中药双黄补对体外培养人牙周膜细胞增殖活性的影响

背景:目前的研究大多为单味中药或单一中药成分对体外培养人牙周膜细胞的影响,而中药组方提取液对体外培养细胞影响的研究较少.目的:观察中药双黄补对体外培养的人牙周膜细胞增殖活性的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-11/2009-02在河北医科大学第四医院科研中心完成.材料:人牙周膜细胞组织选自河北医科大学第四医院口腔科要求手术拔除的埋伏多生牙者.黄连、黄芩、骨碎补均购自河北医科大学第四医院中药房.方法:采用组织块法体外培养人牙周膜细胞.水提醇沉法制各双黄补提取液.以每1 Ml药液含生药1 g加入体积分数20%的胎牛血清培养液,稀释成质量浓度为10,25,50,100,150,200,250,500,750,1 000 mg/L,分别作用于体外培养的人牙周膜细胞,以不加双黄补提取液的培养细胞为对照.主要观察指标:采用四甲基偶氮唑蓝法测定培养细胞增殖活性的变化,应用流式细胞术检测100 mg/L的双黄补提取液对牙周膜细胞周期的变化和对成纤维细胞生长因子18水平的影响.结果:双黄补对人牙周膜细胞的增殖活性的影响存在质量浓度和时间效应,各质量浓度双黄补均能促进体外培养人牙周膜细胞的增殖活性,其中以100 mg/L质量浓度促增殖活性作用最明显(P<0.01),相同质量浓度不同作用时间对细胞促增殖活性作用也不同,以48 h作用最明显(P<0.05).与对照组相比,100 mg/L的双黄补促进牙周膜细胞成纤维细胞生长因子18水平增高,S期和G2M期细胞数目增多,在48 h最明显.结论:中药双黄补可增强人牙周膜细胞的增殖活性,具有明显的浓度效应和时间效应.     

中药骨碎补对人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞体外增殖的实验研究

目的探讨中药骨碎补对体外培养的人的牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞增殖的影响。方法采用组织块法外培养人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞,取第4、5代培养细胞随机分为实验组和对照组,实验组加不同浓度的骨碎补,对照组只加培养液。通过HE染色观察其对牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞的形态、结构及生长增殖的影响,通过MTT法和考马斯亮蓝法对实验组和对照组的细胞生长情况和总蛋白合成的检测。结果 1在10~1000μg/ml浓度范围内骨碎补对人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞均有促增殖作用(P0.05),尤以100μg/ml浓度最为明显(P0.01);2总蛋白测定结果显示在骨碎补浓度为10μg/ml时,对照组与其总蛋白含量差异无统计学意义(P0.05),实验组细胞总蛋白含量随骨碎补浓度增加高于对照组(P0.05),尤以500μg/ml骨碎补浓度组作用牙髓成纤维细胞最佳;而100μg/ml骨碎补浓度组作用牙龈、牙周膜成纤维细胞最显著。结论骨碎补在有效作用浓度范围内,其促增殖效应和总蛋白含量与骨碎补浓度呈剂量依赖关系,随着浓度的增加促增殖作用增强、总蛋白含量增加,浓度达到最大作用后,随着浓度增加作用反而呈现减弱趋势。     

胶原蛋白膜对人牙周膜细胞增殖能力量效分析的影响

目的:观察不同质量浓度胶原蛋白膜对人牙周膜细胞增殖能力的影响,寻求牙周组织工程中胶原蛋白膜载体的最佳浓度。方法:实验于2006-02/11在辽宁医学院实验中心完成。实验材料:选取因正畸需要拔除的新鲜第一前磨牙,患者知情同意并自愿捐献。实验分组:通过热烘干法制备胶原蛋白膜(胶原质量浓度分别为3,6,9g/L)。将细胞浓度为5×107L-1的第3～8代的人牙周膜细胞接种到3,6,9g/L胶原蛋白膜上,每种薄膜设立3个样本。分别将负载细胞的薄膜移至24孔板中,对照组为细胞直接接种于24孔板中。实验评估:①复合培养第7天对人牙周膜细胞进行细胞记数。②利用扫描电镜观察人牙周膜细胞在胶原蛋白膜上的生长情况。结果:①复合培养第7天人牙周膜细胞记数:随着培养时间的增长,3,6,9g/L胶原蛋白膜上的细胞数量逐渐增加[分别为(3.63±0.59)×104,(3.92±0.10)×104,(4.26±0.24)×104个],9g/L胶原蛋白膜上的细胞生长最旺盛,均高于对照组(2.51±0.11)×104个,4组之间比较差异均有显著性意义(t=3.263,17.099,11.611,P<0.05)。②扫描电镜下人牙周膜细胞在胶原蛋白膜上的生长情况:复合培养1周,胶原蛋白膜具有较好的多孔状结构;人牙周膜细胞伸出多个伪足样突起,紧密贴附在材料表面,细胞沿材料的孔隙边缘生长。结论:9g/L胶原蛋白膜最适合人牙周膜细胞生长增殖。     

肾间质纤维化大鼠肾脏细胞外基质成分变化与益气活血治法的影响

目的:观察益气活血法中药制剂对肾间质纤维化大鼠肾组织细胞外基质成分纤维连接蛋白、层粘连蛋白和胶原蛋白Ⅳ表达的影响,分析其抗肾间质纤维化的机制.方法:实验于2007-07/10在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成.①材料:Wister雄性大鼠30只随机分为模型组,中药大、中、小剂量组,西药组和假手术组6组,每组5只.益气活血法中药生黄芪15 g,当归10g,赤白芍10g,丹参30g,黄芩10 g,车前草15 g,牛膝15 g等经水提醇沉得4.4 kg/L生药提取液.②方法:假手术组手术但不结扎输尿管,其他5组制备单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型.手术前2 d开始灌胃给药:中药大、中、小剂量组分别给予益气活血中药提取液0.072,0.036,0.018 mL/(kg·d),给予福辛普利钠10 mg/(kg·d),模型组及假于术组给予相同体积的生理盐水,1次/d,连续2周.③评估:术后14 d处死大鼠,观察梗阻肾组织病理改变,免疫组化法检测肾组织纤维连接蛋白、层粘连蛋白和胶原蛋白Ⅳ的表达,通过医学病理图像分析系统对其积分吸光度进行统计学分析.结果:30只大鼠全部进入结果分析.①模型组层粘连蛋白、纤维连接蛋白和胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度高于假手术组(P<0.05).②中药小剂量组胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度低于模型组(P<0.05),层粘连蛋白和纤维连接蛋白积分吸光度与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05).③中药大、中剂量组和西药组层粘连蛋白、纤维连接蛋白和胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度均低于模型组(P<0.05),中药大、中剂量组胶原蛋白Ⅳ的积分吸光度低于西药组(P<0.05).结论:益气活血法可以通过下调层粘连蛋白,纤维连接蛋白和胶原蛋白Ⅳ在肾组织的表达,从而减少细胞外基质的过度聚集,抑制或延缓肾间质纤维化.     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙周膜细胞的作用

背景：碱性成纤维细胞生长因子是具有多功能的细胞生长因子,对来源于中胚层及神经外胚层的细胞有明显的促进增殖作用。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙周膜细胞的作用。方法：将第5代人牙周膜细胞,以1×108 L-1的浓度分别接种到96孔板,随机分成4组,分别加入含0,1,10,100μg/L的碱性成纤维细胞生长因子、体积分数为15%胎牛血清的α-MEM培养基进行培养。在第1,3,5,7天测定细胞的增殖情况,在第1,7天检测碱性磷酸酶活性。结果与结论：4组之间人牙周膜细胞增殖情况的差异有显著性意义（F=6.586,P=0.024）,随着碱性成纤维细胞生长因子质量浓度的增大,吸光度值均增大,其中100μg/L碱性成纤维细胞生长因子组的吸光度值均大于其他组（P 〈0.05）;碱性成纤维细胞生长因子各组的碱性磷酸酶活性均低于对照组（P=0.000）,浓度越大,活性越低（P 〈0.05）。结果显示碱性成纤维细胞生长因子在1-100μg/L范围内质量浓度越高,促进人牙周膜细胞增殖和抑制碱性磷酸酶活性的作用越强。     

不同浓度骨碎补提取液对体外培养人牙髓细胞增殖及超微结构的影响

背景:体外培养人牙髓细胞难度很大,国内外已有生长因子对体外培养牙髓细胞增殖分化作用的研究,而中药骨碎补对体外培养牙髓细胞的影响,经作者检索未见报道.目的:观察不同浓度骨碎补提取液对体外培养的人牙髓细胞增殖分化的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-03/2007-05在河北医科大学第四医院科研中心完成.材料:人牙髓细胞组织选自河北医科大学第四医院口腔科要求正畸治疗需拔除的健康阻生智齿着,取得所有供者对标本采集的知情同意.产地云南的骨碎补购自河北医科大学第四医院中药房.方法:采用组织块法体外培养人牙髓细胞.水提醇沉法提取骨碎补有效成分,以每1 mL药液含生药1 g加入积体分数为0.02的胎牛血清培养液,稀释成质量浓度为10,50,100,500,1 000 mg/L.分别以此培养液作用于体外培养的人牙髓细胞,以不加骨碎补提取液培养的细胞做对照.主要观察指标:①人牙髓细胞原代培养和来源鉴定.②四甲基偶氮唑盐法检测各质量浓度组骨碎补对人牙髓细胞增殖的作用.③免疫组织化学法观察各浓度组骨碎补对人牙髓细胞纤维连接蛋白的表达.④扫描电镜和透射电镜下观察骨碎补对人牙髓细胞超微结构的影响.结果:原代培养的人牙髓细胞呈梭形或多角形.各浓度骨碎补均对体外培养的人牙髓细胞有促增殖作用,其中以100 mg/L浓度组促增殖作用最明显,可诱导牙髓细胞合成、分泌纤维连接蛋白.电镜下实验组人牙髓细胞表面枝状嵴丰富,细胞周围可见细胞外基质,细胞浆内有丰富粗面内质网和游离的核糖体,核内常染色质均匀分散,异染色质少.结论:含1 00 mg/L骨碎补培养液对体外培养的人牙髓细胞有明显的促增殖作用.     

不同质量浓度釉基质蛋白培养人牙周膜细胞的生物活性

背景：大量研究证实釉基质蛋白可促进成骨细胞和成牙骨质细胞的再生,将其运用于牙周缺损治疗可达到接近生理性的牙周再生。
　　目的：观察不同质量浓度釉基质蛋白对人牙周膜细胞增生、分化和迁移的影响。
　　方法：取第3代人牙周膜细胞,以含不同质量浓度釉基质蛋白(0,12.5,25,50,100,250 mg/L)的无血清DMEM培养基培养。培养24 h后,采用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖,MTT法检测细胞活性;培养48 h后,检测细胞碱性磷酸酶活性及骨钙素分泌;待细胞融合为单层,去除细胞培养液,以移液管头将单层细胞制备出1 mm宽的细胞切口,持续24 h观察细胞融合情况。
　　结果与结论：当釉基质蛋白质量浓度在0-100 mg/L范围内,随着其质量浓度的升高,细胞增殖、活性、碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌均逐渐升高,以100 mg/L升高最明显;当釉基质蛋白质量浓度增至250 mg/L时,细胞增殖、活性、碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌均有所下降,但仍高于0 mg/L组。100 mg/L组在初始观察6 h时,创缘周围的细胞开始向中心生长,待培养12 h时,创缘两侧细胞开始融合,培养20 h后创缘两侧细胞融合完全创缘完全关闭完全,创面愈合优于其他质量浓度组。结果表明釉基质蛋白具有促进牙周膜细胞增殖、分化与迁移的能力。     

虎杖苷对成纤维细胞生物学特性的影响☆

背景:虎杖多年来一直是烧伤、创伤创面愈合治疗方剂中的一味主药,因成分复杂,具体药理作用难以进一步研究,对于虎杖苷促愈合作用目前未见文献报道. 目的:分析不同浓度虎杖苷对成纤维细胞生物学特性的影响. 方法:取烧伤后行瘢痕切除植皮4例患者剩余小中厚皮片,原代培养人成纤维细胞.用含有10-6,10-5,10-4,10-3,10-2 mol/L不同浓度虎杖苷培养液作用第2代人成纤维细胞,未加虎杖苷的培养液作为对照.MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;ELISA法检测上清中纤维结合蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的表达情况. 结果与结论:10-5、10-4 mol/L组促进成纤维细胞增殖最明显,10-2 mol/L组吸光度值显著下降,细胞生长受抑制.10-3 mol/L组G1期细胞大幅度下降,细胞有S期阻滞现象.10-2 mol/L组有明确的促凋亡作用.10-2 mol/L组上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白较其他各组显著增高(P <0.05);纤维结合蛋白较对照组显著增高(P <0.05),较其他各组有所下降(P <0.05).说明低浓度虎杖苷有促进成纤维细胞增殖、保护细胞免于凋亡及促进纤维结合蛋白的表达与合成分泌的作用,促进成纤维细胞增殖的最适浓度应为10-5~10-4 mol/L.     

缺血再灌注后心肌细胞凋亡及相关基因变化与不同剂量黄芩茎叶总黄酮的预处理效应

目的:黄芩茎叶总黄酮具有保护缺血再灌注心肌的作用,从细胞凋亡及相关基因的角度,观察黄岑茎叶总黄酮预处理对缺血再灌注大鼠心肌细胞的影响。方法:实验于2006-02/2006-12在承德医学院解剖学研究室(院级实验室)完成。①实验分组及方法:选择雄性Wistar大鼠40只,按随机数字表法分为5组(n=8),即黄岑茎叶总黄酮0.05g/(kg·d),0.1g/(kg·d),0.2g/(kg·d)组、缺血再灌注组和假手术组,分别于术前1周灌服黄岑茎叶总黄酮和等量生理盐水。假手术对照组只穿线不结扎,其余各组结扎大鼠左冠状动脉前降支40min,再灌注1h。②实验评估:实验结束后快速取大鼠心脏,石蜡切片,采用DNA末端标记技术观察心肌细胞凋亡指数;应用免疫组化抗生物素-生物素-过氧化物酶法检测Bcl-2,Bax基因蛋白反应强度。结果:40只大鼠全部进入结果分析。①与假手术组相比,缺血再灌注组、各黄岑茎叶总黄酮剂量组大鼠心肌细胞凋亡指数、Bcl-2和Bax表达均显著增高(P<0.01)。②与缺血再灌注组相比,各黄岑茎叶总黄酮剂量组凋亡指数和Bax基因表达降低(P<0.05￣0.01),黄岑茎叶总黄酮0.1,0.2g/(kg·d)组Bcl-2表达增高(P<0.05)。③黄岑茎叶总黄酮0.1,0.2g/(kg·d)组凋亡指数和Bax基因表达低于黄岑茎叶总黄酮0.05g/(kg·d)组(P<0.05),Bcl-2表达高于黄岑茎叶总黄酮0.05g/(kg·d)组(P<0.05),黄岑茎叶总黄酮0.1,0.2g/(kg·d)组差异无显著性意义(P>0.05)。结论:黄岑茎叶总黄酮预处理可能通过抑制心肌细胞凋亡,下调Bax基因蛋白表达,上调Bcl-2基因蛋白表达来保护缺血再灌注心肌细胞,不同剂量的黄岑茎叶总黄酮阻抑心肌细胞凋亡具有一定的剂量依赖效应。     

人血管平滑肌细胞PGC-1/NRF-1/mtTFA的表达

背景:血管平滑肌细胞由收缩型向合成型的转变过程中线粒体可能参与了这个复杂的过程.目的:拟观察线粒体功能相关的PGC-1/NRF-1/mtTFA通路在人血管平滑肌细胞增殖中的作用.设计、时间及地点:分组设计,对比观察,于2007-01在中国医科大学附属一院中心实验室完成.材料:氧化型低密度脂蛋自由中科院协和研究所提供;叠氮钠由国药集团化学试剂有限公司沈阳分公司提供;人脐动脉平滑肌细胞由中美科技有限公司提供.方法:实验分为4组,对照组予以正常培养基;氧化型低密度脂蛋白组常规培养基中加入氧化型低密度脂蛋白使其终浓度达到10 mg/L作用24 h;PGC-1反义组在氧化型低密度脂蛋白组干预措施的基础上,将细胞以1×108L-1的密度接种于6孔板上,并将配置好的反义PGC-1寡核苷酸脂质体复合物70 μ L加入各孔,6 h后补充小牛血清和培养基;叠氮钠组在氧化型低密度脂蛋白组干预措施的基础上,培养基中加入叠氮钠使其终浓度达到32 mmol/L作用24 h.主要观察指标:蛋白免疫印迹检测各组干预后培养细胞中PGC-1、NRF-1和mtTFA蛋白表达.观察各组干预完成后线粒体功能改变.四甲基偶氮唑盐比色法检测各组细胞活性.结果:与对照组相比,氧化型低密度脂蛋白组PGC-1、NRF、mtTFA蛋白表达、线粒体细胞色素C氧化酶酶活性及细胞增殖活性均增加(P<0.05).与氧化型低密度脂蛋白组相比,PGC-1反义组PGC-1、NRF-1和mtTFA的蛋白表达减少、线粒体细胞色素C氧化酶酶活性及细胞增殖活性均下降(P<0.05);叠氮钠组PGC-1、NRF、mtTFA蛋白表达及细胞色素C氧化酶酶活性降低(P<0.05);细胞增殖受到抑制(P<0.05).结论:PGC-1/NRF/mtTFA信号传导途径在人血管平滑肌细胞增生过程中通过改变线粒体功能影响细胞的生长状态.     

骨碎补总黄酮可促进兔骨髓间充质干细胞的增殖和分化

背景：骨碎补促进骨损伤愈合疗效确切,但具体作用机制尚不清楚。目的：观察骨碎补总黄酮对兔骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响。方法：冲洗兔股骨和胫骨骨髓腔获取骨髓,采用密度梯度离心法联合贴壁培养法体外纯化扩增兔骨髓间充质干细胞;以四甲基偶氮唑蓝法测定不同浓度骨碎总黄酮对兔骨髓间充质干细胞增殖的影响;经骨碎补总黄酮体外诱导后,行扫描电镜形态学观察,碱性磷酸酶染色、茜素红染色和VonKossa银染色了解细胞钙化情况。结果与结论：兔骨髓间充质干细胞可以通过密度梯度离心法联合贴壁培养法扩增和纯化;含骨碎补总黄酮血清培养后,四甲基偶氮唑蓝测定结果显示,骨碎补总黄酮浓度为10-6mmol/L时可明显促进兔骨髓间充质干细胞增殖。经骨碎补总黄酮诱导液诱导,扫描电镜下可见成骨细胞样形态和钙结节形成;细胞碱性磷酸酶染色、钙结节茜素红染色和VonKossa银染色均呈阳性,提示骨碎补总黄酮可促进兔骨髓间充质干细胞增殖和分化。     

骨碎补总黄酮可促进兔骨髓间充质干细胞的增殖和分化

背景:骨碎补促进骨损伤愈合疗效确切,但具体作用机制尚不清楚。目的:观察骨碎补总黄酮对兔骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响。方法:冲洗兔股骨和胫骨骨髓腔获取骨髓,采用密度梯度离心法联合贴壁培养法体外纯化扩增兔骨髓间充质干细胞;以四甲基偶氮唑蓝法测定不同浓度骨碎总黄酮对兔骨髓间充质干细胞增殖的影响;经骨碎补总黄酮体外诱导后,行扫描电镜形态学观察,碱性磷酸酶染色、茜素红染色和VonKossa银染色了解细胞钙化情况。结果与结论:兔骨髓间充质干细胞可以通过密度梯度离心法联合贴壁培养法扩增和纯化;含骨碎补总黄酮血清培养后,四甲基偶氮唑蓝测定结果显示,骨碎补总黄酮浓度为10-6mmol/L时可明显促进兔骨髓间充质干细胞增殖。经骨碎补总黄酮诱导液诱导,扫描电镜下可见成骨细胞样形态和钙结节形成;细胞碱性磷酸酶染色、钙结节茜素红染色和VonKossa银染色均呈阳性,提示骨碎补总黄酮可促进兔骨髓间充质干细胞增殖和分化。     

补肾中药有效成分对大鼠骨损伤愈合及血液流变学的影响

背景:补肾中药为骨伤科常用药,但对不同有效成分用于骨愈合的比较研究尚缺乏.目的:观察不同补肾中药有效成分对骨损伤大鼠骨愈合及血液流变学的影响.方法:建立大鼠股骨干骨折模型并分别用提取的骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮、柚皮甙、槲皮素,以及橙皮甙对造模大鼠进行灌胃治疗.21 d 后取血及骨标本,检测大鼠骨愈合程度和血液流变学指标.结果与结论:不同补肾中药有效成分均对骨愈合有益,且骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮效果优于其他4 种药物.骨碎补总黄酮和淫羊藿总黄酮可有效抑制低剪切速下大鼠的血液黏度,降低红细胞聚集指数及血小板聚集性和黏附性(P < 0.05),但对红细胞变形性无显著作用.说明补肾中药有效成分可促进骨损伤的愈合,且对血液流变学有一定作用,以骨碎补总黄酮效果最佳.     

补肾中药有效成分对大鼠骨损伤愈合及血液流变学的影响

背景：补肾中药为骨伤科常用药,但对不同有效成分用于骨愈合的比较研究尚缺乏。目的：观察不同补肾中药有效成分对骨损伤大鼠骨愈合及血液流变学的影响。方法：建立大鼠股骨干骨折模型并分别用提取的骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮、柚皮甙、槲皮素,以及橙皮甙对造模大鼠进行灌胃治疗。21d后取血及骨标本,检测大鼠骨愈合程度和血液流变学指标。结果与结论：不同补肾中药有效成分均对骨愈合有益,且骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮效果优于其他4种药物。骨碎补总黄酮和淫羊藿总黄酮可有效抑制低剪切速下大鼠的血液黏度,降低红细胞聚集指数及血小板聚集性和黏附性（P〈0.05）,但对红细胞变形性无显著作用。说明补肾中药有效成分可促进骨损伤的愈合,且对血液流变学有一定作用,以骨碎补总黄酮效果最佳。     

肾母细胞瘤过度表达基因促进人神经干细胞增殖和向神经元分化的实验观察

背景肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)编码的NOV蛋白是一种胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)结合蛋白,它对人神经干细胞的增殖和分化有什么影响作用呢?目的探讨NOV蛋白对人神经干细胞(HNSCs)增殖和分化的影响.设计以细胞为研究对象,单因素方差分析实验研究.单位一所军医大学组织学与胚胎学教研室和神经生物学教研室.材料实验在解放军第三军医大学组织学与胚胎学教研室完成.对象为10～14周人胚大脑皮质培养的HNSCs.干预NOV基因重组质粒转染COS-7细胞,收集COS-7细胞和NOV基因修饰COS-7细胞的条件培养液(COS-CM和NOV-CM),作用于培养的HNSCs.主要观察指标3H-TdR掺入液闪检测HNSCs的增殖,免疫细胞化学和流式细胞仪检测HNSCs的分化.结果COS-CM和NOV-CM均能明显促进HNSCs对3H-TdR的摄入,其中NOV-CM组的1/min比COS-CM组要高(P＜0.05),说明NOV-CM中含有促进HNSCs增殖的成分,另外NOV-CM的促细胞增殖作用具有一定的量效关系;免疫细胞化学和流式细胞仪结果显示,在NOV-CM组内有较多的NF-200阳性细胞,在对照组和COS-CM组可见到大量GFAP阳性细胞.结论NOV蛋白可能具有促进HNSCs增殖和向神经元分化的作用.     

人牙周膜成纤维细胞生物学行为的研究

目的观察精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸 (RGDS)对人牙周膜成纤维细胞 (PDL)生物学行为的影响,探讨 RGDS的作用机制及其应用于牙周治疗的可行性.方法采用细胞培养、固相结合分析等方法,观察 RGDS对 PDL细胞的黏附、伸展以及增殖、 ALP的影响.结果 RGDS可促进 PDL的黏附、伸展,在浓度为 25～ 100 mg/L时作用显著 (P< 0.01), 在浓度为 50～ 100 mg/L时可明显促进 PDL细胞增殖 (P< 0.05),浓度为 25～ 100 mg/L时显著提高 PDL细胞的 ALP活性 (P< 0.05).结论 RGDS对 PDL细胞的黏附、伸展、增殖及 ALP活性均有促进作用,且其促黏附、伸展的作用更为显著.     

Effects of ultrasound on the growth and function of bone and periodontal ligament cells in vitro

The effects of therapeutic ultrasound (US) on tissue healing processes in vivo are likely to involve US-induced changes in key cellular functions. However, these have not yet been clearly delineated and the present study has, therefore, examined the effects of a single 5-min CW exposure of 3.00-MHz US on the growth and functional activity of a human osteoblast-like cell line (MG63 cells) and human periodontal ligament (PDL) cells in vitro. Although cell proliferation was found to be largely unaffected by spatial average intensity (I(SA)) values of between 140-990 mW/cm(2), flow cytometry (FCM) analysis showed that there were pronounced and differential effects on cell function. Thus, bone-associated proteins were down-regulated, whereas collagen type I (COL I) was unaffected and fibronectin (FN) was up-regulated at low intensities in MG63 cells. In contrast, bone protein expression was found to be dose-dependent, and FN and COL I were down-regulated in PDL cells. These results show that US has potentially important effects on the functional activities of connective tissue cells in vitro, which could markedly influence tissue repair and regeneration processes in vivo.     

丝蛋白应用于牙周组织工程的可行性

背景:丝蛋白是有利于表皮细胞、成纤维细胞、成骨细胞、血管内皮细胞、胶质细胞黏附和生长的一种新型生物材料。目的:评估丝蛋白作为支架材料应用于牙周组织工程的可行性。方法:采用组织块法培养人牙周膜细胞,将第5代细胞悬液以2×107L-1的浓度接种到丝蛋白支架材料上复合培养,并以1%,10%,50%,100%的丝蛋白支架浸提液培养,观察人牙周膜细胞在丝蛋白上及在丝蛋白浸提液中生长状况,用MTT法测定浸提液培养人牙周膜细胞的活力。结果与结论:扫描电镜可见人牙周膜细胞在丝蛋白支架上伸展充分,生长旺盛,不同浓度丝蛋白支架浸提液培养对人牙周膜细胞的增殖与碱性磷酸酶活性均无影响。说明丝蛋白材料具有良好的生物相容性、独特的力学性能,可作为人牙周膜细胞黏附生长的理想支架材料较好地应用于牙周组织工程中。