海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升高的抑制作用

应用４５Ｃａ２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０、１００μｍｏｌ·Ｌ－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ２＋内流还是胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％；但对Ａ２３１８７引起的胞内［Ｃａ２＋］ｉ升高无显著抑制作用。结果表明：海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流和［Ｃａ２＋］ｉ的升高。     

海风藤酚,甲基海风藤酚,海风藤醇A和海风藤醇B对兔血小板…

海风藤酚、甲基海风藤酚、海风藤醇Ａ和海风藤醇Ｂ均有抑制血小板激活因子（ＰＡＦ）诱导的兔血小板聚集作用，ＩＣ５０分别为１７．９、９．２、１４２．０、１４．０μｍｏｌ·Ｌ＾－１。经阿司匹林（ＡＳＡ）、磷酸肌酸／磷酸肌酸激酶（ＣＰ／ＣＰＫ）预处理的兔洗涤血小板，甲基海风藤酚和海风藤醇Ｂ仍能抑制ＰＡＦ诱导的兔血小板聚集，ＩＣ５０为９．０、１６．５μｍｏｌ·Ｌ＾－１。同时，４种成分对于二磷酸腺苷由１．５９ｎ     

血小板衍生生长因子刺激鼠成骨细胞内Ca^2＋浓度变化的实？…

观察血小板衍生长因子等生长因子对鼠成骨细胞内Ｃａ＾＋浓度变化的影响。方法酶消化法体外分离培养胎鼠成骨细胞,应用ＡＣＡＳ检测成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的变化。结果ＰＤＧＦ可促进成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的瞬时增加;ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ＴＧＦ－β联合应用对成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度升高有协同作用;ＡＣＡＳ能准确测量胞内Ｃａ＾２＋浓度的动态变化,结论ＰＤＧＦ可促进成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度的增加,且与ＢＭＰ,ＴＧＦ－     

丙咪嗪对人血小板胞浆游离钙的影响

目的：观察丙咪嗪体外对人血小板胞浆游离钙的影响。方法：用Ｆｕｒａ２－ＡＭ荧光钙离子指示剂在体外测定人血小板胞浆游离钙离子浓度。结果：丙咪嗪明显抑制凝血酶诱导的血小板胞浆游离钙的升高，ＩＣ５０（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ５０％）为２０．０μｍｏｌ／Ｌ。丙咪嗪对凝血酶诱导的内钙释放亦有明显抑制作用（Ｐ＜０．０１）。结论：丙咪嗪不仅明显抑制人血小板胞外Ｃａ２＋跨膜内流而且抑制胞内储存Ｃａ２＋释放     

海风藤酚、甲基海风藤酚、海风藤醇A和海风藤醇B对兔血小板聚集的影响

海风藤酚、甲基海风藤酚、海风藤醇Ａ和海风藤醇Ｂ均有抑制血小板激活因子（ＰＡＦ）诱导的兔血小板聚集作用，ＩＣ_（５０）分别为１７．９、９．２、１４２．０、１４．０μｍｏｌ·Ｌ~（－１）。经阿司匹林（ＡＳＡ）、磷酸肌酸／磷酸肌酸激酶（ＣＰ／ＣＰＫ）预处理的兔洗涤血小板，甲基海风藤酚和海风藤醇Ｂ仍能抑制ＰＡＦ诱导的兔血小板聚集，ＩＣ_（５０）为９．０、１６．５μｍｏｌ·Ｌ~（－１）。同时，４种成分对于二磷酸腺苷（ＡＤＰ），花生四烯酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集抑制作用较弱，海风藤Ｂ能使ＰＡＦ诱导血小板聚集量－效曲线平行右移，ＥＣ_（５０）由１．５９ｎｍｏｌ·Ｌ~（－１）升为２０．６ｎｍｏｌ·Ｌ~（－１）。结果表明：４种成分能选择性拮抗ＰＡＦ对兔血小板的聚集作用。     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５￣４００μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ＾２＋］ｉ的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５￣１２４．４）μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ＾２＋］ｉ升高的机制。     

NIDDM患者血小板Ca_(2+)转运及其与聚集功能的关系

３２例ＮＩＤＤＭ患者，分血小板聚集功能亢进组（ｎ＝１７）和无亢进组（ｎ＝１５），探讨Ｃａ２＋转运影响血小板胞浆游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）变化与最大聚集（ＭＡＲ）的关系。结果：亢进组血小板静息［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（１３４．４±２６．４对１０１．５±１３．３ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。［Ｃａ２＋］ｉ与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３２１９，Ｐ＜０．０５）以凝血酶刺激，有胞外Ｃａ２＋内流及胞内Ｃａ２＋释放时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ高于对照组（９１８．９±２０７．６对７９１．２±１１９．６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），并与ＭＡＲ呈正相关（ｒ＝０．３３７１，Ｐ＜０．０１）；以ＴＭＢ８阻滞胞内Ｃａ２＋释放，组间差异仍然显著（Ｐ＜０．０５）；当缺乏胞外Ｃａ２＋内流时，则组间不呈显著差异（Ｐ＞０．０５）。以钙载体Ａ２３１８７刺激，在有或无胞外Ｃａ２＋时，亢进组［Ｃａ２＋］ｉ均高于对照组（Ｐ均＜０．０５）然而，无亢进组上述各指标与对照组间均未呈显著差异。提示ＮＩＤＤＭ患者血小板聚集功能亢进与［Ｃａ２＋］ｉ变化有关，可能涉及胞浆内Ｃａ２＋稳态异常，凝血酶刺激胞外Ｃａ２＋内流及Ａ２３１８７作用胞内Ｃａ２＋释放增强等环节     

胞内Ca^2＋,Na^＋和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用

目的;研究Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）诱导大鼠小脑颗凿神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法：分别用Ｃａ＾２＋和Ｎａ＾＋敏感的染料Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＳＢＦＩ／ＡＭ测定胞内Ｃａ＾２＋和Ｂａ＾＋浓度「（Ｃａ＾２＋）ｉ,（Ｎａ＾＋）ｉ」,并用反向高效液相法测定胞内三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的含量。结果：（１）在ＮＭＤＡ预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ｃａ＾２＋反应高峰,两者无显著性差异。而后在ＮＭ     

大鼠脑挫伤后脑不同部位细胞和线粒体内的钙含量变化

用原子吸收分光光度法（ＡＡＳ）及比色法分别测定了脑挫伤后８ｈ大鼠各脑区细胞内钙（Ｃａｉ）、组织总磷（Ｐｔ）、线粒体钙（Ｃａｍｔ）、线粒体（Ｐｍｔ）的含量变化，结果表明原发损伤可使多数脑区的细胞受体影响并发生Ｃａ＾２＋内流，局部伤情影响着Ｃａ＾２＋内流程度；内流Ｃａ＾２＋多是以结合形式沉积于胞浆等部位以维持胞内Ｃａ＾２＋浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）稳定，蛋白质是可能的主要结合剂；但严重的Ｃａ＾２＋内流将     

海风藤醇B对PAF越膜代谢和生物合成的影响

研究海风藤醇Ｂ地抗血小板激活作用与其影响兔血小板中血小板激活因子的越膜代谢和生物合成间的关系。采用放射性薄层层析法和ＰＡＦ生物测定法研究海风藤醇Ｂ对ＰＡＦ越膜代谢和生物合成的影响。海风藤醇Ｂ，银杏内醌Ｂ可抑制兔血小板」＾３Ｈ「－ＰＡＦ的越膜代谢，ＩＣ５０分别为８４．８，３４．９μｍｏｌ．Ｌ＾－１。     

异搏停对小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca—F／25／CL—16A3内某些钙稳…

Ｃａ＾２＋与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文报道了钙拮抗剂异搏停作用Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞后胞内某些钙稳态指标的改变。结果表明，用药后细胞有分化现象且生长速度减慢，同时胞液Ｃａ＾２＋浓度和微粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性明显降低，而线粒体和微粒体贮钙水平显著升高，细胞核钙和细胞总钙明显下降。     

1,6—二磷酸果糖对心肌细胞胞质游离Ca^2＋和pH的影响

考察外源性的１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）对心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度和ｐＨ值的影响，用荧光探针（Ｆｕｒａ－２，ＢＣＥＣＦ）技术同时测定成年大鼠心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度和ｐＨ值，并观察其在缺氧／复氧条件下的变化，结果：在缺氧／复氧过程中，胞质游离Ｃａ＾２＋胞质游离Ｃａ＾２＋浓度缓慢升高，从基础值１３０±２９．５ｎｍｏｌ／Ｌ上升至７４２±１５４ｎｍｏｌ／Ｌ，胞质ｐＨ值则从７．１２±０．０８降至６     

花椒油素对A23187和钙调节血小板及细胞内游离钙作用的研究

目的 研究花椒油素对ＣａＣｌ２和钙离子载体Ａ２３１８７调节血小板及其中Ｃａ＾２＋浓度的作用。方法 比浊法测定血小板聚集,用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定细胞内游离钙的水平。结果 花椒油素显著地抑制ＣａＣｌ２和Ａ２３１８７诱导的血小板聚集,前者的抑制率为９．０％～６７．１％,后者的抑制率为１８．１％～７２．５％。明显降低Ａ２３１８７诱导的血小板胞质游离Ｃａ＾２＋浓度,降低率为１２．８％～６３．４％。结论 花椒油素抑制聚集作用与降低细胞内游离Ｃａ＾２＋水平之间呈线性正相关（Ｐ〈０．０１）。     

用Fluo3—AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca^2＋浓度及药物对 …

用Ｆｌｕｏ ３－ＡＭ为荧光控针,测定２型糖尿病患者淋巴细胞内Ｃａ＾２＋浓度,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Ｂａｙ Ｋ８６４４、胰岛素等药物对胞内Ｃａ＾２＋的作用机制。实验表明患者胞浆内Ｃａ＾２＋浓度与正常人相比显著升高;药物对胞内Ｃａ＾２＋的刺激表明,病人地外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内Ｃａ＾２＋浓度升高,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道,也能促进钙从钙池中释放。上述研     

肿瘤患者血清中NO与Ca^2＋的关系及其临床意义

研究了肿瘤患者血清ＮＯ，Ｃａ＾２＋的含量和两者之间的关系，以及Ｍｇ＾２＋，γ－谷氨转肽酶（γ－ＧＴ），前白蛋白（ＰＡＢ），白蛋白（ＡＬＢ）等的变化规律，结果表明，ＮＯ和Ｃａ＾２＋含量增加（ｒ＝０．８６１２）γ－ＧＴ活性升高，Ｍｇ＾２＋ＰＡＢ及ＡＬＢ含量降低，Ｃａ＾２＋可促进ＮＯ生成，ＮＯ与肿瘤发生，发展有关，提示测定肿瘤患者ＮＯ含量对肿瘤诊断，治疗和预后判断有重要意义。     

急性心肌梗塞患者淋巴细胞钙含量的动态观察

目的 研究急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者不同病期外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）钙含量的动态变化并探讨其临床意义。方法 应用美国Ｍｅｒｉｄｉａｎ公司的激光扫描共聚焦显微镜测定ＰＢＬ内钙含量。结果 ＡＭＩ患者ＰＢＬ内钙明显低于正常对照组（Ｐ〈０．０１）,约２周恢复正常,结论 ＡＭＩ时患者ＰＢＬ内钙含量明显降低,机制可能为：淋巴细胞凋亡抑制基因ＢｃＬ－２被激活,抑制Ｃａ＾２＋由肌浆网向胸浆内释放;Ｃａ＾２＋由肌浆     

Fura－2荷载血小板胞内游离钙浓度的连续测定

以Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ－２荷载血小板，连续测定血小板胞内游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度动态变化。在生理胞外Ｃａ２＋浓度时。正常成人血小板［Ｃａ２＋］ｉ静息水平为１０８．３±３．６ｎｍｏｌ／Ｌ（－ｘ±ｓ－ｘｎ＝１５，下同），以凝血酶０．２Ｕ／ｍｌ作诱导，［Ｃａ２＋］ｉ迅速升至峰值７７０．３±２７．３ｎｍｏｌ／Ｌ，其下降幅度在４ｍｉｎ时为４０．９％±１．８％；以ＴＭＢ８４００μｍｏｌ／Ｌ阻滞胞内Ｃａ２＋释放，［Ｃａ２＋］ｉ的峰值（４４３．７±２７．７ｎｍｏｌ／Ｌ）明显下降（Ｐ＜０．００１），而４ｍｉｎ的下降幅度（４７．７％±３．８％）则无明显差异（Ｐ＞０．０５）。在胞外Ｃａ２＋＜１０－８ｍｏｌ／Ｌ时，［Ｃａ２＋］ｉ静息水平７０．２±７．５ｎｍｏｌ／Ｌ，作同样的诱导，［Ｃａ２＋］ｉ的峰值（３２１．２±１７．８ｎｍｏｌ／Ｌ）及下降幅度（９９．２％±３．６％）均有显著变化（ｐ＜０．００１）。结果表明，本文所建立的方法能连续测定血小板［Ｃａ２＋］ｉ的动态变化。     

糖皮质激素对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞内游离钙浓度的快速影响

目的：探讨糖皮质激素（ＧＣ）快速抑制肾上腺髓质嗜铬细胞（ＡＭＣＣ）受刺激后分泌的机制。方法：用Ｆｕｒａ－２作Ｃａ＾２＋指示剂，观察ＧＣ对乙酰胆碱（ＡＣｈ）刺激引起的ＡＭＣＣ内游离钙（［Ｃａ＾２＋］ｉ）浓度升高的影响，并用放射免疫方法测定了ＧＣ对ＡＣｈ刺激后ＡＭＣＣ的环核苷酸含量的影响。结果：ＧＣ对ＡＣｈ引起的ＡＭＣＣ的［Ｃａ＾２＋］ｉ升高有快速抑制作用，但对ＡＣｈ刺激引起的环核苷酸含量升高无明显作     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP3及钙调蛋白影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１,４,５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂,采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变,以反映［Ｃａ２＋］ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。结果给予０．１、１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２后５０ｓ胞内钙荧光值分别增加４．７和６．１倍,持续８０～１６０ｓ;以１００ｎｍｏｌ／Ｌｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ预处理细胞,Ｅ２仅使胞内钙荧光值升高１．５倍。加入１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２,ＩＰ３含量在给药后２０～３０ｓ和６０～７０ｓ呈双峰升高。同样剂量的Ｅ２可使ＣａＭ含量增加８５．２％。他莫西芬不能阻断Ｅ２引起的胞内钙荧光值、ＩＰ３及ＣａＭ含量升高的作用,而磷脂酶Ｃ抑制剂使Ｅ２的作用部分或完全抑制。结论Ｅ２作用于胞膜引起胞外钙内流,并通过ＩＰ３导致［Ｃａ２＋］ｉ进一步增加,激活ＣａＭ从而调节细胞功能。     

染铅鼠海马神经原长时程增强过程中Ca^2＋浓度及PKC活性的…

为探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，以慢性染铅鼠为动物模型，用高叔刺激诱发海马区产生长时程增强后，以Ｆｕｒａ－２为Ｃａ＾２＋指示剂，测定海马神经元Ｃａ＾２＋浓度，以放射性［ｒ－＾３２Ｐ］－ＡＴＰ掺入外源性底物方法测定神经元胞浆及胞膜ＰＫＣ活性。结果：染铅组长时程增强过程中Ｃａ＾２＋浓度明显升高（２３６．４８±６１．８３ｎｍｏｌ／Ｌ，与对照组比较有统计学意义（Ｐ〈０．０００１）。ＰＫＣ活性亦升高（胞