雷公藤及铅镉对小鼠睾丸间质细胞NOS活性的影响

一氧化氮(NO)在睾丸内可促进生精过程和精子的成熟,但尚未见到有关雷公藤及铅、镉等重金属元素对睾丸间质细胞NOS活性影响的报道。本文应用NADPH-d黄递酶组织化学方法,对给与氯化镉、醋酸铅、雷公藤1周、2周、3周、4周后小鼠睾丸间质内NOS活性变化进行研究,结果显示正常组间质细胞呈NOS强阳性反应,而曲精小管生精上皮细胞均呈NOS阴性反应,给雷公藤2周内NOS反应无变化,给第3和第4周后,NOS阳性的睾丸间质细胞数量无明显变化,但NOS活性稍降低。给醋酸铅和氯化镉1周后NOS阳性的睾丸间质细胞数量明显减少,并随着给药时间延长而加剧,…     

雷蓊滕及铅,镉对小鼠睾丸间质细胞一氧化氮合酶活性的影响

目的 探讨雷公藤及铅、镉等重金属元素对丸间质细胞一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的影响。方法 用ＮＡＤＰＨ－ｄ黄递酶组织化学方法，观察给于氧化镉、醋酸铅、雷公藤１、２、３、４周后，小鼠睾丸回质ＮＯＳ活性的变化。结果 正常组间质细胞呈ＮＯＳ强阳性反应，而曲精小管生精细胞均呈ＮＯＳ阴性反应。给予雷公藤２周内ＮＯＳ反应无变化，第３和第４周后，ＮＯＳ阳笥的睾丸间质数量无明显变化，但ＮＯＳ活性精降低，给予醋酸铅     

雷公藤及铅镉对小鼠睾丸间质细胞NOS活性的影响

一氧化氮（ＮＯ）在睾丸内可促进生精过程和精子成熟，尚未见到有关雷公藤及铅、镉等重金属元素对睾丸间质细胞ＮＯＳ活性影响的报道。本研究应用ＮＡＤＰＨ－ｄ黄递酶组织化学方法，对给与氯化镉、醋酸铅、雷公藤１、２、３、４周后小鼠睾丸间质内ＮＯＳ活性变化进行观察...     

羊睾丸提取液对铅染毒小鼠睾丸生精细胞凋亡及超微结构的影响

目的:探讨羊睾丸提取液对铅染毒小鼠睾丸生精细胞凋亡及超微结构的影响.方法:雄性性成熟小鼠,随机分为对照组(蒸馏水灌胃),模型组(醋酸铅灌胃),给药组(醋酸铅灌胃+腹腔注射羊睾丸提取液),染毒2周.Tunel法观察睾丸生精细胞的凋亡,透射电镜观察生精细胞超微结构的变化. 结果:与对照组相比,模型组睾丸生精细胞凋亡指数明显增高,多数细胞胞质内出现空泡,核固缩,核膜结构模糊,线粒体数目减少、空泡化,溶酶体增多;与模型组相比,给药组睾丸生精细胞凋亡指数有所降低,细胞结构趋于正常,核膜结构清晰,线粒体数量增多.结论:羊睾丸提取液可抑制铅染毒小鼠睾丸生精细胞的凋亡,对精原细胞、精母细胞、精子细胞的超微结构具有显著的保护作用.     

NOS阳性细胞在大鼠和小鼠睾丸内分布的比较研究

NOS在NADPH-存在下催化L-精氨酸产生NO,并在生殖系统内起重要的调节作用。现已证实NOS分布于小鼠和人的睾丸间质细胞内,但对于常用实验动物大鼠睾丸内的NOS分布情况未见报道。本文应用改进的NADPH-d黄递酶组织化学方法,分别对正常Wistar大鼠和昆明小鼠睾丸内NOS分布进行研究。结果显示大鼠和小鼠睾丸内的NOS阳性细胞均分布于间质内,而曲精小管生精上皮各种细胞均呈NOS阴性反应,大鼠的NOS阳性细胞数量和活性均低于小鼠。结果说明大鼠和小鼠睾丸内的NOS阳性细胞分布部位基本相同,但在NOS阳性细胞数量和NOS活性方面具有种系…     

胎儿睾丸组织发育过程中c-fos的表达

目的:研究原癌基因c-fos在胎儿睾丸组织发育过程中的表达变化。方法:H-E染色、免疫组化和图像分析。结果:c-fos在胎儿睾丸组织间质细胞(Leydig cell,LC)、生精细胞、管周肌样细胞均呈阳性反应。支持细胞未见阳性表达。c-fos在12周胎儿睾丸组织中已有阳性表达,16周可明显区分阳性间质细胞与生精细胞,24周达到高峰,此后逐渐减弱,以后间质细胞几乎不可见。结论:c-fos在胎儿睾丸的组织发育中有不同的表达,表明c-fos在睾丸发育过程中可能起着重要的作用。     

实验性铅中毒对睾丸神经生长因子基因表达的影响

目的 探讨实验性铅中毒对睾丸组织神经生长因子（ＮＧＦ）基因表达的影响。方法 小鼠以０．５％醋酸铅自由饮服８周,测定血铅和睾丸铅含量。采用原位杂交法（以地高辛标记ＮＦＧ ＤＮＡ为探针）和ＲＴ－ＰＣＲ方法,观察睾丸组织ＮＧＦ ｍＲＮＡ含量的变化。结果 铅染毒小鼠血铅和睾丸组织铅含量明显升高;原位杂交结果显示,铅染毒小鼠睾丸杂交信号明显减少,ＲＴ－ＰＣＲ结果表明,铅染毒小鼠睾丸组织ＮＧＦ ｍＲＮＡ表达量     

雷公藤多苷通过介导AMPK/mTOR信号通路促进大鼠睾丸间质细胞凋亡的研究

目的 探讨雷公藤多苷（TG）通过腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（AMPK/mTOR）信号通路对大鼠睾丸间质细胞（Leydig cell）凋亡的影响。方法 随机将成年SD雄性大鼠分为空白组12只，雷公藤多苷低、高剂量组各12只，AMPK激活剂（MF）+雷公藤多苷组12只。空白组腹腔注射等量生理盐水，雷公藤多苷低、高剂量组分别腹腔注射9.0和18.0 mg/kg TG,TG+MF组腹腔注射18.0 mg/kg TG+200 mg/kg MF,qd，连续4周。免疫组织化学观察各组大鼠睾丸组织病理形态学；酶联免疫吸附（ELISA）检测各组血清黄体生成素、卵泡刺激素及睾酮水平；TUNEL法检测Leydig细胞凋亡情况；Western blot检测睾丸组织p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR、p-4EBP1/4EBP1、p-S6K1/S6K1蛋白表达水平。结果 与空白组相比，TG低、高剂量组大鼠血清黄体生成素和睾酮水平明显下降（P<0.001)，卵泡刺激素水平升高，睾丸生精小管上皮细胞及Leydig细胞萎缩、扭曲，睾丸间质细胞凋亡数目明显增加（P<0.001),p...     

依普利酮对高盐诱导的高血压大鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶表达及活性的影响

目的:探讨依普利酮对高盐诱导的高血压大鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的表达及活性的影响。方法:50~60 g 4周龄雄性Wistar大鼠随机分为3组:对照(control,C)组用普通饲料饲养16周,高盐饮食(high salt diet,HS)组及依普利酮(eplerenone,Epl)组用5%高盐饲料饲养16周,C组和HS组于末4周给予同等剂量生理盐水灌胃,而Epl组于末4周给予依普利酮40 mg·kg-1·d-1灌胃。每2周检测各组大鼠尾动脉收缩压,16周后处死大鼠,留取主动脉。ELISA法检测醛固酮含量,蛋白免疫印迹法检测盐皮质激素受体(MR)及e NOS蛋白表达水平,化学比色法测定一氧化氮合酶活性,免疫组化染色法观察主动脉e NOS、神经型一氧化氮合酶(n NOS)及MR蛋白表达与定位。结果:(1)高盐饲料饲养8周后,大鼠收缩压即明显升高,并逐渐上升,16周时HS组收缩压较同时点C组明显升高(P0.05);依普利酮灌胃4周后,收缩压比灌胃前明显下降(P0.05)。(2)与C组比较,HS组、Epl组主动脉醛固酮含量明显增加(P0.05),且MR表达明显增加(P0.05)。(3)HS组较C组e NOS蛋白表达减少(P0.05)、结构型一氧化氮合酶(c NOS)活性也降低(P0.05);Epl组较HS组e NOS蛋白表达增加(P0.05)、c NOS活性增高(P0.05)。结论:(1)高盐诱导高血压大鼠的主动脉醛固酮含量明显增加,醛固酮可能通过激动MR降低主动脉e NOS蛋白表达及酶活性。(2)选择性MR拮抗剂依普利酮可恢复e NOS蛋白表达及活性,改善e NOS功能。     

镉对大鼠睾丸的损伤及锌保护作用的超微结构研究

本文报道镉所致大鼠睾丸的即刻和延迟影响以及锌对抗镉损伤的超微结构变化。将44只大鼠分为单纯镉注射组(2 mg/kg体重)、镉和锌联合注射组(锌80 mg/kg体重),以及用生理盐水注射的对照组。注射镉后10～30分钟,部分精子细胞、精原细胞、初级精母细胞和曲细精管周组织,已出现超微结构改变;其中早期精子细胞和初级精母细胞损伤出现最早。睾丸毛细血管在1小时后才查见损伤改变。间质细胞的改变则在2～4小时后见到。3～7天后,生精上皮、曲细精管周组织和睾丸间质已普遍坏死。提示镉的损伤作用,包括对曲细精管的直接损伤和对睾丸血管的直接损伤两个方面,且血管损伤出现较晚。锌对于镉损伤的保护作用显著。但是对于早期精子细胞的保护作用,较其他各级生精细胞差些。     

镉对大鼠前列腺损伤及锌保护的超微结构与硫胺素焦磷酸酶细胞化学的研究

目的　研究镉对大鼠前列腺腹侧叶的超微结构影响及锌保护作用。　方法　小剂量氯化镉 (2 m g/ kg体重 )及锌腹腔内注射后用透射电镜观察及硫胺素焦磷酸酶 (TPPase)电镜细胞化学定量分析。　结果　镉注射后 4h,前列腺上皮主细胞出现轻微的超微结构改变 ,3～ 7d呈明显退变 ,15 d退变减轻 ,出现粗面内质网 (RER)形成的同心圆性小体 ,30～ 6 0 d基本恢复正常。镉注射后 4h,TPPase反应产物较正常组减少 ,3d和 15 d进一步减少。锌保护组较相应的单纯镉组的超微结构损伤轻 ,且 TPPase反应产物也较多。　结论　镉对大鼠前列腺腹侧叶上皮主细胞早期直接损伤较轻 ,所致 TPPase反应产物减少明显。锌对镉所致主细胞超微结构损伤及 TPPase活性降低均有保护作用     

Ultrastructure of kidney of ducks exposed to methylmercury, lead and cadmium in combination

Ultrastructural alterations in the kidneys of Pekin ducks exposed to various combinations of methylmercury chloride (MeHgCl), lead acetate (PbAC) and cadmium chloride (CdCl2 for 12 weeks were studied. Eight groups (Gr), each consisting of 6 female ducks, were fed diets containing no heavy metals (control), 8 mg of methylmercury chloride (MeHgCl)/kg of feed (GrII), 80 mg of lead acetate (PbAC)/kg of feed (GrIII), 80 mg of cadmium chloride (CdCl2)/kg of feed (GrIV), 8 mg of MeHgCl + 80 mg of PbAC/kg of feed (GrV), 8 mg of MeHgCl + 80 mg of CdCl2/kg of feed (GrVI), 80 mg of PbAC + 80 mg of CdCl2/kg of feed (GrVII), and 8 mg of MeHgCl + 80 mg of PbAC + 80 mg of CdCl2/kg of feed (GrVIII). Renal corpuscles of the ducks treated with methylmercury (MdHg), lead (Pb), the cadmium (Cd), either alone or in two way combinations exhibited minor ultrastructural changes. The thickness of the glomerular basement membrane was significantly different from control only in Grs II, IV, V and VI. Crystallization of granules in the juxtaglomerular cells was also observed in Cd and Pb treated birds. Administration of the three metals in combination caused marked changes in podocytes with fusion of secondary processes and no pedicle differentiation. The proximal tubule cells approximately (PT) accumulated lipid droplets, lysosomal bodies and membrane bound vacuoles in methylmercury treated birds. Lead exposed birds had a large number of secondary lysosomes and swollen mitochondria in PT cells. Cadmium administration caused degenerative changes in PT cells which included accumulation of lysosomal bodies containing degenerating organelles, lipid droplets and vacuoles containing myelin figures. Marked degenerative changes in PT cells and interstitial fibrosis was prominent when cadmium was concomitantly administered with the other metals. Concurrent administration of all three metals caused enhancement of degenerative changes in proximal tubule cells and collecting duct cells. These observations suggest that the combined administration of metals causes renal damage that appears to be additive.     

Influence of cadmium on the phagocytic and microbicidal activity of murine peritoneal macrophages, pulmonary alveolar macrophages, and polymorphonuclear neutrophils.

A significant depression in the phagocytic capacity of elicited peritoneal macrophages, pulmonary alveolar macrophages, and elicited peritoneal polymorphonucleated neutrophils was manifested when the cells were incubated in medium containing cadmium chloride. With the exception of the neutrophils, a similar influence was observed when the cells were exposed to cadmium acetate. The impaired phagocytic capacity was related to the concentration of the cadmium in the medium. Peritoneal macrophages and neutrophils did not demonstrate any alteration in their microbicidal activity (percentage of ingested yeast which were killed) in the presence of the cadmium salts. However, a significant suppression in the intracellular microbicidal activity of alveolar macrophages was observed when the cells were incubated in medium containing either cadmium chloride or cadmium acetate. This unique response to Cd2+ may be related to general metabolic characteristics of these cells living at an elevated O2 tension.     

大鼠睾丸前促甲状腺激素释放激素及其受体cDNA的克隆和序列测定

目的 研究促甲状腺激素释放激素（ｔｈｙｒｏｔｒｏｐｈｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ,ＴＲＨ）及其受体（ＴＲＨ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＴＲＨ－Ｒ）在大鼠丸组织中的表达规律和在生殖发育调节中的作用。方法 以大鼠丸组织总ＲＮＡ为模板,依据大鼠下丘脑中的前ＴＲＨ和垂体中的ＴＲＨ－Ｒ ｃＤＮＡ设计引物,进行反转录聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉ     

SA-30抗原在小鼠睾丸、附睾、精子及早期胚的定位

目的 检测ＳＡ－３０（ｓｐｅｒｍ ａｎｔｉｇｅｎ－３０）原在小鼠精子发生、成熟、获能及受精后的分布变化。方法 免疫组织化学ＬＳＡＢ法。结果 ＳＡ－３０在小鼠睾丸内的各级生精上皮均有分布,尤其是造近管腔的精子细胞染色最深;附睾各段的上皮细胞也有ＳＡ－３０存在,而且主要集中在核上区;在附睾头和附睾尾的精子,ＳＡ－３０主要分布在顶体区,两者我明显区别,获能后的精子顶体区有阳性染色外,尾部和顶体后区也出现     

大鼠Fas配体基因的克隆

目的 研究Ｆａｓ配体（Ｆａｓ ｌｉｇａｎｄ,ＦａｓＬ）在移植免疫方面的作用,克隆其编码的全部ｃＤＮＡ序列,并添加Ｋｏｚａｋ序列,以便在直核细胞高效表达大鼠ＦａｓＬ。方法 从大鼠的睾丸组织中提取总ＲＮＡ。下游引物以ＲＴ－ＰＣＲ的方法扩增出－９３１ｂｐ的ＤＮＡ征段,将这一片段重组于ｐＢＲ－ＲＳＶ载体中,酶切鉴定插人片段正确后进行全列分析。结果 证实该研究所克隆的ｃＤＮＡ是编码正确的大鼠ＦａｓＬ基因,与     

Tissue residues, pathology and viral-induced mortality in mice chronically exposed to different cadmium salts

Male Swiss Webster mice were exposed to one of three different cadmium salts (sulfate, acetate and chloride) in the drinking water for 10 weeks and then inoculated with a 14-day LD75 or LD35 dilution of encephalomyocarditis virus. the incidence of viral-induced mortality was lower in 17 of the 18 cadmium-treated groups of mice as compared to controls. Cadmium tissue residues and histopathologic lesions were essentially similar at comparable doses in all groups of mice regardless of the form of cadmium in the diet.     

大鼠三叉神经脊束间质核内接受内脏伤害性信息的含CB神经元向孤束核的投射

目的 探讨大鼠三叉神经脊束间质核(INV)内接受内脏伤害性信息的含calbindin D-28K(CB)神经元与孤束核(NTS)的投射联系。方法 用福尔马林刺激上消化道，应用荧光金(FG)逆行束路追踪结合Fos和CB的免疫荧光组织化学三重标记法。结果 INV的背侧边缘旁核(PaMd)和三叉旁核(PaV)内可见到大量FG逆标细胞，以注射FG的同侧为主。大部分FG逆标细胞(约71.2％)为CB免疫反应阳性。部分FG和CB双标记神经元(约31．5％)同时呈Fos免疫反应阳性的三重标记。结论 INV内部分接受内脏伤害性刺激的CB神经元可直接投射至NTS，含CB的神经元在内脏伤害性信息经INV向NTS的传导通路中，可能发挥重要作用.     

NGF/GDNF基因修饰神经干细胞移植对AD模型鼠前脑胆碱能神经元的保护作用

目的　观察NGF GDNF基因修饰神经干细胞 (NSC)单独和联合移植对穹窿海马伞 (FF)切断后胆碱能神经元的保护作用。　方法　将两种基因修饰的NSC单独和联合移植入FF切断的大鼠侧脑室。移植后 3周取脑行ChAT免疫组织化学染色 ,用Student NewmanKaels方法对内侧隔核 (MS)和斜角带垂直支 (VDB)的ChAT阳性细胞数 (损伤侧与正常侧的百分比 )进行计数分析。　结果　NGF组伤侧MS的ChAT阳性神经元数为 81% ,明显高于损伤组 (34% )、NSC组 (36 % )和GDNF组 (5 0 % ) ,P <0 0 1;NGF GDNF组为 6 8% ,明显高于损伤组和NSC组 (P <0 0 1) ,亦高于GDNF组 (P <0 0 5 ) ;GDNF组与损伤组和NSC组相比 ,有统计学意义 (P <0 0 5 )。NGF组和NGF GD NF组伤侧VDB的ChAT阳性神经元数分别为 80 %和 72 % ,明显高于损伤组 (5 6 % )和NSC组 (5 2 % ) ,P <0 0 1,亦高于GDNF组 (5 9% ) ,P <0 0 5 ;GDNF组与损害组和NSC组相比无明显差异 (P >0 0 5 )。　结论　NGF GDNF基因修饰NSC单独和联合移植均能不同程度地保护损伤的ChAT阳性神经元 ,NGF组和NGF GDNF组作用较大 ,GDNF组作用较小。     

成人基底前脑巢蛋白免疫阳性神经细胞的细胞化学观察

目的 探讨巢蛋白(nestin)免疫阳性细胞在人基底前脑内的分布规律及化学特性。方法 采用nestin331B、10C2、Rat 401抗体显示人基底前脑的nestin免疫阳性细胞，并应用NSE、p75NGFR、ChAT、GFAP抗体分别对nestin免疫阳性细胞进行了双标免疫细胞化学研究，同时还应用NADPH-d进行组织化学染色。结果 在成人基底前脑有一个连续的nestin免疫阳性细胞带，胞体较大，呈卵圆形或梭形，有1～3个突起，分布于隔核、斜角带核、Meynert核、无名质及杏仁核群。双标染色显示，nestin阳性细胞被NSE抗体标记，并与ChAT、NGFR、NOS阳性神经元间杂分布，多数不呈交叉反应。约28％nestin免疫阳性细胞为ChAT阳性神经元，15％为NGFR阳性神经元，6％为NOS阳性神经元。此外，透明隔及隔区靠近软膜处有少量nestin免疫阳性细胞，其形态与星形胶质细胞相似，不与GFAP有交叉免疫阳性反应。结论 成人基底前脑存在一个有别于ChAT、NGFR、NOS神经元的nestin免疫阳性神经元簇，其生物学意义值得进一步研究。