血清和胸腹水腺苷脱氨酶测定

利用2，4-二氯酚参与的Trinder反应检测体液中腺着脱氨酶（ADA）。该法简便、快速、重复性好、特异性高。酶促反应时间短（10min），线性范围宽（0～100U／L）。批内CV3．0％、批间CV4．3％。127例健康人血清ADA活性X±s为20．5±46U／L。11例结核性胸腹水ADA为77．9±16．6U／L，而11例非结核性胸腹水ADA为23．1±17．0U／L，两组有显著性差异（P＜0．01）。     

L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺的合成及其临床应用

[目的]制备L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺，用吡咯烷酮芳胺酶（PYRase）法快速检出链球菌等病原菌。[方法]采用L-谷氨酸与水加热生成焦谷氨酸，再与对硝基苯胺反应制得L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺；将其制成酶底物纸片，对底物浓度、最适pH、反应温度及时间进行了探讨，确定了实验的最佳条件。[结果]本法底物最佳浓度为2mg／ml，最适pH7．2，反应温度37℃，反应时间10min。以此条件用自制底物与进口品进行比较其效果完全一致。鉴定了标准菌株9株，临床分离菌株154株。正确率达100％。[结论]本法可代替常规检验方法提前2～3d报告结果，为链球菌等鉴定提供了一种快速、简便、准确的新方法。     

比色法快速检测尿中有机磷浓度

目的 建立快速检测尿液中有机磷浓度的方法。方法 基于尿液中有机磷在碱性条件下与4-(4-硝基苄)吡啶(NBP)反应生成蓝色化合物可在520nm波长比色测定的原理，通过对实验条件的优选和方法学评价，建立了本法。结果 本法回收率在91％～113．1％，批内CV％为3．25％-7．63％，批间CV％在7．68％-9．3％，敌敌畏浓度在0-120mg／L、甲胺磷浓度在0-130mg／L范围内线性良好。结论 本法准确度和精密度均较好，能符合临床要求。     

碳酸酐酶法测定乳汁锌

目的建立灵敏、准确、特异且试剂稳定的碳酸酐酶法测定乳汁锌。方法乳汁灰化后溶于0．1mol／L HCl．测定前先用0．01mol／L NaOH稀释并中和酸．测定时待分析液巾锌离子复活脱辅基的碳酸酐酶，以醋酸对硝基酚作为酶促反应底物进行测定。结果线性范围达61．2μmol／L。回收率95．6％～103．8％，批内和批间变异系数分别小于3．5％与4．9％，本法（X）与原子吸收分光光度法（Y）比较具有良好的相关性，Y=0．986X＋0．033,r=0．988。Cu^2＋、Fe^3＋、Mn^2＋各200μmol／L对锌测定均无影响；Co^2＋10μmol，L以下对本法测定乳汁锌结果也无干扰。结论该法具有特异、准确、灵敏且试剂稳定等优点．适合于生化分析仪检测乳汁锌。     

比色法快速检测尿中有机磷浓度

目的：建立快速检测尿液中有机磷浓度的方法。方法：基于尿液中有机磷在碱性条件下与4-(4-硝基苄)吡啶(NBP)反应生成蓝色化合物可在520nm波长比色测定的原理，通过对实验条件的优选和方法学评价，建立了本法。结果：本法回收率在91％～113．1％，批内CV％为3．25％～7．63％，批间CV％在7．68％～9．3％，敌敌畏浓度在0～120mg／L、甲胺磷浓度在0～130mg／L范围内线性良好。结论：本法准确度和精密度均较好，能符合临床要求。     

液体单试剂检测血氨方法的建立

目的配制液体单试剂，建立酶两点动力法测定血浆中血氨含量。方法在荷兰威图科学公司DPU-41型半自动生化仪和美国贝克曼公司CX5-CE型全自动生化仪上研究酶两点动力法，建立实验参数。结果试剂含量：三乙醇胺缓冲液（pH7．4）0．25mol／L，α-酮戊二酸15mmol／L，还原型辅酶0．3mmol／L，谷氨酸脱氢酶大于160U／L。该法最低检出限为1．9μmol／L，线性范围达321μmol／L（r=0．9961），批内CV=2．2％，批间CV=4．4％，平均回收率=99．3％，胆红素〈175．8μmol／L，血红蛋白〈3．4g／L，对测定结果无显著影响。结论本法灵敏度高，线性、精密度好，结果准确，胆红素、血红蛋白干扰小，操作简便，适用于全自动及半自动生化分析仪，可推广运用。     

血清尿素丙酮酸氧化酶测定新方法的研究及应用

目的建立一种血清尿素测定的新方法和临床应用。方法应用脲酶、丙酮酸氧化酶、丙酮酸激酶与色原系统2，4-二氯苯酚、4-氨基安替比林，进行血清尿素浓度的酶法测定。结果磷酸盐缓冲液最适浓度为50mmol、pH7．2，最大吸收峰为510nm，线性范围为0～42mmol／L，显色稳定。精密度：批内（n=20）CV为1．89％～3．21％，批间（n=20）CV为1．96％～3．45％，回收率为96．2％～104．2％，平均回收率为99．5％。与酶偶联速率法比较，相关系数r=0．995，回归方程Y=1．023x＋0．38，两法高度相关，正常参考值范围为儿童组2．20～8．50mmol／L，少年组2．60～8．60mmol／L，成人组2．85％～8．95mmol／L。结论本法具有高度的特异性和准确性，其操作简便、灵敏快速、标本用量少、结果稳定，适用于全自动、半自动生化分析仪，更适用于中小医院，有较大的推广使用价值。     

酶偶联Trinder反应测定血清磷酸肌酸激酶实验探讨

[目的]建立一种新的酶偶联Trinder反应测定血清肌酸激酶。[方法]利用甘油激酶作用ATP和甘油产生甘油-3-磷酸，经甘油磷酸氧化酶氧化生成H2O2，后者与2，4，6-三溴-3-羟基苯甲酸和4-氨基安替比林在过氧化物酶作用下生成红色化合物。[结果]该方法线性范围达到2000U／L，批内批间平均相对标准偏差为1．96％和3．77％，与紫外酶偶联速联率法比较，相关系数r=0．989，y=1．002x 2．41。[结论]该方法具有灵敏、准确、简便、快速等优点。     

邻苯二甲醛法血清尿素氮的测定

报道一种不用加热煮沸，室温条件下测定血清尿素氮的方法，并对该法进行了评价。该法尿素氮浓度在0～80mmol／L范围内呈线性；回收率为90％～98％；批内CV4．9％～6．4％，批间CV6．8％；与二乙酰一肟法相关性较好r＝0．9545，回归方程为y（本法）＝0．0719＋0．9937x；测定正常成人男40例、女30例，血清尿素氮参考值范围（x±1．96s）为4.39～14.21mmol／L。     

高效液相色谱荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸

[目的]建立使用高效液相色谱、等度洗脱、荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸的方法。[方法]血浆同型半胱氨酸经Tris(2-Carboxyethyl)phosphate(17CEP)还原后，与7-Fluoro-benzo-2-oxa-1．3-diazole-4-sulohonate(SBD-F)衍生化，以胱氨为内标，C18反相色谱柱分离、等度洗脱，荧光检测器测定，以峰面积比进行定量。[结果]线性范围可达100μmol／L，最低检测限0．3μmol／L，批内不精密度1．2％-2．4％，批间不精密度1．4％-2．5％，平均回收率96．3-103％。[结论]本方法洗脱条件简单，准确性、特异性好，适用于临床实验室测定血浆同型半胱氨酸的含量。     

献血者ALT上限值的确定探讨

[目的]ALT异常是我国献血者查体不合格和血液报废的主要原因，本文对确定中国献血者ALT上限值进行初步探讨。[方法]献血者的初检标本和复检标本应用IFCC推荐的速率法测定ALT，应用ELISA方法测定HBsAg和anti—HCV。[结果]6057份初检标本中ALT异常（≥41U／L）标本191份，其中11份HBsAg阳性（5．76％），4份anti—HCV阳性（2．09％）；176份单纯ALT异常标本中酶活性在4l～80U／L占81．25％，41～100U／L占89．77％，41—120U／L占94．32％，≥121U／L占5．68％。47590份复检标本中ALT异常标本500份，2份HBsAg阳性（0．4％），9份anti—HCV阳性（1．80％）：489份单纯ALT增高标本占总不合格率的68．87％，AL．T活性41～80U／L占89．57％，41～100U／L占93．87％，41—120U／L占97．34％，≥121U／L占2．66％。[结论]将献血者ALT筛查上限定为正常上限的2倍（≤80U／L）或60U／L，血源浪费可降低30％-40％以上，血液报废率可降低50％～60％以上；目前献血者采用标准（≤40U／L）无助于提高血液安全。     

改良血清单胺氧化酶测定法及临床应用

目的建立一种新的血清单胺氧化酶（MAO）测定法,以提高检测MAO活力的特异性和准确性。方法用3-甲基-N-乙基（β-羟乙基）苯胺（MEHA）为色原系统进行患者血清MAO活力测定。结果对缓冲液最适浓度、pH和种类的选择非常重要,可提高灵敏度,线性范围为0～250U／L,正常值范围为30U／L内,回收率为92．4％～102．6％,精密度：批内CV=2．5％～4．0％,批间CV：3．3％～4．5％。与二硝基苯肼比色法比较,相关性良好（r=0．986）。结论本法具有高度的特异性和准确性,操作简便,灵敏快速,标本用量少,结果稳定,对肝硬化的诊断有非常重要的作用。     

尿素酰基裂解酶酶偶联法测定血清总钙

目的 介绍尿素酰基裂解酶酶偶联测定血清总钙的方法。方法 双试剂两点法；缓冲液为三乙醇胺（TEA，pH8.0,200mmol/L）；试剂I：含NaHCO326.0mmol/L,NADPH 0.4mmol/L,α－酮戊二酸8.0mmol/L，尿素酰基裂解酶115U／L，GLDH43．0kU/L；试剂Ⅱ：含NaCO3 26.0mmol/L,ATP6.2mmol/L。结果 方法线性范围为0．5－5．0mmol/L，批内和批间平均变异系数分别为2．13％和2．69％。平均回收率为102．7％ 。本法（Y）与邻甲酚酞络合酮法（OCPC法，X1）比较：r＝0．981，Y1＝1．02X1－0．021，与偶氮胂Ⅲ法（X2）比较：r＝0．978，Y＝0．99X2＋0．03。血清胆红素高达300μmol/L，血红蛋白4g/L，镁2.5mmol/L，NH4^ 2.0mmol/L,Trig 8.0mmol/L对本法无明显干扰。结论 本法具有简便、准确、快速，适用于自动分析等特点。     

高效液相色谱电化学法直接测定血浆中同型半胱氨酸

[目的]建立以高效液相色谱电化学检测法(HPLC-ECD)直接测定血浆中同型半胱氨酸的方法。[方法]同型半胱氨酸被四氢硼酸钠还原后,利用色谱分离技术,以0．02mol／L醋酸盐缓冲液为流动相,电化学检测电极电位为 800mV,用外标法定量。并对其回收率、线性范围、最低检查限度、重复性进行实验。[结果]同型半胱氨酸的平均回收率为92．0％-96．5％,在2-160μmol/L内成线性,最低检查限度为0．5μmol/L批内与批问平均变异系数分别低于3．7％和4．7％。[结论]该法具有较新、简便、快速和直接的特点,适用于临床检测。     

茜素红S直接光度法测定血清白蛋白的方法学评价

目的：建立准确、灵敏、特异、微量的茜素红S(ARS)光度法测定血清白蛋白。方法：建立检测血清白蛋白含量的茜素红S法最适条件并进行方法学系列评价实验。结果：该法线性范围为0～75g／L，手工法批内和批间变异系数分别为2．1％，3．4％；回收率97．2％～102．0％。自动分析法批内和批间变异系数分别为1．9％，2．5％；回收率97．7％～103．2％。与BCG法比较有良好的相关性，相关系数r=0．9913，相关方程y=0．9783x 2．043。γ-球蛋白、胃蛋白酶、溶茵酶、胰蛋白酶对测定基本无干扰。血清甘油三酯浓度3．0mmol／L以下，血红蛋白浓度2．5g／L以下，胆红素浓度342μmol／L以下对测定无影响。结论：茜素红S测定白蛋白方法血清微量，操作简单，线性范围宽，重复性好，准确度高，适用于手工和自动生化分析仪检测。     

胆固醇脱氢酶测定血清胆固醇方法的建立

目的 评价胆固醇脱氢酶测定法在临床应用的可行性。方法 胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下，水解为游离胆固醇，后者被胆固醇脱氢酶还原为胆烷-4-烯-3-酮，同时B—NAD^ 还原为β-NADH H^ 。联胺能清除其反应产物胆烷-4-烯-3-酮，使反应完全。结果 回收率为99．9％和100．1％，在1．1～20．28mmol／L内为线性；批内CV为0．29％～0．39％，批间CV为0．42％～0．45％；乳酸脱氢酶无影响；与化学比色法(X1)和胆固醇氧化酶法(X2)比较，回归方程分别为Y=0．992X1—0．006，r=0．997；Y=0．989X2-0．048，r=0．999。结论 本法结果准确、可靠、易自动化。     

用伊红Y测定脑脊液蛋白的实验研究

[目的]建立一种简便、快速、准确的分光光度法测定脑脊液蛋白。[方法]在非离子去垢剂Brij-35存在下，用伊红Y溶液作显色剂，直接光度测定。[结果]该法所生成的颜色复合物最大吸收峰为540nm，显色l0min后趋向稳定，可达2h。线性范围达1000mg／L，回收率平均值为97．4％，精密度良好，批内精度CV％为0．92％-3．35％，批间精度CV％1．37％-3．26％。[结论]该法简便、快速，所需样本量小，不需特殊试剂和仪器，适宜临床常规测定。     

连续监测法测定腺苷脱氨酶

目的 建立连续监测法测定腺苷脱氨酶的方法。方法 用连续监测法对 pH值、腺苷浓度等反应条件进行实验研究，并对所建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ：含α－酮戊二酸6mmol/L,NADH 0.35mmol/L,ADP0.8mmol/L,EDTA-Na2 0.1mmol/L，谷氨酸脱氢酶1000U／L，试剂Ⅱ：腺苷12mmol/L,均用磷酸盐缓冲液（0．1mol/L);pH7.2。线性范围达97U／L，批内CV＝4．90％，批间CV＝6．53％。与波氏显色法有良好的相关性（r=0.9902)。结论 本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。     

血清芳香基酰胺酶连续监测法测定

报道了血清芳香基酰胺酶的连续监测法。酶促反应最适pH为7．6，用0．1mol／LTris—HCl缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围0～400U／L。批内CV1．9％～2．5％，批间CV3．1％～3．8％。121例健康成人血清酶活性为23.8±6．0U/L（x±s），男女性别间无差异（P＞0．05）。临床初步应用表明肝胆疾病时明显升高，特别是肝内外胆道阻塞时升高幅度较大。     

血清鸟嘌呤脱氨酶的连续监测法

利用葡萄糖氧化酶法测葡萄糖，间接测得2．4－二氧酚摩尔吸光因数ε＝3．31×104cm2／mol，再利用trinder反应建立连续监测法测定血清鸟嘌呤脱氨酶的活力，此法不但灵敏度高，同时有很高的精度，批内、批间的CV≤5．98％，最适pH为7．0，在600秒观察期内吸光度变化与时间成正比。Km＝1．09×10－2mmol／L，最佳黄嘌呤氧化酶用量为10U／L，最佳过氧化物酶用量为≥190U／L。120例健康体检者参考范围为0．06～1．02U／L，并对实验条件及鸟嘌呤脱氨酶的临床意义作了探讨。