镍钛自膨胀支架置入血管后细胞凋亡与增生的实验观察

目的　血管内支架置入后的再狭窄是尚未解决的主要课题 ,本研究对置入镍钛 (NITI)自膨胀支架的动物进行研究 ,观察支架置入后血管平滑肌细胞 (VSMC)的凋亡与增生的关系 ,为再狭窄的防治提供新的方法。方法　在兔的腹主动脉内置入 30个NITI合金自膨胀支架 ,按不同时间处死动物 ,采用电镜和 3′ 末端DNA原位标记法 (TUNEL)观察VSMC的凋亡。结果　从支架置入后的 2 4h到 8周 ,支架置入部位均可见到凋亡的VSMC ,3～ 6周时 ,凋亡达到高峰 ,8周以后凋亡细胞开始减少。凋亡的细胞主要分布于血管的新生内膜层 ,但中膜层也存在有少量的凋亡细胞。结论　NITI自膨胀支架置入后 ,不仅有SMC的增生 ,也有SMC的凋亡。     

血管支架植入对血管平滑肌细胞的影响

支架植入是冠心病的一种重要治疗方式,植入过程伴随着血管壁的损伤和机械性能的改变,进而导致血管平滑肌细胞进行一系列复杂的表型变化,包括从中膜向内膜的迁移和增殖,以及从收缩表型转变为合成表型等,从而导致新生内膜的增殖和支架内再狭窄的发生。恢复血管生理稳态、保持血管平滑肌细胞表型稳定是经皮冠状动脉介入治疗的最终理想,故探究血管支架植入后血管平滑肌细胞发生的生物反应,将有助于新一代心血管器械研发,帮助临床决策的制定。现对血管支架植入对血管平滑肌细胞的生物学影响进行综述。     

牛磺酸对兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨牛磺酸对兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3蛋白表达的影响.方法:将24只日本大耳白兔随机分为正常对照组、高脂模型组和牛磺酸组,14周后观察各组主动脉组织病理形态学改变,透射电镜观察斑块内平滑肌细胞超微结构变化,流式细胞术检测动脉粥样斑块内平滑肌细胞凋亡率,免疫组化染色法检测凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白表达,Western blot蛋白印记法检测caspase-3蛋白表达.结果:高脂模型组与正常对照组比较,动脉内膜出现典型的斑块,管腔极度狭窄,典型的凋亡平滑肌细胞明显增多,平滑肌细胞凋亡率、bax及caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),bcl-2蛋白表达降低(P<0.05).牛磺酸组与高脂模型组比较,主动脉斑块缩小,动脉管腔狭窄减轻,凋亡平滑肌细胞不典型且较少,平滑肌细胞凋亡率、bax蛋白表达及caspase-3蛋白表达降低(P<0.01),bcl-2蛋白表达升高(P<0.05).结论:牛磺酸可能通过对bcl-2、bax及caspase-3蛋白表达的调控而降低动脉斑块内过度凋亡的平滑肌细胞,从而抑制粥样斑块的形成.     

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）对体外培养的人血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMC,给予Hcy干预。5个不同浓度组Hcy分别为0、100、200、500、1000μmol/L,培养24 h,每个浓度设6个标本;同一浓度（1000μmol/L）分别培养0、6、12、24、48 h,每个时间设6个标本;然后用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果单因素方差分析显示,5个不同浓度和时间的细胞凋亡率之间存在统计学差异（P〈0.01）;凋亡率与Hcy干预浓度（0-1000μmol/L）和干预时间（0-48 h）存在直线相关关系（r分别为0.998、0.999,P〈0.01）。结论Hcy可以诱导人VSMC的凋亡,而且这一效应呈浓度和时间依赖性。     

腹主动脉瘤血管平滑肌细胞凋亡和自噬研究

目的探讨血管平滑肌细胞(SMC)凋亡和自噬与腹主动脉瘤(AAA)发病的关系。方法采用原位末端DNA标记(TUNEL)技术观察AAA和人正常主动脉组织中SMC凋亡的情况,并用免疫组织化学分析其中LC3的蛋白表达。提取AAA和正常主动脉组织RNA,采用RT-PCR方法检测其中与自噬相关的基因Beclin1、Atg4b、Bnip3、Vps34的表达。结果 AAA组织中凋亡的SMC明显高于正常主动脉组织(P0.05);LC3蛋白在AAA中的表达高于正常主动脉组织(P0.05);AAA中Beclin1、Atg4b、Bnip3、Vps34表达水平明显高于正常主动脉组织(P0.05)。结论 SMC凋亡和自噬在AAA的发病中起重要作用。     

菟丝子总黄酮对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响

目的观察菟丝子总黄酮对血管平滑肌细胞凋亡的影响,并探讨其保护作用机制。方法菟丝子经溶剂提取,聚酰胺柱分离得黄酮提取物;大鼠胸主动脉平滑肌细胞传代培养,实验分四组,采用流式细胞仪检测细胞凋亡、Westen印迹法测定细胞Bcl-2和Bax蛋白表达及RT-PCR测定C-myc基因表达情况。结果菟丝子总黄酮高剂量组能够增加活细胞数量,降低死亡细胞数,特别是降低早期凋亡细胞数,与模型组比较有显著差异(P<0.05);菟丝子总黄酮高剂量组能够下降Bax蛋白表达量,与模型组比较有显著差异(P<0.05),而菟丝子总黄酮低剂量组升高Bcl-2蛋白表达量,与模型组比较有显著差异(P<0.05);菟丝子总黄酮高剂量和低剂量组C-myc m RNA表达量显著升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),无剂量依从效应。结论菟丝子总黄酮能抑制平滑肌细胞凋亡,其可能是通过能够下降Bax蛋白和升高Bcl-2蛋白表达,改善抗凋亡和促凋亡的蛋白失衡,增加细胞周期C-myc的基因的表达来发挥对心血管起保护作用。     

齐墩果酸对过氧化氢诱导血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的研究齐墩果酸(OA)对H_2O_2诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响。方法采用贴块法培养大鼠主动脉VSMCs,随机分为对照组、H_2O_2组、H_2O_2+OA组、阻断剂组。采用Hoechst 33342染色和Annexin V/FITC染色检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞中磷酸化Akt蛋白表达变化。结果与对照组比较,H_2O_2组细胞凋亡率明显升高,p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.05);与H_2O_2组比较,H_2O_2+OA组细胞凋亡率明显降低,p-Akt蛋白表达明显升高(P<0.05);与H_2O_2+OA组比较,阻断剂组细胞凋亡率明显升高,p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.05)。荧光显微镜显示,对照组细胞核呈蓝色,H_2O_2组细胞核呈致密浓染,H_2O_2+OA组细胞核呈蓝染,有少量细胞核致密浓染,阻断剂组细胞核呈致密浓染。结论 OA能减轻H_2O_2导致的VSMCs凋亡,其机制可能与激活细胞内磷脂酰肌醇-3激酶/Akt信号通路引起下游促生存基因的表达有关。     

血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化

细胞凋亡是细胞死亡的一种特殊形式,其过程受遗传基因及其他多种因素调控,最近研究表明,在动脉粥样硬化斑块中发现血管平滑细胞凋现象,本文着重介绍血管平滑肌细胞凋亡的相关基因,诱导因素,在动脉粥样硬化发生中的病理意义及未来研究展望。     

血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化

血管平滑甩细胞凋亡参与了弱样硬化的形成过程。本文简述了血管平滑肌细胞凋亡在动脉粥样硬化中的意义，血管平骨肌细胞凋亡的有关诱导因素、信号传递、基因调控及与部分动脉粥样化临床并发症的关系。     

平滑肌细胞凋亡与血管疾病

平滑肌细胞凋亡参与了多种疾病的发生、发展过程。已有许多实验证明平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化、血管再狭窄、高血压血管壁重塑、动脉瘤以及冠脉旁路移植术后移植血管的病变均有密切关系。     

雌激素对血管平滑肌细胞凋亡及c-myc基因表达的影响

目的探讨17β雌二醇(E2)对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的影响及其可能机制.方法应用流式细胞仪检测低、高浓度17βE2(10、100 nmol/L)对传代的VSMC凋亡率的影响,并通过细胞免疫组化方法观察对凋亡相关基因c-myc表达的影响.结果17β E2作用下VSMC凋亡率显著高于对照组(P＜0.01),伴随着VSMC凋亡率的增加,c-myc蛋白的表达亦增强,且表现明显的浓度依赖性.结论17β E2具有诱导VSMC凋亡的作用,其部分机制可能是通过上调促凋亡基因c-myc的表达有关.     

过氧化氢酶过度表达对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨腺病毒戢体介导的过氧化氢酶基因转染对体外培养的人血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法 用含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染人血管平滑肌细胞，采用Western blot方法检测血管平滑肌细胞过氧化氢酶的表达。应用流式细胞术、TUNEL法等方法检测血管平滑肌细胞的凋亡。结果 含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染后血管平滑肌细胞过氧化氢酶表达明显增多；流式细胞术显示含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组与对照组比较凋亡率明显增加（P〈0．01）。经TUNEL分析显示，含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组凋亡细胞明显多于对照组。两者之间有显著性差异（P〈0．001）。结论 腺病毒载体介导的过氧化氢酶基因转染导致过氧化氢酶过度表达。促进人血管平滑肌细胞的凋亡，这可能是防治经皮腔内冠状动脉血管成形术后再狭窄的一种新方法。     

tMfn基因2对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的:采用腺病毒介导的去除穿膜区序列的大鼠线粒体融合素基因2(tMfn2)感染血管平滑肌细胞(VSMCs),研究其促VSMCs凋亡的作用及其相关的信号通路。方法:用携带大鼠线粒体融合素基因2(Mfn2)的腺病毒(Adv-Mfn2-GFP)和携带tMfn2基因的腺病毒(Adv-tMfn2-GFP)感染VSMCs,采用激光共聚焦显微镜技术观察tMfn2和Mfn2的融合蛋白在细胞中的定位;细胞凋亡ELISA方法、TUNEL染色法研究Mfn2、tMfn2对VSMCs凋亡的影响;Western Blot方法研究tMfn2促进VSMCs凋亡的相关信号通路。结果:激光共聚焦显微镜成像技术证实tMfn2融合蛋白主要游离于细胞质内,而Mfn2融合蛋白主要位于线粒体外膜。采用ELISA方法证实Adv-tMfn2-GFP感染组促进VSMCs凋亡作用比Adv-Mfn2-GFP感染组更显著;Adv-tMfn2-GFP感染组TUNEL染色的凋亡细胞较Adv-Mfn2-GFP感染组明显增多(P<0.05)。Western Blot结果显示,与空白对照组相比,Adv-Mfn2-GFP感染组、Adv-tMfn2-GFP感染组对应的P-Akt条带明显减弱,且后者更显著(P<0.05)。结论:tMfn2由于去除了穿膜区序列,其表达产物主要游离于细胞质中,更易于通过Ras-PI3K/Akt信号通路,抑制Akt的磷酸化,促进VSMCs凋亡,且作用较Mfn2更明显。     

冠状动脉支架置入对分支血管的影响

目的 比较观察不同药物洗脱支架及普通支架置入术后分支血管的自然发展情况,探讨分支血管闭塞及再通的影响因素。方法回顾性分析在解放军总医院心内科接受支架置入术并进行造影随访的183例患的病例资料及术前、术中、术后的造影光盘资料,分析支架覆盖的所有分支血管。结果支架术后分支血管的闭塞率是8．9％,其中Cypher药物支架组为10．5％,Taxus药物支架组为11．1％,普通支架为7．8％,72．0％的闭塞分支在随访时再通,其中Cypher组是90．9％,Taxus组为66．7％,普通支架组为66．7％;三组间差异无统计学意义;分支开口狭窄和起始部位有病变是分支血管闭塞的独立危险因素;支架内再狭窄、病变类型及分支情况等都不会影响闭塞分支的再通。结论不同类型的药物支架和普通支架在对分支血管的影响方面基本一致;分支开口狭窄和分支起始部位病变是分支血管闭塞的独立危险因素;闭塞的分支血管自然预后良好,大部分会自行再通。     

血管平滑肌细胞凋亡机制的研究进展

血管平滑肌细胞凋亡与很多心血管疾病的发生、发展密切相关,目前已经成为心血管疾病防治研究的热点。现对血管平滑肌细胞凋亡机制的研究现状进行了较为深入的探讨,从其诱导因素以及基因调控机制等角度综述了近年来国内外在这方面的研究进展。     

血管平滑肌细胞凋亡机制的研究进展

本文探讨血管平滑肌细胞凋亡机制的研究现状、血管平滑肌细胞凋亡的诱导因素以及基因调控机制。     

NiTi放射性支架置入兔腹主动脉后对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的　观察NiTi放射性支架对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法　在 76只家兔腹主动脉中分别置入放射与非放射性支架。用免疫组化法和TUNEL法观察放射性支架对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。结果　 (1) 2周时放射与非放射性组新生内膜面积无显著差异 (P >0 0 5 ) ,1个月和 3个月时放射支架组新生内膜面积小于非放射性组 (P <0 0 1) ;(2 )PCNA法测定平滑肌细胞增殖显示放射性组在各时间点PCNA表达低于非放射性组 (P <0 0 5 ) ;(3)TUNEL法测定放射性组平滑肌细胞凋亡与对照组相比在 2周和 1个月时有显著差异 (P<0 0 5 ) ,在 3个月时两组平滑肌细胞凋亡无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　 (1)放射性支架可减少支架置入术后支架内新生内膜面积。 (2 )放射性支架可抑制血管平滑肌细胞增殖。 (3)放射性支架促进血管平滑肌细胞凋亡     

线粒体融合素2突变体对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的研究大鼠线粒体融合素2(mitofusin 2,Mfn2)基因蛋白激酶A(PKA)磷酸化位点的2种突变体对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡及其相关的信号通路的影响。方法构建4种重组腺病毒,分别携带磷酸化位点突变为丙氨酸(重组1组)、Mfn2基因(重组2组)、突变为天冬酰胺(重组3组)和半乳糖苷酶基因(对照组),感染培养的VSMCs,另设未感染腺病毒的空白组。流式细胞术比较各组细胞的凋亡率,JC-1染色法检测线粒体膜电位变化,Western blot分析各组Mfn2蛋白的表达以及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和活性半胱天冬酶9(caspase-9)表达。结果与空白组和对照组比较,重组1组、重组2组和重组3组Mfn蛋白显著增加(P0.01);重组1组和重组2组细胞凋亡率显著增强(P0.01);线粒体膜电位显著降低(P0.01);p-Akt表达水平显著降低(P0.01),活性caspase-9表达水平显著增高(P0.01);且重组1组作用较重组2组更明显(P0.01);而重组3组上述指标无显著差异(P0.05)。结论 Mfn2突变为丙氨酸的位点PKA通过Akt信号及线粒体途径诱导VSMCs凋亡的作用较Mfn2更明显,表明PKA磷酸化位点是调控Mfn2诱导VSMCs凋亡的重要功能位点。     

Fas Ligand基因转染对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 :研究腺病毒介导FasLigand基因转染对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响。 方法 :常规分子生物学技术构建重组腺病毒Ad FasL、Ad βgal。免疫组化方法检测转染Ad FasL的大鼠血管平滑肌细胞FasLigand蛋白表达。用TUNEL法检测转染腺病毒的血管平滑肌细胞是否发生凋亡。结果 :10 0moiAd FasL转染大鼠血管平滑肌细胞 ,10 0 %细胞表达FasLigand蛋白 ,并发生凋亡。结论 :大鼠对Ad FasL转染诱导的凋亡易感。因此可以推断Ad FasL转染损伤后血管壁将减少血管平滑肌细胞积累。Ad FasL转染可能是有效的再狭窄治疗策略     

三种反义c-myc RNA对血管平滑肌细胞凋亡的影响

为探讨反义寡脱氧核苷酸对大鼠肝细胞载脂蛋白Ｂ基因的表达是否具有调控作用,并探索其作用机制。以合成的载脂蛋白Ｂ基因正、反义寡脱氧核苷酸加入培养的肝细胞,测量载脂蛋白Ｂ１００含量;用反转录聚合酶锭反应评价载脂蛋白Ｂ基因的表达。结果发现,载脂蛋白Ｂ基因反义宜脱氧核苷酸可明显下调载脂蛋白Ｂ１００的ｍＲＮＡ表达,５、１０、１５和２０μｍｏｌ／Ｌ的反义寡脱氧核苷酸,可分别降低肝细胞载脂蛋白Ｂ深度的２６．６％、