石榴皮多酚对人前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨石榴皮多酚对前列腺癌PC-3细胞株增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法测定不同质量浓度组石榴皮多酚作用不同时间对PC-3细胞生长的影响,应用流式细胞仪检测石榴皮多酚作用72h后PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况。结果石榴皮多酚明显抑制PC-3细胞的生长,抑制效应呈时间依赖型和浓度依赖型。流式细胞仪检测结果显示,石榴皮多酚可将PC-3细胞阻滞于G1期,并诱导PC-3细胞凋亡。结论石榴皮多酚在体外对前列腺癌PC-3细胞株有明显的生长抑制和诱导凋亡的作用。     

姜黄素和顺铂联用对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3作用

目的:研究姜黄素和顺铂联用抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3增殖的影响.方法:MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化及检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构变化.结果:姜黄素能显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的体外生长,呈时间与剂量依赖性;细胞周期主要阻滞于G2/M期,部分细胞出现凋亡形态学改变.顺铂和不同浓度姜黄素联合可显著抑制PC-3细胞增殖.姜黄素和顺铂在一定程度上均可诱导PC-3细胞凋亡,两种药物联用后,诱导细胞凋亡作用增强.结论:姜黄素可与顺铂协同抑制人前列腺癌细胞株PC-3的增殖.     

枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对PC-3细胞周期和凋亡的影响,TUNEL法观察PC-3细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果LBP可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,并能诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率分别为8.5%、17.5%、29.5%、37.5%和41.5%,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);同时PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白比值显著下降,呈明显的剂量-效应关系。结论LBP对人前列腺癌PC-3细胞DNA具有损伤作用,能诱导PC-3细胞的凋亡,调节其相关基因的表达。     

JAK2/STAT3信号转导通路在岩大戟内酯B诱导的前列腺癌细胞PC-3凋亡中的作用

目的探讨岩大戟内酯B诱导的人前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡以及JAK2/STAT3信号转导通路在此过程中的作用。方法不同浓度的岩大戟内酯B处理人前列腺癌细胞系PC-3细胞0、24、48、72 h后,采用台盼蓝染色法检测PC-3细胞存活率;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测PC-3细胞凋亡率;Western blot分析检测岩大戟内酯B作用不同时间后JAK2/STAT3信号转导通路的表达;预先用不同浓度的JSI-124(选择性STAT3途径抑制剂)处理PC-3细胞60 min,观察岩大戟内酯B作用不同时间后PC-3细胞的凋亡情况。结果岩大戟内酯B能够诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡,降低磷酸化-JAK2/STAT3的表达,JSI-124可以提高岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。结论 JAK2/STAT3信号转导通路参与了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡过程。JSI-124通过特异性地抑制STAT3活性提高了岩大戟内酯B诱导的PC-3细胞凋亡率。     

青蒿琥酯对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用

目的:观察青蒿琥酯对前列腺癌细胞株PC-3的体外作用,并探讨其可能作用机制。方法:应用光镜形态学、MTT法、流式细胞仪观察不同浓度青蒿琥酯在体外对前列腺癌细胞系PC-3的作用和对细胞DNA含量的影响。结果:青蒿琥酯对前列腺癌细胞系PC-3有明显的生长抑制作用,并能诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖周期。结论:青蒿琥酯对前列腺癌PC-3细胞有明显生长抑制和凋亡诱导作用,提示青蒿琥酯有用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性。     

腺病毒载体介导shRNA抑制生存素对PC-3细胞的影响

目的 运用RNA干扰(RNAi)技术抑制雄激素非依赖前列腺癌细胞株(PC-3)中生存素的表达,检测生存素抑制对PC-3细胞的影响.方法 构建负载生存素短发夹RNA(shRNA)且携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒,体外转染PC-3细胞.MTT法监测细胞增殖活性,流式细胞术检测凋亡率,RT-PCR和Western blot分别对生存素mRNA及其蛋白表达进行测定.结果 负载生存素shRNA重组腺病毒构建成功;转染96h后,PC-3细胞增殖受到抑制,并可诱导出PC-3细胞凋亡,凋亡率达到(14.43±0.57)%,生存素mRNA及其蛋白的表达强度分别降低了(72.23±1.11)%和(71.75±2.64)%,与阴性对照组及空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 腺病毒载体介导的生存素shRNA可有效地抑制PC-3细胞中生存素的表达,RNAi结合腺病毒载体系统抑制生存素表达有望成为治疗雄激素非依赖前列腺癌的有效方式之一.     

油菜花粉脂溶性提取物对人前列腺癌细胞PC-3的体外生长抑制研究

目的探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3的杀伤效应。方法光镜观察用药前后PC-3细胞形态,透射电镜观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BPE对PC-3细胞凋亡的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bax/bcl-2基因表达。结果 BPE对PC-3细胞增殖有抑制作用,PC-3细胞随着BPE浓度的增高其活细胞数下降,呈负相关。透射电镜下可见:核结构破坏,染色质稀疏,有些凝聚成团。随着时间的延长,细胞凋亡率上升,BPE与多西他赛能一同促进PC-3细胞发生凋亡。BPE的作用效应不是通过bax/bcl-2基因。结论 BPE可抑制人前列腺癌细胞PC-3的增殖,诱导细胞的凋亡。     

虎耳草抗前列腺癌生物活性部位筛选研究

目的筛选虎耳草抗前列腺癌生物活性部位。方法采用MTT法研究虎耳草不同极性提取物对PC-3细胞的增殖抑制作用,运用流式细胞法检测受试药对PC-3细胞周期分布的影响以及凋亡情况,应用电镜观察PC-3细胞凋亡的形态学特征,探讨抗前列腺癌作用机制。结果虎耳草不同提取部位对PC-3细胞的增殖均有一定抑制作用,随着药物浓度和作用时间的增加而增强。结论虎耳草乙醇提取后乙酸乙酯萃取部位具有很好的抗前列腺癌活性。     

皂角刺皂苷对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究皂角刺皂苷(Saponins of spina gleditsiae,SSG)对前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:实验分成不同浓度的给药处理组(SSG)、未加药的阴性对照组(NP)、以培养液为参照的空白对照组(CP)。对数生长期PC-3细胞用EDTA-胰蛋白酶消化后,接种于96孔培养板。贴壁后分别加入不同浓度的SSG溶液,每孔100μL,每组设6复孔。体外培养前列腺癌PC-3细胞给药处理48h后,MTT比色法检测前列腺癌PC-3细胞抑制率,流式细胞仪检测SSG对PC-3细胞凋亡率的影响。结果:与NP相比,SSG可显著抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖(P<0.05);SSG50mg/L组、100mg/L组、200mg/L组的细胞凋亡率分别为6.91%,10.52%和16.50%,3组的细胞凋亡率均高于0mg/L组(P<0.05)。结论:SSG对前列腺癌PC-3细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。     

基于ROS/PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨玫瑰花甲醇提取物对前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

目的：探讨玫瑰花甲醇提取物（RE）对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响及潜在作用机制。方法：采用CCK8法检测不同浓度RE对PC-3细胞增殖的影响;采用Hoechst染色法和Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;DCFH-DA检测细胞ROS水平;Western blot法检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、Cyt-C、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的蛋白表达。结果：RE呈浓度依赖性抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,24 h和48 h后的IC₅₀值分别为31.30 mg·mL^-1和16.76 mg·mL^-1;RE能显著诱导PC-3细胞凋亡（P<0.05,P<0.01）,且呈现浓度依赖性;RE可显著提高PC-3细胞ROS水平（P<0.05,P<0.01）,且具有浓度依赖性;RE能显著上调PC-3细胞Bax、cleaved caspase-3、Cyt-C的蛋白表达及Bax/Bcl-2的比值（P<0.05,P<0.01）,显著下调Bcl-2、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的蛋白表达（P<0.05,P<0.01）,以上均呈现浓度依赖性。结论：本研究表明RE在体外有明显抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖作用,并可能通过调控ROS/PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导其凋亡,研究结果可为玫瑰花及其组方临床治疗前列腺癌提供实验依据。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的凋亡作用

目的研究葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的影响。方法将低、中、高剂量(分别为16、32和64μl/ml)的葡萄汁加入体外培养的人前列腺癌PC-3细胞,检测葡萄汁对PC-3细胞的毒性作用,用单细胞凝胶电泳测其对DNA损伤作用,流式细胞术测细胞凋亡,免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达。结果3种剂量的葡萄汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖;DNA迁移长度与彗星细胞拖尾率逐渐增高,拖尾细胞率最高为71%;能诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,细胞凋亡率分别是14.5%3、2.1%和40.5%,促凋亡基因Bax表达率分别是36.8%、50.4%和64.8%;抑凋亡基因Bcl-2表达率依次为39.1%、25.0%和12.4%。结论葡萄汁可抑制人前列腺癌PC-3细胞增长,诱导其细胞凋亡,能上调促凋亡基因Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。     

喜树碱(CPT)诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡及其机制的研究

目的测定不同浓度的喜树碱(CPT)对前列腺癌PC-3细胞的促凋亡作用,并进一步探讨其促凋亡机制。方法人前列腺癌PC-3细胞,加入不同浓度的CPT(10~100μmol/L),继续培养24 h。采用形态学观察及MTT方法检测细胞增殖,流式细胞仪测细胞早期凋亡率。Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3和PARP的表达。结果形态学观察及MTT试验显示,不同浓度的CPT可导致PC-3细胞形态改变,并对其生长有明显抑制作用,具有剂量依赖性,其IC50为23.25μmol/L;细胞凋亡检测表明不同浓度的CPT可使早期凋亡比率增加。Western blot结果显示,不同浓度CPT可使PC-3细胞Bcl-2蛋白表达降低,而Bax和Cleaved Caspase-3蛋白,89-k Da PRPP蛋白表达增加且呈剂量依赖性。结论 CPT可以诱导PC-3细胞凋亡,其作用机制可能为激活Caspase依赖途径,并活化其作用底物PARP来实现。     

淫羊藿苷通过Notch1/Jagged1信号通路抑制人前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷(icariin, ICA)对人前列腺癌细胞(prostate cancer cells, PC-3细胞)的侵袭、迁移和增殖的影响及作用机制。方法:运用不同浓度的ICA对PC-3细胞进行24,36,48 h的预处理后,采用MTT法筛选合适的受试浓度;采用流式细胞术检测ICA对PC-3细胞周期的影响;采用划痕实验和Transwell实验分别检测ICA对PC-3细胞的迁移能力和侵袭能力的影响;采用RT-PCR和Western blot分别检测ICA对PC-3细胞Notch1、Jagged1、Hes1、Hey1 mRNA及蛋白表达的调控作用。结果:不同浓度的ICA处理PC-3细胞24,36,48 h后,对PC-3细胞的增殖有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;流式细胞术检测结果表明ICA主要将PC-3阻滞在G0/G1期;划痕实验和Transwell实验结果显示ICA对PC-3细胞的迁移和侵袭能力有明显抑制作用;1×10^-4 mol·L^-1的ICA作用于PC-3细胞48 h后,对Notch1、Jagged1、Hes...     

PIM-1基因沉默对前列腺癌细胞生长抑制作用的研究

目的:探讨RNA干扰(RNAi)沉默PIM-1基因表达对前列腺癌细胞体外生长的影响.方法:将RNAi重组质粒(pPIM1-shRNA-3)经脂质体介导转染前列腺癌PC-3细胞,用G418筛选稳定转染、PIM-1基因沉默的PC-3细胞.用空质粒载体(pRNAT-U6.1/Neo)稳定转染的PC-3细胞和正常培养的PC-3细胞作为对照,进行体外研究.利用细胞计数法分别检测3组PC-3细胞的增殖能力.利用流式细胞技术分别检测3组PC-3细胞的细胞周期及凋亡情况.结果:与两对照组PC-3细胞相比,PIM-1基因沉默组的PC-3细胞在培养48、72和96 h的细胞计数显著减少(P＜0.01),细胞周期中G1期细胞的比例显著升高,而S期细胞的比例显著降低(P＜0.01),发生早期凋亡的细胞比例明显升高(P＜0.01).结论:PIM-1基因沉默可以使得PC-3细胞的细胞周期进程受阻,抑制细胞增殖,并诱发细胞凋亡.PIM-1可以作为前列腺癌基因治疗的有效靶点,具有潜在的临床应用价值.     

20(S)-人参皂苷Rg3对前列腺癌PC-3M细胞的诱导凋亡作用

目的研究20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)对人前列腺癌PC-3M细胞诱导凋亡的作用,并探讨其可能机制。方法采用MTT法观察SPG-Rg3对PC-3M细胞生长的抑制作用,计算IC50;用流式细胞术测定PC-3M细胞周期的变化;AO/EB双染观察SPG-Rg3对PC-3M细胞凋亡的形态学变化;利用免疫细胞化学染色和RT-PCR技术探讨SPG-Rg3对PC-3M细胞的诱导凋亡作用及与其相关基因caspase-8的关系。结果SPG-Rg3可明显抑制PC-3M细胞的生长,IC50为(248.5±0.58)mg.L-1;PC-3M细胞的生长周期中S期细胞数增加,G2/M期细胞数则明显减少,且在G1峰前出现明显的凋亡峰;SPG-Rg3作用后PC-3M细胞呈现明显的凋亡改变,且细胞caspase-8mRNA含量增加、表达明显增强。结论SPG-Rg3能诱导前列腺癌PC-3M细胞发生凋亡,其机制可能与其活化caspase-8作用有关。     

HTERT启动子调控HSV—tk＋GCV系统对人前列腺癌裸鼠移植瘤的疗效观察

目的:研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(HSV-tk)基因结合环氧鸟苷(GCV)对人前列腺癌PC3、LNCaP细胞株裸鼠移植瘤的疗效.方法:建立人前列腺癌BALB/C裸鼠移植瘤模型,利用携带hTERT和ILSV-tk基因的重组腺病毒Ad-hTERT-HSV-tk肿瘤局部注射荷瘤裸鼠后,腹腔注射GCV治疗.结果:(1)LNCaP细胞株、PC-3细胞株裸鼠移植瘤各组肿瘤体积的增长趋势基本一致,Ad-hTERT-HSV-tk+GCV治疗组自腹腔注射GCV后第21天开始,肿瘤体积均明显小于另3组,不同组之间,不同治疗时间差别均有统计学意义(LNCaP细胞株:F分别为17.24和557.83,P<0.01;PC-3细胞株:F分别为24.48和599.37,P<0.01),且分组和治疗时间之间存在交互作用(LNCaP细胞株:F=10.15,P<0.01;PC-3细胞株:F=11.88,P<0.01).(2)LNCaP、PC-3细胞株移植瘤Ad-hTERT-HSV-tk/GCV治疗组凋亡率均高于其他组,而增殖都低于另3组.(3)透射电镜下发现,Ad-hTERT-HSV-tk/GCV治疗组可见凋亡小体.结论:Ad-hTERT-HSV-tk联合GCV对人前列腺癌裸鼠移植瘤模型具有明确的治疗作用.     

三苯氧胺对前列腺癌细胞PC-3增殖抑制和诱导凋亡实验研究

目的探讨三苯氧胺（TAM）抑制前列腺癌细胞PC-3增殖以及诱导凋亡的机制。方法不同浓度三苯氧胺干预细胞,通过四氮唑蓝比色法（MTT）、原位细胞凋亡检测（TUNEL）以及流式细胞术等方法检测TAM增殖抑制及诱导凋亡作用。结果 MTT法以及TUNEL法显示0、10-6mol/L TAM对前列腺癌细胞PC-3的生长无明显抑制作用,10-5、10-4、10-3mol/L TAM有显著的抑制增殖及诱导凋亡的作用（P〈0.05）;流式细胞术检测其活化caspase-3的表达情况显示10-4、10-3mol/L TAM活化caspase-3表达显著增高（P〈0.05）。结论 TAM能抑制前列腺癌细胞PC-3增殖和诱导其凋亡,作用呈剂量和时间依赖性,其机制可能通过诱导caspase-3表达活化增强,最终导致细胞凋亡。     

下调PCNA和VCAM-1表达参与山柰酚抑制人前列腺癌细胞增殖

目的探讨山柰酚对人前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用及机制。方法采用MTT、细胞计数、流式细胞学等方法检测山柰酚对PC-3细胞增殖及凋亡的作用;使用West-ern blot检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)及血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesionmolecule 1,VCAM-1)的表达。结果山柰酚抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖,降低PCNA及VCAM-1的表达水平,诱导PC-3细胞阻滞于S期及G2/M期,但山柰酚对PC-3细胞凋亡无影响。结论山柰酚诱导PC-3细胞阻滞于S期及G2/M期,山柰酚抑制PC-3细胞增殖的作用与该药下调PCNA及VCAM-1的表达有关。     

多西紫杉醇对前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的观察多西紫杉醇对前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法人雄激素依赖性前列腺癌(LNCaP)细胞株与25,50,100nmol/L多西紫杉醇作用,分别在24,48和72h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果多西紫杉醇(25,50,100nmol/L)对LNCaP细胞的增殖抑制率逐渐增加;流式细胞术检测表明多西紫杉醇能诱导LNCaP细胞凋亡,且随浓度和时间的延长而增强。结论多西紫杉醇能够抑制LNCaP细胞增殖,促进其凋亡。     

复方苦参注射液对PC-3细胞凋亡及cyclinE蛋白表达的影响

目的：研究复方苦参注射液对人前列腺癌PC-3细胞凋亡及cyclinE蛋白表达的影响。方法：用复方苦参注射液对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞进行药物处理，采用MTY比色分析法测定复方苦参注射液不同剂量组对PC-3细胞生长的调控作用；采用流式细胞仪分析复方苦参注射液对PC-3细胞周期分布的影响，免疫细胞化学方法观察复方苦参注射液对PC-3细胞周期调控蛋白evelinE的影响。结果：复方苦参注射液可抑制PC一3细胞的增殖，诱导其凋亡，改变细胞周期分布，使G0／G1期PC-3细胞比例增高，同时还可使cyclinE蛋白表达下降。上述作用具有时间和剂量的依赖性。结论：复方苦参注射液可诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡，改变细胞周期分布，影响细胞周期调控蛋白cvclinE的表达，从而抑制细胞增殖。