Th淋巴细胞亚群的比例,显著降低CTL对P815瘤细胞的杀伤活性,同时减少脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3表达量减少。与拘束应激组相比,王老吉凉茶给药可以增加拘束负荷小鼠脾脏淋巴细胞数目,提高CTL细胞杀伤活性,并且改善IL-2和IL-3表达量。结论王老吉凉茶对拘束负荷诱发小鼠免疫机能低下有改善作用。     

补肾、健脾、解毒法对慢性乙型肝炎患者外周血DCs 介导的T 淋巴细胞的影响

目的：比较健脾、补肾与解毒法对慢性乙型肝炎患者外周血DCs 介导T 淋巴细胞的影响。方法：分别收集10 例HBV 慢性乙型肝炎患者和8 例健康者外周血,分离外周血单个核细胞（PBMCs）,体外培养DCs,用大鼠健脾、补肾、解毒药物血清进行干预,并建立DCs、T 细胞相互作用的模型,检测T 细胞的表面分子CD3+ T 细胞、CD4+ T 细胞、CD8+ T 细胞、CD8+CD28+ T 细胞、CD8+ T 细胞PD-1 受体的表达,并检测T 细胞上清液中IFN-γ的分泌水平。结果：经补肾、健脾、解毒药物血清处理,HBcAg 负载DCs 孵育的T 淋巴细胞,CD3+ T 细胞、CD4+ T 细胞表达率升高,CD8+ T 细胞、CD8+T 细胞PD-1 表达率减低,IFN-γ水平提高,六味地黄丸组与模型组间差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,四君子汤组、六味地黄组CD8+CD28+ T 细胞表达率升高（P<0.05）。结论：补肾、健脾、解毒法在一定程度上通过调节慢性乙型肝炎患者外周血DCs 的功能,恢复DCs 下游T 淋巴细胞功能,其中以补肾法最优。     

茵陈五苓散加减联合阿德福韦酯对慢性乙型肝炎病毒复制及免疫功能的影响

目的探讨茵陈五苓散加减联合阿德福韦酯对慢性乙型肝炎病毒复制及免疫功能的影响。方法将158例慢性乙型肝炎患者随机分为2组,西医组79例给予阿德福韦酯治疗,联合组79例给予阿德福韦酯联合茵陈五苓散加减治疗,疗程均为48周。观察2组治疗前、治疗24周、治疗48周时血清HBV-DNA、HBeAg、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TBil)、HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞(HBV特异性CTL)、外周血HBV特异性CTL表面PD-1表达和外周血滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)的水平,统计HBV DNA和HBeAg转阴率、HBeAg血清转换率和治疗期间的不良反应。结果治疗24周、48周时联合组AST、ALT、TBil、外周血HBV特异性CTL表面PD-1表达水平均显著低于同期西医组(P均0.05),HBV特异性CTL、Tfh水平均显著高于同期西医组(P均0.05);治疗48周时HBV-DNA和HBeAg转阴率、HBeAg血清转换率均高于西医组(P均0.05)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论茵陈五苓散加减联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎具有协同作用,可提高机体抗病毒免疫功能,抑制病毒复制,改善肝功能,具有临床应用价值。     

金银花、连翘对大肠杆菌感染模型小鼠血清Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的探讨金银花、连翘对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法将雌性昆明种小白鼠随机分为金银花组和连翘组,每组再分为正常组、中药组、模型组和治疗组4个亚组进行处理,观察小鼠的临床状态,双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(Elisa)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果金银花(0.01 kg/L)、连翘(0.01 kg/L)水煎液对小鼠大肠杆菌的感染有保护作用。与正常组及中药组比较,模型组与治疗组小鼠血清IFN-γ、IL-4表达及IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10比值均显著升高(P均<0.01);金银花治疗组较模型组IL-10表达显著升高(P<0.05),IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,IL-4表达和IFN-γ/IL-10比值有下降趋势;连翘治疗组较模型组IFN-γ和IL-4表达以及IFN-γ/IL-10比值有下降趋势,IL-10表达和IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论感染模型小鼠辅助性T淋巴细胞1型/2型(Th1/Th2)细胞因子分泌亢进,Th1/Th2平衡有向Th1型漂移的特点。金银花、连翘水煎液均能有效保护感染模型小鼠,其调节小鼠的免疫功能可能与调节Th1/Th2平衡相关。     

益气补肾方对环磷酰胺致小鼠免疫抑制抵抗作用及药理学分析

目的:分析益气补肾方对环磷酰胺致小鼠免疫抑制抵抗作用及药理学影响。方法:选取清洁级SD大鼠20只,雌雄各10只,鼠龄三个月,平均体重(200.48±15.72)kg,依据随机数字表法将其分成两组,观察组(10只)及模型组(10只);在第1、3、5、7天注射环磷酰胺(含量15mg/kg)于腹腔,同时观察组大鼠每天使用益气补肾方(经计算小鼠最大耐受量是104g/kg/24h)灌胃给药,模型组大鼠每天等剂量蒸馏水灌胃,两组大鼠均在末次给药以后将其处死;取大鼠胸腺与脾脏,计算免疫器官指数,ELISA法检测大鼠血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、单胺氧化酶(MAO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,MTT法检测淋巴因子激活杀伤(LAK)细胞及自然杀伤(NK)细胞活性。结果:观察组大鼠胸腺指数与脾脏指数均高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);观察组大鼠血清IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-10含量均高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);观察组大鼠LAK及NK细胞活性均高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);观察组大鼠血清MAO及MDA含量低于模型组,SOD含量高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益气补肾方可恢复环磷酰胺所造成小鼠机体免疫抑制状况,提高小鼠自身免疫功能。