M2受体对人支气管平滑肌功能性拮抗的影响

目的研究选择性M2受体阻断剂(MET)对人支气管平滑肌功能性拮抗的影响和M2受体在功能性拮抗中的作用.方法将自手术病人所得的离体支气管段随机分若干组(n=8),用电生理的方法测得不同浓度乙酰胆碱(ACh,1、10、100μmol/L)对人离体支气管平滑肌的收缩作用和对β受体激动剂异丙肾上腺素药理效应的功能性拮抗.相同方法和条件下,用选择性M2受体阻断剂MET(0.1～1.0μmol/L)或/和选择性和选择性M3受体阻断剂4-DAMP mustard(30 nmol/L)预处理人离体支气管后,观察实验结果.结果不同剂量ACh使得异丙肾上腺素量-效曲线右移.ACh 100μmol/L时,异丙肾上腺素效能强度下降33倍(-logEC50=-1.49±0.16),Emax下降30%.MET阻断上述胆碱能功能拮抗现象,对组织胺引起的没有作用.另外,在人离体支气管平滑肌M3受体被4-DAMP mustard(30 nmol/L)完全乙酰化的情况下,MET同样阻断ACh对异丙肾上腺素效应的功能拮抗作用.结论M2受体的激活可间接引起人支气管平滑肌的收缩,降低β受体效应,产生胆碱能功能性拮抗现象.     

海马内M1和M2受体与学习记忆关系的研究

目的 研究海马内M1和M2受体亚型对学习记忆的调节。方法 SD大鼠分为3组，海马内分别微重注射M1、M2反义寡核苷酸(MASODN)，以海马内注射生理盐水作为对照组，观察药物对大鼠被动逃避反应步入潜伏期的影响。结果 海马内注射M2ASODN大鼠的步入潜伏期显著缩短，较对照组减少75％，海马内注射M2ASODN大鼠的步入潜伏期显著延长。结论 海马内M1受体可正向调节学习记忆，而M2受体负向调节学习记忆。     

五种贝母甾体生物碱对豚鼠离体气管条M受体的拮抗作用

目的：研究中药贝母的有效成分贝母甲素、贝母乙素、西贝素、西贝素苷和蒲贝酮碱五种甾体生物碱的平喘机制－－对气管M受体的拮抗作用。方法：制备离体豚鼠气管螺旋条,用非选择性M受体激动剂卡巴胆碱引起气管条收缩,观察上述五种贝母生物碱的拮抗作用。结果：预试表明几种贝母生物碱,均使卡巴胆碱引起气管条收缩的量效曲线右移。经Schild方法计算,五种贝母甾体生物碱的pA2值分别为6．91,6．73,7．18,7．03和6．52。     

M2受体抗体在支气管哮喘发病中的实验性研究

目的测定Wistar大鼠外周血中M2受体的自身抗体,观察地塞米松对M2受体的自身抗体影响以及M2受体的自身抗体在哮喘发病中的可能机制。方法以卵白蛋白致敏制备Wistax大鼠哮喘模型,分为健康对照组、哮喘模型组和地塞米松组。以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,分别通过SA—ELISA检测各组大鼠外周血中的M2受体的自身抗体,计算抗体阳性率和抗体滴度的几何均数;观察各组动物哮喘发作症状、末次卵白蛋白致敏攻击24h内支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞的数量及支气管肺组织病理学改变。结果哮喘模型组的M2受体自身抗体阳性率为66．7％,明显高于对照组的8．3％和地塞米松组的16．7％（P〈0．05）;哮喘模型组自身抗体阳性患者的抗体滴度为1-105,明显高于对照组的1—20和地塞米松组的1-30（P〈0．05）。在哮喘模型组中,M2受体的自身抗体阳性率和抗体滴度明显高于健康对照组与地塞米松组,地塞米松组的BALF中的嗜酸性粒细胞与哮喘组相比有明显减少,地塞米松组的气道炎症程度轻于哮喘组。结论应用地塞米松可以降低M2受体的自身抗体阳性率和抗体滴度,提示M2受体的自身抗体可能参与哮喘的病理生理过程。     

抗原致敏人支气管平滑肌β2受体-腺苷酸环化酶偶联失常

目的；观察抗原刺激是否引起被动致敏的离体人支气管β２－受体－腺苷酸环化酶偶联失常。方法：内径２￣４ｍｍ的支气管来源于１２例接受肺叶切除手术的病人，用高效价的抗屋法螨－ＩｇＥ血浆致敏支气管。正常被动致敏及抗原刺激后的支气管分别用于建立腺苷酸环化酶兴奋剂Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ和β２受体兴奋剂舒喘灵累加浓度反应曲线。结果：与正常及被动致敏的支气管比较，抗原刺激后的支气管舒喘灵的反应减弱，而对Ｆｏｒｓｋｏｌｉ     

异丙肾上腺素对组织胺引起豚鼠支气管痉挛的拮抗作用

本实验采用自行研制的微机控制动物肺功能仪，观察到豚鼠雾化组织胺后肺顺应性急剧降低，气道阻力急剧增加，１８ｍｉｎ后恢复正常。给予异丙肾上腺素０３～３０μｇ／ｋｇ剂量在１～８ｍｉｎ各时间点均不同程度地增加了肺顺应性，降低了气道阻力（Ｐ＜００５），并呈现量效依赖性关系。     

中药外敷对哮喘豚鼠肺组织β和M受体含量的影响

目的：观察豚鼠哮喘急性发作时肺组织β肾上腺素能受体和M胆碱能受体含量变化及中药外敷对其影响。方法：用Hutson法造模和诱喘，治疗组予中药外敷，对照组予0．9％生理盐水浸润纱布外敷，2周后取肺组织，用放射配基结合分析法测定其中β受体和M受体含量。结果：豚鼠哮喘性发作时肺组织β受体含量明显降低，M受体含量明显升高，而中药外敷能其恢复正常。结论：提高肺组织β受体含量和降低M受体含是是中药外敷治疗哮喘的机理之一。     

有机磷类杀虫剂对毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响

目的：研究有机磷类杀虫剂（OPs）对G蛋白结合受体激酶-2（GRK2）介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响,进一步揭示有机磷类杀虫剂可能存在的其他作用途径.方法：利用亲和层析方法从猪脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱M2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体,G蛋白结合受体激酶-2,[γ-p^32]标记的ATP与不同浓度的对氧磷（PO）、氧毒死蜱（CPO）共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果.之后将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化M2受体蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数.结果：氧毒死蜱（CPO）完全抑制毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化,其IC50为70 μM;毒死蜱（CPF）也抑制M2受体的磷酸化,而对氧磷（PO）与对硫磷（parathion）不抑制M2受体的磷酸化.结论：不同的OPs对GRK2介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化有完全不同的作用;毒死蜱阻断M2受体的磷酸化,提示OPs的毒性作用存在其他的可能作用途径.     

正常豚鼠胆囊平滑肌M受体亚型mRNA表达的研究

目的 研究M受体亚型mRNA在正常豚鼠胆囊平滑肌的表达.方法 10周龄白化豚鼠10只,RT-PCR检测胆囊平滑肌M受体亚型mRNA的表达.结果 豚鼠胆囊平滑肌有M受体4种亚型mRNA的表达,各亚型mRNA表达从强到弱顺序依次为M3、M2、M4及M1,无M5受体mRNA的表达.M3与M2受体mRNA的表达量差异无显著性(P＞0.05),M3、M2受体mRNA的表达量分别与M4和M1受体mRNA的表达量相比,差异均有显著性(P＜0.05).结论 胆囊平滑肌有4种M受体亚型mRNA表达即M1～M4,提示这4种亚型可能均参与迷走神经递质乙酰胆碱激发的胆囊收缩.     

人食管下括约肌毒蕈碱受体的表达

目的：研究毒蕈碱受体亚型在人食管下括约肌（LES）套索纤维和钩状纤维的表达,对LES胆碱能收缩机制作进一步分析．方法：选取高位食管中段癌,行食管大部切除术患者12例,取食管胃接合部标本分离套索纤维和钩状纤维．分别应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印记（Western Blot）检测5种M受体亚型在两种肌纤维中mRNA和蛋白的表达．结果：不同M受体亚型mRNA在两种肌纤维的表达有统计学差异（P〈0．05）,从数据观察5种受体亚型mRNA表达从强到弱顺序依次为M2,M3,M1,M4,M5;同一受体mRNA在两种肌纤维间表达无统计学差异;不同M受体亚型蛋白在两种肌纤维表达有统计学差异（P〈0．05）,5种受体亚型蛋白表达强弱同mRNA;同一受体在两种肌纤维间蛋白表达无差异．结论：5种M受体亚型mRNA和蛋白在两种肌纤维均有表达,M2受体表达量最高,其它依次是M3,M1,M4和M5受体;相同受体在两种肌纤维间mRNA和蛋白的表达相同．     

心肌M2胆碱受体抗体对大鼠心房及心室肌cAMP含量的影响

目的 :了解心肌M2 胆碱受体抗体 (M2 Ab)对大鼠心房和心室肌cAMP含量的影响 ,并与M2 胆碱受体激动剂卡巴可 (Carb)的作用进行了对比观察。方法 :采用离体生化放射免疫分析法测定M2 Ab及M2 胆碱受体激动剂Carb对心肌cAMP含量的影响。结果 :①M2 Ab及Carb两者均可剂量依赖性抑制异丙肾上腺素 (Isoproterenol,Iso)所刺激的大鼠心房及心室肌cAMP的增加。卡巴可浓度为 2 μmol/L ,10 μmol/L ,5 0 μmol/L时可分别抑制Iso所刺激的cAMP含量 (8.5± 1.2 ) % ,(16 .2± 1.4) % ,(2 9.5± 2 .1) % ,而M2 Ab浓度为 5 0nmol/L ,10 0nmol/L ,40 0nmol/L时 ,可分别抑制 (6 .1± 0 .6 ) % ,(17.3± 1.8) % ,(31.7± 3.1) % (P <0 .0 1)。②Carb(10 μmol/L)及M2 Ab(10 0nmol/L)两者可分别抑制基础cAMP(49.2± 4.3) %和 (6 4.3± 5 .1) %。③M受体阻断剂阿托品 (Atr) (1.5 μmol/L)不但可阻断Carb对Iso的抑制反应 ,亦能阻断M2 Ab的这种反应。而相应的抗原性肽段也能阻断M2 Ab的这种反应。结论 :M2 Ab抑制Iso引起的心室肌细胞cAMP生成量的增加反应 ,类似于M受体激动剂Carb ,两者效应均通过作用于M2 受体途径实现。     

慢性缺氧高二氧化碳大鼠支气管中结构型一氧化氮合酶的分布

目的：研究结构型一氧化氮合酶（ｃＮＯＳ）在慢性缺氧高二氧化碳的大鼠支气管中的表达及分布。方法：用原位杂志技术，对慢性缺氧高二氧化碳的大鼠支气管中ｃＮＯＳ的表达进行定位研究。结果：慢性缺氧高二氧化碳大鼠的各级支气管平滑肌细胞呈ｃＮＯＳ阳性染反反应，上皮细胞呈ｃＮＯＳ弱阳性染色反应。结论：慢性缺氧高二氧化碳时，ｃＮＯＳ在支气管上皮细胞中的表达被抑制。     

The regulating effects of protein kinase C on the tone of guinea-pig trachea and human lobus bronchi

Summary The regulating effects of protein kinase C (PKC) on the tone of guinea-pig trachea and human lobus bronchi were investigated by measuring the tone of isolated tracheal and bronchial strips. The effects of PKC on the tone of guinea-pig tracheal and human lobus bronchi were observed and compared. The results showed that: (1) PKC activator PMA induced concentration-dependent relaxation in guinea-pig isolated trachea strips. This relaxation was completely ablated by the pretreatment with 5 × 10^t-6mol/L Ro31-8220 which is a PKC-specific inhibitor, but was not affected by the removal of epithelium (EP), or by the pretreatment with propranolol (β-receptor blocker) or atropin (M-receptor blocker); (2) PMA led to concentration-dependent contraction in human lobus bronchi. This contractile response was completely depressed by the pretreatment with 5 × 10^t-6 mol/L Ro31-8220 and was partly inhibited by 1 × 10^t-5 mol/L isoptin (Ca²⁺-antagonist). but was not significantly affected by propranolol or atropin. It is concluded that PKC is involved in the regulation of airway smooth muscle tone. The regulating effects may vary in different animals.     

M_2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流家兔心房钠尿肽分泌的影响

[目的]建立离体跳动灌流心房模型,并探讨激活M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房钠尿肽(ANP)分泌的影响.[方法]利用急性剥离的家兔左心房和放射免疫分析方法观察M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房动力学及灌流液中ANP分泌的影响.[结果]记录到的离体跳动灌流心房模型心房内压及每搏搏出量与文献报道基本一致;卡巴胆碱明显抑制心房内压和搏出量,显著增加灌流心房ANP的分泌,此效应被M2型毒蕈碱受体抑制剂Methoctramine阻断.[结论]成功建立离体跳动灌流心房模型;M2型毒蕈碱受体的激活增加心房ANP的分泌.     

正常幼龄豚鼠巩膜组织毒蕈碱受体五种亚型的表达

目的 探讨正常幼龄豚鼠眼巩膜组织毒蕈碱受体(M受体)五种亚型的表达.方法 2周龄三色豚鼠6只,RT-PCR检测巩膜组织M受体亚型的mRNA的表达,免疫荧光法染色检测M受体的蛋白水平的表达.结果 豚鼠巩膜组织中有M受体五种亚型mRNA的表达,其中以M1亚型的表达最高.激光共聚焦显微镜观察发现,在巩膜基质中可见到M受体五种亚型的表达绿色荧光,围绕在成纤维细胞核周围.结论 豚鼠巩膜组织中存在M受体五种亚型,提示M受体参与调控眼球的生长.     

The role of potassium channels in the nitric oxide-induced relaxation of human airway smooth muscle of passively sensitization by serum from allergic asthmatic patients

INTRODUCTIONNitric Oxide (NO), the major endothelium-de-rived relaxing factor (EDRF), can relax thesmooth muscle of airway, vascular and gastroin-testinal. Clinically, nitric oxide (NO) is widely usedas a pulmonary vaso-and bronchodilator agent. Inprevious study, we found that NO relaxed the con-traction of airway smooth muscle partly via potassi-um channel (most of BKca channel) opening inrats [1]. Another animal studies indicated the same re-sults [2] , But there is scarce evidence…