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1.
目的 探讨抗胃泌素释放肽前体(ProGRP)(31-98)单克隆抗体D-D3的131I标记方法 及其在健康昆明小鼠体内的生物学分布规律与特点.方法 采用氯胺-T法用131I标记单克隆抗体D-D3,利用纸层析法测定其标记率、放化纯度和稳定性.取健康昆明小鼠50只,随机分为10组,每组5只,自昆明小鼠尾静脉注射131I-D...  相似文献   

2.
目的 制备靶向肺腺癌细胞表面碳水化合物相关抗原(carbohydrate antigen 215,CA215)的核素分子探针131I-RP215单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),鉴定其理化性质并探讨其在荷瘤裸鼠模型中的体内分布情况和放射免疫显像特点.方法 采用氯胺T法对McAb RP215进行131I标记,Sephadex G25M柱纯化标记抗体,并鉴定其理化特性,观察该抗体标记物在荷A549裸鼠模型中的生物分布及放射免疫显像情况.结果 131I-RP215 McAb标记率为(91.03 ±2.36)%,纯化后的放化纯度为(93.15±1.40)%,比活度(3.37±0.42) MBq/μg;具有较好的稳定性及免疫活性.荷瘤裸鼠体内生物分布及SPECT显像结果显示,131 I-RP215 McAb能够在肿瘤组织中选择性浓聚,131I-RP215 McAb作用24h时,肿瘤/肌肉比达最高,且瘤体显影最清晰.结论 成功制备了特性理想的131I-RP215 McAb分子探针,在荷人肺腺癌裸鼠模型中有较好的显像效果.  相似文献   

3.
目的:通过对已构建的肺腺癌相关人源单链抗体库进行筛选,得到抗过氧化物酶Peroxiredoxin Ⅰ (Prx Ⅰ)肺腺癌单链抗体,评价抗体在动物模型体内分布及靶向显像作用。方法:PCR法检测大肠杆菌TG1中单链抗体single-chain variable fragment (scFv) 基因插入率;凝胶电泳鉴定Sfi Ⅰ和Not Ⅰ双酶切质粒结果;以肺腺癌细胞株A549和在肺癌中高表达的抗氧化蛋白Prx Ⅰ为靶抗原,对抗体库进行富集筛选。阳性克隆用IPTG诱导表达并检测。放射性核素131I标记纯化抗体,进行荷瘤裸鼠体内分布及SPECT放射免疫显像研究。结果:scFv基因插入率为77%(23/30),双酶切鉴定证实目的条带。通过亲和筛选,肺腺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮是第1轮的180倍。选取10个克隆经ELISA法检测,其中6个克隆与A549细胞呈阳性反应,阳性率60%(6/10)。SDS-PAGE及ELISA检测证实得到人源抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体。竞争ELISA显示抗〖JP3〗体能有效结合A549细胞。核素标记抗体的放射化学纯度为(95.6±3.7)%,比活度为(2.8±0.2) TBq/g体内分布研究显示抗体与肺腺癌组织有效结合。尾静脉注射48 h后,瘤/血和瘤/肌肉放射性比值均达最大值,分别为(4.06±0.13)和(5.17±0.97) %ID/g。SPECT示抗体与肿瘤有效结合。抗体注射后48 h的T/NT值(3.73±0.20)明显高于12 h(1.26±0.15)、24 h(2.18±0.16)和72 h(2.85±0.18)(均P<0.01)。结论:利用肺腺癌细胞A549和Prx Ⅰ为靶抗原,从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗Prx Ⅰ肺腺癌单链抗体。在体内抗体能与肺腺癌组织特异性结合。  相似文献   

4.
目的 探索制备99mTc标记载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒(99mTc-5-FU-Ab-NPs)的方法,并观察99mTc-5-FU-Ab-NPs胃癌移植瘤模型体内的分布情况.方法 用改进的Schwarz方法对载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒进行99mTc标记,经SephadexG250柱分离纯化,用纸层析法测定标记率与放化纯度;ELISA法和免疫组化法测定标记物的免疫活性;经荷人胃癌鼠静脉注射99mTc-Ab-5-FU-NPs(实验组)及99mTc标记鼠源性多克隆IgG纳米粒(对照组),并于2、6 h行放射免疫ECT显像,用感兴趣区(ROI)技术获得实验组和对照组荷人胃癌鼠全身和肿瘤放射性计数及肿瘤与对侧正常组织(T/NT)的放射性比值;24 h显像后处死鼠,测定体内放射性分布,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及T/NT比值.高效液相色谱法检测两组鼠肿瘤组织和血液中5-FU的浓度.结果 制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs标记率为90%~95%,抗体的活性在标记前后无明显下降;荷人胃癌鼠放射免疫显像结果提示静脉注射99mTc-5-FU-Ab-NPs 2 h后肿瘤已显影,随时间延长到6 h更清晰,2和6 h肿瘤组织ID%/g均显著高于对照组;6 h时实验组肿瘤组织ID%/g和肿瘤与血液的放射性比值较2 h时升高;同时,实验组肿瘤组织中5-FU浓度随着时间延长呈持续升高且与对照组5-FU浓度相比有显著性差别.结论 本研究制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs能较好地满足放射免疫显像的要求;抗VEGF单克隆抗体的免疫导向作用可靠,注射后6 h,99mTc-5-FU-Ab-NPs在肿瘤组织中有相对较高的特异性浓聚.  相似文献   

5.
通过2 - 巯基乙醇直接还原法将抗人膀胱癌单克隆抗体 B D I- 1 与核素99m Tc 进行标记, 制备99 m Tc - B D I- 1 . 优化条件后进行标记并进行一系列检测. 结果: 标记率为72 % , 经 Sephadex 柱纯化后标记抗体的放化纯度高于95 % ; 标记抗体的免疫活性分数为87 % , 与 E- J细胞的结合率为90 % ; 无毒、无菌、无热原. 结果表明: 2 - 巯基乙醇直接还原法将抗人膀胱癌单克隆抗体 B D I- 1 与核素99 m Tc 进行标记为进一步进行膀胱癌的放射免疫显像诊断奠定了基础.  相似文献   

6.
Background Recent studies have shown the LyP-1 peptide can home to either tumor lymphatics or the tumor cells and be internalized by targeted cells.This study aimed to investigate the possibility of us...  相似文献   

7.
目的研究叶酸受体肿瘤显像剂99mTc-肼基烟酰胺基酰肼基-叶酸(99mTc-HYNIC-叶酸)的合成、生物分布及其动物显像。方法以叶酸为原料经过多步反应合成叶酸衍生物HYNIC-叶酸,以该衍生物为配体,并以三(羟甲基)甲基甘氨酸和三苯甲基膦三磺酸钠为共配体进行99mTc标记,对其放化纯度、稳定性进行分析,对正常小鼠及荷瘤小鼠的体内生物分布和荷瘤小鼠的γ相机显像进行研究。结果配体HYNIC-叶酸的结构经核磁共振氢谱和质谱进行确认,经99mTc标记后,放化纯度为96%,体外稳定性好。在荷瘤小鼠中的生物分布和显像结果表明,99mTc-HYNIC-叶酸在肿瘤中有较高的浓集,单位质量摄取率αm为5·620±0·753。除在肾中摄取较高(单位质量摄取率为41·959±6·759)外,其他非靶组织中摄取均较低。结论99mTc-HYNIC-叶酸有望成为性能良好的叶酸受体肿瘤显像剂。  相似文献   

8.
目的:microRNA-155(miR-155)显著高表达于乳腺癌、肺癌、肝癌等多种恶性肿瘤,本研究旨在构建靶向miR-155的放射性示踪探针对乳腺肿瘤的活体显像。方法:体外化学合成靶向miR-155的反义互补寡核苷酸探针(AMO-155),并对其进行5′端乙酰基修饰及2′ 甲氧基修饰,进而与双功能螯合剂NHS MAG3偶联后,在氯化亚锡的还原作用下对其标记 99mTc,评价血清稳定性,并对乳腺癌荷瘤裸鼠进行活体显像,对比反义、无义及阻断组的显像差异,并通过实时定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)鉴定肿瘤的miR-155水平。结果:99mTc-AMO-155的制备标记率达97%(n=5),放射化学纯度大于98%(n=5),放射比活度约为3.75 GBq/μg。通过对比无义对照组及阻断组,99mTc-AMO-155能够在活体水平特异性地显示miR-155高表达的恶性肿瘤。此外,针对miR-155不同表达水平的肿瘤,99mTc-AMO-155亦可在活体水平反映其表达差异。结论:经化学修饰的99mTc标记的AMO-155探针具有良好的血清稳定性及活体肿瘤靶向识别作用,为肿瘤显像提供了潜在的新型探针。  相似文献   

9.
目的探讨99mTc标记特异性靶向肺癌小分子多肽的标记方法,观察99mTc-多肽在正常动物体内的动力学特性及体内生物学
分布特点。方法采用NHS-MAG3双功能螯合法进行99mTc标记小分子多肽(cNGQGEQc),纸层析法测定标记率,通过体外稳定
性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验评价99mTc-多肽的放化特性,测定标记物静脉注射后在新西兰大白兔不同时相
血液放射性清除曲线;分别测定经尾静脉注射7.4 MBq标记物后的小鼠体内各脏器质量数和放射性计数,计算各脏器每克组织
百分注射剂量率(%ID/g);经耳缘静脉注射37 MBq标记物,应用SPECT显像法观察标记物在大白兔体内的放射性动态分布
变化。结果99mTc 标记多肽的标记率>90%,室温下和血清中37 ℃下放置12 h 放化纯度分别为91%和85%;半胱氨酸置换率
<7%;血清蛋白结合率<5%。99mTc标记多肽在兔体内血放射性清除迅速;在小鼠体内清除较快,主要通过肾脏排泄,其余脏器内
放射性均较低(P<0.05)。结论99mTc标记基于肺癌特异性靶向多肽的标记方法简单,标记率高,具有良好的体内外稳定性,具有
比较理想的体内分布动力学特性。
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10.
目的 确立131I标记胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂exendin-4多肽的最佳标记条件,并研究131I-exendin-4在正常小鼠体内的生物分布。 方法 131I标记exendin-4多肽采取氯胺-T方法标记,利用纸层析法计算标记产物的标记率及放化纯度,测定131I-exendin-4的体外稳定性及脂水分配系数,研究131I-exendin-4在注射后的1、3、6、12和24 h时在正常小鼠体内的分布特征,对经尾静脉注入131I-exendin-4的小鼠进行SPECT多时相显像,并观察小鼠体内放射性分布变化。 结果 exendin-4的131I标记率在85%以上,放化纯度大于97%,131I-exendin-4在人血清和生理盐水中仍保持较好的体外稳定性,131I-exendin-4的脂水分配系数为-1.002。正常小鼠静脉注入131I-exendin-4后,双肾的放射性分布明显较其他组织器官的放射性增高,1 h和12 h肾脏的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)分别为(51.54±13.51)%ID/g和(11.61±0.94)%ID/g,胃、肺的摄取相对较高,3 h后除肾脏外的其他各脏器器官的放射性均较快下降。正常小鼠静注131I-exendin-4后的SPECT多时相显像示随着时间的延长,双肾及膀胱的放射性浓聚影增加,而其他器官未见明显放射性浓聚影分布。 结论 131I标记exendin-4的标记率较高(大于85%),体外稳定性良好,131I-exendin-4为水溶性物质,可通过泌尿系统排泄,体外分布特性比较理想。   相似文献   

11.
NHS-MAG3为螯合剂的99mTc-寡核苷酸标记特性   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 探讨以NHS-MAG,作为螯合剂的^99mTc-寡核苷酸(^99mTc-ON)的标记特性。方法将NHS-MAG,与长度为15个碱基的c-myc mRNA的反义(ASON)、正义(SON)和无义寡核苷酸(MON)偶联,进行^99mTc标记,Sephadex G25 柱层析分离纯化,评价^99mTc-ON的标记率、放化纯和稳定性;将ON-MAG,偶联物置-20℃贮存15 d、1月、2月后进行^99mTc标记,观察标记率的变化,评价ON-MAG3的稳定性;用三氯乙酸沉淀法测定^99mTc-ON的血浆蛋白结合率。结果 ^99mTc-ASON、^99mTc-SON和^99mTc-MON的标记率分别为68.41%、66.24%和69.38%,纯化后放化纯分别为96.98%、95.34%和94.62%。三者在室温和血清中均较稳定。ON-MAG3在-20℃保存2月后,标记率未见明显下降。三种^99mTc-ON的血浆蛋白结合率均小于13%。结论以NHS-MAG3作为螯合剂的^99mTc-ON具备优良的标记特性,标记率、放化纯较高,稳定性好,血浆蛋白结合率低,是一种有临床应用潜力的放射性标记药物。  相似文献   

12.
目的 制备99mTc-CL3-Bt并对其质量控制、生物分布进行研究。方法 将单抗CL3生物素(Bt)化,以2-巯基乙醇(2-ME)还原后以直接法进行99mTc 标记。以细胞结合实验测定并比较99mTc-CL3-Bt 和99mTc-CL3的免疫活性;然后将两种标记物注入荷大肠癌裸鼠模型,6 h后处死裸鼠,计算并比较99mTc-CL3-Bt 和99mTc-CL3在体内的每克组织摄取分数(ID%/g)值和肿瘤ID%/g/其它组织ID%/g(T/NT)比值。结果99mTc-CL3-Bt和99mTc-CL3的细胞结合率分别为90%、94%;在瘤体的ID%/g值分别为(6.3±1.1)、(6.7±0.9),二者无显著差异(t=0.6293, P>0.05);瘤/血比值分别为(0.70±0.24)、(0.80±0.12),二者亦无显著差异(t=0.8333, P>0.05)。结论 99mTc-CL3-Bt免疫活性高,能特异性被肿瘤摄取,可广泛用于临床放射免疫显像研究。  相似文献   

13.
目的 探讨碘131(131I)联合锝亚甲基二膦酸盐注射液(99Tc-MD)治疗Graves眼病(GO)的临床效果.方法 回顾性分析2011年1月至2016年2月在海南省人民医院治疗的270例Graves眼病患者的临床资料,根据治疗方式将患者分为观察组(143例)和对照组(127例).观察组采用131I联合99Tc-MD治疗,对照组仅使用131I治疗,两组患者均规范治疗12个月,比较两组患者的甲亢及突眼的临床疗效.结果 观察组和对照组患者治疗甲亢总有效率分别为95.10%和86.62%,差异无统计学意义(P>0.05);观察组和对照组患者治疗突眼总有效率分别为70.63%和41.73%,差异有统计学意义(P<0.05),其中Ⅰ度有效率分别为92.86%和65.79%,Ⅱ度有效率分别为71.83%和34.92%,差异均有统计学意义(P<0.05),Ⅲ度有效率分别为36.67%和23.08%,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组患者的突眼度、甲状腺容积分别为(17.78±2.42)mm、(25.79±3.23)g,明显小于对照组患者的(18.85±2.73)mm、(27.56±3.51)g,差异均有统计学意义(P<0.01).两组患者均未现严重不良反应.结论 131I联合99Tc-MD治疗Graves 眼病,能提高患者的突眼治疗效果,改善患者的临床症状,值得临床参考.  相似文献   

14.
以肺鳞癌细胞为免疫原制备出抗肺癌单抗SM-1。免疫组织化学染色证明,其与各型肺癌均有较强结合力,而同其他组织肿瘤及正常组织则无明显突又反应。用两种蛋白水解酶将单抗高效消化成具有免疫活性的片段并经动物实验证明,完整抗体及片段均能特异性地分布于肿瘤组织并能使裸鼠移植瘤清晰地显象。片段与完整抗体相比,具有分布快、非特异性本底低及显象时间早的优点,显家质量也优于完整抗体。单抗用直接法标记99mT。试用于18例肺癌患者,有13例发现肿瘤病灶,阳性率为73%。  相似文献   

15.
目的制备放射性药物99Tcm-annexinV,评估其在早期预测肺癌化疗效果中的作用。方法通过毕赤酵母重组表达、硫酸铵沉淀和分子筛层析纯化得到annexinV,采用氯化亚锡还原法在annexinV的氨基端标记放射性核素99Tcm,经脱盐柱纯化获得标记产物。采用薄层层析测定99Tcm-annexinV的标记率和放射性化学纯度,外露磷脂酰丝氨酸的红细胞测定99Tcm-annexinV的生物活性。通过在615小鼠腋部皮下接种LA795细胞和组织插块法获得荷肺癌小鼠模型,经腹腔注射环磷酰胺治疗肺癌后6、12、24和48h测定99Tcm-annexinV在小鼠体内的分布情况。结果毕赤酵母工程菌株分泌表达annexinV,经硫酸铵分级沉淀和分子筛层析纯化后annexinV得以有效回收。室温下30min完成anne-xinV的99Tcm标记,标记率为50.2%。99Tcm-annexinV放射性化学纯度为93.9%,其生物活性保存良好。生物分布实验表明,99Tcm-annexinV通过肾脏排泄。615荷肺癌小鼠模型经过环磷酰胺化疗后48h,99Tcm-annexinV在肿瘤组织的摄取达到最高,肿瘤/肌肉放射性摄取率之比为6.34,肿瘤/血液放射性摄取率之比为4.09。结论制备了毕赤酵母来源的99Tcm-annexinV,有可能应用于早期预测肺癌化疗效果。  相似文献   

16.
为研究99m锝标记的D 二聚体 (D dimer,DD)单抗在静脉血栓和动脉血栓靶向定位诊断中的应用 ,采用外科手术的方法复制家兔股静脉和股动脉血栓模型 ,将99m锝标记的抗DD单抗注入动物血管内 ,以放射免疫显像检测技术观察放射性核素在血流和血栓部位的分布。结果 :血栓形成术后 2d ,血栓处放射性99m锝的分布较健侧和正常兔明显增多 ,而单纯钳夹血管未能引起局部放射性物质的堆积。注射99m锝标记的单抗后 ,动物无明显不良反应 ,主要器官无明显病理学改变。研究结果提示 :99m锝标记抗DD单抗可对实验性股静脉血栓和股动脉血栓作出快速、准确的定位诊断  相似文献   

17.
应用亲和层析法提纯我室自制的抗胰癌单克隆抗体4C_6,经固相氧化法标记~(131)I,腹腔注入荷人胰癌裸鼠移植瘤模型中。经体外扫描,观察单抗4C_6在不同时间的定位能力及其生物学分布和代谢情况。结果表明:投药后48h~168h,随非瘤组织本底的消减,肿瘤部位有明显的放射性聚集,与对照组全身均匀分布不同;显像最佳时间为投药后120h,此时,T/NT比值除血、甲状腺外,均大于3,与对照组均呈非常显著差异(P<0.01);每g瘤组织的放射性百分比,于投药后120h达6.87%ID/g。结果说明单抗4C_6对胰腺癌具有一定的定位能力,可望用于胰腺癌的临床放免显像定位诊断。  相似文献   

18.
目的:研制一种新型亲炎症或感染的99mTc标记谷胱甘肽(GSH)。报道其制备、质控及药代动力学。方法:用氯化亚锡作还原剂,制备冷冻干燥99mTc标记GSH一步法药盒,用纸层析法鉴定99mTc-GSH标记率及标记稳定性,测定标记产物99mtc-GSH的理化性质、生物学性质,初步试用于临床。结果:室温下该药盒与99mTcO4混合30分钟后,得标记率大于99%的99mTc-GSH,标记方法简便;标记后24小时测定其标记率仍大于98%,标记产物稳定性好;药盒放置6月后,标记率大于99%。99mTc-CSH生物分布显示血中清除快,主要经肾清除,其余器官浓聚少。松节油和金黄色葡萄球菌实验炎症模型显像,示踪剂定位明确,T/NT值高(3h为4.65)。药盒的各项技术指标符合药典体内诊断试剂的规定。结论:研制的99mTc-GSH药盒适合于临床探测炎症与感染,特别适合于我国国情。  相似文献   

19.
目的 探明碘化氟维司群对人乳腺癌细胞的生长抑制作用及对裸鼠重要脏器的影响.方法 明确碘化氟维司群对MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞杀伤作用的不同;建立MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,采用不同方式给药,观察肿瘤、肝肾等重要脏器的情况.结果 MTT实验表明碘化氟维司群对MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞具有相似的细胞毒作用,但前者稍强于后者,一过性接触实验表明碘化氟维司群能够与MCF-7细胞结合继续发挥肿瘤抑制效应,而在MDA-MB-231细胞则不然(P<0.05);经尾静脉注射碘化氟维司群后,肿瘤部位有放射性浓聚,占到注射总量的(4.33±0.28)%,瘤体先缩小后增大,血液中的放射性占到注射总量的(20.76±2.54)%,肝肾等脏器也有放射性分布,其分布符合雌激素受体分布状况;瘤体局部注射显示强大的肿瘤杀伤作用,放射性分布基本局限于瘤体区域.结论 碘化氟维司群对乳腺癌MCF-7细胞有良好的抑制作用,是放疗和内分泌治疗作用的叠加,且对裸鼠的一般状况及重要脏器的影响是可控的.  相似文献   

20.
目的 评价99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合应用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像效果.方法 建立荷人肺腺癌裸鼠动物模型;采用直接法99Tcm标记抗EGFR和CD44的单克隆抗体,运用柱层析法对标记抗体分离、纯化,并对标记、纯化后的抗体特性进行鉴定;利用99Tcm-EGFR-McAb及99Tcm-CD44-McAb单独及联合进行倚人肺腺癌裸鼠显像及体内分布研究.结果 99Tcm对EGFR-McAb和CD44-McAb的标记率分别为(91.5±3.8)%、(92.3±4.1)%,标记抗体比活度分别为(2.8±0.3)MBq/μl、(2.9±0.5)MBq/μl,放射化学纯度分别为(96.5±2.8)%、(96.2±3.1)%.放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对2种标记抗体均有较高的摄取,2种标记抗体联合使用肿瘤部位的放射性浓聚明显高于2种标记抗体单独使用,通过ROI技术测得T/NT值分别为(5.58±0.46)、(2.72±0.22)、(2.30±0.18).标记抗体的体内分布规律与显像结果一致.结论 99Tcm-EGFR-McAb、99Tcm-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的靶/非靶比值,2种标记抗体的联合应用,可在一定程度上提高靶/非靶比值,优于一种标记抗体的单独使用.  相似文献   

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