蛋白激酶C在精氨酸加压素诱导的心肌成纤维细胞诱导型一氧化氮合酶-一氧化氮系统活性增高中的作用

目的:观察蛋白激酶C(PKC)在精氨酸加压素(AVP)诱导下仔鼠心肌成纤维细胞(CFs)诱导型一氧化氮合酶(i NOS)-一氧化氮(NO)系统活性增高中的作用。方法:胰酶消化法分离培养Sprague-Dawley仔鼠CFs,硝酸还原酶法、分光光度法和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CFs NO含量、一氧化氮合酶(NOS)活性和i NOS mRNA表达。结果:AVP显著提高CFs i NOS-NO系统活性;PKC抑制剂chelerythrine剂量依赖性地抑制AVP对CFs i NOS-NO系统活性的提高作用,其中10-6mol/L chelerythrine可将AVP诱导下CFs i NOS-NO系统活性抑制到与基础状态近似水平。结论:PKC参与了AVP诱导下CFs i NOS-NO系统活性的提高,PKC有可能成为阻断或逆转心肌纤维化新的干预靶点。     

精氨酸升压素对大鼠心肌成纤维细胞诱导型一氧化氮合酶-一氧化氮系统活性的影响

目的　研究精氨酸升压素 (AVP)对大鼠心肌成纤维细胞诱导型一氧化氮合酶 (iNOS) 一氧化氮 (NO)系统活性的影响。方法　胰酶消化法分离培养Sprague Dawley仔鼠心肌成纤维细胞 ,采用硝酸还原酶法、蛋白质印迹和逆转录 聚合酶链式反应观察AVP对心肌成纤维细胞的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOSmRNA表达的影响。结果　 (1)不同浓度AVP干预下 ,心肌成纤维细胞的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOSmRNA表达都随AVP浓度的增高而增加。其中 10 -7mol/LAVP组和 10 -6mol/LAVP组的NO含量 [(6 9 0 5± 5 5 6 ) μmol/L和 (6 2 86± 6 0 5 ) μmol/L]、iNOS蛋白水平 (0 73± 0 0 6和 0 6 4± 0 0 5 )和iNOSmRNA表达 (0 70± 0 0 3和 0 6 6± 0 0 6 )都显著高于对照组 [(2 9 34± 5 34)μmol/L ,0 2 0± 0 0 5 ,0 2 5± 0 0 4 ]、10 -9mol/LAVP组 [(31 79± 6 5 9) μmol/L ,0 2 4± 0 0 7,0 30±0 0 6 ]和 10 -8mol/LAVP组 [(36 87± 7 89) μmol/L ,0 30± 0 0 9,0 31± 0 0 3]。但 10 -6mol/LAVP组的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOSmRNA表达都低于 10 -7mol/LAVP组。 (2 ) 10 -7mol/LAVP干预下CFs的NO含量、iNOS蛋白水平和iNOSmRNA表达都随培养时间的延长而增加。其中 2 4h组和 36h组的NO含量 [(6 5     

颈动脉窦诱导型一氧化氮合酶的抑制对压力感受性反射的影响

目的 :探讨 SD大鼠颈动脉窦 （CS）诱导型一氧化氮合酶 （i NOS）与压力感受性反射 （BR）及血压的关系。方法 :合成的 i NOS反义寡核苷酸 （ASODN）和其正义链干预 SD大鼠 CS前后 ,用生理记录仪同时记录血压和心率 ,测定静脉注射苯肾上腺素 （PE）引起的加压反应和压力感受性反射敏感度 （BRS）及心率变化中点对应的血压值（MAP5 0 ） ,CS处 i NOS含量的变化通过免疫组化的方法测定 ,并对其 CS的 i NOS进行免疫组化染色分析。结果 :1i NOS- ASODN干预大鼠 CS后 ,加压反应较干预前减弱 （2 4± 3 vs 44± 6 mm Hg,P<0 .0 1,1mm Hg=0 .133k Pa） ,而 i NOS正义链干预 CS后加压反应较干预前无变化 （37± 9vs41± 7mm Hg,P>0 .0 5 ） ;2 i NOS- ASODN干预大鼠 CS后 ,MAP5 0 较干预前下降 （135± 6 vs147± 6 m m Hg,P<0 .0 1） ,压力心率曲线左移 ,而 i NOS正义链干预 CS后 ,MAP5 0 较干预前无差异 （147± 7vs146± 7mm Hg,P>0 .0 5 ） ;3i NOS- ASODN干预大鼠 CS后 ,BRS较干预前升高 （- 3.6± 0 .5 vs- 2 .3± 0 .7beat· s- 1 · m m Hg- 1 ,P<0 .0 1） ,而 i NOS正义链干预 CS后 BRS较干预前无变化 （- 2 .5± 0 .5 vs- 2 .5± 0 .6 beat· s- 1· mm Hg- 1 ,P>0 .0 5 ） ;4i NOS- ASODN干预大鼠 CS后 ,对血压无影响 (12 3± 6     

吡格列酮对自发性高血压大鼠心脏成纤维细胞周期的影响

目的研究盐酸吡格列酮对培养的自发性高血压大鼠（SHR）和血压正常大鼠（WKY）心脏成纤维细胞（CFs）细胞周期的影响,并进一步探讨其与NO-NOS系统的关系。方法采用胶原酶消化法培养SHR和WKY的CFs,流式细胞仪（FCM）分析技术检测细胞周期,硝酸还原酶法测定CFs培养上清NO浓度,分光光度法测定CFs培养上清NOS活性。结果0.1、1、5和10μmol/L的吡格列酮作用48h后,SHR、WKY CFs的G0/G1期细胞百分率较对照组显著增高（均P<0.01）,S期细胞百分率、G2/M期细胞百分率和增殖指数则显著低于对照组（P<0.01,P<0.05）,且随着作用浓度的增加,吡格列酮对细胞周期的影响逐渐增强。5μmol/L的吡格列酮干预48 h后,SHR和WKY的CFs培养上清NO浓度分别为（111.2±12.4）μmol/L和（221.7±35.3）μmol/L,与各自对照组（76.8±2.4）μmol/L、（112.1±8.9）μmol/L相比,差异非常显著（P<0.01）;SHR和WKY大鼠CFs培养上清NOS活性分别为（208±18）μkat/L、（257±30）μkat/L,和各自对照组（148±10）μkat/L、（187±8）μkat/L相比,亦有非常显著性差异（P<0.01）。NO浓度和NOS活性呈显著正相关（r=0.964,P<0.01）。结论吡格列酮能够抑制SHR CFs的细胞周期增殖,其效应可能与上调NO-NOS系统活性有关。     

精氨酸加压素诱导大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的作用

目的 :探讨精氨酸加压素 （AVP）对大鼠心脏成纤维细胞 （CFs）胶原合成的影响。方法 :采用胰酶消化法分离、培养新生 SD大鼠 CFs,3H-脯氨酸掺入法和羟脯氨酸比色法分别观察不同浓度 AVP及其 V1 受体拮抗剂 [d（CH2 ） 5 Tyr2 （Me） ]AVP对 CFs的影响。结果 :1CFs3H-脯氨酸掺入率随着 AVP浓度的增加而增高 ,其中 10 - 7mol/ L,10 - 6 mol/ L AVP组的 3H-脯氨酸掺入率分别为 （5 41± 96 ） cpm/ 5 0 0 0 cells和 （5 6 5± 72 ） cpm/ 5 0 0 0 cells,较对照组 （16 6± 31） cpm/ 5 0 0 0 cells明显增高 （均 P<0 .0 1） ;10 - 7m ol/ L AVP+ 10 - 7mol/ L[d（CH2 ） 5 Tyr2 （Me） ]AVP组3H -脯氨酸掺入率 （2 6 8± 6 4） cpm/ 5 0 0 0 cells较 10 - 7m ol/ L AVP组明显降低 （P<0 .0 1）。 2 CFs培养上清光吸收值（A值 ）随着 AVP浓度的增加而增高 ,其中 10 - 7m ol/ L ,10 - 6 m ol/ L AVP组的培养上清 A值分别为 0 .2 2± 0 .0 1和0 . 2 4± 0 .0 1,明显高于对照组 0 .2 0± 0 .0 1,有统计学意义 （均 P <0 .0 1） ;10 - 7m ol/ L AVP+ 10 - 7mol/ L [d（CH2 ） 5 Tyr2 （Me） ]AVP组的 A值为 0 .19± 0 .0 1,明显低于 10 - 7mol/ L AVP组 （P<0 .0 1）。结论 :AVP促进 SD大鼠 CFs胶原合成 ,其作用可能与 V1 受体介导有关     

反义MAPK寡核苷酸可抑制血管升压素诱导的心肌成纤维细胞一氧化氮合酶活性

目的探讨反义丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）寡核苷酸对血管升压素（VP）诱导的心肌成纤维细胞（CFs）一氧化氮合酶（NOS）活性的抑制作用。方法分离培养SD仔鼠CFs,采用分光光度法和RT-PCR测定CFs NOS活性和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达。结果VP显著提高CFs NOS活性和iNOS mRNA表达;反义MAPK寡核苷酸剂量依赖性地抑制VP诱导下CFs NOS活性增高和iNOS mRNA表达增强,其中0.2μmol/L和0.3μmol/L反义MAPK寡核苷酸可将VP诱导下CFs NOS活性和iNOS mRNA表达抑制到与对照组近似水平。结论MAPK参与了VP诱导下CFs NOS活性增高和iNOS mRNA表达增强。     

拉西地平对AVP诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响及其与ERK1/2的关系

目的观察拉西地平对血管加压素（AVP）诱导的大鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与细胞外信号调节激酶（ERK）1/2的关系。方法以培养的新生SD大鼠CFs为实验模型,采用四氮唑盐比色法测定细胞数目;用流式细胞术分析细胞周期;用蛋白免疫印迹法测定总细胞外信号调节激酶（t-ERK）1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）1/2在细胞内的表达。实验按照给予CFs干预因素的不同,分为对照组、10-7mol/L AVP处理组、10-910-6mol/L拉西地平+10-7mol/L AVP干预组和10-7mol/L拉西地平单独干预组。结果①10-7mol/LAVP干预24 h后,CFs的A490值（0.232±0.013）较对照组（0.132±0.008）显著增高（P<0.01）。在10-910-6mol/L拉西地平和10-7mol/L AVP共同干预下,拉西地平可呈浓度依赖性地下调CFs的A490值,分别为0.216±0.01、0.203±0.01、0.176±0.01和0.160±0.01,均显著低于AVP组（P<0.01）。②细胞周期分析显示,AVP组CFs在S期的百分率和增殖指数（PI）分别为13.06±0.83和21.70±1.55,与对照组（分别为4.60±0.60和8.97±1.56）比较显著增高（P<0.01）。在10-7mol/L拉西地平干预下,细胞在S期的百分率（8.84±0.80）和PI（15.46±1.84）较AVP组显著降低（P<0.01）。③AVP组CFs的p-ERK1/2表达显著高于对照组（P<0.01）,10-9、10-8、10-7和10-6mol/L拉西地平组CFs中p-ERK1/2的表达与AVP组比较呈浓度依赖性地降低（P<0.01）。结论拉西地平可抑制AVP诱导的大鼠CFs增殖,提示拉西地平对预防和逆转心脏重构具有一定的作用,其机制可能与ERK1/2的磷酸化有关。     

辛伐他汀对血管加压素诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其与小窝蛋白-1表达的关系

目的研究辛伐他汀（simvastatin,Sim）对精氨酸血管加压素（arginine vasopressin,AVP,简称血管加压素）诱导成年大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其与小窝蛋白-1（caveolin-1,cav1）的关系。方法离体培养成年大鼠CFs,以四氮唑盐（MTT）比色法检测CFs的增殖,流式细胞分析仪测定其细胞周期,蛋白免疫印迹法检测cav1蛋白的表达。观察cav1在AVP诱导大鼠CFs增殖前后及Sim干预后的变化。结果10-7mol/LAVP干预24 h后,MTT比色法检测CFs的吸光值（A）（0.24±0.03）较对照组（0.15±0.02）显著增高（P<0.01）;给予10-810-5mol/L的Sim和AVP共同干预后,CFs的A值呈递减趋势,分别为0.22±0.03、0.21±0.02、0.19±0.02和0.17±0.02,均较AVP组降低,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。以10-7mol/L的AVP干预24 h后,CFs S期的百分率（19.52±1.07）和增殖指数（48.25±1.27）较对照组（分别为7.02±0.27和18.93±3.03）均显著增高（均P<0.01）;10-710-5mol/L Sim与10-7mol/L AVP联合干预组CFs S期的百分率和增殖指数均较AVP单独干预组降低,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。10-7mol/L的AVP分别与10-810-5mol/L的Sim共同干预后,cav1蛋白的表达呈浓度依赖性地减少。甲羟戊酸（MVA）可逆转Sim对CFs增殖的抑制效应,并拮抗Sim诱导的cav1蛋白表达的降低。结论Sim可抑制AVP诱导的CFs增殖,Sim的干预效应可能受到cav1蛋白表达的调节。     

洛伐他汀对醛固酮诱导鼠心肌成纤维细胞增殖及其 iNOS-NO 系统活性的调控作用

目的：探讨洛伐他汀对醛固酮诱导心肌成纤维细胞（ CFs）增殖及诱导型一氧化氮合酶-一氧化氮（ iN-OS-NO）系统活性的调控作用。方法用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠CFs,采用MTT比色法、硝酸还原酶法、分光光度法和半定量RT-PCR技术,观察不同浓度洛伐他汀对CFs增殖、NO含量、iNOS活性和iNOS mRNA表达的影响。结果洛伐他汀（1×10-8～1×10-5 mol/L）能剂量依赖性抑制醛固酮诱导CFs的增殖,升高CFs的NO含量、iNOS活性及增加iNOS mRNA的表达（P均＜0．05）,甲羟戊酸（1×10-3 mol/L）、法尼酯焦磷酸（5μmol/L）可完全逆转洛伐他汀的上调作用。洛伐他汀干预下醛固酮诱导CFs的NO生成量与iNOS活性、iNOS活性与iNOS mRNA表达均呈正相关（r分别为0．826、0．752,P均＜0．01）;CFs增殖数目与NO含量呈负相关（r＝-0．908,P＜0．01）。结论洛伐他汀可上调醛固酮诱导CFs的iNOS-NO系统活性,抑制CFs增殖,并呈剂量依赖性,其作用机制可能与甲羟戊酸途径调节有关。     

红芪多糖对高糖条件下人脐静脉内皮细胞功能的影响

目的研究红芪多糖（HPS）对高糖条件下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）合成和释放一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）的影响及作用机制。方法从新鲜脐带中分离HUVEC进行鉴定、培养,细胞分为正常对照组、高糖组（30mmol／L葡萄糖）和HPS干预组。MTT比色法分析HPS对高糖诱导HUVEC增殖率的影响,流式细胞术Annexin—V／PI双染法检测细胞凋亡,硝酸盐还原酶法检测上清液中NO的水平,分光光度法检测细胞内一氧化氮合酶（NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的浓度,酶联免疫吸附（ELISA）法检测上清液中ET-1的含量,实时荧光定量聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、ET-1和c-Jun氨基末端激酶l（JNKl）mRNA的表达水平。组间差异显著性检验使用单因素方差分析,组间两两比较使用LSD法。结果高糖组在6h[（82．4±3．5）％]、24h[（68．2±1．4）％]、48h[（63．0±2．9）％]的细胞增殖率显著低于对照组（100％,P〈0．05）;HPS干预组细胞增殖率随浓度变化呈现先上升后下降的趋势,其中50mg／L[（85．34-4．6）％]、100mg／L[（89．6±1．1）％]、200mg／L[（88．8±3．6）％]HPS干预组较高糖组增加,差异具有统计学意义（均P〈0．05）;高糖组NO[（24．84±1．34）μmol／L]、NOS[（0．54±0．06）U／m1]含量较正常对照组呈现下降的趋势,iNOS[（0．133±0．015）U／m1]和ET_l[1（0．740±0．070）ng／m1]含量则在各时间点均高于对照组,HPS干预组升高不同时间点HUVEC内NO[（23．20±0．55）p．mol／L]、NOS[（0．46±0．10）U／m1]、以及降低iNOS[（0．08±0．020）U／m1]和ET-1[（0．710±0．030）μg/L]的变化,P〈0．05,使其趋向正常水平;HPS可提高高糖所致内皮细胞eNOSmRNA的水平[（0．33±0．02）比（0．23±0．04）],降低ET-1mRNA的水平（2．28±0．31比2．79±0．29）;高糖组细胞内JNK1mRNA水平表达（2．95±0．05）较正常对照组（1．00±0．00）显著增加（P〈0．05）,而HPS干预组（1．45±0．05）则较高糖组（2．95±0．05）明显减少（P〈0．05）。结论HPS对体外高糖诱导HUVEC损伤具有保护作用,这一作用可能与抑制JNK信号通路有关。     

S-nitrosylation/activation of COX-2 mediates NMDA neurotoxicity

Glutamate/N-methyl-d-aspartate (NMDA) receptor-mediated neurotoxicity involves cyclooxygenase (COX)-2. We demonstrate that this neurotoxicity reflects activation of COX-2 by S-nitrosylation after selective binding of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) to COX-2. nNOS, via its PDZ domain, binds COX-2 with the generated NO S-nitrosylating and activating the enzyme. Selective disruption of nNOS-COX-2 binding prevents NMDA neurotoxicity.     

人胃癌组织中一氧化氮合酶的表达

目的探讨NOS与胃癌的关系.方法用NADPH-d组织化学法测定了正常胃组织、癌旁组织和癌组织中一氧化氮合酶(NOS)表达水平.结果正常胃组织中粘膜上皮细胞、各种有分泌功能的细胞及肌层神经纤维中均有NOS表达,测一个视野NOS阳性细胞的平均灰度,正常胃组织为112、癌旁组织为120、胃癌组织为145.各组间差异有显著意义.表明正常胃组织NOS活性最高,胃癌组织NOS活性最低.结论①正常胃组织有广泛的NOS分布,提示NO对维持正常胃功能具有重要作用;②胃粘膜细胞癌变过程中,NOS活性明显降低,提示NOS活性与胃粘膜细胞癌变有高度相关性.     

Nitric oxide: not just a negative inotrope

Nitric oxide (NO) appears to play a role in modulating cardiac function in both health and disease. Early studies in isolated rodent cardiac myocytes demonstrated a depressant effect of NO supplied by NO donors (exogenous) as well as NO generated within myocytes (endogenous). There is increasing evidence for a functional NO generating system within the human myocardium, which appears upregulated in certain disease states. Induction of the high output nitric oxide synthase isoform (iNOS) has been demonstrated in the failing myocardium, though its functional significance remains unproven. More recently published data have contradicted the notion that NO acts solely as a negative inotrope demonstrating positive inotropy in both isolated rodent and human ventricular myocytes in response to a range of NO donors. Different NO donors have different NO release kinetics and generate a range of NO species (NO., NO+ and NO-) which may interact at a number of subcellular targets. The observed response of any cardiac preparation to an NO donor represents the net effect of activation of different effector targets and may explain the contradictory reported effects of NO. To realise the therapeutic potential of NO will require specific targeting at a subcellular level.     

Expression of inducible nitric oxide synthase in human gastric cancer

INTRODUCTIONInduciblenitricoxidesynthase(iNOS)isanenzymethatcatalyzestheformationofnitric0xide(N0)fromL-arginine.iNOSexpressionandactivityresultsintheproduction0fhighlevelsofNO[1].ThegenerationofphysiologicallevelsofNOisimp0rtantformucosalfunctionanditalsoexertsacytoprotectiveeffectonthegastr0intestinalmucosa.However,increasediNOSexpressionhasbeenobservedinpatientswithchronicinflammatorydiseasesofthegastr0intestinaltract,suchasulcerativec0litis[2'3],andgastritis['Jandithasbeenspecul…     

诱导型一氧化氮合酶在心肌缺血/再灌注损伤中的研究进展

采用溶栓疗法、动脉搭桥术、冠状动脉血管成形术等技术,使缺血组织和器官重新恢复血流,挽救了众多危急重病人的生命,然而,缺血器官及组织在恢复血流的同时,均伴随着缺血/再灌注损伤,是目前临床上亟待解决的问题。在对心血管疾病的研究过程中,随着心肌保护研究的不断深入,如何减轻心肌缺血/再灌注损伤成为心肌保护问题的关键。越来越多的研究表明,心肌缺血/再灌注损伤与诱导型一氧化氮合酶表达过量一氧化氮紧密相关。研究表明,诱导型一氧化氮合酶既有心肌保护作用,也有促心肌损伤作用,而通过对诱导型一氧化氮合酶抑制剂的应用,有望减轻心肌损伤的进展,保护损伤心肌。     

Nitric Oxide and its Role in Blastocyst Implantation

Reviews in Endocrine and Metabolic Disorders -     

内皮型一氧化氮合酶基因G894T多态性与原发性高血压的相关关系

目的　探讨内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因G894T多态性与中国汉族人原发性高血压 (EH)的相关性。方法　 (1)采用多聚酶链式反应结合限制性内切酶片段长度多态分析方法检测310例健康人和 15 1例高血压患者的eNOS基因G894T多态性 ,(2 )硝酸还原酶法测定空腹血清一氧化氮代谢物 (NOx)水平 ,用放射免疫法测定内皮素 (ET)的水平。结果　 (1)EH组GT TT基因型和T等位基因频率显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ;(2 )高血压患者中T等位基因携带者的收缩压 [(15 0 5± 13 6 )mmHg]、舒张压 [(10 0 0± 8 5 )mmHg]和脉压 (116 8± 7 8)mmHg均高于GG基因型携带者 (14 5 0± 12 2 ,97 4± 8 0 ,114 0± 7 5 )mmHg ,且有显著性差异 ,(P <0 0 5 )。 (3)EH组GT TT基因型空腹血清NOx[(6 9 7± 2 7 0 ) μmol/L]、NOx/ET比 (1 0 1± 0 5 6 )明显低于GG基因型 (78 5± 32 5 ) μmol/L (1 4 7± 1 5 1) ,而GT TT基因型 (83 2 5± 39 74 ) pg/mLET水平明显高于GG基因型 (72 9± 33 8)pg/mL。 结论　eNOS基因G894T多态性的T等位基因与中国汉族人EH的发生相关 ,T等位基因携带者可能通过减少内皮NO的释放参与EH发病。     

孤啡肽在原发性高血压时的改变及其降压机制初探

目的观察原发性高血压患者血浆孤啡肽水平的改变及孤啡肽对血管内皮舒张因子（ＥＤＲＦ／ＮＯ）的影响，初步探讨孤啡肽舒张血管，降低血压的可能机制。方法应用放射免疫测定法测定原发性高血压患者（３２例）血浆孤啡肽水平并以正常成年人（１９例）作对照。大鼠主动脉条组织孵育液中亚硝酸盐的含量可反映一氧化氮（ＮＯ）的产生量，采用微盘测定法测定，用张新波等建立的ＮＯ合酶测定改良法检查ＮＯＳ活性。结果ＥＨ患者血浆孤啡肽水平明显高于对照组（１５．４７±２．１４ｎｇ／Ｌｖｓ８．８３±５．６８ｎｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０５），且随高血压程度分期的加重，孤啡肽水平增加越明显。孤啡肽能明显刺激大鼠主动脉条组织ＮＯ产生量和提高ＮＯＳ活性，随剂量的增加，此作用更加明显（Ｐ＜０．０５）。结论推测孤啡肽可能为一种存在于外周血液中与血压调节有关的新型血管活性多肽，其与心血管疾病的关系有待进一步深入研究。     

原发性肝癌血管形成的免疫组化和形态学研究

目的研究原发性肝癌血管形成及血管起源。方法用病理及CD34、UEA-1、Collagen Ⅳ免疫组化的方法对21例肝癌及癌旁组织中血管形成进行原位检测和观察。结果阳性反应可见血管星棕色或棕黄色条带。癌旁组织血窦内皮细胞CD34及UEA-1染色阴性,炎症组织内的血管染色阳性。部分肿瘤血管与癌旁组织血管不相连;部分肿瘤血管与癌旁组织血管相连。Collagen Ⅳ在肝癌组织中有较强的表达,癌旁组织中表达很弱,但在门脉区炎症组织内表达可较强。结论CD34、UEA-1、Collagen Ⅳ染色与肿瘤血管形成有关,部分肝癌血管可能起源于毛细血管化的癌旁肝血窦。     

肝癌组织中一氧化氮合酶及其基因表达的研究

目的研究肝癌组织中一氧化氮合酶(iNOS)及其基因表达与肝癌发生发展的关系。方法用免疫组化和原位杂交的方法对21例肝癌及癌旁组织中的诱导型一氯化氮合酶(iNOS)及其基因表达进行原位检测和观察。结果:NOS 阳性反应物质呈黄色或棕黄色,位于细胞浆中。非癌殖织(肉眼观距癌组织边缘>1.5)多呈阴性或弥漫弱阳性,但部分非癌组织中可见 iNOS 呈阳性的细胞呈点状分布;癌旁组织多呈阳性,提示 iNOS 表达与肝组织癌变有关。癌组织核心多呈阴性或弥漫弱阳性,但分化中和差的癌组织核心也分别有一例 NOS 呈强阳性;周边癌组织呈局灶阳性,侵入纤维组织中的弥敢癌细胞星强阳性,提示 NOS 的表达与肝癌组织的侵润能力有关。肝癌组织 iNOSmRNA 阳性细胞的分布与 iN-OS 蛋白的表达基本相似。结论 iNOS 蛋白及其基因表达与肝组织癌变及肝癌侵润能力有关。