识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用…

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株，分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，腹水效价１．２×１０＾６。将ＳｊＡ１１１ ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原，阳性者３９０例（７８．１６％）；２５例肺吸虫病人，３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）     

酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原的研究

用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测脑囊虫病人血清中ＣＡｇ，并与ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ进行了比较，其阳性率分别为８９．２％和８１．１％。４０例正常人，３０例单纯绦虫病患者及２９例包虫病人血清，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测囊虫ＣＡｇ，除１例包虫病患者呈轻度交叉反应外均为阴性。结果表明本法具有高特异性与敏感性。对５７例接受阿苯达唑治疗的脑囊虫病人，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法及ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ于治疗后１年内检测血清中ＣＡｇ，累计检出率分别为４３．９％及２２．８％。表明ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法测ＣＡｇ具有更好的疗效考核价值。     

混合或单一单抗检测肺吸虫病人血清中循环抗原的研究

本文报道应用由７种抗卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫单克隆抗体（ＰｗＭ和ＰｗＡ一ＭｃＡｂ）组成的混合ＭｃＡｂ一ＥＬＩＳＡ法检测辽宁省凤城县肺吸虫病流行区２０８份滤纸血循环抗原（ＣＡｇ），阳性率为３８％（７９／２０８）。对１００份同时有滤纸血和血清样本者同步检测进行比较，滤纸血ＣＡｇ阳性率为６２％（６２／１００），血清ＣＡｇ阳性率５７％（５７／１００），符合率为９１％，经确切概率法处理两者无显著性差异，说明滤纸血可代替血清作ＣＡｇ检测。分别用７种ＭｃＡｂ检测５５份混合ＭｃＡｂ检测为阳性的样本，４种抗囊蚴ＭｃＡｂ中Ｇ＿２Ｂ＿３检出率最高，Ａ＿３Ａ＿７次之，３种抗成虫ＭｃＡｂ中Ａ＿３Ｄ＿３检出率最高，表明用Ｇ＿２Ｂ＿３或Ａ＿３Ａ＿７与Ａ＿３Ｏ＿３混合检测Ｐｗ病人ＣＡｇ更省更好。但在斯氏肺吸虫流行区应首选Ａ＿２Ｅ＿７，因其与斯氏Ａｇ有强烈的交叉反应，对斯氏肺吸虫患者血清ＣＡｇ检出率高达９４．７％（１８／１９）。本研究结果提示上述７种ＭｃＡｂ单独应用或不同组合后应用有助于提高ＣＡｇ的检出率并有助于肺吸虫感染虫种和虫期的判别。     

酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原的研究

用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测脑囊虫病人血清中ＣＡｇ，并与ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ进行了比较，其阳性率分别为８９．２％和８１．１％，４０例正常人，３０例单纯绦虫病患者及２９例包虫病人血清，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测囊虫ＣＡｇ除１例包虫病患者呈轻度交叉反应外均为阴性，结果表明本方法具有高特异性与敏感性，对５７例接受阿苯达唑治疗的脑囊虫病人，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ及ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ于治疗后１年内检测血清中ＣＡｇ     

应用单克隆抗体检测血吸虫病人血清特异性循环免疫复合物的初步研究

抗血吸虫ＭｃＡｂ应用于ＥＬＩＳＡ（ＭｃＡｂ一ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫病人血清中抗原特异性ＣＩＣ，并与其提取的ＣＩＣ沉淀物为对照，二者结果完全相同。另与“抗原非特异性”ＣＩＣ检测法（ＰＥＧ法）作对照。慢件血吸虫病患者６７例，ＭｃＡｂ一ＥＬＩＳＡ有４６例呈阳性反应（６８．７％），２１例呈阴性反应（３１．３％），对肺吸虫病患者５９例、健康人２３例全部呈阴性反应；而ＰＥＧ法，肺吸虫病患者全部呈假阳性反应，健康人６例呈假阳性反应（２６％）。初步结果表明，ＭｃＡｂ一ＥＬＩＳＡ检测血清ＣＩＣ具有较高的抗原特性。     

应用单克隆抗体检测血吸虫人血清特异性循环免疫复合物的初步研究

抗血吸虫ＭｃＡｂ应用于ＥＬＩＳＡ（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）检测血吸虫病人血清中抗原特异性ＣＩＣ，并与其提取的ＣＩＣ沉淀物为对照，二者结果完全相同。另与“抗原非特异性”ＣＩＣ检测法（ＰＥＧ法）作对照。慢性血吸虫病患者６７例ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ有４６例呈阳性反应（６８．７％），２１例呈阴性反应（３１．３％），对肺吸虫病患者５９例、健康人２３例全部呈阴性反应；而ＰＥＧ法，肺吸虫病患者全部呈假阳性反应，健康     

血清中新的肿瘤标志物MG—Ags检测对胃癌的诊断价值

作者采用ＣｏＡ－单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ法分别检测１５０例胃癌、２５例良性消化道疾病、８６例正常人血清中肿瘤标志物ＭＧ－Ａｇｓ（ＭＧ７－Ａｇ、ＭＧｄ１－Ａｇ、ＭＧ９－Ａｇ、ＭＧＣ１－Ａｇ）的含量。胃癌阳性检出率为５７．３％（８６／１５０），良性疾病假阳性率为１２％（３／２５），正常人为９．３％（８／８６），诊断符合率为８７％；说明应用该法测定血清中ＭＧ－ＡｇＳ对胃癌具有较高临床诊断价值。     

日本血吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶诱生的保护性免疫应答特征的研究

目的：研究日本血吸虫重组谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ）在不同品系小鼠（ＢＡＬＢ／ｃ小鼠及Ｃ５７ＢＬ／６小鼠）诱生免疫应答的差异。方法：将ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ（弗氏佐剂）经皮下免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠及Ｃ５７ＢＬ／６小鼠,收集免疫前和免疫后血清及取小鼠脾脏,分析ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫小鼠诱生的特异性抗体、脾脏淋巴细胞特异性增殖能力及细胞因子种类等。结果：ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠所诱生的抗体总ＩｇＧ及ＩｇＧ亚类均较明显高于免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。抗体ＩｇＧ亚类分析显示,ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠诱生较高滴度的ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ及ＩｇＧ２ｂ（血清按１∶４００稀释,Ａ４９２ｎｍ值分别为＞３．０、１．１２７、＞３．０）,而在ＢＡＬＢ／ｃ小鼠主要诱生较低滴度的ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ及ＩｇＧ２ｂ（血清按１∶４００稀释,Ａ４９２ｎｍ值分别为１．１８９、０．３９、０．６２５）;ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫能够诱导小鼠Ｔｈ细胞激活。细胞因子分析显示ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠既能诱生较高水平的ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ,又能诱生ＩＬ－５。而ｒｅＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠仅     

4种抗原检测日本血吸虫病人血清中特异性IgG和IgG_4考核疗效的比较研究

目的探讨ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２检测日本血吸虫病人的特异性和敏感性及疗效考核价值。方法采用ＥＬＩＳＡ法,用ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２及ＳＥＡ检测治疗前及治疗后不同时期血吸虫病人血清中的特异性ＩｇＧ、ＩｇＧ４及正常人和肺吸虫、肝吸虫、囊虫病人血清中的非特异抗体。结果ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２的敏感性和特异性与ＳＥＡ比较差异均无显著性（均Ｐ＞０．０５）;用ＳｊＭＡｇ和ＫＬＨ分别检测治疗后１２个月血清中ＩｇＧ和ＩｇＧ４的阴转率均显著高于ＳＥＡ（Ｐ＜０．０１）、检测治疗后２４个月血清中ＩｇＧ４的阴转率均达９７．６％。结论ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２具有与ＳＥＡ相似的诊断价值和较高的疗效考核价值;特异性ＩｇＧ４可能系一种疗效敏感抗体,可望成为疗效考核评价指标。     

多价McAb—RIHA检测血吸虫循环抗原的应用研究

采用多价ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ检测５０６例不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清ＣＡｇ，累计阳性率为９０．３％，比用单价ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ提高了敏感性。３７５例下沉人的假阳性率为２．１３％，与２２例肺吸虫病人和６６例肝吸虫病人的交叉反应率分别为４．５％和０％。血吸虫病人经吡喹酮治疗后半年和１年，ＣＡｇ转阴率分别为７９．０％和９２．３％。结果表明该方法有较高的敏感性和特异性，可用于确诊病人的１年内考核疗效，操     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫病循环抗原的研究

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针,以抗猪囊尾蚴抗原的McAb为联桥,建立了非常规Dot-IGS用于检测脑囊虫病患者CAg的方法,用4G_2McAb检测84例脑囊虫病人脑脊液(CSF),CAg阳性率为88.09％。检测63例其他疾病患者,出现2例假阳性。以1F_(11)McAb检测14例脑囊虫病人,13例检出CAg,阳性率为92.86％。检测其他疾病患者36例,均为阴性。用4G_2与1F_(11),株McAb可分别检出最小抗原量为1ng/ml和0.25ng/ml。本法敏感、特异、操作简单,可用于脑囊虫病的诊断。     

单克隆抗体74D_(11)、SJA_(111)检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和虫卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数＜５只／２０克粪）、中度（６－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、９２．８％，检测６５例健康献血员，２０例肺吸虫病人，１２例华支睾吸虫病人，１０倒包虫病人，交叉反应率依次为１．５％、５％、０％、０％，４２例经吡喹酮治疗后的血吸虫病人用该方法复查，治后３月和６月随访粪孵毛蚴阴转者中，循环抗原阴转率分别为７８．０％和９２．１％，考核疗效明显优于检测循环抗体。用单抗ＳＪＡ１１１检测感染家兔循环抗原动态变化，循环抗原于感染后３—４周可检出，７周达高峰，以后逐渐消退，而循环抗体（ＩｇＧ）推迟１周出现，８－９周达高峰。实验结果表明，血吸虫病血清ＣＡｇ阳性率与感染度有关，可在早期检出，检测方法具有较高敏感性和特异性，可用于早期诊断和疗效考核。     

组合单克隆抗体多表位检测日本血吸虫循环抗原的研究

目的探讨抗肠相关抗原单克隆抗体（单抗）JPG5和抗虫卵可溶性抗原单抗JPS6、JPG5＋JPG1组合和JPS6＋JPG1组合对血吸虫循环抗原（CAg）的诊断效能。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）对慢性血吸虫病、急性血吸虫病、晚期血吸虫病、卫氏并殖吸虫病、华支睾吸虫病、乙型肝炎患者血清,以及治疗前、治疗后半年、治疗后1年的慢性血吸虫病疗效考核血清进行CAg单位点和多位点检测。结果JPG5检测慢性血吸虫病患者的敏感性和特异性分别为74.3%和96.8%,JPS6分别为78.7%和95.3%;两株单抗与卫氏并殖吸虫病、华支睾吸虫病及乙型肝炎患者血清的交叉反应率分别为15.2%、15.6%、3.2%和21.5%、15.6%、16.0%。JPG5检测治疗后1年的慢性血吸虫病患者血清CAg阴转率高于JPS6。JPG5＋JPG1组合检测慢性血吸虫病患者的敏感性和特异性分别为80.1%和93.7%,JPS6＋JPG1组合分别为73.5%和96.1%;两种组合与卫氏并殖吸虫病、华支睾吸虫病及乙型肝炎患者血清交叉反应率分别为21.5%、15.6%、18.0%和22.8%、15.6%、16.0%。两种组合多位点检测治疗后1年的慢性血吸虫病患者血清CAg阴转率分别为66．7％和45．5％。结论JPG5、JPS6可用作CAg检测的备选探针。JPG5＋JPG1组合与JPS6＋JPG1组合对CAg的诊断效能相近;较之单位点检测,多位点检测敏感性无明显提高。     

血吸虫循环抗原检测及疗效考核价值

采用单克隆抗体(McAb)S31/32双夹心ELISA法检测感染不同寄生虫病人血清中循环抗原(CAg)427份,其中慢性血吸虫病188例,阳性检出率为95.2%,晚期血吸虫病阳性率4.5%(2/44),正常53人假阳性率5.7%.测定其他寄生虫感染患者及肝炎病人,除发现肺吸虫病、旋毛虫病和华枝睾吸虫病有交叉反应外,其它均呈阴性反应.同时,检测血吸虫病治疗前、后CAg,计495 份血清,慢性血吸虫病治疗前188例,阳性率95.2%,吡喹酮治疗后3、6、12和36个月,其阴转率分别为20.4%、31.9%、96.2%和87.7%.比较双夹心ELISA法和一步法ELISA检查CAg,无显著差异.测试结果提示,采用单抗S31/32建立的双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原有很高的敏感性和良好的特异性,病人在治疗后一年其阴转率高,有很好的疗效考核价值.     

BALB／C小鼠感染卫氏并殖吸虫后血清中循环抗原的动态

用滤纸血以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠血中循环抗原（ＣＡｇ），结果显示：小鼠感染卫氏并殖吸虫囊蚴后第３天检出ＣＡｇ，其阳性率为３８％，第１５天起ＣＡｇ达高峰，阳性率１００％，２６～５６天ＣＡｇ维持高水平，第７１天ＣＡｇ滴度下降，以后维持在一定水平，说明滤纸血可以代替血清作ＣＡｇ检测。以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫小鼠血中ＣＡｇ时，具有简便，敏感和特异的优点，可试用于肺吸虫感染的早期诊断和流行病学调查。     

单克隆抗体检测囊虫病人循环抗原及其在疗效考核中的应用

用单克隆抗体致敏绵羊红细胞作反向间接血凝试验，检测７７例囊虫病人血清循环抗原，阳性率为６４．９％；３０例正常人血清的假阳性率为０；２２例华支睾吸虫病人、２４例包虫病人和１７例弓形虫病人的交叉反应率分别为４．６％、４．２％和１１．８％。结果表明，该法较为敏感、特异，且稳定可靠、简单易行，尤适于在基层医疗单位推广应用。检测经治疗１～１０个疗程囊虫病人血清中循环抗原和抗体，发现随着疗程的增加循环抗原的消失明显快于抗体，且大部分患者的循环抗原和其临床症状、体征同时消失。表明循环抗原的检测对囊虫病的诊断和疗效考核有一定的实用价值。     

棘球蚴病CAb、CAg与CIC检测结果的评价

对棘球蚴病患者用ABC-ELISA法检测CAb,ABC-夹心双抗体法和Pernice法分别检测CAg和CIC,阳性率分别为87.0％(40/46)、15.6％(7/45)和17.8％(8/45)。在检测CAb阴性的6例中CAg阳性者4例,表明CAb与CAg同时检测可提高阳性检出率达95.6％(43/45)。 CAb阴性病例主要是肺棘球蚴病,占83.3％(5/6)。CAg的检出率仅15.6％,但特异性高,未出现交叉反应和假阳性反应。检测CIC不但检出率不高,而且非特异性反应与检测CAb时相似。     

卫氏并殖吸虫感染犬循环抗原的动态观察

应用Dot-ELISA,以抗卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫McAbG_2B_3、A_3D_3检测了4只Pw囊蚴感染犬吡喹酮治疗前后血清CAg动态。感染后第4d,4只犬囊蚴CAg均为阳性,1只犬成虫CAg为阳性。至第19d,4只犬囊蚴和成虫CAg均为阳性。第101～105d,4只犬中2只以每只3.2g总量吡喹酮进行治疗,治疗后短期内囊蚴和成虫CAg滴度明显升高,其中尤以成虫CAg升高显著。至治疗后第6d,囊蚴和成虫CAg达高峰,其后便逐步下降。1号犬在治疗后55d、2号犬于治疗后26d囊蚴CAg滴度为0.1号犬于治疗后65d、2号犬于治疗后36d成虫CAg滴度为0。未治疗犬成虫CAg维持于1:16～1:640,囊蚴CAg为1:20～1:40,CAg的动态呈现明显的期特异性。治疗后80d剖检2只治疗犬,其肺部均有多个陈旧性虫囊,虫囊内多为变性坏死虫卵,未发现成虫。未治疗犬于死后即行解剖检获Pw成虫60条。上述研究结果提示:1.感染Pw犬囊蚴CAg的动态具有明显的期特异性,与虫体在宿主体内的发育情况是一致的;2.有效治疗后囊蚴和成虫尤其是成虫CAg的滴度在短期内明显升高;3.可联合或单独应用抗囊蚴McAbG_2B_3、抗成虫McAbA_3D_3进行并殖吸虫病的虫期诊断和疗效考核。     

脑囊虫病患者脑脊液常规和生化检查与循环抗原检测的比较

本文对408例脑囊虫病患者脑脊液循环抗原检测与脑脊液常规检查和生化分析进行了比较.研究发现循环抗原强阳性组和弱阳性组脑脊液中出现嗜酸粒细胞者所占的比例高于阴性组(分别是50.43%、41.26%和17.65%).274例进行脑脊液生化分析,氯化物基本正常.循环抗原强阳性组葡萄糖含量降低的发生率(14.71%)高于阴性组(3.85%).脑脊液蛋白增高者所占的比例明显高于弱阳性组,弱阳性组又明显高于阴性组(分别为89.70%、71.43%和50.00%).23例原发性癫痫患者脑脊液中CAg均阴性,脑脊液常规和生化分析结果正常.