EMMPRIN/CD147对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞合成基质金属蛋白酶的刺激作用

目的 观察细胞外基质金属蛋白酶诱导剂（EMMPRIN／CD147）对类风湿关节炎（RA）患者滑膜成纤维细胞（FLS）合成基质金属蛋白酶（MMPs）的作用。方法 手术切除的RA患者的滑膜组织，分离成FLS，传代培养。明胶酶谱法测FLS的MMPs含量将FLS与高表达EMMPRIN／CD147的单核细胞株（THP）-1共培养，观察THP-1细胞对FLS MMPs表达量的影响，同时观察EMMPRIN／CD147拮抗肽激活蛋白（AP）-9对FLS MMPs表达的影响。结果 THP-1细胞表达高水平的CD147，而MMP-2、MMP-9的表达水平很低；分离的FLS表达低水平的CD147和一定水平的MMP-2、MMP-9。二者混合培养后，FLS表达MMP-2、MMP-9水平显著升高，随着THP-1细胞数的增加，MMP-2、MMP-9的合成量也增加THP-1对FLS合成MMP-2、MMP-9的刺激作用可被CD147拮抗肽AP-9所抑制。结论 CD147对RA患者FLS合成MMP-2、MMP-9有刺激作用，而这种刺激作用呵被CD147拮抗肽AP-9所抑制。     

类风湿关节炎外周血与滑液细胞CD147分子表达的研究

目的　为了探讨关节内CD14 7表达细胞的来源与类风湿关节炎 (RA)的关系 ,研究CD14 7分子在RA患者及正常健康人外周血与滑液细胞中的表达水平。方法　取 10例活动期RA患者用药治疗前后外周血、治疗前滑液及 10名正常健康对照外周血 ,外周血和滑液分离后细胞悬液采用双色免疫荧光标记 ,流式细胞术测量淋巴细胞 (CD3+ T)、CD14 + 单核细胞和中性粒细胞表达CD14 7阳性率及表达荧光强度水平。结果　①与正常对照相比 ,RA患者外周血CD3+ T淋巴细胞与CD14 + 单核细胞的表面CD14 7表达强度较高 (P <0 0 1) ,而其表达率比较差异无显著性。中性粒细胞表面CD14 7的表达率与表达强度与正常人相比差异均无显著性 ;②正常对照外周血细胞膜表面CD14 7的分子的表达在IFN γ刺激后有显著增多 ,而RA患者在刺激前后差异无显著性 ;③关节滑液中淋巴细胞、单核细胞与中性粒细胞上的CD14 7表达强度均比外周血细胞表达高 ,且淋巴细胞的表达率较高。结论　CD14 7在RA中各种炎细胞上均有较高表达 ,提示其在RA的病理损伤中起到重要作用。     

类风湿关节炎滑膜组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的研究

目的研究类风湿关节炎(RA)患者滑膜组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMM-PRIN)的表达,探讨其在RA致病中的作用。方法对20例RA患者膝关节滑膜组织标本采用免疫组织化学染色和半定量反转录-聚合酶联反应(RT-PCR)法,观察RA滑膜组织中EMMPRIN的蛋白及mRNA表达。10例骨关节炎OA滑膜作为对照。结果RA滑膜内衬层的单核细胞、成纤维细胞中EMMPRIN阳性表达广泛,RA组EMMPRIN的免疫反应明显强于对照组(P<0.01)。14例RA、2例OA滑膜标本EMM-PRINmRNA表达阳性,EMMPRINmRNA表达水平RA也明显高于OA组。结论滑膜中过度表达的EMMPRIN通过上调MMPs促进关节软骨的破坏。因此选择性地抑制EMMPRIN生物活性,可能是治疗RA的新途径。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制物在慢性肝炎和肝硬化肝组织中的表达

为进一步探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-2组织抑制因子（TIMP-2）在肝纤维化发生，发展过程中的作用，用免疫组织化学方法检测慢性肝炎和肝硬化肝组织中MMP-2和TIMP-2的表达及分布状态，并作定位及半定量分析。     

基质金属蛋白酶9在大肠癌中表达的研究

目的 探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）在大肠癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测216例大肠癌组织中MMP-9的表达。结果 216例大肠癌组织MMP-9阳性表达率为76．9％（166／216），高表达率为65．3％（141／216）。MMP-9高表达与大肠癌的分化程度、Dukes分期、生存期、淋巴结转移和器官转移密切相关（P〈0．05或0．01）。结论 MMP-9高表达在大肠癌的侵袭和转移中发挥重要作用。     

核因子κB在类风湿关节炎滑膜组织中的表达与意义

目的检测核因子κB(NF-κB)及白细胞介素(IL)-1β、基质金属蛋白酶(MMP)-9在类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)及正常滑膜组织中的表达差异。方法反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测46例滑膜组织(RA17例,OA24例,正常5例)中p65、p50、NF-κB抑制因子(IκB)及IL-1β、MMP-9的mRNA水平。免疫组织化学检测39例滑膜组织(RA14例,OA21例,正常4例)中p65的表达情况。对8例RA、6例OA滑膜组织进行滑膜细胞培养,提取核蛋白进行免疫印迹,检测p65含量。结果RA组p65、IL-1β、MMP-9的mRNA水平显著高于正常对照组(分别为P<0.05、P<0.01、P<0.05),与OA组比较差异无显著性。RA、OA与正常组之间p50、IκB的mRNA水平差异无显著性。NF-κBp65免疫组织化学染色组显示RA滑膜衬里层细胞、衬里下层浸润的炎症细胞、血管内皮细胞均有着色。RA组NF-κB活性系数显著高于OA组、正常对照组(P<0.001)。免疫印迹发现RA滑膜细胞核蛋白中p65含量显著高于OA组(P<0.05)。结论RA滑膜组织中NF-κB的表达与活化水平显著高于OA及正常滑膜组织。RA组IL-1β与MMP-9的mRNA水平显著高于正常对照。     

基质金属蛋白酶与类风湿性关节炎骨侵蚀关系的研究进展

类风湿性关节炎（RA）的发病机理尚不清楚,现在普遍认为是多基因和环境因素共同诱发病理性自身免疫性炎症反应,主要表现为破坏性多关节炎和不同的关节外炎症病变。研究发现炎性因子IL-1、IL-17、TNF-α、基质金属蛋白酶（MMPs）等在RA的关节破坏中发挥重要作用,本文就MMPs与RA骨侵蚀的研究进展进行综述。     

基质金属蛋白酶及组织金属蛋白酶抑制剂与类风湿性关节炎

基质金属蛋白酶(MMPs)是降解细胞外基质(ECM)的一种重要的蛋白酶,对类风湿性关节炎的发生、发展有重要作用.组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)是MMPs的天然抑制物,MMPs/TIMPs两者比例可作为反映疾病活动程度及预后的重要指标.     

CD147和基质金属蛋白酶-2在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理因素间的关系,探讨其与大肠癌侵袭和转移的相关性及二者间的相互联系.方法 应用免疫组织化学方法检测44例大肠癌患者癌组织、癌旁组织和正常对照组织中CD147和MMP-2的表达,以图象分析软件进行半定量分析.结果 大肠癌组织、癌旁组织和正常对照组织中CD147和MMP-2表达阳性率呈递减改变.CD147和MMP-2的表达部位和染色强度相似,半定量分析显示两者呈正相关(r=0.777,P＜0.05).两者的表达与大肠癌患者年龄、肿瘤分型、肿瘤分化程度未见相关性(P＜0.05),而在大肠癌患者伴转移组显著高于无转移组(P＜0.05).结论 CD147在大肠癌患者组织中的表达增高与大肠癌侵袭转移密切相关,其促MMP-2的激活和表达增高的作用可能是其中一个重要因素.     

基质金属蛋白酶类在颅内动脉瘤中的表达

目的检测基质金属蛋白酶类(MMPs)中MMP-2、MMP-9在颅内动脉瘤中的表达情况。方法取经DSA证实为颅内动脉瘤,并经显微神经外科手术夹闭动脉瘤的17例患者的17个动脉瘤的瘤壁组织为研究标本(动脉瘤组)。17个动脉瘤中,小动脉瘤10个,大动脉瘤7个;Hunt-HessⅠ～Ⅱ级的患者为11例,≥Ⅲ级的患者为6例。对照组为同期经CT及MRI证实为非血管性疾病的外伤患者,共15例,取其颞浅动脉组织为对照标本。经HE染色及免疫组化染色,检测动脉瘤的瘤壁组织和正常血管壁的组织结构变化及其中MMP-2、MMP-9的表达情况,计算阳性指数(PI)。结果①对照组的动脉壁各层MMP-2、MMP-9的阳性表达较低。动脉瘤组瘤壁组织的内膜、中膜、外膜有MMP-2、MMP-9的阳性表达。②动脉瘤组患者MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为88.2%和82.4%,高于对照组的6.7%和13.3%,差异有统计学意义,P<0.01。③小动脉瘤患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为5.1±2.2、5.1±4.2,大动脉瘤患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为4.6±2.4、4.1±2.3,差异均无统计学意义,P>0.05。④Hunt-HessⅠ～Ⅱ级患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为4.5±1.6、4.2±3.7,高于Ⅲ级患者的MMP-2和MMP-9的PI值(分别为5.7±3.1、5.7±3.1),差异均无统计学意义,P>0.05。⑤经Spearman相关分析,动脉瘤组MMP-2的PI值与MMP-9的PI值呈正相关,r=0.425,P<0.05。结论 MMP-2、MMP-9在动脉瘤的瘤壁组织中表达较高,其高表达可能促进了颅内动脉瘤的形成和破裂。     

细胞亲环素A通过CD147分子促进类风湿关节炎单核/巨噬细胞MMP-9的表达

目的观察类风湿关节炎（RA）滑液中存在的大量细胞亲环素A（CypA）是否可以上调RA滑液中细胞膜表面高表达CD147分子的单核／巨噬细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的表达及活性，并确定这一调节是否需要CDl47分子信号通路的参与。方法重组人CyPA（200ng／mL）刺激人单核细胞系THP-l细胞24h。进行实时定量RT-PCR及明胶酶谱分析MMP-2和MMP-9mRNA表达及酶活性的改变：加入抗CDl47拮抗肽AP-9阻断细胞膜分子CDl47的作用。临床收集10例确诊的活动期RA患者外周血及关节腔滑液，分离获得单核／巨噬细胞，观察CypA对其MMP-2和MMP-9表达的影响。结果CyPA增加分化前及分化后THP-1细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达和活性，而对MMP-2则无作用；环孢素A（CsA）及抗CDl47拮抗肽AP-9显著抑制THP-1细胞MMP-2和MMP-9 mRNA表达及其分泌和活性及阻断CypA的上调作用。CyPA对RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达和活性具有促进作用。结论CypA通过CD147受体的参与，上调RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达及其活性，这一作用机制为RA发病机制及其治疗提供了新的理论基础。     

CD147在单核-巨噬细胞促进成纤维细胞分泌活化基质金属蛋白酶中的作用及意义

目的 探讨cD147在单核-巨噬细胞(THP-1)诱导成纤维细胞(HFC)分泌基质金属蛋白酶(MMPs)过程中的作用及其在类风湿关节炎(RA)发病机制中的意义。方法 通过建立THP-1与HFC体外共培养模型，采用流式细胞术、明胶酶谱电泳分析法和侵袭小室法，观察THP-1细胞表面CD147的表达、THP-1与HFC共培养前后上清中MMPs的分泌与活化水平、侵袭力的变化。结果 THP-1细胞表面CD147呈现高表达：共培养后MMPs的产生以及侵袭力均明显增强：CD147拮抗肽AP-9对共培养后明胶酶的产生以及侵袭力均有明显的抑制作用。结论 单核-巨噬细胞通过CD147促进成纤维细胞MMPs分泌活化水平的提高及侵袭力的增强。提示CD147可能成为导致RA受损关节软骨、骨基质降解的重要因素之一。     

脐带间充质干细胞对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响

目的探讨脐带间充质干细胞（UCMSCs）对 RA 滑膜成纤维细胞（FLSs）分泌 MMPs 的影响。方法 Wistar 大鼠制作胶原诱导关节炎（CIA）模型,第17天尾静脉输注1×106 UCMSCs,第42天处死大鼠后收集滑膜组织提取 RNA,实时荧光定量 PCR 检测滑膜组织 MMP-1、MMP-3、MMP-13的表达水平。取行膝关节置换术的 RA 和 OA 患者滑膜组织,分离培养 FLSs,比较 RA 与 OA FLSs 的 MMP-1、MMP-3和 MMP-13的表达水平。将 RA FLSs 与 UCMSCs 用 Transwell 小室共培养72 h,配对 t 检验比较共培养前后 FLSs 的 MMPs 表达水平变化及上清中 MMPs 含量,并检测 UCMSCs 在共培养过程中分泌的可溶性细胞因子水平。向培养体系中加入可溶性细胞因子的抑制剂后观察 FLSs 表达 MMPs 水平变化。2组间比较采用 t 检验,而3组及以上之间比较采用单因素方差分析。结果 CIA 大鼠滑膜组织较正常鼠高表达 MMP-1（6.9±5.4,1.3±1.4,P<0.05）、MMP-3（6.0±6.5,1.4±1.0,P<0.05）和 MMP-13（21.8±20.8,1.5±1.6, P<0.05）,UCMSCs 治疗后与未治疗组及成纤维细胞治疗组比较,滑膜组织 MMP-1（1.3±1.4,6.9±5.4,8.7±6.8,P<0.05）、MMP-3（1.4±1.5,6.0±6.5,6.0±5.7,P<0.05）和 MMP-13（3.0±3.2,22±21,22±26,P<0.05）均表达下调。 RA 患者 FLSs MMP-1（1.8±0.9,0.9±0.7,t=2.44,P<0.05）、MMP-3（2.6±1.7,1.1±1.0,t=2.25,P<0.05）和MMP-13（2.4±2.3,0.6±0.7,t=2.37,P<0.05）水平明显高于 OA 患者。经 UCMSCs 体外共培养后,MMP-13（1.3±1.2,0.9±1.2,t=3.63,P<0.05）水平下调,而 MMP-1（1.5±1.4,6.6±6.0,t=3.90,P<0.05）、MMP-3（7±17,22±35,t=2.86,P<0.05）上调。共培养后 UCMSCs 表达 IDO、肝细胞生长因子（HGF）和 IL-10等可溶性细胞因子水平明显增多。加入 IL-10抗体后 UCMSCs 抑制 MMP-13的能力减弱。结论 UCMSCs 通过分泌可溶性细胞因子 IL-10抑制 RA 滑膜组织 MMPs 分泌,从而改善关节炎病情。     

VEGF在类风湿关节炎滑液中的表达及上调MMP-2活性的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在类风湿关节炎(RA)患者关节滑液中的表达及其上调基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性在RA关节损伤机制中的意义。方法采用免疫印迹法、酶联免疫吸附试验、明胶酶谱电泳分析法及侵袭小室法,观察RA患者组及对照组关节滑液单个核细胞中VEGF及受体KDR的表达,单个核细胞上清液中VEGF的水平,VEGF与KDR阳性的单个核细胞体外共培养前后上清中MMP-2的活性及细胞侵袭力的变化。结果VEGF及KDR在滑液单个核细胞高表达；共培养后MMP-2的活性及细胞的侵袭力明显增强。结论VEGF与受体KDR结合促使RA滑液单个核细胞MMP-2活性上调及细胞侵袭力的增强,促进受损关节软骨及骨的降解破坏。     

英夫利西单抗对类风湿关节炎患者外周血单核细胞CD147表达的影响

目的 探讨抗肿瘤坏死因子-α人鼠嵌合单克隆抗体英夫利西单抗(infliximab)治疗前后类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞CD147表达的变化.方法 30例经甲氨蝶呤(MTX)治疗至少3个月病情仍处于活动期的RA患者按3:1:1比例由计算机程序产生随机分配方案分为A、B、C 3组,A组接受为期14周的英夫利西单抗(3 mg/kg)治疗;B组接受为期6周的英夫利两单抗(3 mg/kg)治疗;C组接受为期14周的安慰剂治疗.治疗期间继续口服原剂量的MTX.流式细胞术检测RA患者外周血CD14+单核细胞CD147平均荧光强度水平(MFI)变化,并观察其与临床相关指标的关系.数据采用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析、Spearman相关分析和Kruskal-Wallis秩和检验.结果 ①治疗前RA患者外周血CD14+单核细胞CD147 MFI为(101±25),健康志愿者为(78±18),差异有统计学意义(P=0.019).RA患者外周血CD147 MFI与病情活动指标DAS28(r=0.471,P=0.000)、红细胞沉降率(ESR)(r=0.371,P=0.000)、C反应蛋IQ(CRP)(r=0.249.P=0.010)、晨僵持续时间(r=279,P=0.010)呈正相关.②3组患者治疗后外周血CD14+单核细胞CD147 MFI均有下降,第18周与基线相比,A组平均改变差值(-26.9±21.7)、B组平均改变差值(-35.4±15.5)与C组平均改变差值(-10.0±6.0)相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 活动期RA患者外周血CD14+单核细胞CD147表达增高;与单用MTX相比,英夫利西单抗联合MTX治疗CD147 MFI表达下降更明显.     

胆管细胞癌细胞CD147表达及其临床意义*

目的 探讨CD147在肝胆管结石并发胆管细胞癌（ICC）组织的表达及其临床意义。方法 收集肝胆管结石并发ICC标本30例、对应的癌旁肝组织标本30例和正常肝标本10例。采用qRT-PCR法检测组织CD147 mRNA水平,采用免疫组化法检测CD147蛋白的表达;采用Western-Blotting法检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和9（MMP-9）蛋白的表达;采用肯德尔（Kendall）等级相关分析CD147 mRNA、CD147、MMP-2和MMP-9表达的相关性。结果 经qRT-PCR检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147mRNA水平为（3.67±1.88）,显著高于癌旁组织【（1.52±0.57）,P<0.01】和正常肝组织【（1.05±0.32）,P<0.01】,癌旁组织高于正常肝组织（P<0.01）;>5 cm ICC组织CD147 mRNA相对水平（2.73±0.97）显著高于<5 cm肿瘤组织【（1.03±0.32）,P<0.01】,有淋巴转移（2.68±0.74）组织显著高于无转移组织【（1.07±0.44）,P<0.01】,肿瘤分化程度低组织（2.71±0.86）显著高于中高分化组织【（1.06±0.42）,P<0.01】;不同年龄和性别患者ICC组织CD147 mRNA水平无显著性差异（P>0.05);经免疫组化检测显示,肝胆管结石并发ICC组织CD147蛋白表达相对水平为（27.95±4.90）,显著高于癌旁组织【（13.34±9.59）,P<0.01】和正常肝组织【（2.18±0.66）,P<0.01】,而癌旁组织高于正常肝组织（P<0.01）;ICC组织MMP2表达量为（1.06±0.13）,显著高于癌旁组织【（0.20±0.03）,P<0.01】和正常肝组织【（0.15±0.02）,P<0.01】,而癌旁组织MMP2表达量显著高于正常肝组织（P<0.01）;肝胆管结石并发ICC组织MMP9表达量为（0.93±0.12）,显著高于癌旁组织【（0.17±0.03）,P<0.01】和正常肝组织【（0.15±0.03）,P<0.01】,而癌旁组织MMP9表达量显著高于正常肝组织（P<0.01）;在ICC组织中,CD147mRNA水平与MMP2蛋白表达呈正相关（r=0.457,P<0.05）;CD147mRNA水平与MMP9蛋白表达也呈正相关（r=0.428,P<0.05）;CD147蛋白与MMP2蛋白表达呈正相关（r=0.543,P<0.05）,CD147蛋白与MMP9蛋白表达也呈正相关（r=0.517,P=0.05）。结论 CD147 mRNA、CD147、MMP2、MMP9均在肝胆管结石并发ICC组织中表达增强,CD147的表达可能促进了MMP2和MMP9的表达上调,它们可能共同参与了胆管癌的发生和发展过程。     

类风湿关节炎滑膜中促凋亡基因PDCD5的表达

目的 探讨类风湿关节炎(RA)发病机制中促凋亡基因PDCD5的表达与作用.方法 采用实时定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot方法来检测RA滑膜组织中PDCD5在mRNA和蛋白水平的表达,免疫组织化学检测PDCD5在滑膜内的表达特征,用骨关节炎(OA)患者滑膜标本作对照.结果 RA滑膜组织中PDCD5 mRNA的表达为1.3±0.9,与OA滑膜组织(4.3±2.7)相比低了约4倍(P＜0.05),二者之间的差异有统计学意义.Western blot检测结果表明与OA滑膜组织相比较,RA滑膜组织中PD-CD5蛋白水平的表达较低.免疫组织化学染色显示在RA滑膜组织与OA滑膜组织之间PDCD5蛋白有不同的表达特征,RA滑膜组织阳性染色强度明显弱于OA滑膜组织,其增生滑膜表现为分散的PDCD5阳性染色,主要集中在衬下层而不是衬里层,衬下层主要分布为成纤维样滑膜细胞,而在OA滑膜中PDCD5阳性染色主要集中在衬里层,衬下层PDCD5表达的细胞较少.结论 在RA滑膜细胞凋亡过程中PDCD5表现为下调,至少部分地减少了RA滑膜组织凋亡.