Sestrin2在大鼠局灶性缺血性脑损伤中的神经保护作用及机制

目的：研究应激诱导蛋白Sestrin2在大鼠局灶性缺血性脑损伤后的神经保护作用及机制。方法：采用与接近临床的光化学栓塞法建立 SD（sprague - dawley）大鼠局灶性缺血性脑损伤模型,实验分为对照组、模型组、阴性病毒组和Sesn2过表达组共4组。应用基因过表达技术上调Sestrin2的表达,采用Longa改良神经评分系统对各组大鼠神经功能缺损进行评分,TTC染色法检测脑梗死体积,尼氏（Nissl）染色评估神经元损伤情况,Western blot检测Sesn2和VEGF蛋白表达。结果：神经功能学评分结果显示,与模型组（3.200±0.789）、阴性病毒组（3.200±0.632）相比较,Sesn2过表达组（2.100±0.738）神经功能评分明显降低（P＜0.05）。TTC染色结果显示,Sesn2过表达组（0.034±0.004）梗死面积均较模型组（0.072±0.003）、阴性病毒组（0.069±0.003）明显减少（P＜0.05）。Nissl染色结果显示Sesn2过表达组（334.300±21.550）、阳性神经元数量均较模型组（122.000±17.000）、阴性病毒组（137.700±16.070）明显增多（P＜0.05）。Western blot结果显示,Sesn2过表达组中Sesn2蛋白的表达高于模型组（0.542±0.035）、阴性病毒组（0.578±0.052）（P＜0.05）;Sesn2过表达组VEGF蛋白表达较模型组（1.074±0.094）、阴性病毒组（1.196±0.167）明显增多（P＜0.05）。结论：Sesn2的过表达改善了神经功能缺损,减少了脑梗死,减轻神经元损伤。这种保护作用可能是通过上调VEGF促进脑缺血区域的微血管再生来实现。     

Neuroprotective effect of granulocyte colony-stimulating factor in a focal cerebral ischemic rat model with hyperlipidemia

Granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) has been demonstrated to have neuroprotective effects in rat model with focal cerebral ischemia through anti-apoptotic pathways and by promoting proliferation of neural stem cells. In the present study, we examined the neuroprotective effect of G-CSF in an acute focal cerebral ischemia rat model with lipid metabolism disorder. Eighty male SD rats were randomly divided into normal diet control group (NC group) and high-fat diet group (HFD group) (n = 40 in each). In HFD group, rats were fed on high fat diet to induce atherosclerosis. After 29 days, 4 rats from each group were sacrificed to evaluate the effects of different diets, and the middle cerebral artery occlusion (MCAO) was performed in the rest of the rats. MCAO rats received either G-CSF (50 μg·kg-1·mL-1) or phosphate buffered saline (PBS) injection through the external jugular vein for 5 days, which was followed by 5-bromo-deoxy uridine (BrdU, i.p., 50 mg/kg) injection for another 7 days. To evaluate the effects of G-CSF treatment on neurological function, the modified neurological severity score (mNSS) was calculated. The vascular distribution, ischemic cells proliferation, cell apoptosis and the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) were measured to determine the effects of G-CSF treatment. Our results showed that G-CSF-treated rats had a lower mNSS than PBS-treated rats in both NC group and HFD group. G-CSF injection promoted endothelial cell proliferation and vascular regeneration, and inhibited cell apoptosis. The serum and tissue levels of VEGF were significantly increased after G-CSF treatment. It is concluded that G-CSF exerts its neuroprotective effect in focal cerebral ischemia rats with hyperlipidemia by enhancing angiogenesis, promoting cells proliferation, decreasing cell apoptosis, and increasing local VEGF expression.     

氧化铈纳米颗粒抗病理性血管生成的研究进展

氧化铈纳米颗粒（CeONPs）是一种应用广泛的稀土氧化物材料,具有自我再生和仿酶活性,在抗肿瘤、抗炎、抑菌、杀菌、免疫调节、抗氧化等生物领域应用广泛。其中,调节血管生成是氧化铈的最重要医学用途之一,病理性血管生成与许多疾病的发生发展密切相关,但常缺乏有效的治疗手段,调控血管生成是治疗的新靶点。本文根据现有相关研究,就CeONPs抗病理性血管生成疾病模型的应用及其潜在的机理研究进展进行综述。文献复习结果表明,CeONPs可抑制肿瘤、慢性炎性病变、视网膜病变、子宫内膜异位症等疾病模型的病理性血管生成,其可能的潜在机理包括调节活性氧的过量产生、影响血管内皮细胞的增殖及凋亡、调节血管生成促进因子的表达以及VEGF磷酸化、下调ASK1-p38/JNK-NF-κB信号通路等。探讨CeONPs的抗病理性血管生成作用,可为CeONPs新材料和药物的研发提供理论指导,并为肿瘤、炎症等与病理性血管生成密切相关疾病的治疗及临床研究奠定基础。     

急性局灶性脑缺血性脑损伤发生机制

目的　探讨急性局灶性脑缺血时脑损伤的发生机制。方法　采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血动物模型 ,结合脑组织含水量及病理变化 ,测定脑缺血 2小时后脑组织 MDA、SOD、GSH- Px、CAT及 NOS活性。结果　缺血性脑损伤时脑组织 MDA、SOD及 NOS活性较对照组升高 ,而 GSH- Px、CAT活性明显下降 ,伴随脑含水量增加 ,出现明显病理改变。结论　氧自由基参与急性局灶性缺血脑损伤的病理过程。     

短暂性脑缺血发作对脑梗死患者的神经保护作用

目的:观察短暂性脑缺血发作(transient ischemic attacks, TIA)对脑梗死患者兴奋性氨基酸(excited amino acids, EAAs)含量和梗死容积的影响,研究TIA是否具有神经保护作用. 方法:选择20例行下肢手术的患者作为正常对照组;选择20例首次发作脑梗死的患者作为脑梗死组;选择有同侧TIA的首次发作脑梗死患者20例作为TIA组. 脑梗死组与TIA组患者入院后行颅脑CT确诊. 应用高效液相色谱分析(high performance liquid chromatography, HPLC)检测三组患者脑脊液(cerebrospinal fluid, CSF)及血浆中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)浓度,同时测定脑梗死容积. 结果:脑梗死组血浆和CSF中Glu和Asp水平高于正常对照组(P<0.05),而TIA组血浆和CSF中Glu及Asp水平均低于脑梗死组(P<0.05). TIA组患者的梗死容积小于脑梗死组(P<0.05). 脑梗死组和TIA组血浆和CSF中EAAs含量与梗死容积的大小呈明显正相关(r=0.905, P<0.01). 结论:TIA可降低首次发作脑梗死患者血浆和CSF中EAAs的释放,减少脑梗死容积,具有神经保护作用.     

大鼠缺血性脑卒中模型的研究

本研究用477只SD和Wistar大鼠制作缺血性脑卒中模型,结果表明:种系、麻醉剂、年龄和双侧颈总动脉不同间隔时间结扎对脑卒中发生有影响。因这两种鼠价廉及来源广泛,手术简单易行,制作出的脑卒中症侯出现率高,有一定存活率,所以该模型较理想。可依不同研究目的,在成年Wistar或SD鼠行双侧颈总动脉同时或间隔一定时间结扎,制成用于不同研究目的之缺血性脑卒中模型。     

白藜芦醇抗脑缺血再灌注损伤的研究进展

缺血性脑血管疾病是神经科常见疾病,其致残、致死率高.治疗原则是及时恢复缺血区的血液供应,但同时也带来了再灌注损伤.抑制再灌注损伤已成为治疗缺血性脑血管疾病的重要环节.近年来对白藜芦醇(resveratrol)的药理活性研究发现,该物质具有调节脂质、抗炎、抗氧化、抗癌、延长寿命等多种益于人类健康的重要功能,自从发现后一直受到医学界的重视.     

白藜芦醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的: 探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法: 雄性SD大鼠150只,随机分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组30只。采用线栓法阻断大脑中动脉血供90 min,拔出栓线实现再灌注。缺血再灌注后1 h腹腔注射Res (低、中、高剂量分别为10、30、60 mg/kg)。再灌注后24 h,用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色显示脑梗死范围,并用干湿重法测定脑组织含水量;缺血再灌注后第7天,取大鼠脑组织固定包埋,HE染色。结果: Res各剂量组均可缩小脑梗死范围并改善大鼠的行为学障碍(P < 0.05~P < 0.01);Res各剂量组大鼠缺血侧大脑半球含水量均较模型组低(P < 0.01);Res中剂量组可以改善脑缺血大鼠海马CA1区神经元损伤(P < 0.05),但对齿回神经元形态无明显影响。结论: Res对局灶性脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,以Res 30 mg/kg治疗效果最好。     

ND-308抗脑缺血神经保护作用的研究

目的 观察ND-308对大鼠局灶性脑缺血的保护作用,探讨ND-308抗脑缺血作用的机制.方法 78只健康雄性SD大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion)模型,随机分为6组:模型组、假手术组、ND-308小剂量组(5 mg/kg)、ND-308中剂量组(10 mg/kg)、ND-308大剂量组(20 mg/kg),阳性对照依达拉奉组(6 mg/kg),于再灌注后30 min内尾静脉注射给药.缺血2 h再灌注24 h后测定神经行为障碍评分、脑梗死体积,HE染色观察缺血皮层组织形态学变化,采用免疫组织化学染色法测定IL-1β、TNF-α、NF-κB的表达.结果 ND-308治疗组与模型组相比神经系统症状减轻,脑梗死体积缩小,下调脑组织中IL-1β、TNF-α、NF-κB的表达,并呈现一定剂量依赖性,ND-308小剂量组各项与模型组相比无统计学意义(P＞0.05),其余各组与模型组相比P＜0.05或P＜0.01.结论 ND-308对脑缺血再灌注具有保护作用作该作用可能有抑制炎症反应有关.     

复方中药丹星通络汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨复方中药丹星通络汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注脑损伤的保护作用及机制. 方法:40只大鼠随机分为4组,即对照组(假手术 生理盐水)、模型组(缺血再灌注 生理盐水)、尼莫地平组(缺血再灌注 尼莫地平)、复方丹星通络汤组(缺血再灌注 复方丹星通络汤). 每组分别连续5 d灌胃口服生理盐水、尼莫地平、复方丹星通络汤. 线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2 h后再灌注24 h. 检测血清乳酸脱氢酶(LDH)活力、大脑FAS细胞表达. 结果:模型组大鼠局灶性脑缺血再灌注后血清LDH活力明显高于对照组(P＜0.05), 尼莫地平组、复方丹星通络汤组血清中LDH活力明显降低(尼莫地平组vs 模型组,P＜0.01; 复方丹星通络汤组vs模型组,P＜0.05),尼莫地平组和复方丹星通络汤组间无显著性差异(P＞0.05). 模型组大脑FAS细胞表达明显高于对照,尼莫地平,复方丹星通络汤组(P＜0.01),与模型组比较,尼莫地平组、复方丹星通络汤组脑组织FAS阳性细胞数表达显著下调(P＜0.01),复方丹星通络汤组明显低于尼莫地平组(P＜0.01). 结论:复方丹星通络汤可有效地防止FAS及LDH升高, 对脑缺血再灌注脑损伤有显著保护作用.     

远隔缺血预适应对大鼠局灶性脑缺血后诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：研究远隔缺血预适应（ remote ischemic preconditioning,RIPC）对大鼠脑缺血再灌注后诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）表达的影响,以探讨 RIPC 保护脑缺血损伤的相关机制。方法应用线栓法制作大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,将21只健康雄性 SD 大鼠采用数字表法随机分为3组：假手术组（sham,n=7）,MCAO 组（n=7）,RIPC＋MCAO 组（n =7）。在 MCAO 手术前连续3 d,进行远隔肢体缺血预适应处理（双侧股动脉夹闭10 min/放开10 min,每天3次）。在缺血2 h-再灌注24 h 后进行神经功能评分,TTC 染色检测脑梗死体积,采用 Western blotting 方法检测梗死侧脑组织的 iNOS 蛋白表达水平。结果1）在 MCAO 手术过程中,3组实验动物的生理指标均在正常范围内,且组间差异无统计学意义。与 sham 组相比,MCAO 组大鼠再灌注24 h 时神经功能缺损评分显著升高、脑梗死体积明显增大（P〈0.05）。而 RIPC＋MCAO 组大鼠神经功能较 MCAO 组大鼠得到明显改善、脑梗死体积显著减少（P〈0.05）。2）再灌注24 h 时,与 sham 组相比,MCAO 组大鼠脑梗死侧 iNOS 蛋白表达显著增加（P〈0.05）。与 MCAO 组相比,RIPC＋MCAO 组大鼠脑梗死侧 iNOS 蛋白表达显著降低（P〈0.05）。结论 RIPC 处理对大鼠脑缺血损伤具有保护作用,其机制与降低脑缺血大鼠脑内 iNOS 蛋白表达有关。     

醉茄素A对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其机制

探讨醉茄素A对缺血性脑卒中大鼠神经功能的保护作用,阐明其可能作用机制。     

局灶性脑缺血大鼠血浆蛋白组学研究

目的 研究脑缺血后的血浆蛋白质组学的变化差异,筛选出具有高度脑特异性的差异表达蛋白.方法 用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血模型.造模成功后,收集新鲜血浆.用阳离子交换色谱分级血浆蛋白,并用胰蛋白酶消化蛋白,得到的肽段混合物经超高效液相色谱分离后进行飞行时间质谱鉴定,确定缺血前后血浆中的差异表达蛋白,对差异蛋白进行基因表达组织特异性分析,筛选具有高度脑特异性的蛋白.结果 在正常组和缺血组的大鼠血浆中各鉴定到285种和309种蛋白质.其中,缺血组的差异蛋白种类数量为200.经基因表达的组织特异性分析,从缺血组差异蛋白中筛选出6个具有高度脑特异性的差异蛋白.结论 脑缺血后,血浆蛋白组发生明显变化.鉴定到的脑特异性蛋白,为后续生物标记物研究提供了候选蛋白.     

增强自噬水平对脑缺血预处理神经保护机制的影响

目的 探讨自噬参与脑缺血预处理神经保护机制的影响.方法 使用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型.100只成年SD大鼠随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组),缺血预处理组(C组),缺血再灌注+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)组(D组),缺血预处理+3-MA组(E组).D、E组大鼠侧...     

肉苁蓉总苷对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响

目的研究肉苁蓉总苷(GCs)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法采用插线法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO)制造大鼠局灶性脑缺血模型，采用NBT染色测定脑梗死范围．用“重量求面积法”计算梗死组织占对侧大脑质量的百分比作为对梗死范围的判定．行为指标评分采用11分评分制，并测定缺血脑组织的抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)含量。结果GCs125，250mg／kg可明显缩小脑梗死范围，改善神经症状，脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性明显升高，MDA含量显著下降。结论GCs对大鼠局灶性脑缺血损伤具有神经保护作用，此作用可能与SOD，GSFH-Px活性水平的升高有关。     

透光法测定小鼠局灶性脑缺血梗死灶

目的：探索透光法评价局灶性脑缺血模型梗死体积的方法。方法：采用大脑中动脉阻塞法（MCAO）诱导小鼠持续性局灶性脑缺血，于缺血后24h取脑，切成1mm厚的脑片，先在体视显微镜下进行透光，图像输入计算机；然后，在0.5%氯化三苯四氮唑（TTC）溶液中37℃孵育30min，并将TTC染色的脑片图像输入计算机。以AnalyPower1.0软件计算每一脑片以透光法和TTC染色法测得的梗死体积，以Photoshop 5.0计算缺血组和对照组透光和TTC染色脑片左右侧灰度。结果：透光测定的脑梗死体积与TTC染色测定的梗死体积具有较好的相关性（r=0.81)。缺血组小鼠透光和TTC染色测得的缺血侧大脑平均灰度、皮层灰度、皮层下灰度和海马灰度，与非缺血侧相应部位及对照组相应部位比较有显著差异（P＜0．001），对照组脑片左右侧及对照组与缺血组非缺血侧比较无显著差异（P＞0．05）。结论：透光法可用于局灶性脑缺血的定量分析。     

急性脑梗死患者脑微出血相关因素分析

目的 比较有无合并脑微出血(CMB)两组急性脑梗死患者危险因素和临床生化有无区别,探讨急性脑梗死合并CMB的可能原因.方法 选择南京卒中登记系统中自2008年6月至2009年3月所有急性脑梗死并进行MRI GE-T_2 WI枪查的68例患者,并检测纤维蛋白原、尿酸等生化指标,比较有无合并CMB组相关危险因素及生化指标是否存在差异,并进行多因素同归分析.结果 68例患者中,合并有CMB 29例,共109处CMB.其中患者年龄、高血压病史、纤维蛋白原含量、尿酸两组间比较差异有统计学意义.多因素回归分析显示,年龄(OR=1.14,95%C/1.042～1.247;P=0.04)、高血压病史(OR=0.084,95%CI 0.017～0.403;P=0.02)以及纤维蛋白原含量(OR=1.009,95%CI 1.002～1.017;P=0.019)与CMB相关.结论 急性脑梗死患者合并有CMB比率较高,CMB与患者年龄、高血压病史、纤维蛋白原含量相关.纤维蛋白原增高与CBM的机制有待进一步研究.     

Neuroprotective effect of Naomaitong extract following focal cerebral ischemia induced by middle cerebral artery occlusion in rats

Objective

To examine the neuroprotective effect of extract from Naomaitong following focal cerebral ischemia reperfusion induced by occlusion of middle cerebral artery (MCA), and to determine the biochemical alterations in urine using proton nuclear magnetic resonance spectroscopy and principal component analysis.

人参总皂苷对大鼠脑缺血再灌注的神经保护研究

目的:了解人参总皂苷对MCAO再灌注大鼠的神经保护作用。方法:采用神经行为学评分,Nissl染色法了解人参总皂苷的抗缺血损伤作用。结果:总皂甙20mg/kg和60mg/kg治疗组可改善缺血再灌注后24h神经行为学评分,以20mg/kg效果更为显著。总皂甙20mg/kg和60mg/kg治疗组大鼠顶叶皮层缺血半暗带区神经元存活较多,其中以20mg/kg组神经元存活率最高。结论:人参总皂苷对MCAO后再灌注的大鼠脑组织具有保护作用。