头针电刺激对急性脑梗死大鼠Bax与Bcl-2蛋白的影响

目的:观察头针电刺激对急性脑梗死大鼠Bax与Bcl-2蛋白的变化,探讨其作用于脑梗死的机理。方法:将健康的雌性Wistar大鼠,随机分为头针电刺激组、模型对照组、假手术组,每组又依据脑梗死后治疗时间点分出7天组、14天组,每个时间点15只大鼠。用线栓法制作大鼠局灶性脑梗死模型,然后3组大鼠于造模结束1天起,头针电刺激组予大鼠针刺干预,选取百会穴与大椎穴针刺,以参数为100 Hz的密波进行电刺激治疗,1次/日,30 min/次,余2组大鼠固定于针刺台后,不进行任何干预。于7天、14天治疗结束后,断头取脑,行Western blot技术检测,测定梗死脑组织的Bax及Bcl-2蛋白表达相对值。结果:头针电刺激组Bax表达逐渐下降,Bcl-2表达逐渐上调;模型对照组Bax与Bcl-2表达均下降。与模型组比较,头针电刺激组7天、14天的Bax蛋白表达、Bcl-2蛋白表达差异具有统计学意义(P0.05)。结论:头针电刺激具有良好的保护梗死脑组织作用,可以下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,使两种蛋白表达差值达到最大,抑制缺血区细胞凋亡,这可能是头针电刺激改善梗死大鼠的作用机制。     

头针电刺激对急性脑梗死大鼠神经胶质细胞及凋亡基因相关蛋白的影响

目的观察头针电刺激对急性脑梗死大鼠神经胶质细胞及凋亡基因相关蛋白的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组和头针电刺激组,采用线栓法制备动物大脑中动脉栓塞模型,在造模成功24 h后头针电刺激组进行电针治疗,刺激时长每日1次,每次30 min,假手术组和模型组每天固定于针刺台上30 min,不进行头针电刺激,持续14 d。在实验结束时进行大鼠神经功能Bederson′s评分,处死大鼠后对脑组织进行TTC染色,计算梗死体积;检测脑组织中Bax、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)蛋白的表达量;用TUNEL法检测神经胶质细胞凋亡情况。结果假手术组大鼠表现正常,未见梗死灶;与模型组相比,头针电刺激组梗死体积明显减小,神经功能Bederson′s评分降低,差异有统计学意义(P 0.05);与假手术组相比,模型组和头针电刺激组大鼠脑组织中细胞凋亡率、Bax和Caspase-3蛋白表达量均增加,Bcl-2蛋白表达量均降低,差异有统计学意义(P 0.05);与模型组比较,头针电刺激组大鼠脑组织中细胞凋亡率、Bax和Caspase-3蛋白表达量均降低,Bcl-2蛋白表达量增加,差异有统计学意义(P 0.05)。结论头针电刺激能减小脑梗死体积,改善急性脑梗死大鼠的神经功能,其机制可能与下调Bax和Caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制神经胶质细胞凋亡有关。     

头针电刺激对急性脑梗死大鼠血小板活化标志物CD62P、CD63的影响

目的观察头针电刺激不同时间点对急性脑梗死大鼠血清CD62P和CD63水平、神经功能缺损的调节作用并探讨其机理。方法将160只健康的雄性Wistar大鼠,随机分为头针电刺激组、普通针刺组、假手术组和模型对照组,各组又根据治疗的时间点不同分为1 d组、3 d组、7 d组和14 d组4个亚组,每组10只大鼠。头针电刺激组、普通针刺组及模型对照组采用改良的线栓法制作右侧大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血大鼠模型,4组大鼠在造模成功1 d起,每天同一时间进行干预,头针电刺激组给予大鼠头针电刺激干预,以疏密波进行电刺激治疗,普通针刺组给予大鼠普通头针干预,选取百会和大椎穴,假手术组及模型组大鼠于同一时间固定于针刺台,不做处理。于治疗1、3、7、14 d后,检测血清中CD62P、CD63的表达。各组大鼠造模结束清醒后及治疗前后均采用Bederson评分法评分。结果头针电刺激组较各组能显著降低CD62P、CD63的表达(P 0.01),头针电刺激组中各治疗时间点比较,血清中CD62P、CD63表达明显减少(P 0.01)。头针电刺激组、普通针刺组及模型对照组Bederson评分比较,3、7及14 d组差异具有统计学意义(P 0.05);头针电刺激组中各治疗时间点评分比较,随着时间增加,评分降低(P 0.05),且以14 d为最佳。结论通过比较各组大鼠血清CD62P、CD63表达及Bederson评分,结果均表明头针电刺激能降低CD62P、CD63表达,改善脑梗死大鼠神经功能,且随着时间延长,改善越明显,以14 d为最佳。     

头针治疗急性脑梗死大鼠不同时间窗的疗效观察

目的：头穴电刺激脑梗死大鼠不同时间窗的疗效观察。方法：将健康雌性大鼠分为模型对照组、假手术对照组及头穴电刺激组,每组又分为治疗1天、3天、7天、14天4个亚组,每组15只。头穴电刺激组、模型对照组采用线栓法制备大脑中动脉急性脑梗死大鼠模型,假手术对照组只分离动脉不结扎插线。对3组大鼠Zea Longa评分,造模24 h内对头穴电刺激组大鼠针刺大椎、百会进行电刺激治疗,每日1次,每次30 min,治疗1天、3天、7天、14天,其余两组于每天相同时间将大鼠固定于实验台上,不予处置。在治疗后1天、3天、7天、14天对各组大鼠进行评分,断头取脑,用PT-PCR方法检测Caspase-3mRNA的表达变化。采用SPSS统计软件进行统计分析。结果：头穴电刺激治疗14天组和治疗7天组Zea Longa评分疗效显著（P〈0.05）;头穴电刺激组中治疗14天组Caspase-3 mRNA的表达量明显低于治疗1天、3天（P〈0.05）。结论：对急性脑缺血性脑梗死大鼠行头穴电刺激治疗,可促进其肢体功能的恢复,14天疗程对大鼠肢体功能的恢复疗效最佳。     

针刺对脑卒中模型大鼠认知功能障碍影响及其与PI3K/Akt信号转导通路关系

目的:分析针刺对脑卒中模型大鼠认知功能障碍影响及其与磷酸酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路联系。方法:选取SPF级雄性大鼠30只,随机数字表法将大鼠分成3组,分别为针刺组、模型组和正常组,针刺组、模型组大鼠制备大脑中动脉梗塞(MCAO)模型,成功造模后电针仪对针刺组大鼠行针刺治疗,模型组与正常组不进行任何处理。观察大鼠神经功能评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率、脑组织PI3K、Bcl-2、p-Akt、t-Akt、Bax蛋白表达及Bax、Bcl-2及Bc1-2/Bax mRNA表达。结果:和正常组相比,模型组大鼠脑梗死面积增大;和模型组相比,针刺组大鼠脑梗死面积减少,差异有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠凋亡阳性细胞比例升高;和模型组相比,针刺组大鼠凋亡阳性细胞比例降低,差异均有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠Bax蛋白表达升高,PI3K、Bcl-2、p-Akt蛋白表达降低;和模型组相比,针刺组大鼠Bax蛋白表达降低,PI3K、Bcl-2、p-Akt蛋白表达升高,差异有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠Bax mRNA表达升高,Bcl-2及Bc1-2/Bax mRNA表达降低;和模型组相比,针刺组大鼠Bax mRNA表达降低,Bcl-2及Bc1-2/Bax mRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:针刺脑卒中大鼠可显著改善其认知功能障碍,加速神经功能恢复,作用机制可能将PI3K/Akt路径激活,对神经细胞凋亡抑制有联系。     

温针对膝骨性关节炎模型大鼠行为学及Bcl-2、Bax m RNA表达的影响

目的 探讨温针对膝骨关节炎（KOA）模型大鼠行为表现及相关因子B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的影响。方法 将24只SPF级大鼠随机分为空白组、模型组与温针组,每组8只。膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶建立KOA大鼠模型,用温针对温针组进行干预,每次20 min,每日1次,干预6 d休息1 d,1周为1个疗程,共2个疗程。干预结束后,对大鼠进行Lequesne MG动物行为学评分,检测软骨组织内Bcl-2与Bax的m RNA表达。结果 造模后,模型组与温针组行为学评分均明显高于空白组（P <0.01）。疗程结束后,与模型组相比,温针组行为学评分显著降低（P <0.01）,Bcl-2 m RNA表达增加（P <0.05）,Bax m RNA表达下降（P <0.05）,差异均有统计学意义。结论 温针可能通过提高Bcl-2的基因表达、抑制Bax m RNA的表达对膝关节软骨起保护作用,从而改善KOA模型大鼠的日常行为活动能力。     

针康法对局灶性脑缺血大鼠运动功能及缺血区周围内皮素受体-β表达的影响

目的:观察针康法对局灶性脑缺血大鼠运动功能及缺血区周围内皮素受体-β表达的影响.方法:选取清洁级SD雄性大鼠,按随机数字表法分成5组,假手术组、模型组、针刺组、康复组以及针康组,按时间点每组又分为3天、7天、14天、21天共4个亚组.采用线栓法制备脑梗死动物模型,造模后24 h分别进行相应干预.针刺组仅采用头穴丛刺,康复组仅进行康复训练,针康组采取头穴丛刺结合康复训练,采用行为学评分法分析大鼠运动功能,并应用免疫组化法观察各组不同时间点缺血灶周围皮质ET-β受体表达.结果:针康组术后14天、21天行为学评分低于针刺组、康复组,且针康组明显低于模型组(P＜0.05);造模后大鼠ET-β受体阳性细胞数增加,3天和7天达到高峰,随后逐渐减低;3天、7天和14天时,针康组ET-β受体阳性细胞的表达水平低于针刺组、康复组,明显低于模型组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:针康法可促进局灶性脑缺血大鼠运动功能的恢复,其机制可能是与减少缺血区周围ET-β受体的表达有关.     

背部循经推拿手法对亚健康模型大鼠海马神经元凋亡相关基因Bcl-2、Bax及Casepase-3表达的影响

目的:观察背部循经推拿对亚健康模型大鼠海马神经元凋亡相关基因Bcl-2、Bax及Casepase-3蛋白表达的影响。方法:60只wistar大鼠随机分为正常组、模型组和推拿干预组,后两组予束缚应激,推拿干预组予背部循经推拿。实验结束后,采用免疫组化法检测3组大鼠海马组织Bcl-2、Bax及Casepase-3蛋白表达,实时荧光定量PCR方法检测Casepase-3 mRNA的表达情况。结果:模型组大鼠海马组织Bcl-2蛋白表达下降、Bax与Caspase-3蛋白表达上升,与空白组比较,差异有显著性(P0.05);推拿干预组海马组织Bcl-2蛋白表达上调、Bax蛋白表达下调、Caspase-3蛋白及Caspase-3 mRNA表达均上升,与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。结论:背部循经推拿手法可以通过抑制Bax与Caspase-3蛋白及Caspase-3 mRNA表达、上调Bcl-2蛋白表达,从而发挥对慢性应激所致亚健康状态的脑神经保护作用。     

头电针联合强制性运动对缺血脑卒中大鼠抗细胞凋亡调控机制研究

目的:观察头电针联合强制性运动对缺血性脑卒中大鼠脑组织Bax、Bcl-2、Bax/Bcl-2及Caspase-3蛋白表达的影响。方法:将SD大鼠100只随机分为模型组(造模成功后不予处理)、常规康复组(常规康复训练)、头电针组(头电针治疗)、强制运动组(CIMT训练,限制健侧,强迫患侧治疗)和综合干预组(头电针加强制性运动训练)5组,用Longa线栓法造成左侧大脑中动脉缺血模型,另选取20只同质鼠作为正常对照组。干预7天后检测大鼠神经功能、脑组织Bax、Bcl-2、Bax/Bcl-2及Caspase-3蛋白表达。结果:常规康复组、头电针组、强制运动组和综合干预组与模型组比较,Longa评分明显改善(P0.01);各干预组之间比较,综合干预组Longa评分较其他组有明显改善(P0.01),但常规康复组、头电针组及强制运动组之间没有明显差别;在抗细胞凋亡因子方面,模型组与正常对照组比较,可明显上调Bax蛋白和Caspase-3蛋白、下调Bcl-2蛋白(P0.05),Bax/Bcl-2明显升高(P0.05);常规康复组、头电针组、强制性运动及综合干预组与模型组分别进行比较,干预后各组均可明显下调Bax及Caspase-3蛋白表达、上调Bcl-2蛋白、Bax/Bcl-2下降(P0.05);各干预组之间比较,综合干预组可显著下调Bax和Caspase-3蛋白及上调Bcl-2蛋白,改善Bax/Bcl-2比值,与常规康复组、头电针组及强制运动组有显著性差异(P0.05),但常规康复组、头电针组及强制运动组之间没有显著性差异。结论:常规康复、头电针及强制性运动训练均有抗细胞凋亡作用,但头电针加CIMT训练作用最为明显,对脑卒中具有更好的保护作用。     

针刺对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠大脑皮质14-3-3蛋白表达的影响

目的:探讨针刺对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠大脑皮质中14-3-3及凋亡相关的Bcl-2家族中两大主要成员Bcl-2和Bax的影响。方法:明确预产期的SD雌性妊娠大鼠接受延迟5min剖宫产术,所得新生大鼠随机分为模型组和针刺组;接受正常剖宫产术的大鼠所产新生大鼠为假手术组;代乳雌鼠自然分娩的新生大鼠为正常组。每组8只动物。针刺组新生大鼠饲养至14d时,每天针刺"脑三针""颞三针""智三针",每个穴位刺激20s,不留针,连续7d。各组新生大鼠均于出生后21d断头取脑,用免疫组织化学染色法检测大脑皮质中14-3-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:比较各组新生大鼠大脑皮质14-3-3的表达,假手术组和模型组显著低于正常组和针刺组(P0.05,P0.01);比较各组新生大鼠大脑皮质Bcl-2的表达,模型组略低于正常组(P0.05),针刺组高于模型组(P0.05);比较各组新生大鼠大脑皮质Bax的表达,假手术组、模型组显著高于正常组(P0.01,P0.05),针刺组与模型组间的差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刺可以提高HIBD新生大鼠大脑皮质中14-3-3和Bcl-2的表达水平。     

电针调节脑缺血再灌注大鼠大脑皮层Bcl-2和Bax mRNA的表达

目的:探讨电针是否通过干预Bax/Bcl-2 mRNA的表达,来调控缺血再灌注大鼠大脑皮层细胞凋亡,发挥电针对脑神经元保护作用。方法:将清洁级健康雄性SD大鼠19只,按随机数字表随机分成假手术组(n=5)和用于造模动物14只,采用改良Longa线栓大脑中动脉法制作局灶性脑缺血再灌注模型。在成功制作出脑缺血再灌注模型并作神经缺损综合评分为2分以上后随机分为模型组、电针组,每组各7只。取电针组大鼠"百会"及"大椎"穴,采用疏密波刺激30min,电流强度1～3mA,频率20Hz/80Hz,疏、密波交替时间各为1.5s。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测大鼠大脑皮层组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果:与假手术组相比,模型组Bcl-2、Bax mRNA表达均显著升高,而Bcl-2/Bax比值显著下降;与模型组相比,电针组Bax mRNA表达降低,Bcl-2 mRNA表达虽无统计学差异,但Bcl-2/Bax比值显著上升,形成以Bcl-2占优势的Bcl-2/Bax二聚体。结论:电针可以通过调控内源性凋亡途径,抑制Bax的促凋亡作用,降低缺血再灌注区的细胞凋亡,促进细胞的存活,这可能是电针拮抗局灶性脑缺血再灌注损伤后的神经细胞凋亡,保护脑神经元的分子生物学机制之一。     

电针对失坐骨神经大鼠腓肠肌细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的:观察电针疗法对失坐骨神经大鼠腓肠肌细胞凋亡及相关蛋白的影响,探讨电针对失坐骨神经骨骼肌萎缩的延缓效应及其可能机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组21只。采用切断坐骨神经法制备腓肠肌萎缩大鼠模型。电针组电针患侧"足三里""承山"穴,每日1次,每次10min,各组分别在术后7、14、21d取材。TUNEL法检测腓肠肌细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-2、Bcl-2相关的X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt-C)以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达,RT-PCR法检测腓肠肌Caspase-3mRNA表达。结果:模型组各时点细胞凋亡指数均高于假手术组(P0.05),电针组的细胞凋亡指数显著低于模型组(P0.05)。模型组各时点腓肠肌Bcl-2蛋白表达较假手术组显著降低(P0.05),Bax、Cyt-C以及Caspase-3蛋白表达均明显升高(P0.05)。术后14、21d,电针组与模型组比较,Bcl-2蛋白表达显著升高(P0.05),Bax、Cyt-C及Caspase-3蛋白表达则明显降低(P0.05)。各组大鼠腓肠肌的Caspase-3mRNA表达与蛋白表达结果基本一致。结论:电针能够促进腓肠肌Bcl-2的表达并抑制Bax、Cyt-C和Caspase-3的表达,从而抑制肌细胞的凋亡,这可能是电针延缓失神经性骨骼肌萎缩的机制之一。     

祛瘀生肌法对糖尿病大鼠创面新生肉芽组织凋亡相关基因的动态影响

目的探讨祛瘀生肌法对糖尿病溃疡大鼠创面愈合中凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA表达的影响。方法48只SD大鼠采用四氧嘧啶造成糖尿病模型后,剪去背部局部全层皮肤造成糖尿病溃疡。将大鼠随机分成生肌化瘀方1组、生肌化瘀方2组、生肌化瘀方3组和生理盐水对照组。分别于创面修复第3天、11天取材,采用实时PCR法检测新生肉芽组织中凋亡相关基因Bax和Bcl-2mRNA变化。结果创面修复第3天,生肌化瘀方1组和生肌化瘀方2组Bcl-2拷贝数及Bax/Bcl-2比值均高于生理盐水对照组（P〈0.05）;创面修复后第11天,生肌化瘀方1组Bcl-2拷贝数和Bax/Bcl-2比值仍高于生理盐水对照组（P〈0.05）,而生肌化瘀方2组Bax/Bcl-2比值与生理盐水对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论祛瘀生肌中药调节糖尿病溃疡大鼠模型新生肉芽组织中凋亡相关基因Bax和Bcl-2mRNA表达是促进创面愈合的原因之一。早期重用化瘀药物能抑制细胞凋亡,有利于创面愈合,而晚期重用生肌药物能促进细胞凋亡,有利于减少疤痕形成。     

穴位电刺激对脑缺血后大鼠臂丛神经细胞凋亡的影响

目的通过电刺激脑缺血后大鼠的"曲池""足三里"穴位,观察疼痛阈值和臂丛神经细胞Caspases-3、Bax和Bcl-2表达改变,探讨穴位电刺激对大鼠臂丛神经凋亡的影响。方法 120只SD大鼠随机均分为3组(40只):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和电刺激组(EA组)。I/R和EA组造脑缺血再灌注模型,脑缺血再灌注造模成功后,I/R组未进行其他处理, EA组给予"曲池""足三里"穴位电刺激治疗。分别于实验前(T_0)及实验第1天(T_1)、3天(T_2)、7天(T_3)、14天(T_4),通过电子测痛仪测定足底机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold, MWT),观察并记录大鼠疼痛阈值。3组于T_1、T_2、T_3和T_4各取10只大鼠处死,取出右侧臂丛神经,采用Western blot检测大鼠臂丛神经的Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果 3组大鼠实验前MWT无明显差异性(P0.05);S组MWT实验前后无明显差异(P0.05);与组内T_0比较,T_1、T_2、T_3和T_4时I/R组和EA组MWT低(P0.01);与S组比较,T_1、T_2、T_3和T_4时I/R组和EA组MWT更低(P0.01);与I/R组比较,T_3和T_4时EA组MWT更高(P0.05或0.01)。Western blot检测臂丛神经细胞Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达结果:S组大鼠臂丛神经细胞Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达实验前后无差异(P0.05);与组内T_1比较,T_2、T_3和T_4时I/R组和EA组Caspase-3和Bax蛋白表达增强(P0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P0.01);与S组比较,T_1、T_2、T_3和T_4时I/R组和EA组Caspase-3和Bax蛋白表达更高(P0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P0.01);与I/R组比较,T_3和T_4时EA组Caspase-3和Bax蛋白表达更低(P0.01),Bcl-2蛋白表达更高(P0.01)。结论对脑缺血/再灌注损伤大鼠"曲池"和"足三里"穴位电刺激,可以提高疼痛阈值,缓解疼痛,促进臂丛神经修复,减少臂丛神经凋亡,可能与调节凋亡相关蛋白Casepase-3、Bax、Bcl-2的表达有关。     

隔药灸脐对卵巢早衰模型大鼠Bcl-2、Bax蛋白和mRNA表达的影响

目的观察隔药灸脐对卵巢早衰模型大鼠Bcl-2和Bax表达的影响,探讨其对卵巢的保护机制。方法采用腹腔注射环磷酰胺建立大鼠卵巢早衰模型。48只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸脐组、西药组,每组12只。隔药灸脐组大鼠隔药灸"神阙",30 min/d,隔日1次,连续14 d;西药组大鼠予戊酸雌二醇灌胃,每日1次,连续14 d。采用免疫组化、Western blot和实时荧光定量PCR检测大鼠卵巢凋亡相关因子Bcl-2、Bax蛋白和mRNA的表达。结果模型组大鼠卵巢质量明显低于正常组(P0.05)。Bcl-2、Bax蛋白主要表达在细胞胞浆中,隔药灸脐组和西药组较模型组卵泡颗粒细胞Bax表达范围明显缩小,Bcl-2表达范围明显增加。与正常组比较,模型组大鼠卵巢Bcl-2蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01),Bax蛋白和mRNA表达显著升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,隔药灸脐组和西药组大鼠卵巢Bcl-2蛋白和mRNA表达显著升高(P0.05,P0.01),Bax蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论隔药灸脐可能通过上调卵巢早衰模型大鼠卵巢Bcl-2和下调Bax的表达,改善卵巢功能。     

红景天苷对急性心肌梗死大鼠心肌相关凋亡因子及Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响

目的：探讨红景天苷对急性心肌梗死（AMI） 大鼠心肌相关凋亡因子及B 淋巴细胞瘤-2 基因（Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3） 表达的影响。方法：75 只健康SPF 级SD 大鼠,随机选择10 只作为假手术组,仅进行开胸、缝合处理;剩余65 只采用冠脉结扎诱导建立大鼠AMI 模型,剔除不合格模型后共有50 只标准大鼠AMI 模型,随机分为模型组、阳性对照组及红景天苷低、中、高剂量组,每组10 只。阳性对照组按10 mg/kg 的剂量给予卡维地洛;红景天苷低、中、高剂量组分别按12、24、36 mg/kg 的剂量给予红景天苷,均溶于10 mL 生理盐水灌胃给药;假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。模型制备成功后次日开始灌胃,持续8 周。原位末端凋亡检测（TUNEL） 法检测心肌细胞凋亡情况,苏木精-伊红（HE） 染色法测定梗死面积,BCA 法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表达,荧光定量PCR 法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 相对表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡指数（AI）、心肌梗死面积、Bax、Caspase-3蛋白及mRNA 相对表达均增加（P＜0.05）,Bcl-2 蛋白及mRNA 相对表达均降低（P＜0.05）。与模型组比较,阳性对照组及红景天苷低、中、高剂量组大鼠心肌细胞AI、心肌梗死面积、Bax、Caspase-3 蛋白及mRNA 相对表达均降低（P＜0.05）,Bcl-2 蛋白及mRNA 相对表达均升高（P＜0.05）。与阳性对照组比较,红景天苷低、中剂量组大鼠心肌细胞AI、心肌梗死面积、Bax、Caspase-3 蛋白及mRNA 相对表达升高（P＜0.05）;Bcl-2 蛋白及mRNA 相对表达降低（P＜0.05）。结论：红景天苷可通过下调Bax、Caspase-3 的表达,上调Bcl-2 的表达,来减少细胞凋亡,缩小大鼠AMI 模型梗死面积。     

加味温胆方对心肌缺血(痰浊血瘀证)大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3表达的影响

目的探讨加味温胆方对心肌缺血(痰浊血瘀证)大鼠细胞凋亡及B淋巴细胞瘤(Bcl-2)、Bcl-2同源二聚体X蛋白(Bax)、Survivin、Caspase-3表达的影响。方法清洁级SD大鼠雄性100只,根据体质量随机分成5组:空白组、模型组、加味温胆方低剂量组(5.0 mg/kg)、加味温胆方中剂量组(10.0 mg/kg)、加味温胆方高剂量组(20.0 mg/kg)。模型组、加味温胆方各剂量组喂以高脂饲料,同时分别以0.9%氯化钠注射液及各剂量加味温胆方灌胃,连续灌胃7周,在第49天施冠状动脉结扎术;空白组喂以普通饲料,以0.9%氯化钠注射液灌胃,实验结束后,测定凋亡光密度及面积、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白及m RNA水平。结果与空白组比较,模型组及加味温胆方组各剂量Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白表达水平降低,Bax、Caspase-3mRNA、蛋白表达水平、心肌细胞凋亡光密度及面积升高(P 0.05);与模型组比较,加味温胆方组各剂量组Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白表达水平降低升高,Bax、Caspase-3 m RNA、蛋白表达水平、心肌细胞凋亡光密度及面积降低,且随着加味温胆方组给药剂量的增加,Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白表达水平逐渐升高,Bax、Caspase-3 mRNA、蛋白表达水平、心肌细胞凋亡光密度及面积逐渐降低,剂量-效应关系明显(P 0.05)。结论加味温胆方能减轻冠心病大鼠的病理损伤,抑制心肌缺血(痰浊血瘀证)大鼠细胞凋亡,其机制与加味温胆方能促进Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白的表达,抑制Bax、Caspase-3 m RNA、蛋白的表达有关。     

实验性脑出血后Bcl-2 mRNA的变化及安宫牛黄丸的干预作用

目的:观察安宫牛黄丸对自发性高血压大鼠脑出血后Bcl-2 mRNA表达及行为学变化的影响。方法:自发性高血压大鼠随机分为空白对照组、模型组、西药治疗组、中药治疗组、中西药结合治疗组,以自体血制作大鼠脑出血模型于1、2、3d观察大鼠神经行为学评分,RT-PCR测定Bcl-2 mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,模型组与各治疗组大鼠造模后行为学评分与Bcl-2 mRNA表达增加(P<0.05)。与其它3组相比,中西药结合治疗组大鼠造模后2d和3d大鼠行为学评分明显降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达明显增加(P<0.05),中药组与西药治疗组行为学评分低于模型组(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达明显高于模型组(P<0.05),中药组与西药治疗组间相比差异无显著性。结论:安宫牛黄丸能够有效改善神经功能缺损症状,提高Bcl-2 mRNA的表达。以早期与常规西药联合应用疗效更好。     

肿瘤坏死因子-α在电针预刺激经穴与非经穴镇痛效应差异性中的作用

目的:观察肿瘤坏死因子-α在电针预刺激经穴与非经穴镇痛效应差异性中的作用。方法:采用弗氏完全佐剂(CFA)诱发单发关节炎大鼠模型,造模前7天开始给予电针经穴预刺激、电针非经穴预刺激和甲氨蝶呤治疗,治疗至造模后7天结束;为观察经穴预刺激的后延效应,于实验第21天取材进行指标检测。实验第1天、7天、10天、14天、21天采用热辐射法测定大鼠的缩爪潜伏期(PWL);实验第21天,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中TNF-α的水平,Real-time PCR检测下丘脑中TNF-αmRNA表达。结果:实验第7天,经穴预刺激组的PWL与非经穴组比较显著延长(P0.05);第14天,经穴组较非经穴组PWL显著延长(P0.05);第10天、14天,经穴组与甲氨蝶呤组无显著性差异(P0.05);第21天,经穴组的PWL较MA组(模型组)显著延长(P0.05),但非经穴组PWL与MA组相比,无显著性差异(P0.05);经穴组血清中TNF-α水平和下丘脑中TNF-αmRNA表达量显著低于非经穴组(P0.05)。结论:与非经穴预刺激相比,经穴预刺激对MA大鼠模型的镇痛效应更强,这种差异可能与二者对血清中TNF-α水平和下丘脑中TNF-αmRNA的调控能力不同有关。     

Bcl-2、Bax和Caspase-3在酒精性肝病大鼠肝组织中的表达和五田保肝液的干预作用

目的 研究Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA在酒精性肝病大鼠肝组织中的表达变化及五田保肝液对其表达的干预作用.方法 选用健康清洁级雄性Wistar大鼠64只,随机分为对照组10只;模型组、中药治疗组、阳性对照组各18只.采用62度白酒(10 ml·kg-1·d-1)、玉米油(2 ml·kg-1·d-1)、吡唑(25 mg·kg-1·d-1)混合物灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模型.12周末处死大鼠,取肝组织采用荧光实时定量RT-PCR法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA的表达.结果 模型组Bcl-2基因表达较之对照组和中药治疗组显著性降低(P<0.01),与阳性对照组差异不明显(P>0.05);模型组Bax 、Caspase-3基因表达较之其它各组均明显升高(P<0.01);中药治疗组、阳性对照组Bcl-2、Bax 、Caspase-3基因表达与对照组相比无明显差异(P>0.05);中药治疗组和阳性对照组Bcl-2、 Bax 、Caspase-3基因表达差异亦不具有显著性(P>0.05).结论 大量饮酒可通过下调Bcl-2基因的表达,上调Bax 、Caspase-3基因的表达促进肝细胞的凋亡,导致肝损伤.而五田保肝液可通过调节Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA的表达,抑制肝细胞的凋亡,起到保肝护肝作用.