人肝细胞癌总基因组DNA与c-myc、c-N-ras基因甲基化的改变

分别用两种方法研究了人原发性肝细胞癌总基因组及特定癌基因片段的DNA甲基化情况，并进行对比研究。以3H－SAM掺入法研究总基因组DNA甲基化水平，以限制性内切酶酶切、South－ern吸印法对c－myc、c－N－ras两种癌基因状况进行分析。结果：发现人肝细胞癌区和癌旁区组织内c－myc、c－N－ras癌基因分别有不同程度的低甲基化，且有癌区总基因DNA甲基化水平明显下降。本文结果提示：两种方法检测均发现在人原发性肝癌中存在DNA低甲基化现象，联用两种方法效果优于单一检测者。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c—myc,N—ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探讨对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２３１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性，Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌六     

胃癌c—myc c—Ha—ras基因DNA甲基化与病理的关系

以限制性内切酶ＨｐａⅡ／ＭｓｐⅠ消化，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法，分析２２例进展期胃癌手术标本的癌灶，癌旁和外周正常组织细胞内ｃ－ｍｙｃ，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因位点的ＤＮＡ甲基化状态，并与其组织病是学变化相比较。     

c—Ha—ras癌基因低甲基化在胃癌形成中的作用

应用ｃ－Ｈａ－ｒａｓ（６．６Ｋｂ）探针检测人类胃癌组织中ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因序列中５＇－ＣＣＧＧ－３＇甲基化状态，根据胃组织ＤＮＡ用ＨｐａⅡ酶切、杂交后所显示的杂交带的位置和出现的频率不同，并且与ＭｓｐＩ酶切、杂交带型比较来判定ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因甲基化程度的差异。本组胃癌ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因低甲基化发生率是４５％，癌旁组织中发生率是１５％，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因低甲基化是胃癌发生的重要早期事件。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c－myc，N－ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探针对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性．Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌旁肝细胞．作者认为，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因在肝细胞癌中均可呈较高水平表达．二者参与了肝癌的恶性转化过程并在肝癌的发生过程中相互协同以维持肝癌的恶性表型．     

肝细胞癌中BLU基因甲基化状态

目的了解肝细胞癌（HCC）中BLU基因的甲基化状态及临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）技术，检测50例HCC癌组织及相应的癌旁组织，4个HCC细胞系，8例肝血管瘤旁和4例供肝组织，了解BLU基因在上述组织中的甲基化状态，并分析其与临床资料间的相关性。结果4例供肝组织均未发生甲基化，8例肝血管瘤旁组织有1例发生甲基化，4个HCC细胞系有3个出现甲基化。50例HCC癌组织及其相应的癌旁组织中，分别检测到33例（66％）、18例（36％）发生甲基化；癌组织与癌旁组织甲基化率比较，差异有显著性（P=0．003）；肝功能Child B级患者甲基化率高于Child A级患者（P=0．041）；甲基化阳性患者的肿瘤直径大于阴性患者（P=0．004）；甲基化阳性患者的半年无瘤生存率低于阴性患者，但差异无显著性（P=0．058）。结论BLU基因甲基化是HCC中的频发事件，可能参与HCC的发展。     

人肝细胞癌及其癌前病变的DNA,AgNORs定量分析

用图象分析法对２０７例人正常肝，慢性肝炎，肝硬化、肝细胞不典型增生和肝细胞肝癌中的细胞ＤＮＡ指数、增殖指数、核面积、二倍体细胞比率和超五倍体细胞百分比等项参数进行量测定；同时进行核仁组织区计数及其与ＤＮＡ含量相关关系研究。结果显示：人肝癌的发生符合肿瘤发生多阶段理论，癌前病变ＬＣＤ其各项指标均显著增加，其中异倍体ＬＣＤ各项指标ＨＣＣ十分接近，因而提出异倍体ＬＣＤ作为病变进入演进期的标志，为肝癌发生     

肝细胞癌c—myc基因DNA甲基化模式的研究

探讨肝细胞癌ｃ－ｍｙｃ基因是否存在低甲基化状态及其临床意义。方法应用甲基敏感的限制性内切酶ＨｐａⅡ和ＭｓｐⅠ结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交手段，对６例正常肝组织和１８例肝细胞癌ｃ－ｍｙｃ基因３′端ＣＣＧＧ位点的甲基化状态进行检测。结果６例正常肝组织ｃ－ｍｙｃ基因３′端至少５个ＣＣＧＧ位点均被甲基化，而这种高甲基化模式在１１例肝细胞癌消失，表现为不同程度的低甲基化。在同一肿瘤组织各亚克隆细胞的甲基化状态也不一样。具有低甲基化状态的肝细胞癌多属进展期，其分化程度较差，大多伴有不同程度的肝内、外转移。结论肝细胞癌ｃ－ｍｙｃ基因的甲基呈不同程度的丢失，由此可能导致ｃ－ｍｙｃ基因异常高表达；ｃ－ｍｙｃ基因低甲基化状态可反映肝癌的恶性程度，有助于判断病人的预后。     

N—ras和C—myc反义寡核苷酸与p53和p16基因联合抑制人肝 …

目的：研究反义癌基因与抑癌基因联合抑制肝癌细胞生长的效果。方法：利用基因重组方法构建携带ｐ１６基因、ｐ５３基因的融合表达载体（ｐｃＤＮＡ１６￣５３）,利用基因合成仪体外合成Ｎ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸、并将Ｎ－ｒａｓ,Ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸与ｐｃＤＮＡ１６￣５３融合表达载体转染到人肝癌细胞系ＳＭＭＣ７７２１细胞中,观察肝癌细胞生长情况及软琼脂集落形成能力。结果：联合治疗组肝癌细胞增殖速度最慢     

c—myc,ras与P53基因蛋白在喉癌中的共同表达

目的：研究癌基因及抗癌基因在喉癌中的联合表达情况。方法：应用ＬＳＡＢ微波免疫组化方法，检测了ｃ－ｍｙｃ、ｒａｓ与Ｐ５３在３０例喉癌及癌帝粘膜，４例下沉喉粘膜中的共同表达。结果：①ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ和Ｐ５３的阳性表达率在癌组织中分别为８６．７％，９６．７％，６３．３％；癌旁粘膜分别为４３．３％，５６．７％，１０．０％；正常喉粘膜中分别为２５．０％，２５．０％，０．０％。癌与癌旁及正常粘膜间差异有显著     

人肝癌c—myc基因产物和HBxAg表达研究

本实验对４８例石蜡包埋人肝癌和癌旁组织的Ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ和ＨＢｘＡｇ进行了免疫组化检测。结果显示，Ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ在肝癌和癌旁组织阳性率分别为８３．３％和８９．６％，肝癌及其癌旁组织ＨＢｃＡｇ阳性率均为９３．８％，在肝癌组织中Ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ与ＨＢｘＡｇ的表达呈显著正相关性，这为ＨＢｘＡｇ在肝癌中作为反式作用因子激活ｃ－ｍｙｃ癌基因提供了细胞水平的证据。     

HBV相关肝细胞癌抑癌基因甲基化异常及机制的研究进展

肝细胞癌（HCC）的死亡率位居世界第三,其早期诊断及晚期治疗手段有限。由于甲胎蛋白（AFP）在肝癌早期临床诊断的敏感度较低,以及人们对该病自身及生活方式认识不足,这种癌症的发病率仍在上升。乙型肝炎病毒（HBV）感染作为我国公认的导致肝脏细胞发生癌变的主要危险因素,其可能会加快基因甲基化的进程,继而导致肝细胞癌的发生。DNA甲基化及其诱导的表观遗传学改变,由于其潜在的可逆性,为寻找HCC的新型生物标志物和治疗提供了新的途径。这些抑癌基因甲基化异常在HBV相关HCC发展中的机制仍未被阐明,进一步了解HBV相关HCC表观遗传学的新分子靶点对HCC的诊断、治疗和预防具有重要意义。本文就DNA甲基化介导HBV相关肝细胞癌中抑癌基因甲基化异常及机制进行综述,为攻克肝癌治疗的难点提供新的思路。     

应用双重原位杂交研究myc,ras癌基因在人肝细胞癌中的表达特征

目的： 建立非同位素双重原位杂交技术,以便在单细胞水平时显示两种不同的癌基因杂交信号,验证“癌变多步骤”学说。结论：肿瘤的性涉及多种癌原激活,激活是有次序性的,首先是ｒａｓ的“启动”激活,至于具体哪一种ｒａｓ似乎无关紧要,而ｍｙｃ的激活应是癌变过程较晚期的重要步骤。该观点似可部分修正“癌变多步骤”学说,即修正有关“癌基因激活的次序似乎并不重要的”论断,     

乳腺癌相关基因DNA甲基化的研究进展

乳腺癌是女性发生率较高的恶性肿瘤之一,其产生与发展是一个复杂的生物学过程,而DNA甲基化是促使乳腺癌发生的重要方式。DNA甲基化可介导乳腺癌致病基因的异常表达。随着人们对乳腺癌认识的不断深入,通过基因组水平筛选出乳腺癌主要致病基因,对进一步诊断及治疗乳腺癌有重要意义。本文对乳腺癌DNA甲基化及相关基因的研究进展进行综述与评价。     

血浆DNA甲基化和肝细胞癌

DNA启动子异常甲基化在原发性肝细胞癌(HCC)中是早期、普遍事件。启动子异常甲基化作为一种表观遗传学改变,与HCC的发生、发展及预后密切相关。HCC患者血浆和癌组织中基因甲基化水平具有良好的一致性,血浆是研究甲基化的可靠资源。检测HCC患者血浆DNA启动子异常甲基化对HCC的早期诊断、病情和疗效观察、预后评估具有一定的应用价值。     

人宫颈癌组织中c—myc基因的表达

目的 研究人宫颈癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的表达。方法 应用Ｄｉｇ标记ｃＤＮＡ探讨，ＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交技术检测３７例人宫颈鳞状细胞癌内癌基因ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ。结果 ３７例中１６例有ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达，检出率为４３．２４％，ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ主要分布在癌细胞胞浆内。结论 ｃ－ｍｙｃ癌基因表达在宫颈癌发生中可能起作用，宫颈癌的发生可能还有更多的癌基因参与。     

DNA甲基化与肿瘤的相关研究进展

表观遗传学改变是指基于非基因序列改变所致基因表达水平变化,如DNA甲基化和组蛋白修饰等。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,将S-腺苷甲硫氨酸提供的甲基基团共价结合到CpG二核苷酸的胞嘧啶5碳位上的过程。目前CpG岛异常高甲基化所致抑癌基因转录失活以及整个基因组异常低甲基化所致原癌基因的激活,已经成为肿瘤研究中的热点问题。