胞外基质蛋白与血小板生长因子对气道平滑肌细胞的影响

目的研究层黏蛋白(laminin,LN)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、I型胶原(collagen I,Col I)3种不同细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)蛋白对血小板生长因子(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导的气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)形态及收缩变化的影响。方法将ASMCs分别附着在LN、ColI、FN表衬的细胞培养皿中,并分成2组,分别在有或无PDGF-BB(10 mg/L)的无血清培养基中培养0～5 d。然后采用显微图像方法观测细胞形态和宽长比,光学磁微粒扭转细胞测量方法测量细胞受KCl或组胺(histamine)刺激时的收缩反应。结果在有PDGF-BB的培养条件下,ASMCs形态总体上变细变长,即细胞宽长比减小,但附着在LN上的ASMCs比附着在Col I或FN上的细胞宽长比相对要大。在无PDGF-BB的培养条件下,ASMCs对KCl刺激的收缩响应随培养时间增加而增加,但不受ECM蛋白成分的影响。而在有PDGF-BB的培养条件下,ASMCs对KCl或Histamine刺激的收缩响应总体上随培养时间呈下降趋势,但附着在LN上的ASMCs收缩响应下降程度相对较小。结论 ASMCs受PDGF-BB作用时,其形态和收缩性的变化与不同ECM蛋白成分有关,相对于Col I和FN,附着在LN的细胞形态和收缩性的变化较小。ECM蛋白成分对PDGF-BB诱导的ASMCs形态和收缩性变化的差异性影响,对于深入认识基质蛋白、炎症因子与气道平滑肌细胞的相互作用及其与哮喘病理生理机制的关系具有重要意义。     

布地奈德对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨布地奈德（BUD）吸入对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡的影响及其分子生物学机制。 方法 40只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、BUD低及高剂量（0.25 mg/kg、2 mg/kg）组,采用卵蛋白（VOA）联合氢氧化铝凝胶致敏激发构建大鼠哮喘模型,干预组在致敏后激发前雾化吸入不同剂量BUD。采用医学图像分析系统测定并计算各组大鼠肺组织气道相关参数;采用免疫荧光检测大鼠气道平滑肌（ASM）组织中Ⅰ型（ColⅠ）和Ⅲ型胶原蛋白（Col Ⅲ）的表达;Western blotting检测大鼠ASM组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3、磷酸化ERK 1/2（p-ERK 1/2）及p-p38 MAPK蛋白表达。组织贴壁法分离培养原代ASMCs,采用MTT法检测ASMCs增殖活性;流式细胞术检测ASMCs凋亡率。 结果 与对照组比较,哮喘模型组大鼠气道发生重塑,气道总管壁厚度（WAt/Pbm）、内壁厚度（WAi/Pbm）和平滑肌厚度（WAm/Pbm）增加;与模型组比较,BUD干预组大鼠气道重塑被抑制,气管WAt/Pbm、WAi/Pbm和WAm/Pbm均降低;BUD能降低哮喘大鼠ASMCs增殖活性,提高ASMCs凋亡率,抑制哮喘大鼠ASM组织ColⅠ、Col Ⅲ的表达,下调哮喘大鼠ASM组织Bcl-2蛋白表达,上调Bax、Caspase-3蛋白表达（均P<0.05）,抑制ERK 1/2、p38 MAPK信号通路的活性。 结论 BUD可抑制哮喘大鼠ASMCs增殖,并促进其凋亡,可能机制与抑制ERK 1/2及p38 MAPK信号通路有关。     

核因子-κB对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡及TGF-β1表达的影响

目的: 探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡和转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达的影响。方法: 体外培养ASMCs，以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药,将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β₁ mRNA表达，Western blotting检测NF-κB、TGF-β₁的表达，免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位，四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖，Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡。结果: （1）TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01)。（2）TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01),TNF-α＋PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01)；TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01)。（3）TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01)，TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01)。（4）TNF-α组ASMCs的TGF-β₁的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋PDTC组（P<0.01）。结论: NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β₁的表达和分泌。     

瘦素对大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨瘦素对大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养大鼠的ASMCs,分别用RT-PCR和Western blot测定ASMCs中瘦素受体mRNA和该细胞上瘦素受体蛋白的表达.不同浓度的瘦素(0～100 μgL)干预培养的ASMCs不同时间(1～72 h)后,以CCK-8法测定ASMCs的增殖情况.不同浓度的瘦素作用于ASMCs 48 h后,Western blot测定磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)和磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)的表达.结果:不同浓度的瘦素作用不同时间后,均可促进大鼠ASMCs增殖,并呈浓度依赖性(r=0.837,P＜0.01)和时间依赖性(r=0.874,P＜0.01).Western blot的结果显示,不同浓度的瘦素干预后,大鼠ASMCs中p-ERK、PI-3K蛋白的表达较对照组显著增加(P＜0.05),并与瘦素的浓度呈正相关(前者r=0.793,P＜0.01,后者r=0.746,P＜0.01).结论:大鼠ASMCs表面有瘦素受体表达.瘦素可促进体外培养的大鼠ASMCs增殖,其机制可能与激活p-ERK和PI-3K有关.     

半夏提取物通过AMPK/FOXO3a信号通路对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响

目的：探讨半夏提取物（EP）对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡的影响及作用机制。方法：采用卵清蛋白致敏和激发方式构建哮喘大鼠模型，分离并培养大鼠ASMCs，免疫荧光染色鉴定ASMCs中的α-肌动蛋白（α-actin），符合ASMCs特征后将ASMCs分为对照组、模型组、EP组、Compound C组、EP+Compound C组，MTT检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡；ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-6、TNF-α水平；Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原（PCNA）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、p-AMPK、叉头框蛋白O3a(FOXO3a)、p-FOXO3a蛋白表达。结果：免疫荧光染色显示98%细胞的细胞质中呈现绿色荧光的肌丝，α-actin呈阳性表达，证明培养的细胞为ASMCs。与对照组比较，模型组细胞OD490、CyclinD1、PCNA蛋白表达及上清中IL-6、TNF-α水平显著升高，细胞凋亡率、Bax、Caspas...     

核因子κB在蛋白激酶C诱导哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

目的： 探讨核因子κB（NF-κB）在蛋白激酶C（PKC）致哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖中的作用。方法： 16只Wistar大鼠随机分为哮喘组（8只）和对照组（8只）。应用PKC激动剂PMA和NF-κB抑制剂PDTC干预哮喘组和对照组大鼠ASMCs。采用流式细胞术、MTT法及增殖细胞核抗原（PCNA）免疫荧光技术等方法检测ASMCs增殖；免疫荧光技术及电泳迁移率改变分析(EMSA)检测NF-κB活性。 结果： PMA干预哮喘组ASMCs 后S期细胞比例、A值、PCNA表达率、NF-κBp65阳性率及结合带的灰度值均显著高于未干预的哮喘组ASMCs (均P<0.05)，PDTC预处理后再给予PMA上述指标均低于仅用PMA干预及未干预者(均P<0.05)。仅用PDTC处理的哮喘组ASMCs上述指标均低于未干预的ASMCs (均P<0.05)。结论： NF-κB参与哮喘大鼠ASMCs增殖，在其增殖中存在着PKC－NF-κB信号途径。     

肾舒对阿霉素肾病大鼠系膜基质的影响

为了探讨肾舒对阿霉素肾病（AN）大鼠的保护作用，我们将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（N组），阿霉素肾病组（A组），强的松治疗组（P组）和肾舒治疗组（S组），采用一次性尾静脉注射阿霉素建立AN模型，对AN大鼠分别用强的松和肾舒治疗，以自动图象分析仪测定各组肾小球系膜细胞数密度，系膜基质指数，对免疫组织化学反应进行半定量测定肾小球中IV型胶原（ColⅣ），层粘连蛋白（LN）及纤维连接蛋白（FN）含量。结果显示：A组大鼠肾小球系膜基质指数，系膜细胞数密度，ColⅣ，LN和FN均较N组明显增加（P＜0．05），S组大鼠以上五指标均较A组明显减少（P＜0．05），而P组大鼠与A组比较差别不明显（P＞0．05），提示肾舒能明显减少肾小球系膜细胞的增殖和系膜基质的合成，从而对AN大鼠具有明显保护作用，且治疗作用优于传统强的松疗法。     

香烟提取物对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的： 探讨香烟提取物（CSE）对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖作用及可能机制。方法: 16只SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,各8只。原代培养大鼠ASMCs,取第3-6代细胞,分为对照组、对照+CSE组、哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+嘧啶基-苯磺酰胺（GW8510,细胞周期蛋白依赖激酶-4抑制剂）组、哮喘+GW8510组。用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐（MTT）法及增殖细胞核抗原（PCNA）免疫细胞化学技术检测ASMCs增殖;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹（Western blotting）检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果: （1）哮喘组ASMCs与对照组ASMCs相比,在S+G2/M期比例、吸光度（A）值和PCNA表达率上明显增高,差异显著（P＜0.01）。（2）哮喘组ASMCs S+G2/M期比例、吸光度（A）值和PCNA表达率分别为(18.30±1.12)%、0.512±0.110、(55.1±3.7)%;哮喘+CSE组分别为（32.12±1.17）%、0.801±0.210、（90.2±7.3）%;哮喘+CSE+GW8510组分别为(17.21±0.95)%、0.508±0.009、(54.3±4.8)%;哮喘+GW8510组分别为(11.16±1.48)%、0.345±0.078、(40.6±5.4)%。除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著（P＜0.01）。（3）哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+GW8510组、哮喘+GW8510组ASMCs cyclin D1 mRNA A值比值和蛋白表达A值比值分别为0.236±0.045、0.271±0.002;0.369±0.124、0.379±0.002;0.231±0.075、0.261±0.002;0.165±0.064、0.193±0.002。除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著（P＜0.01）。结论: 正常与哮喘大鼠ASMCs在CSE干预后增殖明显加快,cyclin D1表达明显增加。CSE可能是通过cyclin D1参与调控哮喘大鼠ASMCs的增殖。     

PolyI:C介导气道平滑肌细胞TLR3和IL-8、Eotaxin的表达

目的:观察PolyI:C对大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)Toll样受体3(TLR3)及炎性细胞因子表达的影响,探讨ASMCs内TLR3表达与气道炎症间的关系。方法:体外培养大鼠ASMCs,传代培养后分为正常对照组和PolyI:C刺激组,PolyI:C刺激组又分为不同的时间点。用RT-PCR法检测细胞TLR3mRNA的表达;Western blot法检测ASMCs中核因子κB(NF-κB)的蛋白含量;ELISA法检测细胞培养上清Eotaxin和IL-8的浓度。结果:与正常对照组相比较,PolyI:C刺激组ASMCs内TLR3mRNA和NF-κB蛋白表达增加(P0.05);ASMCs培养上清液中IL-8和Eotaxin浓度增加(P0.05),并存在时间依赖性。结论:PolyI:C可以上调ASMCs内TLR3的表达,活化NF-κB,增加趋化因子Eotaxin和IL-8的浓度,参与哮喘的气道炎症反应。     

miR-192在肾脏和糖尿病肾病中的作用机制

本期“Smad交互蛋白1在增生性瘢痕组织中的表达及其对纤维化相关因子的影响”参考文献[12]：糖尿病肾病（DN）的关键特征为细胞外基质蛋白的堆积增加，如胶原Iα1和胶原Ⅱ（Col Iα1和ColⅡ）。转化生长因子β1（TGF-β1）是这些细胞外基质基因的关键调节因子，能够增加糖尿病肾病的系膜细胞（MC）。通过微阵列分析，我们注意到TGF—β1可增加小鼠系膜细胞（MMC）Col Iα2的mRNA表达水平，也能降低E—box阻抑蛋白δEF1的mRNA表达水平。     

Differential effects of extracellular matrix proteins on human airway smooth muscle cell proliferation and phenotype

Mature airway smooth muscle cells are characterized by a low proliferative index and expression of contractile marker proteins such as smooth muscle alpha-actin (sm-alpha-actin), calponin, and smooth muscle myosin heavy chain (sm-MHC). In the present study, defined extracellular matrix (ECM) components were examined on the proliferative and phenotypic status of mitogen-stimulated, cultured human airway smooth muscle cells. The results demonstrate that although cells adhered and spread on plates precoated with (1 to 100 microg/ml) of fibronectin (FN), collagen I (Col I), laminin (LN), or Matrigel, their subsequent proliferative response varied qualitatively. FN and Col I enhanced proliferation in response to either platelet-derived growth factor (PDGF)-BB or alpha-thrombin, compared with cells on plastic. LN, however, reduced mitogen-stimulated proliferation. A similar reduction was found in cells cultured on Matrigel. The effect of ECM substrates on contractile phenotype was determined by examining cellular expression of sm-alpha-actin, sm-MHC, and calponin using immunocytochemical and flow cytometric methods. Approximately 75% of PDGF-BB-stimulated cells, cultured on LN or Matrigel, expressed sm-alpha-actin, calponin, and sm-MHC, but only 8 to 10% stained for the Ki67 nuclear antigen proliferation marker. In contrast, more than 75% of cells cultured on FN or Col I were positive for Ki67 antigen, but only 20% were positive for contractile proteins. Flow cytometric analysis of sm-alpha-actin and DNA content confirmed the immunocytochemical findings and showed that the observed reduction in sm-alpha-actin content after culture on FN or Col I, compared with LN and Matrigel, occurred in the majority of the cell population, supporting bidirectional phenotype modulation. Overall, the data suggest that ECM substrates modulate both proliferation and phenotype of human airway smooth muscle cells in culture.     

P13K在细胞外基质分泌细胞因子表达中的作用

目的 探讨纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)两种细胞外基质(ECM)成分对被动致敏的人气道平滑肌细胞(HASMCs)免疫功能的影响及磷脂酰肌醇-3激酶(PDK)在此调控中的作用.方法 将HASMCs接种于FN、Col Ⅰ包被的培养板和空白培养板中,用10%哮喘患者血清被动致敏HASMCs,以10%非哮喘者血清为对照,在加入血清前用PDK抑制剂(LY294002)预处理HASMCs 30 min.采用RT-PCR法检测HASMCs RANTES(regulated upon activation.normal T cell ex-pressed and secreted)、Eotaxin、TGF·β1 mRNA表达;ELISA法测定HASMCs培养上清中RANTES、Eotax-in、TGF-β1蛋白水平.结果 与单纯对照血清组比较,单纯哮喘血清组、对照血清+FN组、对照血清+Col Ⅰ组HASMCs RANTES、Eotaxin、TGF-β1 mRNA和HASMCs培养上清中蛋白的表达均增高(P<0.05).哮喘血清+FN、哮喘血清+Col Ⅰ处理HASMC后,RANTES、Eotaxin、TGF-β1mRNA和HASMCs培养上清中蛋白的表达均高于单纯哮喘血清组,且LY294002干预后上述各指标均下降(P<0.05).结论 细胞外基质对被动致敏的HASMCs免疫功能具有调控作用,PI3可能参与细胞外基质对被动致敏的HASMCs的免疫功能调控.     

丹酚酸B对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响

目的:研究丹酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响及其机制。方法:培养人肾小球系膜细胞(HGMCs),随机分为正常对照组、高糖组及高糖+丹酚酸B高、中、低剂量组,高糖组和丹酚酸B各组用含高浓度(33.3 mmol/L)葡萄糖的培养基培养72 h,丹酚酸B各组同时加人相应浓度丹酚酸B共同孵育。Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平,ELISA法检测细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的分泌水平,Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及Smad2和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化水平。结果:高糖孵育72 h后,肾小球系膜细胞α-SMA的蛋白表达水平明显升高,ColⅠ、ColⅢ、FN及LN蛋白的分泌水平显著增加(P 0.01),TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平也明显升高(P 0.01);与丹酚酸B共同孵育可明显降低α-SMA蛋白的表达水平,ColⅠ、ColⅢ、FN和LN的分泌明显减少,TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平显著下降(P 0.01或P 0.05)。结论:丹酚酸B可明显抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化,减少ColⅠ和ColⅢ等细胞外基质分泌,其机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路及p38 MAPK活化有关。     

细胞外基质及其筑构对平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究细胞外基质层粘连蛋白(Laminin,LN),纤维连接蛋白(Fibronecfin,FN)和三维基膜基质Matrigel胶对平滑肌细胞增殖的作用。方法:将用酶消化法分离的兔主动脉平滑肌细胞种植在LN和FN上及三维基膜基质Matrigel胶里,然后用Brdu法检测各平滑肌细胞的增殖率。结果:生长在FN上的平滑肌细胞增殖率最高(24%),生长在LN上的平滑肌细胞增殖率次之(17%),而生长在三维基膜基质胶里的平滑肌细胞未出现细胞增殖,另外LN较FN有明显的促进平滑肌细胞分化成熟的作用。结论:细胞外基质成分和基质筑构对平滑肌细胞的增殖与分化具有重要的调节作用。     

Effect of angiotensin-(1-7) and angiotensin II on the proliferation and activation of human endometrial stromal cells in vitro

Recent studies have shown that angiotensin II (Ang II) or angiotensin-(1-7) [Ang-(1-7)] has effect on the proliferation and activation of a variety of cells, however, the exact mechanisms that the role of Ang II or Ang-(1-7) in human endometrial stromal cell (ESCs) remains elusive. Here we demonstrated that Ang II could promote proliferation and activation of ESCs, up-regulated the expression of a-SMA, TGF-β1 and IGF-I, increased the secretion of extracellular matrix [Type I collagen (Col I) and fibronectin (FN)] of ESCs; Ang-(1-7) could inhibit Ang II induced the proliferation and activation of ESCs, down-regulated the expression of a-SMA, TGF-β1 and IGF-I, decreased the secretion of extracellular matrix (Col I and FN) of ESCs. These findings suggest that Ang-(1-7) can inhibits Ang II induced the proliferation of ESCs, Ang-(1-7) can inhibits the Ang II induced activation of ESCs and decreases secretion of Col I and FN by suppressing TGF-β1 and IGF-I expression.     

Caveolae在高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成中的作用

 目的：探讨胞膜小凹(caveolae)在高糖(HG)诱导大鼠肾小球系膜细胞(MCs)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)表达过程中的作用。方法：传代培养的大鼠MCs同步化后分为：(1)正常糖组;(2)HG组;(3)HG+甲基-β-环糊精(β-MCD)组;(4)HG+β-MCD+胆固醇组。用Western blotting检测小凹蛋白1(Cav-1)、磷酸化小凹蛋白1(p-Cav-1-Y14)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白的表达水平,用实时定量PCR检测细胞中Cav-1 mRNA表达变化,用ELISA方法检测上清中纤维连接蛋白(FN)的蛋白含量。结果： (1)高糖状态下, 系膜细胞 FN和ColⅠ 蛋白表达水平均显著增加(均P<0.05)。(2)高糖培养显著增加p-Cav-1-Y14水平(P<0.01),而对Cav-1 mRNA及蛋白表达无明显影响(P>0.05)。(3)β-MCD预处理抑制了高糖诱导的 p-Cav-1-Y14升高(P<0.01)及FN表达(P<0.05),但对高糖诱导的Col I表达无影响;β-MCD的作用可被胆固醇抑制。结论：高糖可显著增加系膜细胞1型胶原及纤维连接蛋白的合成。高糖诱导的纤维连接蛋白合成与Cav-1磷酸化水平增加有关。     

脱细胞脑组织支架初步制备及形态学观察

目的 利用新型的脱细胞-交联技术制备脱细胞脑组织支架,为脑损伤修复提供一种实用性支架材料.方法 8只健康SD成年大鼠皮层脑组织,完全随机法选取2只用于正常脑基质成分免疫组织化学染色,其余6只经过脱细胞及交联处理,初步制成脱细胞脑组织基质修复支架;光镜及电镜观察支架空间构型,了解支架交联前后失质量率的改变;免疫组织化学对比观察正常脑组织和支架材料中纤维粘连蛋白(FN)、细胞外基质层粘连蛋白(LN)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)的含量和分布情况.结果 大鼠皮层脑组织经脱细胞处理后,形态上具有高度仿生的三维立体孔洞结构,孔壁较薄(厚度约2μm),孔径相近(平均约50～200 μm),孔隙率约为85%～92%,交联后支架材料失质量率明显变小(15.09比62.50,P=0.001);免疫组化显示LN、FN和ColⅢ在正常脑组织呈弱阳性表达,在支架材料中LN亦呈弱阳性表达.结论 初步研制的脱细胞脑组织基质修复支架具备了神经修复支架材料的基本物理学条件,具有作为中枢神经系统再生支架材料的良好应用前景.     

The growth and morphological behavior of salivary epithelial cells on matrix protein-coated biodegradable substrata

The purpose of this study was to examine the growth and morphology of a salivary epithelial cell line (HSG) in vitro on several biodegradable substrata as an important step toward developing an artificial salivary gland. The substrates examined were poly-L-lactic acid (PLLA), polyglycolic acid (PGA), and two co-polymers, 85% and 50% PLGA, respectively. The substrates were formed into 20- to 25-mm disks, and the cells were seeded directly onto the polymers or onto polymers coated with specific extracellular matrix proteins. The two copolymer substrates became friable over time in aqueous media and proved not useful for these experiments. The purified matrix proteins examined included fibronectin (FN), laminin (LN), collagen I, collagen IV, and gelatin. In the absence of preadsorbed proteins, HSG cells did not attach to the polymer disks. The cells, in general, behaved similarly on both PLLA and PGA, although optimal results were obtained consistently in PLLA. On FN-coated PLLA disks, HSG cells were able to form a uniform monolayer, which was dependent on time and FN concentration. Coating of disks with LN, collagen I, and gelatin also promoted monolayer growth. This study defines the conditions necessary for establishing a monolayer organization of salivary epithelial cells with rapid proliferation on a biodegradable substrate useful for tissue engineering.