重症急性胰腺炎大鼠血清高迁移率族蛋白-1对胰腺腺泡细胞死亡方式的影响

目的探讨重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血清高迁移率族蛋白-1（HMGB1）水平对胰腺腺泡细胞胀亡的影响。方法将32只SD大鼠随机分为假手术组（SO组,n=8）和SAP组n=24）。SO组大鼠开腹后仅翻动肠管,SAP组大鼠采用胆胰管内逆行注射3％牛磺胆酸钠的方法建立SAP模型。建模成功后,将SAP组大鼠随机均分为6、12及24h组,每组8只,分别于上述时点处死大鼠,取静脉血及胰腺组织,行HE染色以观察胰腺组织的病理学改变,行ELISA法检测血清中的HMGB1浓度,以流式细胞仪检测胰腺腺泡细胞的胀亡百分比。结果SO组大鼠的胰腺腺泡结构完整,偶见单个炎症细胞浸润。SAP．6h组可见胰腺腺泡肿胀、间质水肿,炎症细胞浸润;SAP-12h组及SAP．24h组见胰腺病理学损伤加重,部分腺泡细胞坏死,间质血管瘀血,局灶坏死,且随时间延长病理学损伤加重。3个SAP亚组大鼠的血清HMGB1浓度和胰腺腺泡细胞胀亡百分比均高于SO组（P〈0．01）,且随时间延长,SAP大鼠的血清HMGB1浓度和胰腺腺泡细胞胀亡百分比均增高（P〈0．05）。24h内SAP大鼠的血清HMGB1浓度与胰腺腺泡细胞胀亡百分比呈正相关r=0．846,P〈0．01）。结论SAP时,HMGB1在介导炎症反应的同时,可能诱导胰腺腺泡细胞胀亡,从而参与SAP的病理生理过程。     

丙酮酸乙酯对重症急性胰腺炎大鼠血清高迁移率蛋白-1水平的影响及意义

目的　探讨重症急性胰腺炎 (SAP)大鼠血清高迁移率蛋白 1(HMGB1)水平的变化规律 ,以及丙酮酸乙酯 (EP)对其水平的影响和意义。方法　采用胰管逆行灌注人工胆汁的方法复制大鼠SAP模型。随机分为正常对照组 (N组 ,n =8)、重症急性胰腺炎组 (SAP组 ,n =80 )、EP治疗组 (Treat组 ,n =3 2 )。Treat组建模 12h开始使用EP治疗。酶联免疫吸附试验检测各组动物血清肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)水平。Westernblot法检测血清HMGB1水平。另设实验组研究EP对SAP大鼠生存时间的影响。结果　SAP组大鼠血清TNF α和IL 1β水平在建模 3～ 6h达高峰 ,12h即大幅下降。SAP组大鼠血清HMGB1水平在建模后 12h明显升高 ,至 2 4和 48h仍维持在较高水平 [(161.4± 2 2 .8) μg/L和(98.7± 15 .8) μg/L]。Treat组血清HMGB1水平在建模 2 4、48h [(95 .3± 3 0 .1) μg/L和(4 2 .2± 2 1.5 ) μg/L]明显低于SAP组(P <0 .0 5 )。而血清TNF α和IL 1β水平与SAP组比较差异无显著性。Kaplan Meier分析显示 ,EP治疗组动物生存时间 (71± 6)h明显高于SAP组 (4 6± 4)h (P <0 .0 0 0 1)。结论　HMGB1作为晚期炎症因子参与了SAP的全身炎症反应。延迟的EP治疗仍能降低SAP大鼠血清HMGB1水平 ,延长动物生存时间。     

急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺高迁移率族蛋白-1的表达及意义

目的探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠模型胰腺组织高迁移率族蛋白-1(HMGB1)的表达及其意义。方法72只大鼠随机分成3组,即对照组、ANP组和正丁酸钠治疗组(治疗组)。逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立ANP模型。ELISA法检测血清TNF-α和IL-1β水平;RT-PCR法检测胰腺组织HMGB1 mRNA的表达,并观察其病理变化。结果ANP组血清TNF-α和IL-1β水平在ANP建模后6h达高峰,12h下降。ANP组大鼠胰腺组织HMGB1 mRNA表达水平在ANP后12h明显升高,至24h仍维持在较高水平。治疗组胰腺组织HMGB1 mRNA表达水平在ANP后12,24h明显低于ANP组(P<0.05),且同期胰腺损伤比ANP组轻(P<0.05)。建模后24h血清TNF-α和IL-1β水平ANP组与治疗组间差异无显著性。结论HMGB1作为晚期炎症因子参与了ANP的全身炎症反应。HMGB1抑制剂正丁酸钠能降低ANP大鼠胰腺组织HMGB1基因表达水平,减轻ANP胰腺组织的损伤。     

急性胰腺炎大鼠肾脏中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1mRNA的表达及意义

目的 探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(poly ADP-ribose polymerase-1,PARP-1)mRNA在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肾脏中的表达及意义.方法 48只Wistar大鼠按随机数字表法分为SAP组和假手术组(SO)组,分别于造模术后1、3、6及12 h测定血清肌酐,观察胰腺和肾脏组织病理变化,并以RT-PCR法检测PARP-1 mRNA在肾脏中的表达水平.结果 SAP组大鼠术后血清肌酐逐渐升高,于3、6及12 h明显高于SO组(P＜0.05).SAP组大鼠术后胰腺出现腺体破坏、腺泡坏死、出血、炎性细胞浸润等病理损害,且呈进行性加重;SO组各时相胰腺组织基本正常.SAP组大鼠术后出现肾小管上皮细胞变性、坏死、肾小球瘀血、缺血等改变,并随时间延长逐渐加重,其损伤程度在3、6及12 h明显较SO组严重(P＜0.05).SO组大鼠肾脏组织仅表达少量PARP-1 mRNA,而SAP组大鼠随病程延长肾脏组织中PARP-1 mRNA表达逐渐增加,自3 h时起明显高于SO组(P＜0.01).结论 在SAP发病过程中,PARP-1 mRNA的表达在肾脏组织中逐渐增加,PARP-1可能参与了SAP相关肾损伤过程.     

雷帕霉素对重症急性胰腺炎胰腺损害的保护性作用

目的探究雷帕霉素对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺损害的保护性作用,并进一步阐述其保护机制。方法将90只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组(SO组)、SAP组和雷帕霉素组(RAPA组),每组30只大鼠;每组大鼠再随机分为24、36和48 h 3个时点亚组,每个亚组10只大鼠。每组大鼠均行开腹手术,采用逆行胰胆管注射法制备模型,SO组大鼠仅注射0.9%生理盐水,SAP组和RAPA组大鼠注射5%牛磺胆酸钠溶液,且RAPA组在注射5%牛磺胆酸钠前30 min经腹腔注射雷帕霉素。分别于模型制备术后24、36及48 h处死相应亚组存活的大鼠,收集大鼠血清和胰腺组织,采用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6及TNF-α含量,采用Western blot法检测胰腺组织中磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)和磷酸化的核糖体S6蛋白激酶1(p-S6K1)的表达水平;胰腺组织行HE染色,光镜下进行病理学改变评分。结果①胰腺组织中p-mTOR和p-S6K1的表达水平:24、36及48 h时,胰腺组织中p-mTOR和p-S6K1的表达水平均是SO组RAPA组SAP组,3组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。②IL-1β:48 h时,3组的血清IL-1β含量顺序为SO组RAPA组SAP组,3组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05);IL-6:36 h和48 h时,3组的血清IL-6含量顺序为SO组RAPA组SAP组,3组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05);TNF-α:48 h时,3组的血清TNF-α含量顺序为SO组/RAPA组SAP组(P0.05),但SO组和RAPA组比较差异无统计学意义(P0.05)。③胰腺织病理学评分:24、36及48 h时3组胰腺组织的病理学评分顺序均为SO组RAPA组SAP组,3组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。④胰腺组织中p-mTOR和p-S6K1的表达水平与胰腺组织的病理学评分均呈正相关(r=0.97,P0.01;r=0.89,P0.01)。结论雷帕霉素可以减轻SAP的胰腺损害程度,对胰腺组织具有保护性的作用。     

不同严重程度急性胰腺炎大鼠IL-17、IL-23的表达及其相关性

目的探讨不同严重程度的急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)中白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)和白细胞介素-23的表达及其相关性。方法 SD大鼠72只,随机分为4组(n=6):重症急性胰腺炎组(severeacute pancreatitis,SAP)、轻型急性胰腺炎组(mild acute pancreatitis,MAP)、SAP+地塞米松组和假手术组(shamoperation,SO)。造模成功后3h、6h和12h分批处死各组大鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组鼠血清IL-17、IL-23表达水平。结果与SO组相比,SAP组、MAP组和SAP+地塞米松组在各个时间点均出现了不同程度的急性胰腺炎的病理变化,造模成功。与MAP组及SAP+地塞米松组相比,各个时间点SAP组的血清IL-17、IL-23表达水平显著增高,差异有统计学意义(P0.05);相关性分析结果提示血清IL-17、IL-23和AP严重程度呈显著正相关(r=0.866,P0.01;r=0.855,P0.01)。结论 IL-17、IL-23的表达水平能较准确地预测急性胰腺炎的严重程度,对临床上重症急性胰腺炎的早期诊断具有一定的价值。     

重症急性胰腺炎大鼠HMGB1表达与肠黏膜屏障损害的关系

目的:观察大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)时肠组织中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)表达的变化及其与肠黏膜屏障损害的关系.方法:48只Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=8)和SAP组(n=40).正常对照组麻醉后取材,SAP组分别于建模后3、6、12、24和48 h取材.测定血浆D-乳酸、肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)水平,应用RT-PCR方法检测SAP大鼠肠组织中高迁移率族蛋白B1 mRNA表达的变化,应用westernblot法检测SAP大鼠肠组织中HMGB1水平的变化.结果:随着SAP病情进展,血浆D-乳酸与肠组织MPO水平在24 h达最高值,分别为(16.41±4.65)μg/mL和(26.76±3.63) U/g(P<0.01).SAP 6 h时大鼠肠组织HMGB1 mRNA及HMGB1表达水平显著高于对照组,并于24 h达峰值且持续至48 h(P<0.01).结论:SAP大鼠肠组织中HMGB1表达延迟且持续增高.HMGB1作为晚期炎症介质参与了SAP大鼠肠黏膜屏障损伤的病理生理过程.     

环氧合酶-2在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中表达的实验研究

目的　研究环氧合酶 -2 (COX 2 )在重症急性胰腺炎 (SAP)大鼠胰腺组织中的表达 ,探讨其在SAP发病中的机制。方法　健康成年雄性SD大鼠 40只随机分成重症急性胰腺炎组 (SAP ,n =2 0 )和正常对照组 (NC ,n =2 0 )。术后 12h两组各处死 10只大鼠 ,检测腹水量 ,血清淀粉酶活性、肿瘤坏死因子 -α(TNF α)浓度 ,血浆TXB2 和 6 keto PGF1α浓度及胰腺组织中COX 2的表达 ,光镜观察胰腺的病理变化 ,并进行评分。两组其余 10只大鼠观察 2 4h及 72h存活率。结果　SAP组 12h大鼠胰腺组织中COX 2蛋白表达为强阳性 ,而NC组中无COX 2的表达。血清淀粉酶活性、TNF α浓度 ,血浆TXB2 和 6 keto PGF1α浓度均显著高于NC组 (P <0 .0 1) ,SAP组腹水量生成显著增加 (P<0 .0 1)。光镜病理评分显示 ,SAP水肿、炎症、出血和坏死评分均较NC组有明显升高 (P <0 .0 5 )。SAP组大鼠 2 4h死亡率为 10 0 % ,NC组死亡率 2 4h为 0 ,48h为 10 .0 %。结论　重症急性胰腺炎时有COX 2的高表达和前列腺素 (PGs)升高 ,提示COX 2可能通过促进PGs升高而在SAP发病中起重要作用。     

紧密连接蛋白1与重症急性胰腺炎大鼠胰腺微血管损伤关系的实验研究

目的研究重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）大鼠紧密连接蛋白1（ZO-1）随时间的变化及其与SAP微血管损伤和胰腺组织病理学评分的关系。方法将48只Wistar大鼠随机均分为假手术组（SO组）和SAP组。SO组大鼠开腹后仅翻动胰腺;SAP组大鼠开腹后,以逆行胰胆管微泵注射5%牛磺胆酸钠法制备SAP模型。2组大鼠分别于手术后6、12及24 h各处死8只大鼠,取腹主动脉血测定外周血中淀粉酶、胰蛋白酶、白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及ZO-1蛋白水平;取胰腺组织行HE染色,观察其病理学变化并评分;同时行免疫组化染色检测ZO-1蛋白的表达情况。结果同时点与SO组比较,各时点SAP组的血清淀粉酶、胰蛋白酶、IL-8、TNF-α及ZO-1蛋白水平均较高（P〈0.05）。SAP-6 h组和12 h组的血清淀粉酶水平均低于24 h组（P〈0.05）;SAP组内大鼠的胰蛋白酶、IL-8和ZO-1蛋白水平均随时点延长逐渐升高,各时点组间两两比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;SAP组内3个时点组间TNF-α水平的差异无统计学意义（P〉0.05）。多重线性回归模型结果显示,SAP组血清ZO-1蛋白水平与胰腺组织病理学评分（b=0.96,P〈0.05）、血清淀粉酶水平（b=0.87,P〈0.05）、胰蛋白酶水平（b=0.72,P〈0.05）及IL-8水平（b=0.69,P〈0.05）均呈正相关,而与TNF-α水平的关系无统计学意义（P〉0.05）。HE染色结果显示,各时点SAP组大鼠的胰腺组织损伤程度重于SO组,且随时间延长,SAP大鼠胰腺组织的病理学损伤加重;SAP-12 h组和24 h组的胰腺组织病理学评分均高于6 h组（P〈0.05）。SP免疫组化染色结果显示,随时间延长,SAP组大鼠胰腺腺泡细胞间及毛细血管壁的ZO-1蛋白颗粒数量减少,且在毛细血管中的表达不连续。结论在SAP的进程中,血清中ZO-1蛋白的水平上升,同时其在胰腺组织中的表达呈下调趋势,表明其与SAP时的胰腺微血管损伤有关。     

花姜酮通过NF-κB保护重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤

目的探讨花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤可能的保护作用,为重症急性胰腺炎防治提供理论依据。方法 70只Wistar大鼠,雄性,按照随机数字表法随机分为4组,即正常对照组(NC组,n=10)、重症急性胰腺炎组(SAP组,n=40)、花姜酮预处理组(ZER组,n=10)及花姜酮药物对照组(ZER-CON组,n=10),SAP组又分为建模后1、3、6及12 h 4个时间点组(n=10)。SAP组及ZER组大鼠采用胆胰管逆行注射5%硫磺胆酸钠溶液(0.1 m L/100 g)制备SAP模型,NC组及ZER-CON组则向胆胰管注入等量生理盐水。ZER组及ZER-CON组于模型制备前30 min由股静脉穿刺给予10 mg/kg的花姜酮溶液。NC组、ZER组及ZER-CON组于建模后12 h处死大鼠,SAP组分别于建模后1、3、6及12 h处死大鼠。分别观察各组大鼠的死亡情况,测定其腹水量、血清淀粉酶(AMY)和磷脂酶A2水平;光镜下观察胰腺组织的病理学改变;采用免疫组化法检测各组大鼠胰腺组织中核因子-κB(Nuclear Factor-kappa B,NF-κB)p65的表达。结果 ZER-CON组大鼠的死亡情况、腹水量、AMY及磷脂酶A2水平和胰腺组织的病理学评分以及NF-κB p65蛋白表达与NC组相近,其差异均无统计学意义(P0.05);SAP组上述指标均明显高于NC组(P0.05)。ZER组组大鼠的上述指标与SAP组相比明显降低(P0.05),但均高于NC组(P0.05)。结论应用花姜酮可以减少SAP大鼠的死亡,减少腹水量,减轻胰酶及胰腺病理学损伤,同时可降低胰腺NF-κB p65蛋白的表达。提示花姜酮可能通过核因子NF-κB途径对SAP大鼠胰腺起保护作用。     

HMGB1 A box蛋白对于急性胰腺炎脏器损伤的保护作用

目的 应用高迁移率族蛋白-1(HMGB1)的拮抗剂-A box蛋白治疗小鼠急性胰腺炎模型并观察其疗效.探讨A box蛋白对于急性胰腺炎所致脏器损伤影响的作用机制.方法 以20%L-精氨酸腹腔注射诱导建立小鼠急性坏死性胰腺炎模型,并于建模后应用A box蛋白进行治疗,测定血AST、ALT、LDH、BUN及Cr等生化指标.比较对照组和治疗组小鼠的胰腺、肺、肾、肝的病理变化及两组小鼠的存活率和存活时间.结果 建模后48 h,治疗组小鼠的胰腺、肺组织损伤病理评分较对照组减少,有显著性差异(P<0.05),治疗组肾、肝组织损伤的病变程度较对照组减轻.建模后24 h治疗组的AST值较对照组明显降低(P<0.05),建模后48 h治疗组的AST、ALT、LDH和Cr值较对照组明显降低(P<0.05).治疗组小鼠的存活率(66.7%)明显高于对照组的存活率(26.7%)(P<0.05).结论 A box蛋白对于胰腺炎及其所引发的肺、肾、肝等脏器的损伤有显著的保护作用.可提高重症胰腺炎小鼠的存活率.     

猫不同类型急性胰腺炎心肌酶谱的变化

目的　探讨猫不同类型急性胰腺炎 (AP)时心肌酶谱的变化。方法　将 2 8只杂种猫分成 3组 :( 1)重型急性胰腺炎 (SAP)组 ,用猫自身胆汁加等量 3 0mmol/L去氧胆酸钠复合液以 2 0kPa恒定压力逆行注入胰管内 ,诱发重型急性胰腺炎模型 ;( 2 )轻型急性胰腺炎 (MAP)组 ,除注射压力为 3kPa以外 ,其余操作同SAP ;( 3 )对照组 (CG) ,开腹翻动胰腺 8～ 10次。观察 18h后取标本 ,分别测定各组血淀粉酶 (AML)、激酸激酶 (CK)及其同工酶 (CK MB)、乳酸脱氢酶 (LDH)及其同工酶 1(LDH1)的变化 ,并观察各组腹水量、胰腺和心肌病理改变。结果　SAP时AML、CK、CK MB、LDH及LDH1均非常显著高于MAP和CG组 (P <0 .0 1)。各组腹水量、胰腺和心肌病理变化 ,SAP组明显重于MAP组。结论　AP不论轻重均伴有心脏损伤 ,其损伤程度与AP的类型呈正相关 ,SAP对心脏的影响较MAP大。     

罗格列酮对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织STAT1的影响

目的 探讨罗格列酮对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织信号转导与转录激活因子1(STAT1)的影响.方法 将54只Wistar大鼠随机分为假手术组(S0组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、罗格列酮预处理组(ROSI组),每组18只.逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型.ROSI组造模前30 min经股静脉注射罗格列酮(6 mg/kg),然后制备SAP模型.术后3、6、12 h心脏取血处死大鼠,每个时间点6只,测定血清淀粉酶水平,胰腺组织病理切片HE染色后评分;免疫组织化学方法检测胰腺组织磷酸化STAT1蛋白的表达情况;RT-PCR测定胰腺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达水平.结果 SAP组各时间点磷酸化STAT1蛋白、TNF-α mRNA的表达水平、血清淀粉酶及胰腺组织光镜下病理评分较SO组显著升高(P<0.01);ROSI组各时间点上述指标较SAP组降低(P<0.05),但较SO组增高(P<0.05).结论 SAP时胰腺组织STAT1活化;罗格列酮对SAP大鼠具有保护作用,其机制可能是通过抑制Janus激酶-信号转导与转录激活因子通路来抑制其下游炎性介质的产生.     

丙酮酸乙酯对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜HMGB1表达的影响

目的探讨丙酮酸乙酯（EP）对大鼠重症急性胰腺炎（SAP）肠组织中高迁移率族蛋白B1（HMGBl）表达的影响，以期为SAP的治疗提供思路。方法雄性Wistar大鼠90只随机分为3组：A组为SAP组；B组为SAP＋EP处理组（EP组）；C组假手术对照组（对照组）。3组动物于术后3，6，12，24，48h取材。测定血淀粉酶（AMY）、D-乳酸、肠组织丙二醛（MDA）含量。通过光学显微镜观察肠组织病理变化及免疫组织化学法观察HMGBl在肠组织中的表达。Western-blot法进行HMGBl检测。结果A，B组AMY和D-乳酸水平明显升高，但B组较A组显著降低（P〈0．05）。A组肠组织中MDA明显高于C组（P〈0．01），B组肠组织中MDA升高幅度较A组小（P〈0．05）。B组较A组肠组织病理损伤明显减轻。A组6h时肠组织HMGBl表达水平显著高于C组，于24h达峰值，且持续至48h（P〈0、01）。B组肠组织HMGBl表达水平均明显低于A组（P〈0．05）。结论SAP时，HMGBl可介导肠黏膜通透性增加。EP能显著抑制HMGBl的表达，改善肠黏膜屏障功能，对SAP肠黏膜损伤有明显的保护作用。     

重症急性胰腺炎早期体液代谢特点及机制

目的 探讨重症急性胰腺炎早期体液代谢的特点和机制.方法 取杂种犬23条分两组:轻症急性胰腺炎组(MAP组)8条和重症急性胰腺炎组(SAP组)5条,采用自身胆汁逆行主胰管注射法制模.制模后第1～5天每日补液,测定血浆Na+、K+、红细胞压积(HCT)、血浆醛固酮激素(ALD)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,记录总人量、总出量和体液隔离量.结果 SAP组K离子浓度变化不明显,Na离子浓度在制模后第1天升高,从第2天开始下降;SAP组在6 d实验过程中出量均小于入量,MAP组在第3天出量开始大于入量;SAP组体液隔离量在48 h和72 h持续增加,分别为(1341±373)ml和(1998±510)ml,与MAP组比较差异有统计学意义(P<0.05);SAP组制模后第1天血浆ALD水平和AngⅡ水平升高,与MAP组比较差异有统计学意义(P<0.05),在第2、3天有下降,但仍高于制模前水平.结论 SAP早期体液代谢紊乱主要集中在容量和浓度方面,表现为出量显著少于入量和体液隔离量持续增加;肾脏排出功能下降使其不能发挥体液调节作用可能是SAP体液代谢紊乱的中心环节.     

HMGB1 与claudin-1 在重症急性胰腺炎肠黏膜屏障损伤中的表达及意义

目的：探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）与claudin-1在重症急性胰腺炎（SAP）肠黏膜屏障损伤时的表达改变及意义。方法：将24只雄性Wistar大鼠随机均分为假手术组,SAP模型组（模型组）,SAP模型+HMGB1 抑制剂丙酮酸乙酯（EP）处理组（EP处理组）。SAP模型采用5%牛磺胆胆酸钠逆行胰管注射法,EP处理组于造模后2 h尾静脉注射EP溶液。各组大鼠于术后24 h处死,测定血浆淀粉酶（AMY）,内毒素（LPS）,血浆二胺氧化酶（DAO）水平;观察肠黏膜的病理学变化;免疫组织化学法观察肠黏膜claudin-1蛋白的表达;RT-PCR法检测肠组织HMGB1和claudin-1 mRNA的表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠血浆AMY,LPS和DAO水平均明显升高（均P<0.05）;小肠黏膜屏障受损,上皮细胞间紧密连接破坏;肠黏膜claudin-1蛋白表达降低,肠组织HMGB1 mRNA表达升高,claudin-1 mRNA的表达降低。与模型组比较,EP处理组肠组织HMGB1 mRNA表达降低,claudin-1蛋白与mRNA表达升高,各损伤指标均明显改善。结论：SAP肠黏膜屏障损伤可能与肠组织HMGB1表达升高,从而下调紧密连接蛋白claudin-1的表达有关;HMGB1抑制剂EP对SAP肠黏膜屏障损伤具有保护作用。

     

谷氨酰胺对重症急性胰腺炎大鼠肠道损伤影响的实验研究

目的通过建立实验性重症急性胰腺炎大鼠模型，谷氨酰胺灌胃，以期寻求谷氨酰胺在重症急性胰腺炎时的肠道保护作用及其分子机制。方法雄性SD大鼠90只，随机分为三组：假手术组、SAP组、谷氨酰胺治疗组。检测血浆D-乳酸OD值；免疫组化技术分析小肠组织ICAM-1的表达和肠黏膜细胞凋亡（TUNEL法）情况。结果SAP组在术后24h、48h和72h各点血浆D-乳酸OD值均明显高于OP组，同时也高于谷氨酰胺治疗组。造模后24h、48h和72h，SAP组肠组织血管内皮细胞ICAM-1表达光密度值与OP组相比明显增高。与谷氨酰胺治疗组相比，SAP组的ICAM-1的表达则有所下降。肠黏膜组织在SAP组发生细胞凋亡的数目与OP组相比明显增加。而谷氨酰胺治疗组与SAP组比较，细胞凋亡数目则有所降低。结论重症急性胰腺炎时肠黏膜屏障功能的损伤受多种因素的调节，而谷氨酰胺作为肠道的能源物质，对重症急性胰腺炎时肠黏膜屏障功能的破坏具有明显的保护作用。     

热休克蛋白27在大鼠急性胰腺炎中的表达及其对细胞间连接的影响

目的探讨热休克蛋白27(HSP27)在轻型急性胰腺炎(MAP)及重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型中的表达及其对腺泡细胞间连接的影响。方法雄性Wistar大鼠90只,随机分3组:A组为SAP组,B组为MAP组,C组为对照组。3组动物于成模后1,3,8h分批处死。检测血清淀粉酶(SAM),计算胰腺系数;Western-blot半定量分析HSP27蛋白和磷酸化蛋白含量;RT-PCR半定量分析HSP27 mRNA表达;透射电镜观察细胞间连接的变化。结果A,B组SAM水平升高,但B组明显低于A组(P<0.05);A组胰腺系数迅速升高并持续增长,间质水肿严重(P<0.05),细胞间连接损伤;B组间质水肿比A组轻(P<0.05),细胞连接比较稳定;A,B两组HSP27蛋白及其mRNA表达均显著高于对照组(P<0.05),B组明显高于A组(P<0.05);B组HSP27磷酸化蛋白(Ser78)含量显著高于对照组和A组(P<0.05),A组与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论细胞间连接破坏是急性胰腺炎的共同特征,但SAP损伤更严重,可能与细胞间连接调控因子HSP27及其磷酸化表达相对下降。提示HSP在AP发生、发展中具有重要作用。     

清胰颗粒对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的:探讨复方中药提取物清胰颗粒对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肠黏膜屏障的影响。方法:96只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、SAP组和清胰颗粒组。采用胆胰管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠建立SAP动物模型,假手术组以同样方法注射生理盐水,清胰颗粒组于造模前2h、造模后6h、18h、30h和42h分别给予清胰颗粒灌胃;SAP组仅给予安慰剂。各组大鼠分别于造模后6h、12h、24h、48h取腹主动脉血行淀粉酶和二胺氧化酶的检测,取胰腺和末端回肠组织行HE染色和病理学评分。结果:与SAP组比较,清胰颗粒组于造模后12h、24h和48h血清淀粉酶降低(P﹤0.05),于造模后24h和48h二胺氧化酶活性降低(P﹤0.05),胰腺和回肠末端病理学评分分别于造模后24h和48h降低有显著性差异(P﹤0.05)。结论:清胰颗粒能够减轻重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤,降低肠黏膜通透性,对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障具有保护作用。