FK506与周围神经再生研究近况

新型免疫抑制剂FK506有明显的促进周围神经再生的作用，但对其机制存在争议，具体实验用法亦尚未明确。本文就国外相关文献进行了综述。     

FK506缓释膜片促进外周神经再生的实验研究

目的观察神经断伤吻合口局部植入FK506缓释膜片对神经再生的影响.方法取Wistar大鼠60只,随机平均分为A、B、C、D 4组.切断大鼠右侧坐骨神经后间断吻合,将免疫抑制剂FK506溶入聚乳酸(PLA)后制成15 mm×8 mm×1 mm大小的膜片,植入神经吻合口周围作为生物降解缓释制剂,可稳定、持续释放FK506约3周.A组为对照组,膜片内不含FK506;B、C、D组设计释放率分别为1 mg@kg-1@d-1、2 mg@kg-1@d-1和5 mg@k-1@d-1.术后第3、6、10周观察神经吻合口质量、测定坐骨神经功能指数以及电生理学和组织学检查的定性、定量分析.结果B、C组测定结果明显优于A组,C组优于B组.D组神经连接及再生不良.结论适量FK506神经吻合口植入,缓释应用对周围神经再生的速度和质量均有明显的促进作用.     

FK506缓释剂促进周围神经再生的形态学研究

[目的]探讨FK506缓释剂对周围神经再生纤维形态学恢复的促进作用.[方法]利用自行研制的梭形双通道桥接管桥接32只SD (Sprague-Dawley)大鼠坐骨神经长10 mm缺损.根据梭形管的两支管内加入的药物不同将动物随机均分为A组(两支管内均加入几丁糖凝胶)、B组(一侧支管内注入几丁糖+ FK506(B1组);另一侧支管内注入几丁糖(B2组)).术后8、16周对再生神经进行Holmes银染、透射电镜观察、硫代乙酰化胆碱染色和碳酸酐酶染色观察再生神经形态结构.[结果]术后8、16周,Holmes还原银染色及透射电镜观察到A组两支管内再生纤维无明显差异,与B2组比,B1组再生纤维数量多,排列整齐,粗细均匀;其运动纤维与感觉纤维的数量均优于对照组(P＜0.05).[结论] FK506缓释剂可明显促进周围神经再生纤维形态结构的恢复.     

局部应用FK506缓释膜片对大鼠坐骨神经缝合术后脊髓神经元的影响

目的探讨大鼠坐骨神经切断缝合术后局部应用FK506缓释膜片对脊髓神经元的保护。方法建立大鼠坐骨神经切断缝合术模型。术后分为治疗组(A组):术中神经缝合后在神经缝合口周围放置FK506缓释膜片(FK506释放率为2mg·kg·d);对照组(B组):不用药物。A、B组大鼠各为25只。于术后1、3、7、14、28d5个时相点,切取L46脊髓。标本按常规固定、脱水、冰冻切片、切片厚度为5μm,每隔20张取1张切片,每个标本取10张。采用TUNEL法行细胞凋亡检测。结果A组中仅发现少量脊髓神经元凋亡,B组的凋亡细胞明显多于A组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠坐骨神经切断缝合术后局部应用FK506缓释膜片对脊髓神经元有保护作用。     

不同剂量FK506对周围神经端侧吻合功能恢复的影响

目的探讨不同剂量FILS06对神经端侧吻合功能恢复的影响。方法30只Wistar大鼠取右侧腓总神经切断后,近端结扎并反转缝于邻近肌肉上,远端与胫神经外膜开窗处行端侧缝合。左侧为正常对照。术后分为5组,每组6只。于术后当天开始,每组于动物右小腿外侧肌肉内分别注射生理盐水(对照组)和生理盐水稀释的FKS06(实验组)．剂量分别为lmg／kg-1·d~(-1)(实验组1)、2ms、kg~(-1)·d~(-1)(实验组2)、4mg/kg~(-1)·d~(-1)(实验组3)、8mg/kg~(-1)·d~(-1)(实验组4),连续2周。于术后3个月检测术肢双侧腓总神经、胫前肌电生理、组织学检查和胫前肌肌湿重的测定。结果实验各组全部电生理检测动作电位恢复率、肌肉单次收缩力恢复率、强直收缩力恢复率均显著高于对照组,再生神经纤维数目、肌湿重、肌纤维截面积均显著优于对照组。实验组2、3、4组之间差异无显著性意义．但均高于实验组1。结论FKS06对神经端侧吻合功能恢复具有促进作用。2mg/kg~(-1)·d~(-1)为比较合适的使用剂量。     

局部应用FK506促进外周神经再生的研究进展

外周神经损伤的修复一直是基础和临床科研的一个热门课题，许多学者从不同材料的外周神经桥接到构建组织工程化的外周神经移植修复、药物促进轴突再生等方面进行了不懈的研究，但是由于外周神经系统的特殊和复杂性，可以应用于临床的组织工程化神经短期内还不能实现，所以目前的治疗仍是从自体神经移植和药物促进轴突再生以防止肌肉萎缩方面入手。在药物治疗方面，FK506最先作为免疫抑制剂广泛应用移植外科，近来国内外学者发现其有强大的促进周围神经再生的作用，但是由于全身用药时肾毒性、高血糖和中枢神经系统毒性等副作用的存在而使其临床应用的可能性受到了阻碍。     

局部应用甲状腺素促进周围神经再生的实验研究

在周围神经系统 ,外源性甲状腺素可以增加受损神经元合成蛋白质的数量 ,促进轴突的再生 [1 ]。近年来研究发现 ,在周围神经系统 ,甲状腺素对于相应细胞的作用需要三碘甲状腺原氨核心受体 (NT3 R) [2 ] 。而在坐骨神经损伤时或许旺细胞的体外培养中 ,许旺细胞会表达 NT3 R[3 ] 。因此 ,局部应用的甲状腺素会与损伤局部许旺细胞上的 NT3 R特异性结合 ,从而发挥甲状腺素促进许旺细胞增殖分化的作用。因此 ,本实验设计用硅胶管桥接大鼠周围神经缺损 ,在其中注入一定剂量的甲状腺素 ,观察其能否促进周围神经的再生 ,从而探索一种新的治疗措施…     

FK506应用于冷藏保存同种异体神经移植的作用

目的　研究FK5 0 6结合冷藏保存应用于同种异体神经移植后对神经再生的实验效果。方法　 60只雌性Wistar大鼠做为受体动物模型 ,按移植物的不同分为 4组 ,每组 15只大鼠。A组 :新鲜同种异体神经移植组 ;B组 :冷藏保存同种异体神经移植组 ;C组 :冷藏保存同种异体神经移植组 ,同时服用FK5 0 6,剂量为 ( 2mg/kg) 1·d-1;D组 :冷藏保存同种异体神经移植组 ,同时服用FK5 0 6,剂量为 ( 0 .5mg/kg) -1·d-1。于术后 4、8、10周各组分别行大体观察 ,测定比目鱼肌肌湿重 ,运动神经传导速度 (MNCV)和运动动作电位 (CMAP)的波幅及组织学变化。结果　术后 8、10周时 ,4组中以C组神经再生最好 ,D组神经再生好于A、B组 ,但与C组相比则较差。轴突计数、肌湿重的统计学分析 ,有明显差别。结论　冷藏保存预处理同种异体神经移植后可以加速神经再生及功能恢复。     

FK506缓释膜应用于同种异体神经移植的实验研究

目的研究普乐可复(prograf,FK506)缓释膜在同种异体神经移植中的作用。方法应用异体神经桥接大鼠坐骨神经缺损,术中局部应用FK506缓释膜,分别于术后4、8、12周对移植物行大体和光镜观察,及轴突图像分析、移植神经电镜检查、小腿三头肌肌湿重比较、患肢坐骨神经电生理检查。结果C组(应用FK506缓释膜)的神经生长最好,基本与D组(自体神经移植)相同,B组(经预处理异体神经移植)次之,A组(新鲜异体神经移植)最差。经过对肌电图、轴突计数、肌湿重的统计学分析,C、B、A组的差异有统计学意义(P<0.05),C、D组之间差异无统计学意义。结论应用FK506缓释膜有助于减轻同种异体神经的免疫排斥反应,为神经再生创造良好条件;在同种异体神经移植中应用FK506缓释膜有助于促进神经再生。     

FK506对大鼠坐骨神经再生作用的实验研究

押目的对FK506促神经再生的作用及药物应用方法进行初步探讨。方法雄性SD大鼠60只,随机分成三组,切断双侧坐骨神经制成坐骨神经再生室模型。A组(对照组)再生室内注入生理盐水;B组(全身用药组)再生室内注入盐水,颈后皮下注射FK5061mg/kg,连续14天;C组(局部用药组)再生室内注入1μg/mlFK506。于术后一定时间内观察神经损伤局部的免疫反应熏检测腓肠肌湿重、组织形态学及图像分析、电生理学。结果B、C组神经损伤局部淋巴细胞浸润程度较A组轻微。6周时B组各测定结果明显优于A组;C组各指标好于A组,但不具有统计学意义。结论穴1雪全身应用FK506(1mg/kg)具有神经保护和神经营养作用,可加快神经功能的恢复。(2)局部应用FK506(1μg/ml)对早期损伤神经有一定的保护作用,但对神经再生的促进作用不确切。     

免疫抑制剂FK506加速周围神经损伤修复后功能恢复的初步临床报告

目的探讨免疫抑制剂FK506加速临床周围神经损伤修复后功能恢复的可能性.方法严格选择15例肢体神经断裂修复术后1d～3个月志愿者,男性12例,女性3例,年龄18～45岁.口服FK506胶囊,1mg～8mg/d,定期监测血药浓度并以此调节剂量,实际用药时间2～6月.定期评价神经再生及功能恢复.结果15例患者均有效,Tinel征、肌电图、临床神经功能恢复评价等综合显示神经再生速度达2.2～4.0 mm/d,平均3.1mm/d,快于同期肢体神经断裂修复术后非免疫抑制对照组1.2mm/d的速度.FK506血药浓度维持在3～5ng/ml,所有患者未出现明显的药物副作用.结论免疫抑制剂FK506可用于周围神经损伤修复后的临床治疗,促进神经快速再生,加速肢体功能恢复,值得进一步探讨.     

FK506缓释膜片促进外周神经端-侧吻合后神经再生的研究

目的 探讨免疫抑制剂FK506缓释膜片局部应用对周围神经端-侧吻合后神经再生的影响。方法 选用SD大白鼠40只，随机平均分成实验组和对照组。实验组：切断腓总神经，在邻近的胫神经干外膜上开一1mm窗口，将腓总冲经远端与胫神经干做端-侧神经吻合后在吻合口周围放置含有FK506分子可降解缓释膜片。对照组：单纯行神经端-侧吻合：两组分别于术后2、4、8、12周取材，对腓总神经和胫神经干用快蓝（FB）和荧光金（FG）注射标记，取背根神经节（DRG）和脊髓在荧光显微镜下观察被标记细胞。结果 实验组背根冲经节和脊髓内FB标记细胞明显多于对照组。结论 免疫抑制剂FK506能促进外周神经端-侧吻合后神经再生的速度和质量。     

锂剂促进周围神经损伤修复的初步研究

目的 探讨锂剂对周围神经损伤后神经再生的影响.方法 取48只雌性SD大鼠,制作大鼠右侧坐骨神经损伤动物模型,通过腹腔注射氯化锂,在不同时间点观察动物下肢活动情况,检测小腿三头肌神经电生理及肌湿重,并对损伤远端神经纤维的神经丝蛋白(NF200)、单核巨噬细胞抗原(ED1)、P-75和运动终板进行免疫组织化学染色观察.结果 损伤后4周,实验组动物下肢已接近正常行走步态,对照组右侧肢体仍明显跛行;损伤后2周和4周,实验组的复合肌肉动作电位(CMAP)波幅较对照组明显增大,两组间的差异有统计学意义(P＜0.05);损伤后4周、8周,实验组的小腿三头肌重量较对照组明显增大,两组间差异有统计学意义(P＜0.05);损伤后3 d,在距离损伤远端5 mm处,实验组坐骨神经纤维内NF200呈连续丝状染色,而对照组仍然是颗粒状染色;损伤后4周,在神经肌肉接头处,可观察到实验组肌肉运动终板有新生神经纤维支配,而对照组运动终板上无神经纤维支配,两组ED1及P75染色未见明显差别.结论 锂剂可有效促进周围神经损伤后的再生,但其机制仍需进一步研究.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of lithium on nerve regeneration after peripheral nerve injury.Methods Sciatic nerve crash injury model was created on the right side of 48 female SD rats.Lithium was administered after the injury by intraperitoneal injection.Locomotion of the lower limbs, electromyography and wet muscle weight of the triceps muscles were measured at different time points after the injury.Changes of NF200, ED1, P-75 and motor end plate at the distal part of the injured nerve were detected by immunohistostaining.Results Four weeks after sciatic nerve crash injury, animals that received lithium injection restored near normal gait, whereas the control animals were limping.Two and four weeks after the injury, the lithium injection group had significantly higher CMAP amplitude than the control group.Four and eight weeks after the injury, the wet muscle weight in lithium injection group was significantly heavier than the control group.Three days after crush injury, continuous NF200 positive fibers were found 5 mm distal to the injury site in the lithium injection group, whereas in the control group, only granular NF200 positive staining was observed Four weeks after crush injury, new innervations to the motor end plate were detected in the neuromuscular junction in the lithium injection group, but not in the control group.No differences in ED1 and P75 staining were detected.Conclusion Lithium could significantly promote axon regeneration after peripheral nerve crush injury.Its mechanism is subject to further investigation.     

FK506加速周围神经损伤修复后肢体功能恢复的实验研究

目的探讨FK506对大鼠坐骨神经横断伤修复后肢体功能恢复的影响.方法SD大鼠高位切断坐骨神经后原位缝合,术后实验组FK506灌胃,对照组不给药.分别于第1、2、3、5月检测术肢比目鱼肌重量恢复率、小腿三头肌肌力恢复率、坐骨功能指数、皮层体感诱发电位潜伏期.结果实验组肢体功能恢复时间较对照组提前大约两个月.结论FK506可加速周围神经横断伤修复后肢体功能恢复.     

FK506及神经干细胞对异体神经移植生长的作用

目的 探讨大鼠坐骨神经异体神经移植后联合应用FK506(他克莫司)及神经干细胞(NSCs)的可行性.方法 制造大鼠坐骨神经缺损模型,异体神经移植修复;根据分组不施加干预因素、吻合口注入NSCs、腹腔注射FK506,通过运动及感觉评分、电生理检测、组织学检查,以及免疫组织化学染色,观察神经再生差异.结果 同时应用FK506及NSCs组,感觉及运动评分(5.32±1.43),神经传导速度(20.52±1.45)m/s,GAP43染色(965.72±369.17)都明显优于其他组(P＜0.05).结论 FK506结合NSCs对异体神经移植生长具有促进作用.

Abstract：

Objective This experiment study the effect of FK506 and neural stem cells on the regeneration in nerve allografts. Methods An established rat sciatic nerve model was used. Sciatic nerve ( 10 mm) deficits were created in the Lewis rats. Nerves allografts were harvested from BN rats to repair the deficits of the Lewis rats. Group A received no treatment. Group B received neural stem cells. Group D received FK506. Group C receive both neural stem cells and FK506. Nerve regeneration was evaluated by standardized pin-prick and toe-spread tests. Nerve samples and gastrocnemius muscles were harvested for examination. Muscle denervation atrophy was evaluated by gastrocnemius weights. GAP-43 and BrdU (Two-step immunohistochemistry detection reagent) were assayed by immunohistochemistry test. Results Improved functional outcomes were observed in group C when compared with other groups. Nerve conduction velocity were (20. 52 + 1.45) m/s. The score of sense and motion were higher ( 5.32 ± 1.43 ) than other groups. Improved histomorphology and electrophysiologiy were observed in group C when compared with other groups. The concentrations of GAP-43 (965.72 + 369. 17) were largest in group C, showing ststistically significant difference between groups (P ＜ 0. 05). Conclusion The combination of neural stem cells and FK506 can improve nerve regeneration. It may provide an expanded source for those afflicted with extensive nerve defects.