Ca~(2 )/CaM在植物血凝素促淋巴细胞分裂中的分子调节机理——(二)CaM对PHA有丝分裂原活性的影响

应用MTT微量自动定量比色法分析细胞的存活与增殖状况,观察钙调蛋白(CaM)对植物血球凝集素(PHA)促小鼠脾淋巴细胞分裂的影响.结果发现,细胞培养48h后,PHA加CaM的最大刺激组的吸光度(A)值比未加CaM的PHA对照组提高了46.8％(吸光度(A)值分别为0.457和0.311),CaM的最大刺激浓度为30μg/ml.结果提示,CaM参与细胞增殖的调节作用,并能显著提高PHA的促有丝分裂原作用。     

Ca^2＋对PHA促淋巴细胞分裂作用的影响

以小鼠脾淋巴细胞为实验材料,采用MTT微量自动比色法判断细胞分裂状况,观察PHA的促淋巴细胞分裂作用时Ca~(2 )的影响。结果发现:加Ca~(2 )的最大刺激组的光密度(OD)值比对照组提高了35.4％,Ca~(2 )的最大刺激浓度为4％葡萄糖酸钙.结果表明Ca~(2 )有增强PHA的有丝分裂原作用,并且存在明显的量—效关系。     

Ca^2＋／CaM在植物血凝素促淋巴细胞分裂中的分子调节机理：（一）Ca^…

实验材料为小鼠脾淋巴细胞，应用ＭＴＴ微量自动化色法判断细胞分裂状况，观察植物血凝素（ＰＨＡ）的促脾淋巴细胞分裂活性和Ｃａ＾２＋的影响。结果发现，加Ｃａ＾２＋的最大刺激组的吸光度（Ａ）值比对照组（未加Ｃａ＾２＋的ＰＨＡ组）提高了３５．４％（两组Ａ值分别为０．３９０和０．２８８），Ｃａ＾２＋的最大刺激浓度为４％葡萄糖酸钙。结果表明Ｃａ＾２＋参与细胞增殖的调节，并有增强ＰＨＡ的有丝分裂原活性的作用。     

川芎嗪对AngⅡ诱导的VSMCs增殖中CaM和CaN活性的影响

目的探讨不同浓度川芎嗪在不同作用时间内对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的VSMCs(VSMCs)增殖的抑制作用.方法建立AngⅡ诱导VSMCs增殖模型,用酶促反应定磷法观察不同浓度的川芎嗪在不同时段内对VSMCs中钙调蛋白(CaM)和钙调神经磷酸酶(CaN)活性影响.结果成功建立AngⅡ诱导的VSMCs增殖模型,川芎嗪各组CaM和CaN活性随川芎嗪的浓度和作用时间的延长而显著下降(P＜0.01).结论川芎嗪对AngⅡ诱导的VSMCs增殖的抑制作用有剂量和时间依赖性,其抑制机制可能与其干预CaN依赖的信号转导途径有关.     

愈痫灵对致痫大鼠海马神经元CaM和CaMKⅡα表达的影响

目的研究愈痫灵颗粒对致痫大鼠海马组织钙调蛋白(CaM)和钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)表达的影响。方法采用腹腔注射戊四氮(PTZ)造成慢性癫痫大鼠模型,以半定量RT-PCR技术检测不同药物干预后大鼠海马组织CaM和CaMKⅡα的mRNA表达水平;图像自动分析系统进行其吸光度扫描。结果愈痫灵颗粒可降低海马神经元CaMmRNA的表达,升高CaMKⅡαmRNA的表达。结论通过调控Ca2 信号转导途径中的某些靶位点,影响Ca2 -CaM-CaMKⅡα信息链是愈痫灵颗粒抗癫痫的重要途径之一。     

丝裂原和秋水仙胺对大鼠淋巴细胞粘附于主动脉内皮细胞的影响

本文用体视学从二维切片估计三维图象的方法,对大鼠淋巴细胞粘附于主动脉内皮细胞的过程进行了初步研究。实验表明,胸腺和肠系膜淋巴结的淋巴细胞中均含有一定数量的粘附细胞。粘附在受淋巴结浸出液刺激的内皮细胞上的细胞数量明显增多。有丝分裂原ConA、PWM和LPS在不同程度上能够促进胸腺或肠系膜淋巴结细胞对主动脉内皮细胞的粘附,其中ConA和PWM作用较强。一定剂量的秋水仙胺可部分抑制肠系膜淋巴结细胞对主动脉内皮细胞的粘附。     

腺病毒介导多基因对大鼠脾淋巴细胞毒作用的影响

目的 研究含多基因（p53、GM-GSF、B7-1、IL-2）的重组腺病毒载体Ad-multigenes,对大鼠脾脏淋巴细胞毒作用的影响及对淋巴细胞分泌IL-2的刺激作用。方法 应用人外周血淋巴细胞和肿瘤细胞混合培养,分析导入目的基因的肝癌细胞系体外刺激人T淋巴细胞分泌IL-2的作用;利用大鼠脾淋巴细胞杀伤活性试验,分析导入目的基因的大鼠癌肉瘤Walker256细胞,其名疫原性的变化。结果 导入Ad-multigenes的肝癌细胞系体外刺激人外周血T淋巴细胞分泌IL-2的水平增加,导入Ad-multigenes的大鼠Walker256细胞,能增加大鼠脾脏淋巴细胞的杀辛本瘤细胞活性。结论 腺病毒介导多基因Ad-multigenes、能增加大鼠癌肉瘤Walk-er256细胞的免疫原性,和T细胞分泌IL-2的水平增加。     

小檗胺类化合物对黑色瘤细胞内钙调蛋白水平的影响

目的：研究5种小檗胺类化合物对恶性黑色瘤细胞内钙调蛋白Calmodulin(CaM)水平的影响。方法：收集不同浓度不同药物作用后的细胞,通过反复冻融法破碎细胞,并用磷酸二酯酶（PDE）法测CaM含量。结果：5种化合物均能不同程度地降低细胞内CaM的水平,IC50（μmol/L）值分别为：B0＝10．83,B2＝9．1,B4＝7．4,BB＝6．15,EBB＝1．55。结论：小檗胺衍生物降低细胞内CaM的能力大于小檗胺,其中EBB的效果最为突出。     

植物凝集素刺激下人外周血淋巴细胞端粒酶催化亚单位(hTERT)表达上调

目的通过测定正常人外周血淋巴细胞中hTERT在植物凝聚素(PHA)刺激前后的表达水平的变化,评估正常人淋巴细胞对PHA刺激的反应能力。方法采集40例正常人外周血,分离淋巴细胞后,一部分在含0.5%PHA的培养液中培养,分别于24h、48h收集细胞,提取总RNA后,用RT-PCR法测定其hTERT合成水平的相对含量。结果淋巴细胞受到PHA刺激前hTERT的表达相对水平为0.575±0.231。刺激后24h、48hhTERT的表达相对水平分别为0.723±0.294,0.931±0.342,刺激后较刺激前明显升高(P<0.01)。结论正常人外周淋巴细胞活化时,hTERT的表达水平随时间延长明显升高。     

神经生长因子对小鼠脑突触体游离钙的调节

文章报道了在高体情况下神经生长因子（NGF）对青年（1月龄）和老年（18月龄）小鼠海马突触体内游离钙浓度的影响，以及不同钙浓度条件下，NGF对Ca~（2 ）的调节作用。结果表明：（1）不同浓度的NGF对青年小鼠海马突触体内的游离钙离子均无明显作用；（2）只有浓度为10μg／ml的NGF可显著降低老年小鼠海马突触体内游离钙离子浓度（P＜0．05）；（3）当胞内钙水平较低时．NGF具有升高钙离子浓度的作用，反之，则具有降低钙离子浓度的作用。提示NGF对Ca~（2 ）的调节作用呈双向性。     

镉对人体外周血淋巴细胞内游离Ca~(2+)及钙调素影响的研究

采用体外实验方法，观察CdCl2对培养24h的人外周血淋巴细胞内游离Ga2+浓度及CaM活性的影响。结果表明：细胞内游离Ca2+浓度与镉浓度（≤100μmol／L）及染毒时间（≤60min）存在明显的剂量及时相相关，在≤50μmol／LCdCl2作用下，CaM活性随染毒剂量增加而升高，50μmol／LCdCl2使CaM活性增至0μmol／L组的190．22％（P＜0．05），但100μmol／LCaCl2则对CaM无激活作用。在一定镉浓度（0～50μmol／LCdCl2）及染毒时间（0～40min）内，细胞内游离Ca2+浓度与CaM活性呈*一致性变化，提示镉的免疫毒作用机制与Ca2+、CaM系统有关。     

四种小檗胺衍生物与红细胞膜Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATPase的相互作用

四种小檗胺衍生物对人红细胞膜Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATPase的基础活性无影响,但对钙调素(CaM)和胰蛋白酶限制性酶解这两种形式所活化的Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATPase都有不同程度的抑制作用,且有平行的抑制强度。初步探讨了这类化合物影响Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATPase活力的可能机制。     

Effect of SJAMP on Human Platelet Cytoplasmic Ca~(2 )

Using the method of dual-wavelength measurement of platelet [Ca~(2 )]_i and Fnra-2 as the Ca~(2 ) fluorophore probe, we measured the effect of acidic Mu copolysaccharide front Sticopus Japonicus Selenka (SJAMP) on platelet [Ca~(2 )]_i.The results showed that the most significant increase in platelets [Ca~(2 )]_i was seen when the concentration of SJAMP wits 100μg/ml and the elevation of normal platelet [Ca~(2 )]_i was 93.96±10.24 nmol/L (n=10). In the presence of extracellular Ca~(2 )(1 mmol/L), the magnitude of platelet [Ca~(2 )]_i response to SJAMP was increased and the [Ca~(2 )]_i could reach 116.72±10.66 nmol/L (n=10). On the other hand, the magnitude of increased platelet [Ca~(2 )]_i induced by SJAMP was smaller and the duration of [Ca~(2 )]_i reaching the highest level was longer when compared with other platelet aggregation agents. In the mean time, if platelets were first incubated with cyclooxygenase inhibitor, the rise of [Ca~(2 )]_i evoked by SJAMP was inhibited. The results indicated that     

孟鲁司特对哮喘大鼠淋巴细胞凋亡的作用及其机制

目的：观察孟鲁司特（MK）对哮喘大鼠淋巴细胞凋亡的影响并探讨其分子机制。方法：40只大鼠随机分为正常组、哮喘组、MK和地塞米松（DXM）组。采用卵蛋白（OVA）腹腔注射致敏并反复雾化吸入刺激建立大鼠哮喘模型，药物干预组管喂MK或腹腔注射DXM。采用双标记双染色的方法先标记CD4^ /CD8^ T淋巴细胞，然后用原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡，采用免疫组化的方法检测淋巴细胞Fas的表达。结果：哮喘大鼠外周血及肺组织中T淋巴细胞的凋亡率低于正常组大鼠，MK、DXM处理后，CD4^ /CD8^ T淋巴细胞凋亡率均明显升高，与哮喘组及正常组比较差异均具显著性（P＜0．01）。体外培养时MK呈剂量和时间依赖性促进OVA抗原刺激的外周血淋巴细胞Fas表达水平及凋亡，其中以CD4^ T淋巴细胞凋亡率和Fas表达的增加更为明显，与CD8^ T淋巴细胞比较差异具显著性（P＜0．05）。10^-6mol/L的MK可明显促进10^-4mol/L DXM对淋巴细胞凋亡的诱导作用。结论：MK可促进哮喘大鼠外周血及肺组织中CD4^ T淋巴细胞凋亡，该作用可能通过Fas途径介导。MK对DXM促淋巴细胞凋亡具有协同作用。     

VitE对尿毒症患者血清诱导淋巴细胞凋亡的影响

目的通过观察尿毒症患者血清对培养的正常人淋巴细胞凋亡、Fas分子表达的影响以及VitE的干预作用,探讨淋巴细胞凋亡与尿毒症患者免疫功能低下的关系,并寻找防治对策。方法分离健康正常人外周血淋巴细胞并进行体外培养一周,分成对照组、尿毒症患者血清组、尿毒症患者血清 VitE组,培养一定时间后,用流式细胞仪测淋巴细胞早期凋亡率和Fas分子表达率。结果加入尿毒症患者血清培养12、24h,淋巴细胞早期凋亡率、Fas表达率分别较对照组明显增高(P<0.01),且两者呈正相关(rs=0.905,P<0.01);VitE干预后淋巴细胞早期凋亡率、Fas表达率与尿毒症血清组比较,明显降低(P<0.05)。结论尿毒症患者血清可使正常淋巴细胞Fas分子表达增高和细胞早期凋亡率上升,可能是尿毒症患者免疫功能低下易发生感染的原因之一。VitE在一定程度可抑制尿毒症患者血清诱导的淋巴细胞Fas分子表达,减少细胞凋亡。     

温度对幼鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的探讨温度对幼鼠心肌细胞内游离钙的影响。方法用萤光探针Fura－2及BCECF染料结合计算机图像处理技术，观察温度对心肌细胞内Ca2 浓度的影响。结果发现低温引起细胞内游离Ca2 浓度明显上升（P＜0．05），而异搏定能显著地降低低温心肌细胞内的游离Ca2 浓度（P＜0．05）。结论低温对幼鼠心肌细胞不利。     

结核性胸膜炎病人局部T淋巴细胞对B淋巴细胞产生抗PPD抗体水平调节作用的观察

目的：观察结核性胸膜炎病人胸水中Ｔ淋巴细胞及正常人血清中Ｔ淋巴细胞对Ｂ淋巴细胞抗ＰＰＤ抗体产生的影响。方法：应用体外细胞培养的方法，常规ＥＬＩＳＡ间接法检测Ｂ、Ｂ＋Ｐ、Ｂ＋Ｔ和Ｂ＋Ｐ＋Ｔ四组培养上清中抗ＰＰＤＩｇＧ水平。结果：健康人Ｔ淋巴细胞对Ｂ细胞及含ＰＰＤ的Ｂ细胞产生抗ＰＰＤ抗体无明显影响；而结核性胸膜炎病人病变局部Ｔ细胞在无ＰＰＤ存在的情况下对Ｂ细胞产生抗ＰＰＤ抗体无抑制作用，反而能辅助其抗体的产生，而在ＰＰＤ存在的情况下，Ｔ细胞明显抑制Ｂ细胞产生抗ＰＰＤＩｇＧ。结论：结核性胸膜炎病人Ｔ淋巴细胞使Ｂ＋Ｐ组产生抗ＰＰＤＩｇＧ水平下降的原因不是Ｂ细胞本身分泌免疫球蛋白功能受损，而是功能上受抑制。抑制的因素不是来自于Ｔ淋巴细胞本身，而是ＰＰＤ抗原的间接作用