乙型肝炎HBV—DNA与HBs特异性免疫复合物的测定及意义

目的：了解各型乙型肝炎（乙肝）中HBV－DNA的含量与HBs特异性免疫复合物（HBs-IC)的关系及其意义。方法：共检测172例血清标本。用定量PCR测HBV－DNA及ELISA法测HBs-IC。结果：（1）、各型乙肝患HBs-IC阳性率和含量都明显升高,但HBV－DNA阳性组的乙肝患升高更为显;HBs-IC与HBV－DNA的测定结果无明显相关;（2）、HBV－DNA阳性率在不同肝病有所不同;在HBV－DNA阳性组中,DNA复制量在各病型无明显差异;（3）、HBs-IC检出率在无症状携带最低（59％）;慢性乙肝轻度、中度和原发性肝癌检出率中等（60％、75％及80％）;慢性乙肝重度,乙肝后肝硬化及急性乙肝检出率最高,均为100％。结论：在免疫应答功能正常的机体中,HBV－DNA的扩增常伴有HBs-IC的升高。推测：HBs-IC产生主要与机体的免疫功能有关,对HBV－DNA的复制及清除有一定意义。     

乙型肝炎HBV DNA/补体双特异性免疫复合物的检测

HBV DNA／C1q—TCIC和HBV DNA／B—TCIC的阳性率年均以慢性乙型肝炎最高。以羊抗人C1q和B因子IgG为捕捉抗体．分别用以捕捉通过经典和旁路途径激活抗体的Dane颗粒抗原抗体免疫复合物中曲勺C1q和B因子,再利用引物的特异性和PCR的强大扩增能力,对捕捉物中的HBVDNA进行微孔法反向杂交检测,时间短且效果明显,是一种快速检测手段。     

乙型肝炎HBV DNA／补体双特异性免疫复合物的检测

许多学者对乙肝患者的免疫应答和免疫调节功能进行了大量研究 ,发现细胞免疫功能的异常在其发病机理中有重要作用[2 ] 。本文即通过PCR -反向微孔法[1] 对乙型肝炎HBVDNA/补体双特异性免疫复合物B因子和C1q的检测 ,来为探讨乙型肝炎的发病机理提供一种新的方法。     

慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒DNA与e抗原含量的关系

目的 对患有慢性乙型肝炎的患者的血清中的乙型肝炎病毒(HBV)DNA与乙型肝炎病毒e抗原含量之间的关系进行研究分析.方法 本次研究采用病例对照研究的方法,在患有慢性乙型肝炎的患者中抽取HBeAg(+)、e系统双阳、HBeAg(-)患者各40例.对3组患者的HBeAg和HBV DNA水平进行检测,并对检测结果 进行比较分析.再将抽样中的120例临床确诊患者按照病情程度分为3组,对3组的HBV DNA平均水平在进行比较.结果 HBeAg(+)组患者的HBeAg和HBV DNA水平明显高于e系统双阳、HBeAg(-)两组([ 1289.46±974.17)peiu/ml比(8.36±2.53)peiu/ml,(0.04±0.02)peiu/ml;(6.89±1.83)copy/ml比(4.92±1.28)copy/ml,(3.74±1.36)copy/ml,P<0.05];e系统双阳组患者的HBeAg和HBV DNA水平明显高于HBeAg(-)组患者;轻度组患者的HBVDNA水平明显高于中度组患者([ 6.68±1.48)copy/ml比(4.77±1.36)copy/ml];中度组患者的HBV DNA水平明显高于重度组患者([ 3.83±1.18)copy/ml].结论 慢性乙型肝炎患者的HBV DNA含量与HBeAg的含量有着非常密切的关系,其含量会随着HBeAg含量的不断升高而升高,患者乙肝病情程度不断加重会导致其HBV DNA水平不断下降.     

乙型肝炎免疫复合物性肾炎二例报告

乙型肝炎免疫复合物性肾炎是Combes于1971年从1例膜性肾小球肾炎患者的肾活检中首次证实,在肾小球内有乙肝表面抗原、TgG和C_3沉积。其病理组织类型以膜性肾小球肾炎和膜性增生性肾小球肾炎最多     

人类白细胞抗原—抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞的诱生及克隆

为建立一种有效诱导及克隆人类白细胞抗原（HLA）－抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞（CTL）的方法,用EB病毒转化的B淋巴母样细胞系细胞作为刺激细胞,采用长期混合淋巴细胞培养法诱导自身外周血T细胞库中抗原肽－HLA复合物特异性CTL增殖、分化,并用有限稀释法对之进行克隆。通过细胞毒实验证实获得的CD3^ 、CD8^ T细胞克隆具有高度抗原特异性并受某些HLA型别的限制。     

Humoral immune response to HCV core DNA vaccine in mice

DNAvaccine,alsocallednucleicacidvaccine,isarecombinanteukatyoticexpressionplasmidencodingcertainantigenofpathogen.DNAvaccinecanexpressantigenandinducecellularandhumoralimmuneresponsesaftervaccinationbyintramuscularinjectionorplasmid--coatedmicroparticlebombardment.Itshightemperaturestability,lowexpenseofmassproductionandtheabilitytoinducestrongimmuneresponsesevenfortheuseintherapyhavemadeDNAvaccineanexcitingwayfornewvaccinedevelopment['J.InordertofurnishevidenceforHCVDNAvaccinesuitablefo…     

HCV核心蛋白DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫应答

目的：观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体液免疫应答的效力，为研制应用于人类的ＨＣＶ ＤＮＡ疫苗提供实验依据。方法：将全长ＨＣＶ核心蛋白基因插入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３．１，构建ＨＣＶ核心蛋白重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１ＨＣＶｃｏｒｅ，肌注ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＨＣＶ抗体。以此重组质粒转染小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以ＨＣＶ抗体阳性小鼠血清为捕获抗     

轮状病毒DNA疫苗经不同途径接种诱导体内免疫应答研究

目的:通过研究不同途径接种轮状病毒DNA疫苗所诱导的体内免疫应答,寻找其适合的免疫途径.方法:轮状病毒基因疫苗pcDNA1/VP7经肌肉注射及鼻粘膜两种途径免疫BALB/c小鼠,利用ELISA方法对其诱导产生的体液免疫应答进行测定.结果:经肌肉注射及鼻粘膜两种途径接种轮状病毒DNA疫苗后,均在BALB/c小鼠体内诱导产生了病毒特异性IgG增高(P＜0.05),而病毒特异性IgA与对照组相比无显著性差异.结论:肌肉注射及鼻粘膜两种途径均能作为轮状病毒DNA疫苗的候选接种途径.     

Modulation of cellular and humoral immune responses to anHIV-1 DNA vaccine by interleukin-12 and interleukin-18 DNA immunization

Thereismountingevidencethattheinductionofstrongmucosalandcell mediatedimmuneresponsesarekeyelementstoconsiderinconstructingefficaciousHIV 1vac cine .TherapeuticvaccinesthatinducehighlevelsofCTLspecifictoHIVarecurrentlybeingdevelopedworldwide .NucleicacidimmunizationisanewvaccinationtechniquewhichdeliversDNAconstructsencodingaspecificimmuno genintothehost[1] .InadditiontotheabilityoftheDNAvaccinetoinducebothantigen specificcellularandhumor alimmuneresponses ,thistechniquehasthepotentialto…     

乙肝病毒表面抗原基因疫苗诱导小鼠细胞及体液免疫应答的研究

为观察乙肝病毒 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 基因疫苗免疫小鼠后的细胞及体液免疫应答,将该疫苗定向克隆于质粒ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 巨细胞病毒启动子下游,构建能在真核细胞内表达的重组基因疫苗ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ Ｈ Ｂｓ Ａｇ 。将此疫苗通过多点肌肉注射免疫 Ｂａｌｂ／ Ｃ 小鼠后第六周,实验组小鼠均出现抗－ Ｈ Ｂｓ Ｉｇ Ｇ 阳性,其抗体水平明显高于对照组,同时 Ｔｈ１ 免疫应答相关的细胞因子 Ｉ Ｌ２ 及γ干扰素水平也明显高于对照组,表明本文构建的基因疫苗ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ Ｈ Ｂｓ Ａｇ 能诱导 Ｂａｌｂ／ Ｃ 小鼠产生良好的细胞及体液免疫应答。     

HCMV pp65 DNA疫苗诱导小鼠的细胞免疫应答

目的　构建含HCMV pp65336～ 50 7位氨基酸的重组真核表达质粒 pcDNA3 1 pp65作为HCMVpp65基因疫苗 ,观察其诱导小鼠的细胞免疫应答情况。方法　以 6～ 8周龄♀Balb/c小鼠为动物模型 ,试验组和对照组各 6只。试验组于股四头肌注射pp65DNA疫苗 ,对照组注射空载体pcDNA3 1。 2组小鼠分别在 0d、5d、3周注射该DNA疫苗 2 0 0μg。在末次免疫后 3d ,无菌取小鼠脾细胞 ,并用ConA和重组HCMV pp65336～ 50 7作为抗原刺激 ,吉氏液染色观察T淋巴细胞的形态学变化 ,并计算转化率。MTT法对脾脏的特异性杀伤细胞率和淋巴细胞的增殖指数进行测定 ,间接ELISA定量检测脾细胞上清中IFN γ的含量。结果　pp65336～ 50 7抗原刺激的DNA疫苗免疫鼠脾细胞体积变大 ,胞浆增多 ,核仁增多 ;淋巴细胞增殖试验示pp65336～ 50 7抗原能特异性刺激免疫鼠脾细胞增殖 ;试验组IFN γ较对照组增高 ,其含量为 80 0ng/L。与对照组比较 ,差异均具显著性 (P<0 0 5)。试验组及对照组脾细胞杀伤率分别为 :56 0 5 %±1 3 64 %、9 85 %± 2 0 6 % ,试验组脾细胞CTL活性比对照组增高 (P <0 0 5)。结论　HCMVpp65DNA疫苗可诱导小鼠HCMV特异性细胞免疫应答     

hIL2-preS融合基因免疫小鼠诱导体液免疫应答

目的 探讨HBV preS基因免疫和hIL-2与preS融合基因免疫诱导BALB／c小鼠体液免疫反应的规律。方法 将preS基因及hIL2-preS融合基因分别克隆入真核表达载体pCMV4,转染COS－7细胞,明确有目的基因表达后,将重组质粒注射BALB／c小鼠臀部肌肉;ELISA方法检测小鼠血清抗体。结果 pCMV4-preS接种组,3／7小鼠产生抗preS2抗体。pCMV4-hIL2-preS接种组有3／7小鼠产生抗hIL-2抗体,而未检测到抗preS2抗体。结论 pCMV4-preS可有效诱导小鼠产生抗体反应。hIL2-preS融合基因接种BALB／c小鼠时,可诱导产生抗hIL-2抗体。     

泛素-结核抗原融合基因DNA疫苗诱导小鼠较强的细胞免疫应答

目的:构建结核杆菌ESAT6抗原DNA疫苗(pE)和泛素基因与ESAT6抗原基因融合的DNA疫苗(pUE).方法:分别将构建的DNA疫苗肌内注射免疫BALB/c雌性小鼠,检测小鼠的血清抗体(IgG、IgG1、IgG2a)、细胞因子(IFN-γ、IL-4)和细胞毒性T淋巴细胞反应(CTL),比较融合基因DNA疫苗和单基因DNA疫苗诱生免疫应答的强度.结果:pE组小鼠血清IgG水平高于pUE组(P＜0.01),但IgG2a/IgG1比值低于pUE组[(2.28±0.40) vs (3.87±0.60),P＜0.05].与pE组相比,pUE组小鼠IFN-γ分泌水平增高(P＜0.01),IL-4分泌水平下降(P＜0.01);pUE增强了CTL活性.提示融合基因DNA疫苗诱生的抗原特异的体液免疫应答不及单基因DNA疫苗,但其能诱导更强的细胞免疫应答.结论:泛素-ESAT6融合基因DNA疫苗对于防治结核病可能比单基因DNA疫苗更为有效.