倍频激光诱导的大鼠脉络膜新生血管中CD105的表达

目的 观察激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管（CNV）中CD105的表达情况.方法 532 nm倍频Nd：YAG激光诱导生成BN大鼠CNV,于光凝后7、14、21、28、56 d行荧光素眼底血管造影（FFA）检查,处死动物后摘取眼球,进行组织病理学观察.激光后7、14、28 d以免疫组织化学染色法观察CNV中CD105的表达情况.结果 激光后7 d,CNV开始形成,7～14 d为迅速增生期,此后CNV增生平稳.CD105在激光后7 d初步表达于CNV组织,于激光后14 d时表达明显.激光后28 d,新生血管形成趋于静止,CD105在CNV的表达较早期和中期明显减弱.结论 CD105在CNV形成过程中可能起重要作用,并且可以作为增生内皮细胞的一种标记物.     

转化生长因子β1在小鼠脉络膜新生血管中的表达

目的 通过激光诱导小鼠脉络膜新生血管(CNV)模型，探讨TGF-β1在CNV形成中的作用。方法 应用810nm半导体激光光凝C57BL／6J小鼠眼底后极部，诱发CNV生成。术后1、4周，用原位杂交方法检测TGF-β1 mRNA在小鼠CNV中的表达。结果 在正常组织中，TGF-β1 mRNA表达于神经节细胞层，而视网膜色素上皮、脉络膜血管内皮细胞无TGF-β1的mRNA表达。激光光凝1周后CNV膜形成，TGF-β1 mRNA主要表达于CNV及其附近。激光后4周TGF-β1信号仍明显表达。结论 研究结果提示在CNV发生过程中，TGF-β1可能起重要作用。     

血管生成抑制因子k4k5对实验性脉络膜新生血管的抑制作用

目的 评价血管生成抑制因子kringle4-5能否抑制氩激光诱导小鼠的脉络膜新生血管。 方法 通过氩 激光眼底光凝诱导C57BL/6J小鼠产生脉络膜新生血管，随机分为对照组、低剂量组和高剂量组，每组各16只小鼠。在眼底氩激光光凝后立即对3组小鼠分别球后注射林格氏液、kringle4-5 20、50 μg。在光凝后7、14 d通过荧光素眼底血管造影(fundus fluorescence angiography,FFA)评价脉络膜新生血管的发生率。光凝后14 d将动物处死，行组织学检查及观察CD105的表达。用免疫组织化学方法检测光凝后14 d各组血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的表达。 结果 对照组，光凝后14 d脉络膜新生血管的发生率为64.3%，低剂量组和高剂量组脉络膜新生血管的发生率分别为51.2%（P＜0.05）、44.1%（P＜0.01）。组织学检查显示治疗组脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)范围小于对照组，与剂量呈正相关，高剂量组差异有显著性的意义(P＜0.05) ,而且CD105的表达，治疗组少于对照组(P＜0.05)。VEGF及bFGF的表达在对照组与治疗组之间差异无显著性的意义。 结论 Kringle4-5对激光诱导小鼠的实验性CNV具有抑制作用，在此剂量范围，对VEGF及bFGF的表达无明显影响。（中华眼底病杂志，2003，19：201-268）     

应用半导体激光诱导鼠脉络膜新生血管模型

目的 评价半导体激光诱导C57BL-6J小鼠脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV)模型的可行性。方法 对16只小鼠（31只眼）分别于激光照射后2h,3d,1,2及4周行荧光素眼底血管造影(fundus fluorescence angiography,FFA),光镜及电镜检查,以观察激光诱导CNV的效果。结果 激光照射后2h及3d无CNV生成,FFA显示无荧光渗漏,激光照射后1周出现CNV,FFA示1周时荧光渗漏48个点（53.3%),4周时荧光渗漏33个点（36.7%),且CNV出现不一军伴有荧光渗漏,病理切片证实,光凝后1,2及4周,小鼠CNV发生率分别为63.6%,63.6%及66.7%。结论 通过半导体激光光凝诱导C57BL-6J小鼠CNV模型是可行,有效的。     

Racl和HIF-1在激光诱导小鼠脉络膜新生血管模型组织中的表达

目的研究Racl和缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF—1α）在激光诱导实验性小鼠脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）模型组织中的表达及意义。方法用532nm激光诱导小鼠CNV模型，分别在光凝后1d、3d、7d、14d、28d行荧光素眼底血管造影后处死小鼠，摘除眼球制作标本，行病理切片观察及免疫组织化学检测Racl和HIF—1α蛋白在CNV组织中的表达。结果正常小鼠视网膜脉络膜组织未见Racl和HIF—1α蛋白阳性表达。激光诱导的小鼠CNV组织形成过程中均有Racl和HIF—1α蛋白的表达，激光光凝早期二者表达均增高；光凝后1d即有明显的阳性表达，二者的阳性表达率分别是11．21％和24．80％；光凝后3～7d均达到高峰，RacI蛋白的阳性表达率分别为34．58％和53．35％，而HIF-1α蛋白的阳性率为33．05％和50．35％；光凝后14d，二者的表达均下降，阳性率分别为25．50％和31．97％；光凝后28d，阳性率分别为9．32％和11．26％；二者表达呈显著正相关（r=0．943，P=0．016）。结论Racl和HIF—1α在CNV组织中存在高表达，且二者表达密切相关。     

实验性脉络膜新生血管的定量评价

目的 评价氪激光诱导下大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)面积计算的可行性.方法 采用氪激光击破大鼠右眼 Bruch 膜的方法诱导24只大鼠产生实验性 CNV,另一眼作正常对照眼.眼底彩照及眼底血管荧光造影检查(fundus fluorescein angiography,FFA)分别于光凝后1周、2周、3周、4周时观察大鼠眼底CNV渗漏情况,脉络膜铺片技术测量CNV面积.结果 氪激光大鼠CNV模型成模率3周、4周时稳定(75.00%、78.75%).从FFA、脉络膜血管铺片技术可见大鼠CNV面积随造模后时间延长呈明显递增生长(P＜0.05),3周、4周时差异不明显,病理切片亦可见CNV中新生血管数量的增多.结论 FFA检查、脉络膜血管铺片技术、病理切片均可作为评价CNV生长的指标,其中脉络膜血管铺片技术是CNV定量评价的可靠方法.     

PEDF和VEGF mRNA在实验性脉络膜新生血管组织中的表达

目的 研究血管内皮生长因子(vessel endothelial growth factor，VEGF)和色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor，PEDF)在实验性小鼠脉络膜新生血管(choroidal neowascularization,CNV)组织中的表达情况。探讨二者在CNV形成过程中所起的作用。方法 用半导体激光诱导小鼠CNV模型。分别于激光后1、3、7d、2和3周时取出眼球，采用原位杂交方法检测CNV组织中VEGF和PEDF mRNA的表达情况。结果 VEGF和PEDF mRNA在激光诱导的小鼠CNV组织形成过程中均有显著表达。激光光凝早期二者的表达均增高，但VEGF mRNA的表达升高更显著。激光照射后3和7d时．VEGF mRNA的表达即达到高峰，阳性率分别为26．05％和27．92％，而PEDF mRNA的阳性表达率分别为21．13％和23．55％．2周时，VEGF mRNA表达开始下降，约为23．95％，而PEDF mRNA的表达则达到高峰,为29．19％,光凝后3周时，二者的表达均下降，但PEDF mRNA的表达仍高于VEGF mRNA的表达，分别为24．87％和21．93％．结论 VEGF和PEDF mRNA明显表达于实验性小鼠CNV组织中。2者表达失衡可能在CNV的形成过程中起到调控作用。     

激光诱导小鼠脉络膜新生血管中膜攻击物与血管生长因子的表达

目的 观察激光诱导小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)中膜攻击物与血管生长因子的表达.方法 雄性C57BL/6小鼠66只,随机分为对照组与眼镜蛇毒因子(cobra venom factor,cw)预处理组,每组各33只.用氪红激光诱导小鼠CNV动物模型;免疫组织化学检测激光诱导后24h视网膜色素上皮-脉络膜-巩膜复合体补体膜攻击复合物(membrane attack complex,MAC)的表达;RT-PCR分析激光诱导后1d、3d、5d、7d血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) mRNA表达;Western blot检测激光诱导后3 d VEGF蛋白的表达.结果 CVF预处理组:激光诱导后24 h,未见MAC阳性染色;激光诱导后3d、5d、7d与激光诱导后1d相比未见VEGF mRNA表达增加;激光7d未见CNV形成.对照组:激光诱导后24 h MAC呈阳性染色;激光诱导后3d、5d、7d与激光诱导后1d相比VEGF mRNA分别增加380％、276％、98％(均为P＜0.01);激光后3d,对照组较CVF预处理VEGF蛋白高表达.结论 CNV形成与补体MAC形成、VEGF表达上调相关联;MAC沉积导致VEGF表达增加;VEGF表达上调是CNV形成的主要原因.     

肿瘤坏死因子α抑制剂对激光诱导脉络膜新生血管的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)在激光诱导的小鼠脉络膜新生血管(CNV)形成中的作用.方法 野生型C57BL/6J小鼠36只(72只眼),每只眼视网膜上做4个光凝斑诱导CNV生成.小鼠分别于光凝前3 d或后3 d腹腔内植入渗透泵,给予TNF-α抑制剂依那昔普(5μg/h,n=12)或英利西单抗(5μg/h,n=12),持续7 d,对照组给予PBS(n=12).光凝前3 d的用药组分别于光凝后1和2周,光凝后3 d的用药组于光凝后10 d做荧光素眼底血管造影(FFA),之后立刻取左眼行视网膜组织学检查,右眼制作脉络膜平片,免疫组化方法 标记内皮细胞,测定荧光素渗漏面积及脉络膜平片CNV相关荧光面积,比较CNV病变的大小及程度.用免疫印迹法分析比较小鼠光凝前后视网膜色素上皮层及脉络膜上TNF-α蛋白的表达.结果 光凝后1周,免疫印迹法结果 显示小鼠脉络膜及视网膜色素上皮层TNF-α表达增加.光凝前3 d用药,光凝后1周,荧光素渗漏面积为(0.74±0.33)×104 像素,2周时则为(0.63±0.20)×104 像素,与对照组[(2.61±0.80)×104 像素]比较均显著减少(t=3.69,3.56;P＜0.05).光凝后1周对照组、依那昔普组和英利西单抗组CNV面积分别为(3.61±0.93)×105、(1.89±0.62)×105和(2.14±0.72)×105像素,与对照组比较,差异均有统计学意义(t=3.10,2.51;P＜0.05.但光凝后3 d用药,则只有依那昔普能显著抑制CNV病变.组织病理学检查进一步证实,治疗组小鼠的CNV病变直径及厚度小于对照组.结论 TNF-α参与激光诱导的CNV的形成.TNF-α抑制剂能抑制激光诱导的CNV的形成及渗漏.(中华眼科杂志,2008,44:200-206)     

脉络膜血管平铺及CD105染色在大鼠脉络膜新生血管研究中的评价意义

目的 评价异硫氰酸荧光素.右旋糖酐脉络膜血管平铺及CD105免疫组织化学染色作为分析指标在实验性脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)治疗研究中的意义.方法 激光光凝方式建立棕色挪威大鼠CNV模型,30只大鼠随机分为治疗组、生理盐水组、对照组,每组各10只.分别给予Endostatin 20μL(5 g·L-1)、生理盐水20μL视网膜下注射、对照组光凝后不做处理.观察期为14 d.在光凝后第7天及第14天行颈动脉灌注异硫氰酸荧光素-右旋糖酐标记CNV,眼球标本制成脉络膜铺片进行CNV定量分析,组织病理切片光镜、CD105及因子Ⅷ免疫组织化学染色观察,比较不同检测方法在评价血管生成抑制剂对CNV治疗效应中的意义.结果 造模后第7天,光凝部位CNV呈一高荧光团;光凝后第14天,表现为形态各异的高荧光微血管网;脉络膜血管平铺CNV定量分析显示,光凝后第14天Endostatin组CNV面积小于生理盐水组及对照组,Endostatin组CNV面积为(15.58±5.32)×103μm2,生理盐水组及对照组CNV面积为(24.01±4.67)×103μm2、(25.27±5.08)×103μm2(F=307.351,P＜0.001);CD105免疫组织化学显示,光凝后第14天生理盐水组及对照组光斑内CD105及因子Ⅷ呈强阳性表达,各组在视网膜内核层及神经纤维层内皮细胞均无CD105阳性表达;光镜观察造模后第7天激光损伤部位呈纺锤样外观.外核层排列紊乱,光感受器外节消失,RPE屏障破坏,光斑处CNV形成;光凝后第14天,光凝斑部位脉络膜增厚,内皮细胞及微血管增生,大量CNV形成;Endlostatin组内皮细胞增生数量及新生血管明显少于生理盐水组和对照组.结论 脉络膜血管平铺于CNV定量评估具有一定意义;与因子Ⅷ的检测相比,CD105对于CNV的定性评估更具特异性;Endostatin可以有效抑制CNV的形成.     

CD105特异性shRNA表达质粒的构建和筛选

目的:使用Pgenesil-1质粒构建CD105RNA干扰重组体,在激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管模型中,筛选高效抑制CD105基因表达的shRNA。方法:根据CD105基因序列信息设计了3条shRNA以及1条非特异阴性序列,利用含U6启动子的表达质粒Pgene-sil-1构建其RNA干扰重组体。采用视网膜下注射的方法使shRNA表达质粒转染大鼠视网膜和脉络膜,观察质粒所携带绿色荧光蛋白基因表达情况。根据不同的表达质粒对BN大鼠CNV模型2wk时CD105基因mRNA表达的抑制效果与空白对照及仅加转染试剂组比较分析,筛选有效的抑制序列。结果:转染后1d,在荧光显微镜下可见有明显的绿色荧光分布于实验眼视网膜全层,包括RPE层。2~3wk荧光强度比1wk增强,并持续表达4wk。空白对照眼无绿色荧光表达。构建了3条CD105shRNA和阳性对照Pgenesil-HK,基因测序证实目的序列成功插入质粒Pgenesil-1中。研究发现不同的质粒转染后对CD105在CNV高峰期的表达干预效果不同。Pgenesil-eng2和Pgenesil-eng3可明显抑制CNV模型在2wk时CD105mRNA的表达,抑制效率分别为(78±5)%(P<0.01);(52±3)%(P<0.01)。转染Pgenesil-eng1,Pgenesil-HK组及仅加转染试剂组与空白对照组相比CD105mRNA表达水平无明显变化。结论:在阳离子脂质体辅助下,Pgenesil-1质粒可以成功地将目的基因转染至大鼠视网膜各层次,且表达强度高,时间长于4wk。Pgenesil-eng2能明显抑制BN大鼠视网膜组织CD105mRNA的表达。     

Correlation of CD105 and Vascular Endothelial Growth Factor in Laser-induced Choroidal Neovascularization in Rats

Introduction Angiogenesis plays a central role in the growth and development of normal tissues and in a variety of pathological settings. It is a complex multistep process involving growth and migration of endothelial cells, and capillary morphogenesis . These processes are tightly controlled by positive and negative angiogenic factors and their receptors, which regulate one or more of these key events[1-3]. Although the regulatory mechanisms of angiogenesis are not fully understood, evidence …     

大鼠角膜碱烧伤后CD105在新生血管化角膜中的表达

目的：研究大鼠角膜碱烧伤后CD105在新生血管化角膜组织中的表达。方法：采用角膜碱烧伤法对60只Wistar大鼠制作角膜新生血管模型。裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管生长情况,免疫组化法检测碱烧伤后不同时间角膜组织中CD105的表达。结果：大鼠角膜碱烧伤后2d角膜新生血管开始形成,3～7d生长旺盛,新生血管面积达到最大,10～14d角膜新生血管生长停滞。在新生血管化角膜组织中,CD105于3～7d表达最明显,14d后表达微弱。结论：大鼠角膜碱烧伤后CD105在新生血管化角膜组织中有明显表达。     

大鼠角膜碱烧伤后CD105在新生血管化角膜中的表达

目的:研究大鼠角膜碱烧伤后CD105在新生血管化角膜组织中的表达。方法:采用角膜碱烧伤法对60只Wistar大鼠制作角膜新生血管模型。裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管生长情况,免疫组化法检测碱烧伤后不同时间角膜组织中CD105的表达。结果:大鼠角膜碱烧伤后2d角膜新生血管开始形成,3～7d生长旺盛,新生血管面积达到最大,10～14d角膜新生血管生长停滞。在新生血管化角膜组织中,CD105于3～7d表达最明显,14d后表达微弱。结论:大鼠角膜碱烧伤后CD105在新生血管化角膜组织中有明显表达。     

大鼠骨髓间充质干细胞在脉络膜新生血管微环境中的分化

目的研究骨髓间充质干细胞（MSCs）在大鼠脉络膜新生血管（CNV）微环境中的分化。方法将体外培养的BN大鼠MSCs植入经氩激光诱导建立的CNV模型大鼠视网膜下腔,用免疫荧光标记的方法对MSCs进行追踪并观察术后1、2、3、4、5周MSCs在CNV微环境中的分化。结果术后第1周即可见MSCs位于CNV表面,但CD31标记阴性,第2周始可见MSCs在CNV内表达CD31阳性,第5周可见移行于光感受器的MSCs表达视紫红质。结论MSCs植入CNV模型大鼠视网膜下腔后可存活,并可向内皮细胞和光感受器细胞方向分化。     

紧密连接蛋白对实验性角膜新生血管发生的抑制作用

背景 角膜新生血管（CNV）是导致角膜盲的主要原因之一,研究表明紧密连接蛋白中的闭锁小带蛋白1（ZO-1）对病理性新生血管的发生有调节作用,能通过紧密连接结构构成有效的生理屏障,抑制病理性新生血管的生长,但ZO-1对CNV是否发挥作用尚不清楚. 目的 探讨ZO-1在实验性CNV发生及发展中的作用及其机制.方法 将清洁级7～8周龄雄性BALB/c小鼠24只按随机数字表法随机分为碱烧伤15s组和碱烧伤40 s组,用NaOH滤纸贴附小鼠左眼中央角膜的方法构建CNV模型,于碱烧伤后2周在裂隙灯显微镜下观察并比较两组小鼠CNV生长情况,采用逆转录PCR（RT-PCR）法检测并比较两组小鼠角膜组织中ZO-1 mRNA的表达.另取鼠龄和性别相匹配同种小鼠54只随机分为3个组,均用NaOH滤纸贴附小鼠左眼中央角膜40 s的方法构建CNV模型,造模后分别用质量分数0.2％透明质酸钠（HA）配制的10 mg/L的ZO-1抗体和0.2％ HA配制的5 mg/L缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）重组蛋白点眼1周,每日3次.于实验后2周摘除大鼠左眼角膜,用免疫组织化学法检测CD31在CNV中的表达,鉴定CNV的形成数目和面积;采用RT-PCR法检测3个组小鼠角膜组织中血管内皮生长因子（VEGF） mRNA的表达;采用流式细胞术检测碱烧伤角膜中巨噬细胞特异性标志物F4/80、中性粒细胞特异性标志物Ly-6G的阳性细胞比例,评价炎性细胞的浸润情况.结果 裂隙灯显微镜下可见造模后2周小鼠CNV达高峰;碱烧伤15 s组小鼠轻度、中度、重度CNV的眼数分布明显少于碱烧伤40 s组,差异有统计学意义（x2=6.032,P=O.049）;碱烧伤15s组和碱烧伤40 s组小鼠角膜中ZO-1 mRNA的相对表达量分别为1.53±0.04和1.15±0.08,差异有统计学意义（t=4.157,P=0.014）.免疫组织化学法检测显示,ZO-1抗体干预组和HIF-1α阳性对照组小鼠角膜组织中CD31阳性细胞数多于0.2％ HA组,差异均有统计学意义（t=-129.590、-226.820,均     

重组人血管内皮抑素对脉络膜新生血管的抑制作用

目的 探讨重组人血管内皮抑素对半导体激光诱导的Brown Norway大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascuIariza-tion,CNV)的抑制作用.方法 取雄性大鼠30只(60眼),大鼠双眼眼底采用半导体激光光凝建立CNV模型,随机分为3组:实验组、生理盐水组及空白对照组,每组10只(20眼).实验组玻璃体内注射重组人血管内皮抑素20 μL(5g·L-1),每2d注射1次,共注射5次;生理盐水组玻璃体内注射生理盐水20μL,每2d注射1次,共注射5次;空白对照组光凝后不做处理,观察期为14d.观察术后13d各组大鼠荧光素渗漏情况,术后14d光镜下观察组织细胞学变化,免疫组织化学检测CD105的表达,以及应用激光共聚焦显微镜下脉络膜血管平铺法测量各组CNV面积.结果 FFA显示实验组严重渗漏发生率明显低于生理盐水组和空白对照组;实验组光镜下光凝部位新生血管和内皮细胞数明显低于对照组;CD105的表达实验组明显低于生理盐水组和空白对照组;激光共聚焦显微镜下CNV定量分析显示实验组CNV面积(17352±1321)μm2小于生理盐水组(23043±1424)μm2和空白对照组(25937±1744)μm2,其差异具有显著统计学意义(F=342.4,P＜0.001).结论 重组人血管内皮抑素(恩度)可以有效抑制动物模型的CNV形成,为治疗CNV提供了一种新的可能途径.     

Active drug targeting with immunoconjugates to choroidal neovascularization

PURPOSE: Active drug targeting with monoclonal antibody to neovascular vessels may be a potential treatment for choroidal neovascularization (CNV) in age-related macular degeneration (AMD). Endoglin (CD105) is a proliferating endothelial cell marker with excellent potential for targeting. The goals of this study were to investigate the expression of CD105 in CNV membranes surgically excised from patients with AMD and CNV lesions induced by intense laser photocoagulation in a cynomolgus monkey and to evaluate the in vitro effect of immunoconjugates on endothelial cells. METHODS: CNV membranes were surgically excised from 10 patients with AMD. Experimental CNV was induced by intense laser photocoagulation in a cynomolgus monkey. Immunolocalization of CD105 on frozen sections of CNV lesions was studied by immunohistochemical evaluation. Anti-von Willebrand's factor antibody was used as an endothelial cell marker. The cytotoxic effect of immunoconjugates of anti-CD105 monoclonal antibody and dextran binding mitomycin C on human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) was evaluated in vitro. RESULTS: Endothelial cells demonstrated strong immunoreactivity of CD105 in all surgically excised CNV membranes. In the monkey eye, CD105-positive cells were detected only in CNV lesions but not in normal chorioretinal tissues. Immunoconjugates with anti-CD105 monoclonal antibody showed a specific inhibitory effect on proliferating HU-VECs. CONCLUSIONS: These results suggest that anti-CD105 monoclonal antibody-mediated drug targeting has a potential to treat CNV in AMD.     

激光诱导色素兔脉络膜新生血管模型

目的评价半导体泵浦的倍频Nd：YAG532nm绿激光诱导色素兔脉络膜新生血管（choroidal neovascularization．CNV）模型的可行性。方法将24只色素兔按光凝后1周、2周、3周、4周分为4组,每组6只。用高强度倍频Nd：YAG532llm绿激光光凝色素兔视网膜,分别于激光照射后第1、第2、第3及第4周行荧光素眼底血管造影（fundus fluorescein angiography,FFA）,FFA检查后处死动物,取光凝区眼球壁制作标本．进行光镜和透射电镜观察及CD34免疫组织化学染色,以观察激光诱导CNV的效果。结果光凝后第1周．FFA检查见脉络膜期及动脉早期10．0％的光斑有点状荧光素渗漏;光凝后第2、第3、第4周,依次有37．5％、51．7％、45．0％的光斑出现脉络膜新生血管形态。病理切片及CD34免疫组化染色证实,光凝后第1、第2、第3、第4周,兔CNV发生率分别为33．3％、57．1％、66．7％及61．5％。结论通过半导体泵浦的倍频Nd：YAG532nm绿激光诱导色素兔CNV模型是可行的。     

色素上皮衍生因子在大鼠脉络膜新生血管中的表达及意义

目的　探讨激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管 (choroidalneovascularization ,CNV)中色素上皮衍生因子 (pigmentepithelium derivedfactor,PEDF)的表达及意义。方法　对 5组 30只BN大鼠行单眼视网膜氪激光光凝 ,诱导脉络膜新生血管形成。分别在光凝后 3d ,1、2、3及 4周摘除眼球 ,对光凝区进行病理学检查、Ⅷ因子相关抗原 (FⅧR :Ag)的免疫组织化学检查 ,以观测CNV形成。应用免疫组织化学及原位杂交技术检测CNV形成过程中PEDF、PEDFmRNA的表达及变化。结果　病理学检查及FⅧR :Ag免疫组织化学检查显示 ,光凝后 1周开始形成CNV ,3～ 4周达到高峰。正常BN大鼠PEDFmRNA、PEDF在视网膜神经节细胞、内核层部分细胞、视网膜色素上皮层表达。视网膜光凝后 ,PEDFmRNA、PEDF阳性染色信号可见于视网膜神经节细胞层、内核层、视网膜色素上皮层、外核层和脉络膜的损伤区 ;光斑边缘近脉络膜侧PEDF阳性表达信号明显高于光斑内部。光凝后 3d至 4周 ,光斑区内FⅧR :Ag阳性染色密度逐渐增加 (P <0 0 5 ) ,PEDFmRNA、PEDF阳性染色密度逐渐下降 (P<0 0 5 ) ,PEDF与FⅧR :Ag阳性染色密度负相关 (r=- 0 84 ,P <0 0 5 )。结论　CNV形成与PEDF表达量负相关 ,提示PEDF表达不足可能是CNV形成和增生的主要原因之一。