骨髓长期培养的造血基质祖细胞的辐射敏感性

骨髓的长期培养体系使造血干细胞等所有造血细胞活存数周。这是由于培养过程中所形成的贴壁细胞层起到了造血微环境作用所致。把培养的这种贴壁细胞层接种到同系小鼠的肾包膜下,造血基质祖细胞形成异位造血灶。问题是培养的基质祖细胞在转移造血微环境的能力上是否和骨髓基质祖细胞相一致?辐射敏感性是细胞的最重要的特征之一。新鲜骨髓中转移造血微环境的细胞辐射敏感性的特征已有详细介绍。     

造血基质祖细胞的辐射敏感性研究进展

综述了几种动物的造血基质祖细胞在体外培养下的辐射敏感性及其主要影响因素。根据文献和本室工作资料，展望了此类细胞的科学意义及其发展前景。     

人骨髓多能造血祖细胞(CFU-GEMM)的辐射敏感性

20年来,先后有人测定了小鼠多能干细胞(CFU-S)和人定向干细胞(CFU-C)的辐射敏感性,发现其D_0值分别为115和137拉德。本文则测定来自人骨髓的多能造血祖细胞(CFU-GEMM)的辐射敏感性。     

辐射后骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞生长的影响

本文观察了骨髓造血基质细胞贴壁层及细胞悬液对 GM-CFU-C 生长的影响及照射后的变化。实验结果表明,骨髓基质细胞贴壁层及细胞悬液均有增高 GM-CFU-C 产率的作用。这种刺激性影响与基质细胞贴壁层的细胞密度和细胞悬液的浓度没有依赖关系。1～5Gyγ线照射的骨髓基质细胞贴壁层和细胞悬液支持 GM-CFU-C 集落生成的作用明显削弱。文中讨论了造血基质细胞的辐射损伤在放射病骨髓综合征发病机理中的意义。     

人骨髓粒-巨噬祖细胞和基质祖细胞的辐射敏感性:剂量率效应

体外培养的人类白血病细胞系已显示出比骨髓基质细胞更高的辐射敏感性。然而,所提供的有关照射剂量率方面的资料并不多。要了解正常人骨髓造血细胞辐射敏感性是否与剂量率有一定关系,首先,必须纯化各种造血祖细胞。大量资料表明,新鲜骨髓含有很多其他非造血系细胞群,这些细胞同造血干细胞相比,可能对辐射有个高的固有敏感性。但目前还不能从骨髓中将其所含的非造血性基质细胞分离出来,致使人骨髓造血细胞的放射生物学研究工作陷入困境。本文报道以新鲜骨髓细胞及通过长期骨髓培养LTBMC方法,从基质细胞中分离出的非贴壁造血细胞作为靶细胞,观察不同剂量率的X线对同系细胞活存的影响。     

骨髓基质成纤维样祖细胞的辐射敏感性和照射后的变化

造血组织照射后的变化首先是由于造血细胞损伤引起的,但这些变化也发生在维持造血细胞增殖和分化的造血基质中。局部受大剂量照射后,继发的骨髓     

小鼠骨髓细胞长期培养中支持造血的基质细胞辐射抗性

骨髓基质细胞确切的辐射敏感性是一个尚有争论的问题。为此,Zuckerman KS 等对照射0、9、15、20、25、50、100、200或500Gy 的长期培养小鼠骨髓细胞贴壁融合基质细胞层进行了研究。所有受照射的培养物造血均迅速停止。并且,观察十周未见恢复。辐射剂量在100Gy 以下时,基质细胞看不出明显形态学改变。但是随着剂量加大,则出现细胞浆肿胀、细胞溶解和基质细胞的明显减少。照射9Gy 后两天内,RNA和蛋白质总合成下降35～60%,下降的主要原因可能是由于贴壁层中造血细胞的丢失。辐射剂量达100Gy     

造血微环境祖细胞的放射敏感性

造血基质是干细胞增殖和分化的场所,研究其放射敏感性是很有意义的。骨髓和脾脏的造血基质放射耐受性较高,2000rad 的照射仍能维持造血细胞均生长,3000 rad 以上剂量的损伤才不能修复。但基质的间充质细胞及其衍化的各种细胞,当切除其骨髓细胞而引起增殖时,可能会提高其放射敏感性。机械损伤大鼠和家兔的骨髓,照射剂量须超过1000 rad 时,才能影响其修复过程。切除骨髓后,其再生障碍的平均     

脐带血清在骨髓造血祖细胞培养中的效应

目的:探讨人脐带血清(CBS)在骨髓造血祖细胞培养中的效应,为脐血的应用提供实验依据.方法:用人骨髓单个核细胞,分别加入CBS或混合脐带血清(MCBS)和细胞因子,进行造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM)培养,观察集落数.结果:10?S能直接刺激骨髓细胞CFU-GM的形成.CBS的刺激活性和骨髓细胞血型相同与否无关.4人份以上的MCBS,刺激产生的CFU-GM显著高于单人份、双人份混合者,活性稳定.在CFU-GM培养时,20%MCBS与100ng/mlGM-CSF、20%马血清具有相同的效果.MCBS可提高CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM常规体系的集落产率.10%MCBS相当于65.6ng/ml GM-CSF、0.23U/ml、0.3U/ml 0.46U/ml Epo对CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM所起的作用.20%MCBS可直接刺激CFU-E形成.如培养体系内无BpA(爆式集落活性)存在时,形成 BFU-E、CFU-GEMM较少或几乎为零,当含BpA时,可形成一定量的BFU-E、CFU-GEMM集落.结论:CBS(MCBS)内含有能刺激CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-GEMM的生长活性;同血型或不同血型4人份以上混合,其刺激活性高,且稳定.具有良好的应用前景.     

人骨髓和脾脏基质成纤维细胞的辐射敏感性

照射后的造血改变首先取决于造血细胞自身的损伤。但有根据认为,照射能引起作用于造血器官建造特殊环境组织的改变。负责造血微环境的不是造血细胞,而是基质组织,其中包括造血器官基质成纤维细胞。本文报道了一种基质细胞即成集落性基质祖细胞(CUF-f)辐射敏感性的研究结果。实验用体外单层培养法,借此可定最测定CFU-f在骨髓和脾脏中的含量。前曾报道,原发性淋巴肉芽肿病病人骨髓CFU-f比肺结核病人的有较高辐射耐受性。穿刺淋巴肉芽肿病人胸骨或髂骨嵴取骨髓。脾脏小块取自这种病人(7例)切脾时。打碎脾脏断片,     

照射后造血基质祖细胞的再生

造血器官基质有较高的抗辐射性。大剂量(20Gy)照后也能支持造血细胞生长。     

造血干细胞辐射敏感性的比较

本文研究了在体内外照射条件下小鼠骨髓多向性造血干细胞(CFU-S)和粒系定向干细胞(CFU-C)的辐射敏感性。它们的D(?)值分别为103.4拉德和173.7拉德,反映了CFU-S和CFU-C是两类在性质上不全相同的干细胞群。在目前尚未建立起除啮齿类动物以外的多向性造血干细胞测定技术的情况下,我们应用体外琼脂培养技术,比较了在体外照射条件下狗与小鼠骨髓CFU-C的辐射敏感性,它们的D_0值分别为58.6拉德和190.2拉德,反映了两者在辐射敏感性上存在着明显的差异,为阐明不同种属动物的不同辐射耐受性提供了一个根据。联系到AET具有降低造血干细胞辐射敏感性以及提高动物的辐射耐受性的事实,进一步论证了在造血型放射病的发生和发展中,造血干细胞的损伤和修复是起着重要作用的。     

小鼠骨髓粒系祖细胞所成集落的形态学及其辐射敏感性

本文通过琼脂培养小鼠骨髓GM-CFC,经过原位染色,在高倍显微镜下动态观察了集落的细胞形态学。按集落组成的细胞类型可把细胞集落分成5种基本形态。它们发展的相互关系是,随着培养时间的延长,开始为90%的致密型集落,以后急剧下降,而同时其它类型的集落很快增多,其中尤以巨噬细胞增加明显。不同类型细胞集落的辐射敏感性也有很大差异,粒系致密型的D_0值为60.2 rad,巨噬系分散型集落最不敏感,其D_0值为226.6rad。     

小鼠骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤的影响

目的：探讨小鼠骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC）同种异体移植对接受全身大剂量辐射小鼠造血修复的影响。方法：在体外对小鼠骨髓基质细胞进行培养、扩增,并将第三代细胞通过尾静脉移植到同种接受全身大剂量射线照射的小鼠,测定移植后不同时期小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）值,观测各组脾集落形成单位（colony forming unit,CFU-S）,探讨同种异体骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤修复的影响。结果：经骨髓基质细胞移植的小鼠,其WBC、RBC、PLT、HGB在移植后15-20 d较对照组明显增高（WBC、PLT、HGB：P〈0.01;RBC：P〈0.05）,移植组CFU-S明显高于对照组（P〈0.01）。结论：同种异体小鼠骨髓基质细胞移植,能促进小鼠造血干细胞在脾脏定居,增强造血干细胞形成集落的能力,并能显著提高外周血细胞数量,促进损伤后早期造血功能重建。     

胎肝及骨髓来源造血干/祖细胞电离辐射敏感性的比较研究

目的研究电离辐射对胎肝与骨髓来源造血干/祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cells, HSPCs)的影响差异。方法取14.5 d小鼠胎肝及8周龄小鼠骨髓, 分选c-Kit+细胞体外接受60Co单次5、10 Gy照射, 检测HSPCs中细胞凋亡、线粒体活性氧(ROS)水平、集落形成能力、DNA损伤情况。将12只CD45.1背景的C57BL/6J小鼠按随机数表法分成骨髓组(BM)和胎肝组(FL), 60Co全身照射, 第1次4.5 Gy照射, 间隔30 min后再进行第2次5 Gy剂量照射, 6 h后进行移植, 12周后检测嵌合率、谱系分化以及细胞周期。分选胎肝及骨髓的c-Kit+细胞检测线粒体压力。结果与骨髓HSPCs相比, 照射后胎肝HSPCs的细胞凋亡比例显著升高(t=16.21、12.27, P<0.05), ROS水平显著增加(t=68.72、18.89, P<0.05);集落形成能力显著降低, 在5 Gy时胎肝HSPCs成集落能力显著降低, 照射剂量为10 Gy时完全不能形成集落(t=12.41、15.67、9.46, P...