复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠模型滑膜细胞分泌及肿瘤坏死因子的影响

目的 研究复方丹参Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节模型（CIA）关节功能及滑膜细胞分泌前列腺素E2（PGE2）及肿瘤坏死因子（TNF）的影响。方法 采用消化分离的方法获得滑膜细胞,放免法测原代大鼠滑膜细胞培养上清液中PGE2及TNF的水平。结果 复方丹参可以明显下调CIA大鼠滑膜细胞分泌PGE2及TNF的水平,改善其关节活动功能。结论 复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞分泌PGE2及TNF的水平有关。     

复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎大鼠滑膜细胞白介素-6mRNA表达的影响

目的研究复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型(CIA)滑膜细胞白介素-6mRNA(IL-6mRNA)表达的影响。方法用Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠关节炎模型,以逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)半定量法测定模型大鼠滑膜细胞IL-6mRNA的表达,以及复方丹参对其的影响。结果复方丹参可以明显下调CIA大鼠滑膜细胞IL-6mRNA表达的水平。结论复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL-6mRNA的表达水平有关。     

复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎大鼠滑膜细胞白介素—6mRNA表达的影响

目的：研究复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎模型（CIA）滑膜细胞白介素－6mRNA（IL－6mRNA）表达的影响。方法：用Ⅱ型胶原蛋白诱导大关节类型，以逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）半定量法测定模型滑膜细胞IL－6mRNA的表达，以及复方丹参对其的影响。结果：复方丹参可以明显下降CIA大鼠滑膜细胞IL－6mRNA表达的水平。结论：复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL－6mRNA的表达水平有关。     

丹参对类风湿关节炎患者滑膜细胞肿瘤坏死因子α表达的影响

目的探讨丹参对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响。方法抽取RA患者关节液进行体外培养分离滑膜细胞,在细胞培养至3～5代时,给予丹参处理,在处理48h后收集培养上清,ELISA检测TNF-α的表达水平。结果当丹参浓度依次以0,6.25,12.5,25,50,100mg/L递增时,TNF-α浓度分别为（161.68±7.55）pg/ml、（161.68±8.79）pg/ml、（163.49±25.68）pg/ml、（137.33±35.98）pg/ml、（81.32±22.84）pg/ml和（86.89±28.48）pg/ml。丹参浓度为50mg/L和100mg/L时,与加入丹参前比较差异有统计学意义（P值分别为0.001和0.004）。结论丹参可以抑制RA滑膜细胞TNF-α的分泌,并且这一抑制作用可能是其用于RA治疗的理论基础。     

复方丹参注射液对CIA大鼠滑膜细胞凋亡及关节功能的影响

目的研究复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节模型(CIA)滑膜细胞凋亡的影响,恢复关节功能的机制.方法原位细胞凋亡检测试剂盒检测各组原代大鼠滑膜细胞凋亡的水平.结果复方丹参组CIA大鼠滑膜细胞的凋亡数明显增加,有利于受累关节功能的恢复.结论复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与诱导滑膜细胞凋亡有关.     

复方丹参注射液对关节炎模型大鼠滑膜细胞白细胞介素1βmRNA表达的影响

目的：研究复议丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型（CIA）滑膜细胞白细胞介素1β（IL-1β）mRNA表达的影响。方法：用Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠关节炎模型，以反转录-多聚酶链反应（RT-PCR）半定量法测定模型大鼠滑膜细胞IL-1βmRNA的表达。结果：氯化钠注射液组、地塞米松组、小剂量丹参组IL-1βmRNA的表达均高于大剂量丹参组，差异有非常显著性意义（P&;lt;0.01)。结论：复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL-1βmRNA的表达的水平有关。     

通痹灵对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠模型滑膜细胞凋亡的影响

目的研究通痹灵对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节模型(CIA)滑膜细胞凋亡的影响。方法原位细胞凋亡检测试剂盒检测各组原代大鼠滑膜细胞凋亡的水平。结果通痹灵组CIA大鼠滑膜细胞的凋亡数明显增加。结论通痹灵治疗类风湿性关节炎的机制可能与诱导滑膜细胞凋亡有关。     

复方丹参注射液对关节炎模型大鼠滑膜细胞白细胞介素1β mRNA表达的影响

目的研究复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型(CIA)滑膜细胞白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达的影响.方法用Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠关节炎模型,以反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)半定量法测定模型大鼠滑膜细胞IL-1βmRNA的表达.结果氯化钠注射液组、地塞米松组、小剂量丹参组IL-1βmRNA的表达均高于大剂量丹参组,差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL-1βmRNA表达的水平有关.     

通痹灵对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠模型润膜细胞凋亡的影响

目的：研究通痹灵对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节模型（CIA）滑膜细胞凋亡的影响。方法：原位细胞凋亡检测试剂盒检测各组原代大鼠滑膜细胞凋亡的水平。结果：通痹灵组CIA大鼠滑膜细胞的凋亡数明显增加。结论：通痹灵治疗类风湿性关节炎的机制可能与诱导滑膜细胞凋亡有关。     

胶原性关节炎大鼠血浆肿瘤坏死因子α和滑膜血管内皮生长因子表达的相关性

背景：类风湿关节炎的滑膜病变具有类肿瘤样生长的特点，表现为滑膜组织的肥厚增生，血管翳形成，对关节周围的组织产生侵蚀和破坏。在滑膜类肿瘤样病变的发展过程中有多种炎性因子和生长因子的参与，其中肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因舌对滑膜炎症的发展及滑膜血管翳的形成具有十分重要的作用。 目的：同步观察胶原性关节炎大鼠不同时间点的血浆肿瘤坏死因子α含量与滑膜血管内皮生长因子表达变化，探讨肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子在类风湿关节炎发病机制中的作用及其相关性。 设计：随机分组设计、动物实验。 单位：中南大学湘雅医院中西医结合研究所。 材料：实验于2003—07／1l在中西医结合研究所实验室完成。选择13龄45～50d的SD大鼠40只，随机分为正常对照组10只，胶原性关节炎模型组30只。 方法：采用10mg牛Ⅱ型胶原与5mL完全福氏佐剂研磨后，以每只100μL从大鼠尾根部皮内注射免疫，于2ld后按上述方法和剂量再次重复免疫制作大鼠胶原性关节炎模型。依据关节红肿程度和范围及关节肿大和变形情况进行关节炎指数积分评定，关节炎指数积分越高，关节炎症状越严重。正常对照组于25d断头取血，胶原性关节啖模型组于免疫（造模）后25，30，35，40，45d分别断头取血，采用放射免疫法检测胶原性关节炎大鼠不同时间点的血浆肿瘤坏死因子α含量，同时采用免疫组织化学法检测滑膜组织血管内皮生长因子的表达水平，观察其发病时间与滑膜新生血管形成、关节炎指数积分以及肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子之间关系。用直线相关分析法分析肿瘤坏死因子α与血管内皮生长因子之间的关系，用等级相关分析法分析关节炎指数积分与血管内皮生长因子及肿瘤坏死因子α之间的关系。 主要观察指标：胶原性关节炎发病时间与关节炎指数积分的关系，与血浆肿瘤坏死因子α含量及滑膜血管内皮生长因子表达的关系，胶原性关节炎大鼠血浆肿瘤坏死因子α与滑膜血管内皮生长因子表达相关分析。 结果：纳入动物40只，均进入结果分析。随着胶原性关节炎发病时间的延长，滑膜新生血管逐渐增多、滑膜增厚、关节炎指数积分逐渐增加、肿瘤坏死因子α含量和血管内皮生长因子水平也随之升高；其关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达水平呈正相关（r=０．535，P〈0．05），与肿瘤坏死因子α含量虽有相关增高趋势，但差异无显著性（r=０．37l，P〉0．05）。血浆肿瘤坏死因子α含量与血管内皮生长因子表达水平呈显著正相关（r=０．893，P〈0．01）。 结论：肿瘤坏死因子α与血管内皮生长因子在类风湿关节炎炎症反应，滑膜新生血管形成的细胞因子网络中起重要作用，二者相互可能具有影响，相互促进，充当恶性网络循环的调控作用；是介导类风湿关节炎发生和发展以及骨质侵蚀、致残的众多因子中的关键因子。     

青藤碱对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响

目的研究青藤碱对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节模型(CIA)滑膜细胞凋亡的影响。方法原位细胞凋亡检测试剂盒检测各组原代大鼠滑膜细胞凋亡的水平。结果青藤碱组CIA大鼠滑膜细胞的凋亡数明显增加。结论青藤碱治疗类风湿性关节炎的机制可能与诱导滑膜细胞凋亡有关。     

沙利度胺对类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞影响的体外研究

目的研究沙利度胺(Thalidomide)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维样细胞(FLS)体外培养时的增生殖分化特性的影响。方法关节镜、关节活检针取RA患者滑膜组织,分离培养和鉴定FLS,MTT法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察沙利度胺对FLS细胞存活分数(SF)和c-fos、COX-2mRNA表达。结果RA-FLS体外培养呈良性增生。沙利度胺对RA-FLS的SF值的抑制作用最强(P<0.05)。生理剂量的沙利度胺干预时的浓度与FLS的SF值呈负相关。RA-FLS的c-fos、环氧化酶2(COX-2)mRNA表达率高,加入沙利度胺共孵育3天后c-fos和COX-2mRNA的表达率均明显下降。结论培养和鉴定RA滑膜细胞,证实体外培养传代的RA-FLS为非恶性无限制增生。实验剂量下沙利度胺通过抑制c-fos、COX-2的表达、降低FLS增殖能力等不同途径,发挥对RA滑膜细胞的免疫调节作用。     

异种脐血干细胞对胶原诱导关节炎小鼠滑膜组织形态结构影响的研究

目的 探讨异种、异基因脐血干细胞(HMSCs)移植对小鼠Ⅱ型胶原性关节炎(CIA)滑膜组织病理学的影响.方法 (1)应用美国BD公司FAcscaliburTM型分选式细胞分析仪,进行脐血CD34+细胞分选.(2)弗氏完全佐剂+Ⅱ型胶原诱导CIA小鼠模型,随机分为正常对照组、模型组、单份HMSCs移植治疗组、双份HMSCs移植治疗组、甲氨喋呤治疗阳性对照组,每组10只小鼠.(3) 采用尾静脉注射,除模型组、正常对照组用生理盐水,单份、双份人脐血所含的CD34+ 细胞数均为2×105.(4)观察42 d不同分组小鼠的关节症状及进行关节炎指数测定.(5)移植后第42天全部处死动物取踝关节进行病理组织学检测,收集数据并作统计分析.结果 双份HMSCs移植优于单份HMSCs移植治疗组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 双份HMSCs 可作为一种新的替代细胞来源用于自身免疫性疾病的细胞移植治疗.     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子与微血管密度

背景：目前发现的促进血管增生活性最强的是血管内皮生长因子,其在类风湿关节炎滑膜细胞呈现强表达。 目的：观察对胶原诱导性关节炎大鼠不同时间点滑膜血管内皮生长因子表达和微血管计数的变化,探讨血管内皮生长因子和微血管在类风湿关节炎发病机制中的作用及其相关性。 方法：采用Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导 SD 大鼠实验性关节炎模型,采用免疫组织化学方法观察实验性关节炎大鼠不同时间点滑膜组织血管内皮生长因子的表达水平和新生血管计数,并同时观察发病时间与关节炎指数积分、血管内皮生长因子及滑膜新生血管数之间的关系。用直线相关分析法分析血管内皮生长因子表达与滑膜新生血管数之间的关系,用等级相关分析法分析关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达及滑膜新生血管数之间的关系。 结果与结论：随着实验性关节炎发病时间的延长,滑膜新生血管逐渐增多,滑膜增厚,关节炎指数积分逐渐增加,血管内皮生长因子表达水平和微血管数也随之升高;其关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达水平呈正相关关系（r=0.535、P 〈0.05）,血管内皮生长因子表达水平与微血管计数呈显著正相关关系（r=0.860, P〈0.01）。血管内皮生长因子参与了实验性关节炎大鼠滑膜血管翳的形成过程,血管内皮生长因子与微血管密度在类风湿关节炎的发病中具有重要意义。     

低浓度硫化氢对类风湿性关节病变的软骨保护

背景：类风湿性关节炎是一种常见的慢性系统性自身免疫疾病,以关节滑膜病变、骨质侵蚀为主要特征,临床上的治疗仍然比较棘手。目的：探讨外源性硫化氢对类风湿性关节炎大鼠关节病变的影响。方法：将SD大鼠分为4组：空白组、模型组、高浓度硫化氢干预组、低浓度硫化氢干预组。干预2,4周时,测量关节炎指数,血清炎症因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β水平,滑膜组织病理学变化,膝关节标本Ⅱ型胶原染色的平均吸光度值。结果与结论：从关节炎指数,血清炎症因子水平以及滑膜染色炎性浸润方面看,模型组以及硫化氢干预组均高于空白组,高浓度硫化氢干预组明显高于模型组（P＜0.05）,低浓度硫化氢干预组低于模型组（P ＜0.05）。在膝关节软骨Ⅱ型胶原染色的平均吸光度值方面,模型组以及2个硫化氢干预组均低于空白组,高浓度硫化氢干预组明显低于模型组（P＜0.05）,低浓度硫化氢干预组高于模型组（P ＜0.05）。结果可见硫化氢对类风湿关节炎症有调节作用,高浓度的硫化氢加重关节炎症及软骨降解,低浓度的硫化氢减轻关节炎症并对软骨有保护作用。     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜和胸腺Fas、FasL、Bcl-2的影响

目的:观察新风胶囊(XFC)治疗佐剂性关节炎(AA)模型大鼠的疗效及对滑膜和胸腺Fas、FasL、Bcl-2的影响.方法:采用弗氏完全佐剂制备AA模型,设立正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤(MTX)对照组、雷公藤(TPT)对照组和XFC治疗组;记录各组大鼠的足跖肿胀度、关节炎指数(AI);以免疫组织化学(组化)法检测各组大鼠滑膜和胸腺的Fas、FasL、Bcl-2的表达情况.结果:XFC可抑制模型大鼠的足跖肿胀程度,降低AI(P均<0.01).模型对照组大鼠滑膜及胸腺组织中Fas、Bcl-2表达均增加,FasL均无明显表达;与模型对照组比较,XFC治疗组滑膜及胸腺组织中FasL表达增加,Bcl-2表达减少.结论:XFC可以抑制模型大鼠足跖肿胀度,降低AI,促进滑膜和胸腺细胞凋亡,抑制滑膜组织增生及抑制自身免疫反应可能是XFC治疗类风湿性关节炎的部分作用机制.     

Systematic Review of Tumor Necrosis Factor Inhibitor Discontinuation Studies in Rheumatoid Arthritis

Background

Anti–tumor necrosis factor agents (anti-TNFs) have changed the course of rheumatoid arthritis (RA) for more than a decade. Use of these medications often results in remission, or at least low disease activity (LDA), but at a substantial cost. It has been postulated that discontinuation of these medications among patients with RA in remission or LDA may be possible without an associated increase in RA disease activity.

Objective

The goal of this systematic literature review was to summarize published articles regarding discontinuation of anti-TNFs in patients with RA.

Methods

A systematic literature review was conducted to identify English-language articles indexed in PubMed from July 1999 through June 2013 reporting results regarding anti-TNF discontinuation in patients with RA. Study designs included observational longitudinal studies and clinical trials. Outcomes had to include 1 of the following: time to flare after anti-TNF discontinuation, failure to remain in remission, or proportion of patients in LDA or remission at the end of the study.

Results

Ten studies examined discontinuation of anti-TNF therapies in RA. Inclusion criteria varied significantly across studies in terms of disease activity status (remission or LDA) and duration of this disease status (1 year or 1 month) before discontinuation being attempted. Results from larger studies (eg, >100 patients) suggest that the proportion of patients who discontinued anti-TNF and did not have an increase in disease activity ranged from 24% to 81%. In 3 studies that evaluated durability of LDA or remission after anti-TNF discontinuation, the mean time to relapse varied from 15 weeks to 17 months. In studies that analyzed radiographic data, once therapies were reinitiated after an increase in disease activity was detected, patients generally did not experience progression in structural damage.

Conclusions

Discontinuation of anti-TNF therapy is achievable for many RA patients who start in clinical remission or LDA. However, heterogeneous inclusion criteria and highly variable outcome definitions across studies make it difficult to efficiently summarize the literature on this topic or to conduct a meta-analysis. There is a lack of evidence regarding how to best predict which patients have the greatest likelihood of continuing to do well after discontinuation of anti-TNF therapy.