基于尿酸转运蛋白的四妙散改良方降尿酸作用及机理探讨

目的:研究四妙散改良方对大鼠高尿酸血症的防治作用及对肾脏尿酸盐阴离子转运体1(URAT1)、葡萄糖转运体9(GLUT9)以及有机阴离子转运体(OAT1)表达的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、别嘌醇阳性对照组及四妙散改良方低(6.5 g/kg)、中(13 g/kg)、高(26 g/kg)剂量组。以氧嗪酸钾联合腺嘌呤制备高尿酸大鼠模型,分别于造模前及给药14、28 d检测血尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)含量和黄嘌呤氧化酶(XOD)活性;给药28 d处死大鼠,检测肝脏XOD、XDH活性,Western blot法检测肾皮质URAT1、GLUT9、OAT1蛋白表达。结果:与正常对照组比较模型组大鼠血UA、Cr、BUN、XOD及肝脏XOD、XDH显著升高,肾脏URAT1、GLUT9蛋白高表达,OAT1蛋白低表达;四妙散改良方能剂量依赖性地降低高尿酸血症大鼠血清UA、Cr、BUN、XOD及肝脏XOD、XDH水平,降低肾脏URAT1、GLUT9蛋白表达,升高肾脏OAT1蛋白表达。结论:四妙散改良方具有明显的抗高尿酸血症作用,其降尿酸作用存在剂量依赖,机制可能与抑制尿酸合成关键酶XOD、XDH活性,抑制大鼠肾脏URAT1、GLUT9蛋白表达而减少尿酸的重吸收,上调肾脏OAT1蛋白表达而促进尿酸的分泌。     

虎桂药对组分配伍治疗高尿酸血症的作用及机制研究

目的:探究虎杖苷和桂皮醛单体配伍对高尿酸血症大鼠的降尿酸作用及机制。方法:采用氧嗪酸钾(200 mg/kg)皮下注射,次黄嘌呤(50 mg/kg)和乙胺丁醇(250 mg/kg)灌胃建立高尿酸血症大鼠模型。造模5 d后,筛选造模成功的大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、别嘌醇(30 mg/kg)组、苯溴马隆(10 mg/kg)组及虎杖苷-桂皮醛低、中、高剂量(虎杖苷-桂皮醛:0.4 mg/kg+0.45 mg/kg、0.8 mg/kg+0.9 mg/kg、1.6 mg/kg+1.8 mg/kg)组。给药3 w后,分别检测血清中尿酸(SUA)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;qPCR测定肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)和肾脏葡萄糖转运子(GLUT9)、尿酸盐转运子(URAT1)的mRNA表达;Western Blot测定肝脏XOD和肾脏GLUT9、URAT1蛋白表达;肾脏组织行HE染色观察各组病理学变化。结果:与模型组比较,虎杖苷-桂皮醛中、高剂量组大鼠SUA水平显著降低,肝脏ADA、XOD和肾脏GLUT9、URAT1 mRNA及蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01),肾组织病理学明显改善。虎杖苷-桂皮醛中剂量组血清BUN水平显著降低(P0.05)。结论:虎杖苷和桂皮醛单体配伍具有显著的降尿酸作用,其作用机制可能与抑制大鼠肝脏中ADA、XOD mRNA和XOD蛋白及肾脏中GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达有关。     

利清通方对高尿酸血症大鼠的降血尿酸作用及对尿酸生成限速酶与尿酸转运体的影响

目的 建立高尿酸血症大鼠模型,研究利清通方的降血尿酸作用及其机制。方法 将48只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌呤醇组、利清通低、中、高剂量组,采用氧嗪酸钾750 mg/(kg·d)灌胃建立高尿酸血症大鼠模型,以别嘌呤醇为阳性对照,观察利清通方对大鼠体质量的影响,利用比色法测定血尿酸(serum uric acid, SUA)、血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、血肌酐(serum creatinine, Scr)、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XOD)、腺苷脱氨酶(adenosine deaminase, ADA)含量,利用实时荧光PCR和蛋白免疫印迹法分别测定肾脏三磷酸腺苷结合转运蛋白2(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)、尿酸盐阴离子转运体1(recombinant urate transporter 1,URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9,GLUT9)的mRNA及蛋白表达。结果 (1)与空白组比较,模型组体质量降低(P&l...     

槲皮素治疗高尿酸血症的机制研究

目的探讨槲皮素降尿酸的作用及机制。方法利用CRISPR/Cas9技术敲除尿酸酶基因建造高尿酸血症小鼠模型,观察槲皮素对慢性高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿素氮、肌酐及肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响。试剂盒测定肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活力;实时荧光定量聚合酶链式反应qRT-PCR测定肾脏和肠道中尿酸转运体相关基因的mRNA表达。Western Bolt测定肾脏尿酸盐转运体GLUT9、URAT1与ABCG2蛋白的表达情况。结果高剂量槲皮素可显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,降低血清尿素氮和肌酐水平。显著抑制肝脏和肠道中GLUT9的表达,增加ABCG2蛋白的表达,对其他转运蛋白影响不大。结论槲皮素具有良好降尿酸作用,其机制可能与调节肾脏和肠道中的GLUT9和ABCG2表达有关。     

痛风宁对高尿酸血症模型大鼠肾脏尿酸盐转运体表达的影响

目的:通过观察痛风宁对高尿酸血症(HUA)模型大鼠肾脏尿酸盐转运体蛋白及mRNA表达的影响,探讨该方促进尿酸排泄的机制。方法:将80只SD大鼠随机分为空白组20只和造模组60只。造模组行腹腔注射氧嗪酸钾(OAPS)联合盐酸乙胺丁醇(EMB)灌胃造模,于第21天时鉴定模型,确定造模成功后将60只造模大鼠随机分为模型组、痛风宁组和苯溴马隆组,每组20只。痛风宁组和苯溴马隆组分别予15. 3 g·kg-1·d-1痛风宁药液及5. 2 mg·kg-1·d-1苯溴马隆混悬液灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水灌胃,于干预第14,21天分批采集大鼠尿液、血液、肾脏组织。采用酶比色法检测血尿酸(SUA),尿尿酸(UUA)含量,脲酶法检测血尿素氮(BUN)含量,肌氨酸氧化酶法检测血肌酐(CRE)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肾脏尿酸盐转运体蛋白和mRNA表达。结果:药物干预第14,21天,与空白组比较,模型组SUA,CRE,BUN升高,UUA显著降低(P0. 01),尿酸盐转运体1(URAT1),葡萄糖转运体9(GLUT9)蛋白与mRNA表达明显升高(P0. 05),三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2),有机阴离子1(OAT1),有机阴离子3(OAT3)蛋白与mRNA表达明显下降(P0. 05);与模型组比较,痛风宁组及苯溴马隆组SUA,CRE,BUN明显降低,UUA明显升高(P0. 05),URAT1,GLUT9蛋白与mRNA表达明显下降(P0. 05),ABCG2,OAT1,OAT3蛋白与mRNA表达明显升高(P0. 05),痛风宁组CRE,BUN明显降低(P0. 05,P0. 01),且明显优于苯溴马隆组(P0. 05);干预第21天痛风宁组,除BUN外,其余指标改善趋势均更明显。结论:腹腔注射OAPS联合EMB灌胃可致HUA,并伴有肾功能异常;痛风宁可促进尿酸排泄,降低血尿酸,并下调肾脏URAT1,GLUT9表达,上调ABCG2,OAT1,OAT3表达,这可能是其促进尿酸排泄而降尿酸的作用机制之一;痛风宁对肾功能具有一定的保护作用。     

水蛭素对高尿酸血症大鼠尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9表达的影响

目的 探究水蛭素对高尿酸血症大鼠的作用及机制。方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、别嘌醇（30 mg/kg）组和水蛭素低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g/kg）组。大鼠ig氧嗪酸钾（0.75 g/kg）,1次/d,连续5周,建立高尿酸血症模型;同时各给药组分别ig相应剂量的药物,1次/d,连续5周。采用生化法检测大鼠血清和尿液中的尿酸水平;免疫组化法测定肾组织中有机阴离子转运蛋白1（organic anion transporter 1,OAT1）水平;Western blotting法测定肾组织中葡萄糖转运体9（glucose transporter 9,GLUT9）、OAT1、尿酸盐转运体1（urate transporter 1,URAT1）蛋白表达;qRT-PCR检测肾组织中GLUT9、OAT1、URAT1 mRNA表达。结果 模型组大鼠血清和尿液中尿酸水平显著升高（P<0.01）,GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,OAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）;与模型组比较,水蛭素可显著降低大鼠血清和尿液中尿酸水平（P<0.01）,显著下调GLUT9、URAT1 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）,显著上调OAT1 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）。结论 水蛭素可通过调控高尿酸血症大鼠肾脏尿酸盐转运体OAT1、URAT1、GLUT9的表达,从而发挥降尿酸作用。     

痛风宁含药血清对尿酸诱导HK-2中尿酸盐转运体的影响

目的:从肾脏尿酸盐转运体角度探讨痛风宁降低血尿酸的机制。方法:将人肾小管上皮细胞(HK-2)随机分为正常组,模型组,痛风宁低、中、高剂量组(7. 65,15. 3,30. 6 g·kg-1),苯溴马隆组(50μmo1·L-1),分别予不同培养液进行干预。于干预24 h后收集HK-2及上清液,采用蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组HK-2中尿酸盐转运蛋白1(URAT1),葡萄糖转运体9(GLUT9),有机阴离子转运体1(OAT1),有机阴离子转运体3(OAT3)和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)蛋白及mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达显著升高(P 0. 01),ABCG2蛋白及mRNA表达显著下降(P 0. 01);与模型组比较,痛风宁各剂量组和苯溴马隆组URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达均明显下降(P 0. 01),且痛风宁各剂量组优于苯溴马隆组,痛风宁各剂量组ABCG2蛋白及mRNA表达显著升高(P 0. 01);与痛风宁中剂量组比较,痛风宁低、高剂量组URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达明显升高,ABCG2蛋白及mRNA表达明显下降(P 0. 01)。OAT1和OAT3蛋白及mRNA于各组均无表达。结论:痛风宁可通过下调HK-2中URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达,上调ABCG2蛋白及mRNA表达,调节肾小管对尿酸的重吸收和分泌,促进尿酸在肾脏的排泄,降低血尿酸水平。提示对肾脏尿酸转运体蛋白的调节可能是痛风宁发挥利湿排浊功效而降低血尿酸的具体机制之一,OAT1和OAT3蛋白及mRNA在体外培养的HK-2中无表达。     

虎杖对高尿酸血症大鼠肾小管尿酸转运蛋白表达的影响

目的:观察虎杖如何通过影响尿酸转运蛋白葡萄糖转运体9(GLUT9)mRNA、尿酸盐转运体1(URAT1)mRNA和有机阴离子转运体3(OAT3)mRNA表达来起到降尿酸作用。方法:制造高尿酸血症模型,观察不同剂量虎杖及苯溴马隆对高尿酸血症大鼠的血尿酸水平的影响及肾脏中尿酸转运蛋白基因表达水平的影响。结果:虎杖能通过抑制尿酸转运蛋白GLUT9、URAT1的基因表达水平及提高尿酸转运蛋白OAT3的基因表达水平,从而降低高尿酸血症大鼠的血尿酸水平的作用。结论:虎杖可明显降低高尿酸血症大鼠血尿酸水平并对肾脏功能起到保护的作用,其机制可能是抑制高尿酸血症大鼠肾组织中GLUT9mRNA和URAT1mRNA的表达水平,提高高尿酸血症大鼠肾组织中的OAT3mRNA表达水平,促进尿酸经肾小管的排泄,抑制肾小管对尿酸的重吸收,从而起到降尿酸作用。     

木蝴蝶醇提物对高尿酸血症小鼠的降尿酸及肾保护作用

目的 建立高尿酸血症（HUA）体内模型,考察木蝴蝶醇提物（MHD-80）降尿酸及肾脏保护作用。方法 采用氧嗪酸钾（350 mg·kg^-1）及腺嘌呤（80 mg·kg^-1）构建小鼠HUA体内模型评价MHD-80的降尿酸相关机制及肾功能保护作用,将70只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、别嘌呤醇组（5 mg·kg^-1）、非布索坦组（5 mg·kg^-1）、MHD-80低、中、高剂量组（3、6、12 mg·kg^-1）7组,每组10只。除正常组,其余组均连续14 d灌胃氧嗪酸钾及腺嘌呤构建HUA模型。造模第8~14天,每组灌胃给予相应药物,每天1次,末次给药后1 h,摘眼球取血,并收集小鼠肾脏及肝脏组织。酶比色法检测血清中尿酸（UA）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平及肝脏中黄嘌呤氧化酶（XO）活性,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-1β（IL-1β）含量,苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理改变,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾脏组织ATP结合盒转运蛋白G2（ABCG2）及葡萄糖易化转运蛋白9（GLUT9）蛋白表达水平。结果 体内实验结果显示,与正常组比较,模型组小鼠血清中UA、Cr、BUN水平、炎症因子TNF-α、IL-1β及肝脏XOD活性明显升高（P<0.05,P<0.01）,肾脏组织中GLUT9蛋白表达明显上调（P<0.05）,ABCG2蛋白表达明显下调（P<0.05）,肾脏出现明显损伤;与模型组比较,MHD-80中、高剂量组小鼠血清中UA、BUN、Cr、TNF-α、IL-1β水平及肝脏XOD活性有不同程度降低（P<0.05,P<0.01）,MHD-80高剂量组的GLUT9蛋白表达显著下调（P<0.01）、ABCG2蛋白表达明显上调（P<0.05）,MHD-80组肾损伤程度减轻。结论 MHD-80具有一定的降尿酸、抗炎及抗肾损伤作用,其作用与抑制XOD活性、调节ABCG2及GLUT9尿酸转运蛋白表达有关。     

萆薢总皂苷对大鼠慢性高尿酸血症和肾小管尿酸转运体1表达的影响

目的: 研究萆薢总皂苷对大鼠慢性高尿酸血症的防治作用及对肾脏尿酸转运体1(urate transporter 1,URAT1)表达的影响。 方法: 90只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、萆薢总皂苷(total saponin of Dioscorea,TSD)高、中、低剂量组(300,100,30 mg·kg^-1)、苯溴马隆(10 mg·kg^-1)组。以氧嗪酸钾联合乙胺丁醇复制大鼠慢性高尿酸血症模型,第3周开始灌胃给药,每天1次,连续4周,测定血尿酸、尿尿酸、尿酸排泄量、黄嘌呤氧化酶(XOD)活性;RT-PCR法、免疫组化法分别测定大鼠肾小管细胞URAT1 mRNA和URAT1蛋白的表达。 结果: 模型组大鼠血尿酸水平显著升高,尿尿酸排泄减少,肾脏URAT1 mRNA和URAT1蛋白高表达。TSD能剂量依赖性地降低高尿酸血症大鼠的血清尿酸水平,增加尿尿酸浓度和尿酸排泄量,降低肾脏URAT1 mRNA和URAT1蛋白的高表达,其作用与苯溴马隆相近;对高尿酸血症大鼠XOD、尿量无明显影响。 结论: TSD有明显的抗高尿酸血症作用,可能是通过抑制大鼠肾脏URAT1的高表达而减少尿酸的重吸收。     

桂枝汤对高尿酸血症小鼠肾保护作用的研究

目的：研究桂枝汤对高尿酸血症小鼠肾保护作用及其机制。方法：用氧嗪酸钾诱导小鼠产生高尿酸血症模型,并随机分为6组：空白对照组、模型对照组、别嘌呤醇组（5 mg·kg^-1）、桂枝汤组（900、1 799和3 598 mg·kg^-1）。苏木精-伊红染色观察小鼠肾脏组织病理学变化;商品化试剂盒测定小鼠血清和尿液中尿酸、肌酐和尿素氮水平以及肝脏黄嘌呤氧化（XOD）活性。采用Western blot方法检测动物肾脏尿酸盐转运子（URAT1）、葡萄糖转运子9（GLUT9）、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）、有机阳离子转运子1（OCT1）、OCT2、有机阳离子/肉毒碱转运子1（OCTN1）和OCTN2。结果：与模型对照组比较,桂枝汤可明显降低高尿酸血症小鼠血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,增加尿液尿酸和肌酐浓度,提高尿酸排泄分数。另外,桂枝汤可有效抑制高尿酸血症小鼠肝脏XOD活性,下调模型动物肾脏URAT1和GLUT9蛋白水平,上调肾脏ABCG2、OCT1、OCT2、OCTN1和OCTN2蛋白水平。结论：桂枝汤可能通过抑制高尿酸血症小鼠肝脏XOD活性以减少尿酸生成、调节肾脏有机离子转运子蛋白水平以促进尿酸及其他有机离子排泄,从而发挥其降尿酸和肾保护作用。     

基于叶绿体全基因组的贝母属特异性DNA条形码的筛选

本研究通过对贝母属4个物种叶绿体基因组进行全局分析,分别查找基因区域和基因间区的高变异区域,筛选用于高效鉴别贝母属植物的新DNA条形码序列。相关研究发现贝母属植物的基因区域序列相似度极高,不适用于DNA条形码鉴定研究;共有7个基因间区可以作为潜在的贝母属植物鉴定的特异性DNA条形码。本研究所构建的DNA条形码筛选方法,为筛选用于难鉴定科属的新的DNA条形码提供了通用的方法体系。     

车前子醇提物降低急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平及机制研究

目的:探讨车前子醇提物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及降尿酸作用机制.方法:车前子低、中、高剂量(1.17,2.34,4.68 g·kg-1)和别嘌呤醇(10 mg·kg-1)ig连续7d,建立小鼠高尿酸血症模型,观测对氧嗪酸钾盐诱导的急性高尿酸血症小鼠血清尿酸与肌酐含量、肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)与腺苷脱氨酶(ADA)的活性、肾脏尿酸转运体(mURAT1)mRNA表达的影响.结果:与正常组比,模型组小鼠血清尿酸与肌酐含量和肝脏XOD与ADA活性显著增高,并上调肾脏尿酸转运体mURAT1 mRNA的表达.提取物低、中、高剂量组血清尿酸分别为(178.32±10.26),(148.77±13.59),(160.28±14.65)μmol·L-1,明显低于模型组(235.65±19.38) μmol·L-1(P ＜0.01).血清肌酐分别为(56.12±4.58),(50.97±3.27),(52.45±4.66) μmol·L-1,明显低于模型组(107.59±8.32) μmol·L-1(P ＜0.01).肝脏XOD活性分别为(23.18±3.72),(16.96±2.45),(14.62±3.43) U·g-1,明显低于模型组(24.39±3.58) U·g-1 (P ＜0.05).ADA活性分别为(4.70±0.44),(3.89±0.24),(4.08±0.58) U·mg-1,明显低于模型组(5.92±0.84) U·mg-1 (P ＜0.05,P＜0.oi).肾尿酸转运体mURAT1 mRNA的表达分别为1.83±0.12,1.52±0.13,1.72±0.11,明显低于模型组2.22 ±0.1(P ＜0.05,P＜0.01).结论:车前子醇提物能够降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸,改善高尿酸血症小鼠肾脏功能.抑制XOD与ADA活性并下调肾脏尿酸转运体mURAT1 mRNA的表达,是其降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的可能机制.     

益母草提取物对大鼠高尿酸血症的调控作用

该研究采用灌胃给予SD大鼠氧嗪酸钾(300 mg·kg·d)制备高尿酸血症模型, 并将其分为正常组、模型组、别嘌醇组、益母草提取物高、中、低剂量组(200, 100, 50 mg·kg·d), 给予氧嗪酸钾1 h后给药, 连续给药7 d。分别测定血清尿酸(serum uric acid, SUA), 肌酐(serum creatinine, SCre), 尿中尿酸(uric acid, UA)及肾脏中相关转运体的表达水平, 研究益母草提取物对高尿酸血症大鼠血尿酸、肾功能的影响及肾脏相关转运体的mRNA的调节作用。结果显示与模型组相比, 益母草提取物可以显著性降低高尿酸血症大鼠血清尿酸, 肌酐的水平, 升高尿尿酸水平;同时, 益母草提取物可以显著性下调肾脏尿酸盐转运体(urate transporter 1, URAT1), 葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9, GLUT9) mRNA 的表达, 上调有机阳离子转运体(organic cation transportanter, OCT), 肉毒碱转运体(carnitine transporter, OCTN)mRNA的表达, 具有促进肾脏尿酸排泄的作用。     

痛风病理及临床中西医治疗的研究进展

随着人民生活水平的改善,膳食结构的改变,蛋白质、糖、脂肪等摄入量明显增多,痛风的患病率逐渐升高,与年龄的增长呈现正相关,发病年龄逐渐降低。尿酸钠晶体诱导的炎症是痛风的病理基础,激活固有免疫,释放白细胞介素(IL)-1β,IL-6及肿瘤坏死因子(TNF)-α等多种炎症介质,进而引起炎症级联反应,出现关节红肿热痛等急性发作表现。痛风存在自发缓解机制,一方面巨噬细胞通过吞噬作为异物的单钠尿酸盐(MSU)晶体,减少MSU对机体的刺激,另一方面分化成熟的巨噬细胞通过分泌抗炎性因子转化生长因子(TGF)-β1等,抑制炎性因子的表达而促进痛风急性发作的自发缓解。除了炎症反应相关的细胞内信号分子被激活机制外,痛风的炎症机制还涉及补体激活、细胞激活等途径,其造成的心血管系统损害、关节破坏等并发症严重危害人体健康。目前治疗药物多用西药,如别嘌醇、非布司他等,通过抑制黄嘌呤氧化酶发挥疗效,苯溴马隆是通过抑制尿酸盐转运蛋白1(URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)减少肾脏对尿酸重吸收,促进尿酸排泄而发挥作用,即使目前研发中的来辛奴拉、曲尼司特等,也是基于抑制尿酸盐重吸收起效,上述药物存在较多的不良反应而限制了临床应用。中医药治疗痛风具有多靶点的特点,在降尿酸、抗炎和改善关节功能方面更具有优势,且安全性高,在临床治疗痛风中逐渐得到推广应用。因此,基于痛风的病理机制结合中西医治疗痛风是具有前景的研究方向。     

基于“肠-肾”途径的健脾祛湿中药抗痛风病研究

目的:从“肠-肾”途径探讨健脾祛湿中药防治痛风病作用。方法:10%果糖塑造大鼠高血尿酸模型,高钙高嘌呤食饵并限水诱导鹌鹑尿酸盐沉积模型,以菊苣、参苓白术散为示例药。生化检测大鼠血清尿酸(SUA)、粪便尿酸(FUA)水平,计算肾脏尿酸清除率(RCUA);检测鹌鹑粪尿中尿酸含量,计算尿酸排泄量。免疫组化分析大鼠肠道ABCG2、肾脏URAT1、OAT1,及鹌鹑肠道Occludin、肾脏p-p65表达。六胺银染色分析尿酸盐沉积。结果:1)菊苣可显著降低模型大鼠SUA、增加FUA、RCUA,促进肠道ABCG2表达,减少肾脏URAT1表达。2)参苓白术散可显著减少模型鹌鹑肾脏尿酸盐沉积,增加尿酸排泄量,增加肠道Occludin表达,减少肾脏p-p65表达。结论:痛风病发生发展中存在“肠-肾”途径的病理改变,健脾祛湿中药通过调节“肠-肾”尿酸转运促尿酸排泄、改善肠道屏障功能及肾脏炎症状态以祛除尿酸盐沉积,共同发挥防治痛风病作用。     

Longan seed extract reduces hyperuricemia via modulating urate transporters and suppressing xanthine oxidase activity

Hyperuricemia causes gouty arthritis, kidney disease, heart disease, and other diseases. Xanthine oxidase (XOD) and urate transporters play important roles in urate homeostasis. Numerous plants have been identified as XOD inhibitors. Longan seeds are known to contain high levels of polyphenols such as corilagin, gallic acid and ellagic acid. We examined the effect of longan seed extract on XOD inhibition and urate transporters GLUT1 and GLUT9 using both in vitro and in vivo assays. The results showed that dried longan seed extract (LSE) and its active components inhibited XOD dose-dependently in vitro. LSE inhibited uric acid production and XOD activity in normal liver cells (clone-9 cells) and was not cytotoxic under the concentration of 200 μg/ml. For the in vivo study, Sprague-Dawley (SD) rats were given intraperitoneally for thirty minutes with or without allopurinol (a XOD inhibitor, 3.5 mg/kg) or LSE (80 mg/kg) and then injected intraperitioneally with 250 mg/kg of oxonic acid and 300 mg/kg of hypoxanthine intragastrically. LSE was able to reduce serum uric acid level and XOD activity in hyperuricemic rats. However, LSE or allopurinol did not inhibit the liver XOD activities. On the other hand, GLUT1 protein was suppressed in kidney and GLUT9 was induced in liver from experimental rats and LSE or allopurinol decreased GLUT9 but increased GLUT1 protein level in the liver and kidney, respectively. These results confirmed the claimed effect of longan seeds on gout and other complications and suggested that its urate reducing effect might be due to modulation of urate transporters and inhibition of circulating xanthine oxidase.     

Anti-hyperuricemic and nephroprotective effects of Modified Simiao Decoction in hyperuricemic mice

Ethnopharmacological relevance

Modified Simiao Decoction (MSD), based on clinical experience, has been used for decades and famous for its efficiency in treating hyperuricemic and gouty diseases.

Aim of the study

To investigate the effects of MSD on anti-hyperuricemic and nephroprotective effects are involved in potassium oxonate-induced hyperuricemic mice.

Materials and methods

The effects of MSD were investigated in hyperuricemic mice induced by potassium oxonate. MSD were fed to hyperuricemic mice daily at a dose of 0.45, 0.90, 1.80 g/kg for 10 days, and allopurinol (5 mg/kg) was given as a positive control. Serum and urine levels of uric acid and creatinine, and fractional excretion of uric acid (FEUA) were determined by colorimetric method. Its nephroprotective effects were evaluated by determining a panel of oxidative stress markers after the intervention in hyperuricemic mice. Simultaneously, protein levels of urate transporter 1 (URAT1) and organic anion transporter 1 (OAT1) in the kidney were analyzed by Western blotting.

Results

MSD could inhibit XOD activities in serum and liver, decrease levels of serum uric acid, serum creatinine and BUN, and increased levels of urine uric acid, urine creatinine, FEUA dose-dependently through down-regulation of URAT1 and up-regulation of OAT1 protein expressions in the renal tissue of hyperuricemic mice. It also effectively reversed oxonate-induced alterations on renal MDA levels and SOD activities in this model.

Conclusion

MSD processes uricosuric and nephroprotective actions by regulating renal urate transporters and enhancing antioxidant enzymes activities to improve renal dysfunction in hyperuricemic mice.