肝癌和癌旁组织中HCV—RNA及其负链的研究

该研究采用ELISA法,对肝癌患者的血清检测HCV—Ab,用Nested-PCR法对患者的血清、肝癌组织和癌旁组织检测HCV-RNA和HCV-RNA负链,探讨肝细胞癌中是否存在HCV-RNA及其复制状态。对照组血清检测HCV-Ab、HCV-RNA1/17阳性。肝癌组16/31 HCV-RNA阳性;癌旁组织15例测到HCV-RNA负链,癌组织只有6例测到负链。结论:血清中抗HCV检测不能完全反映肝内是否曾有HCV感染情况。癌组织和癌旁组织均能检出HCV-RNA,说明肝癌组织中感染着丙型肝炎病毒。肝癌组织中确实存在HCV-RNA负链,说明HCV-RNA能在肝组织内不断地自我复制。     

HCC组织中HCVRNA正链和负链的检测分析

ＨＣＣ组织中ＨＣＶＲＮＡ正链和负链的检测分析周元平，彭文伟，姚集鲁，吕凌（中山医科大学病毒性肝炎研究室：广州，５１０６３０）关键词丙型肝炎病毒，基因，肝细胞癌中图号Ｒ５１２．６３；７３５．７利用高度敏感的逆转录套式ＰＣＲ技术和特异性引物的限制作用，本...     

湖南地区丙型肝炎病毒基因型在肝细胞癌组织中的分布

采用型特异性引物ＰＣＲ分型法对５０例肝细胞癌组织中感染的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）进行基因分型。结果显示：单独ＨＣＶⅡ型感染为６０％（３０／５０）；单独Ⅲ型感染６％（３／５０）；感染为Ⅱ＋Ⅲ型１０％（５／５０），Ⅱ＋Ⅳ型为１６％（８／５０），Ⅱ＋Ⅰ＋Ⅲ型为４％（２／５０）；Ⅰ￣Ⅳ型均阴性的病例４％（２／５０）。表明湖南地区肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主，并存在Ⅱ型与其它型的混合感染；少数病例可能系     

用套式RT—PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者因清ＨＣＶ,再以巢工地ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。地多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫互助 化和原位杂交检测。结果 ＨＣＶ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％,与ＨＢＶ者,差异无显著性意义,两者重叠感染率３４％。在１０例血清ＨＣＶ一ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶ     

应用PCR技术研究肝细胞性肝癌组织中的HCVRNA,HDVRNA和HG …

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测３１例石蜡包埋的肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）组织中的ＨＣＶＲＮＡ、ＨＤＶＲＮＡ和ＨＧＶＲＮＡ。结果ＨＣＶＲＮＡ阳性４例，ＨＤＶＲＮＡ阳性１例，ＨＧＶＲＮＡ未检出，阳性率分别为１２．９％、３．３％和０，表明ＨＣＣ的发生民ＨＣＶ有一定相关性。     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关，而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

肝癌及癌旁组织中丙型肝炎病毒基因负链的研究

运用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）等方法检测了５例丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ—ＲＮＡ）阳性患者的肝癌、癌旁组织和周围血清中ＨＣＶ—ＲＮＡ正链和负链，其中男４例，女１例。结果，正链检测：血清及癌旁组织全部阳性，癌组织中３例阳性。负链检测：血清中均阴性，癌组织３例阳性，癌旁组织５例均阳性。本组５例患者肝脏ＨＣＶ—ＲＮＡ负链阳性，推测ＨＣＶ以ＨＣＶ—ＲＮＡ负链作为模板在感染的肝脏组织中复制，ＨＣＶ持续存在于肝脏组织中对肝癌的发生起了一定的作用。     

原发性肝癌78例血清HCVRNA和抗HCV的观察

用逆转录－聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测了７８例原发性肝癌患者清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标物。     

Detection of plus and minus strands of HCV RNA in cancerous and non－cancerous liver tissues of patients with hepatocellular c

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｐｌｕｓａｎｄｍｉｎｕｓｓｔｒａｎｄｓｏｆＨＣＶＲＮＡｉｎｃａｎｃｅｒｏｕｓａｎｄｎｏｎ－ｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＣｕｉＸｉａｏｈｏｎｇ...     

Genotyping of hepatitis C virus in patients with hepatocellular carcino Ma

ＧｅｎｏｔｙｐｉｎｇｏｆｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏＭａ￥ＣｕｉＸｉａｏｈｏｎｇ（崔晓红）；ＰａｎＷｅｉ（潘卫）；ＱｉＺｈｏｎｇｔｉａｎ（戚中田）；ＳｏｎｇＹａｎｂｉｎ（宋燕斌）...     

用三种逆转录PCR扩增系统检测丙型肝炎病毒RNA的比较

目的：比较常用的三种（ＭＭＬＶ／Ｔａｑ，ＡＭＶ／Ｔａｑ和Ｔｔｈ单酶）逆转录ＰＣＲ扩增系统的效果。方法：利用这三个系统对丙型肝炎病毒不同稀释度ＲＮＡ进行逆转录ＰＣＲ扩增，比较其检测灵敏度。结果：ＡＭＶ／Ｔａｑ系统最佳，ＭＭＬＶ／Ｔａｑ系统次之，Ｔｔｈ单酶系统最差，ＡＭＶ／Ｔａｑ系统的检测灵敏度比Ｔｒｈ单酶系统高１００００倍，比ＭＭＬＶ／Ｔａｑ系统高１００倍。结论：建议使用ＡＭＶ／Ｔａｑ酶的逆转录ＰＣＲ扩增系统以提高丙型肝炎病毒的检测灵敏度，减少假阴性的出现。     

精细胞及血单个核细胞中丙型肝炎病毒RNA及其负链检测

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对８例慢性丙型肝炎患者的血浆、外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）、精液和精细胞中的正链和负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ进行检测，以了解ＨＣＶ在肝外细胞中是否存在，有否复制。结果血浆中正链ＨＣＶＲＮＡ均阳性，而负链ＨＣＶＲＮＡ全部阴性；ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性者５例，其中２例检出负链ＨＣＶＲＮＡ。在３例留取精液的患者中１例精液和精细胞中检出正链ＨＣＶＲＮＡ。精细胞未次洗液ＨＣＶＲＡＮ阴性，精细胞负链ＨＣＶＲＮＡ阴性。上述结果提示：（１）血浆中可能仅有正链ＨＣＶＲＮＡ存在；（２）ＨＣＶ可在ＰＢＭＣ中存在，并可能在其中复制；（３）精液中有ＨＣＶ存在，因此通过性交传播丙型肝炎的可能性确实存在，但ＨＣＶ可能不在精细胞中复制     

Relationship of hepatitis C virus infection with primary hepatic carcinoma: an investigation of serum HCV RNA in different population groups

A preliminary study on the serum hepatitis C virus(HCV)RNA in 182 pa-tients with different chronic liver diseases and 35 blood donors was carried out with“nested”polymerase chain reaction.It was found that serum HCV RNA was detected in36.6%(34/93)cases of primary hepatic carcinoma(PHC),31.7%(20/63)liver cirrhosis,15.4%(4/26)chronic hepatitis and 2.9%(1/35)blood donors;most of the HCV RNA pos-itive cases(41/58)were complicated with HBV replicating markers;the rate of single posi-tive for HCV RNA was 15.1%(14/93)in PHC,3.2%(2/63)in liver cirrhosis,and 3.8%(1/26)in chronic hepatitis.These findings imply that about 20% of PHC cases appear tobe related to the coinfection of HCV and HBV and 15% of PHC cases are related to sin-gle HCV infection.     

肝癌患者外周血中白蛋白mRNA检测的意义

目的:探讨肝癌患者外周血中白蛋白mRNA在血行播散中的意义。方法:抽取30例肝癌患者外周静脉血5ml,应用RT-PCR技术对血中白蛋白mRNA进行扩增检测。结果:敏感性实验中,健康人血中存在102以上个肝癌细胞时可测出。30例HCC患者中,白蛋白mRNA的阳性率为60%(18/30);白蛋白mRNA的检出率与肝癌的TNM分期、肿瘤大小、有无门脉癌栓及有无肝外转移有显著的相关性(P<0.05),而与血清AFP值无关(P>0.75)。结论:白蛋白mRNA是反映原发性肝癌患者血中是否存在肝癌细胞的灵敏指标。     

原发性肝癌患者及慢性乙肝病毒携带者肝组织中乙型肝炎病毒X基因的变异

目的:探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因及其变异与原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生、发展的关系。方法:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法,检测22例乙型肝炎表面抗原(hepatitis Bsurface antigen,HBsAg)阳性的HCC患者及15例慢性乙肝病毒携带者(chronic asymptomatic carrier,CAC)患者肝组织中HBVX基因,并对PCR产物进行基因测序,同时检测5例无HBV携带者正常肝脏组织中HBV X基因。结果:22例HCC患者癌组织及15例CAC患者肝组织中HBVX基因检出率分别为68.18%和46.67%,5例正常肝脏组织中均未检测到HBVX基因,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组织及HBV携带者肝组织中HBV X基因检出率差异无统计学意义(P>0.05)。肝癌组织及携带者肝组织中HBV X基因发生1 762T/1 764A双突变率分别为93.33%和2/7,肝癌组织中双突变率高于携带者肝组织(P=0.004 3),未发现1 762T及1 764A单独发生突变。结论:HCC患者肝组织中HBV X基因检出率高,肝癌组织中发生1762T/1764A双突变的频率高,HBV X基因及1762T/1764A双突变与HCC的发生可能有重要关系。