黄芪多糖对 Caco-2细胞上P-gp功能、表达的影响

【目的】 研究黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对Caco-2细胞上P糖蛋白(P-gp)功能、表达的影响。 【方法】 采用MTT法考察药物对细胞的毒性,确定药物最大无毒浓度;流式细胞仪测定Caco-2细胞上P-gp底物罗丹明-123(Rh-123)和抗体的荧光强度,评价APS对P-gp功能和表达的影响;建立Caco-2细胞单层模型,研究APS对Rh-123跨膜转运的影响。【结果】 细胞毒性实验结果显示,APS在0.1～100 μg.mL_-1浓度范围内对Caco-2细胞无明显毒性,细胞存活率＞90%;不同浓度的APS作用后,增加了细胞内Rh-123的蓄积,对P-gp的功能表现为抑制作用;中、高浓度组APS对P-gp的表达有抑制作用,其表达量分别降低了11.23%和16.41%;APS高浓度组明显抑制了Rh-123的双向跨膜转运,对P-gp有抑制作用。【结论】 黄芪多糖(APS)对P-gp的功能和表达有一定的抑制作用,且在高浓度尤为明显,能显著增加Rh-123在Caco-2细胞内的蓄积,并抑制其双向跨膜转运。     

黄芪多糖对Caco-2细胞P-gp功能、表达的影响

目的观察黄芪多糖(APS)对Caco-2细胞P糖蛋白(P-gp)功能、表达的影响。方法采用MTT法考察药物对细胞的毒性,确定药物最大无毒浓度;流式细胞仪测定Caco-2细胞P-gp底物罗丹明-123(Rh-123)和抗体的荧光强度,评价APS对P-gp功能和表达的影响;建立Caco-2细胞单层模型,观察APS对Rh-123跨膜转运的影响。结果细胞毒性实验结果显示,APS在0.1~100μg/m L浓度范围内对Caco-2细胞无明显毒性,细胞存活率90%;不同浓度的APS作用后,增加细胞内Rh-123的蓄积,对P-gp功能表现为抑制作用;中、高浓度50、100μg/m L的APS对P-gp表达有抑制作用[(26.72±2.43)、(23.97±2.08)比(30.10±1.28),P0.05],其表达量分别降低11.23%和16.41%;高浓度APS 100μg/m L明显抑制Rh-123的双向跨膜转运,对P-gp有抑制作用。结论黄芪多糖(APS)对P-gp的功能和表达有一定的抑制作用,且在高浓度尤为明显,能显著增加Rh-123在Caco-2细胞内的蓄积,并抑制其双向跨膜转运。     

人结肠腺癌细胞系Caco-2单细胞层短期培养法及其评价

 目的 利用丁酸建立一种短期培养人结肠腺癌细胞系Caco-2(human colon adenocarcinoma cell line)单细胞层的方法。方法 使用不同成分的含丁酸培养基培养Caco-2单细胞层,通过显微镜观察细胞形态学特点、测定跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)和荧光黄通透量等指标,评价其完整性;通过检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性,评价其细胞极化程度;通过RT-PCR评价其对主要药物转运蛋白表达的影响。结果 使用短期培养法获得的Caco-2单细胞层形态完整,TEER>500 Ω·cm2,漏出标志物荧光黄表观分配系数(apparent permeability,Papp)<5×10-5 cm/s,表明单细胞层的完整性良好。同时肠腔侧(apical,AP)AKP活性显著升高,表明单细胞层出现明显的极性分化。短期培养与21天培养所得的Caco-2单细胞层中,药物转运蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的RNA表达水平基本一致。结论 含丁酸的无血清培养基可促进Caco-2单细胞层的快速形成,利用该法建立的Caco-2细胞模型符合各项指标的要求,可用于研究口服药物转运的吸收机制。     

川芎嗪在Caco-2细胞单层模型的转运特征及对P-糖蛋白表达的影响

目的 研究川芎嗪在Caco-2细胞单层模型的转运特征以及对P-糖蛋白（P-gp）表达的影响。方法 MTT法确定川芎嗪对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;以Caco-2细胞单层模型研究川芎嗪的双向转运机制,以表观渗透系数（P_app）为检测指标,考察时间、药物浓度以及P-gp抑制剂维拉帕米对川芎嗪转运的影响;Western blotting法检测川芎嗪对P-gp表达的影响。结果 从顶侧（AP）到底侧（BL）（AP→BL）,川芎嗪的P_app＞10^?6 cm/s,表明其吸收性良好;川芎嗪的转运量与其浓度和时间呈正相关,且川芎嗪AP→BL的转运量明显大于BL→AP的转运量;川芎嗪不仅受到P-gp的外排作用,同时也抑制P-gp表达。结论 川芎嗪在Caco-2细胞模型的转运方式为被动转运,且受到P-gp的外排作用,并对P-gp的表达有抑制作用。     

Caco-2细胞单层模型的建立和评估

目的 建立Caco-2细胞单层的培养和模型评价的方法,为后续研究普萘洛尔(propranolo)对映异构体转运动力学特征奠定基础.方法 常规培养条件下,将Caco-2细胞分别以2.5×105、5.5×105 cells/ml分别接种于Transwell的聚碳酸脂膜上(0.4ml/well),在培养10d、15d和21d后,以细胞单层跨膜电阻(Transepithelial electrical resistance,TEER)、标志物的表观通透系数(The apparent permeability coefficients,Papp)初步评价 Caco-2细胞单层模型的完整性,以扫描电镜和透射电镜验证模型的完整性,以期确定建模时的细胞接种密度和培养时间;检测细胞单层模型在HBSS液和不同浓度的普萘洛尔溶液中培养不同时间时的TEER值,以评价单层模型的稳定性.结果 以5.5×105 cells/ml 接种21d后,TEER＞200Ω*cm2、Papp＜1.0×10-6cm/s,形态学观察可见细胞融合形成连续、完整的单细胞层,细胞表面覆盖一层刷状缘微绒毛;细胞单层模型在HBSS液和盐酸普萘洛尔药液(≤640mmol/L)中孵育8h后TEER＞200Ω*cm2.结论 以5.5×105 cells/ml为细胞接种密度且培养至21d后,Caco-2细胞单层形态与小肠上皮细胞类似,跨膜电阻、标志物透过量均达到要求,具有良好的完整性,而且细胞单层的完整性在HBSS液和盐酸普萘洛尔药液(≤640mmol/L)中可稳定8h,表明该细胞模型建立成功,可用于后续普萘洛尔对映异构体药物吸收动力学研究.     

虚寒状态下药物代谢酶CYP3A和转运蛋白P-gp变化的体内外实验研究

目的 通过体内外实验探讨虚寒状态下药物代谢酶CYP3A和转运蛋白P-gp变化.方法 连续14 d每天肌注氢化可的松粉针剂(20 mg/kg)制造虚寒大鼠模型,观察正常、虚寒大鼠肝、小肠CYP3A活性和小肠P-gp蛋白水平;选用L02细胞和Caco-2细胞作为细胞模型,分别用正常和虚寒状态大鼠血清对其进行干预,分别观察L02细胞中CYP3A活性和Caco-2细胞中P-gp蛋白水平.结果 虚寒模型大鼠肝和小肠微粒体CYP3A活性显著降低(P＜0.05),小肠P-gp蛋白表达显著降低(P＜0.05).虚寒状态L02细胞中CYP3A活性明显降低(P＜0.05),但虚寒状态Caco-2细胞中P-gp蛋白水平没有显著变化.结论 体内、外实验共同验证了虚寒状态下CYP3A活性处于低下状态,至于Caco-2细胞中P-gp没变化,可能与Caco-2细胞株本身为癌细胞,P-gp高表达有关.     

Caco-2细胞模型在中药转运机制及相互作用机制中的研究进展

<正>Caco-2细胞是通过克隆人类的结肠癌细胞而来。Caco-2细胞不仅在显微镜下形态、极性及胞饮功能与小肠上皮细胞相似,而且其含有的转运系统和代谢酶也与小肠刷状缘上皮相似[1]。药物在透过Caco-2细胞模型的体外过程与药物口服后,在小肠内的吸收和代谢有良好的相关性[2]。因此,Caco-2细胞模型常用于药物的跨膜转运实验,从而可进一 更多还原     

应用Caco-2细胞模型观察介质pH和氨氯地平对替米沙坦跨膜吸收转运的影响

目的 探讨介质pH值和常用合并用药氨氯地平对血管紧张素Ⅱ受体(AT1型)拮抗剂替米沙坦跨膜吸收转运的影响.方法 体外培养人结直肠癌Caco-2细胞,通过细胞形态观察、跨上皮细胞电阻(TEER)测定和荧光黄通透性实验验证Caco-2细胞单层完整性;通过ATP酶活性测定和双向转运实验分析替米沙坦是否外排糖蛋白(P-gp)底物;观察改变介质pH及合并使用氨氯地平时对替米沙坦跨膜吸收转运的影响.结果 建立的Caco-2细胞单层完整,适用于转运实验.替米沙坦ATP酶活性与空白对照ATP酶活性的比值为1.73,双向转运实验结果显示外排比率为4.53.随着pH值(8.0～5.0)的降低,替米沙坦吸收表观通透性逐渐增强,跨膜吸收转运呈现明显的pH依赖性.在pH 7.4且合并氨氯地平时,替米沙坦吸收表观通透性明显增强.结论 P-gp可能参与替米沙坦跨膜分泌转运,介质pH酸性环境和氨氯地平可易化替米沙坦跨膜吸收转运.     

补阳还五汤黄酮类有效成分在Caco-2细胞单层模型的转运特征及对CYP450酶活性的影响

目的研究补阳还五汤3个黄酮类有效成分(羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、芒柄花素)在Caco-2细胞单层模型中的转运特征及其在大鼠肝微粒体中对CYP450酶亚型活性的影响。方法 MTT法研究药物在Caco-2细胞单层模型的安全浓度范围,以Caco-2细胞单层模型研究黄酮类有效成分的双向转运机制,以表观渗透系数(Papp)为检测指标,考察时间、浓度以及P-gp抑制剂维拉帕米对转运的影响,利用Cocktail探针法研究药物对CYP450亚型的体外抑制作用。结果从顶侧(apical,AP)到底外侧(basolateral,BL)(AP→BL),芒柄花素、毛蕊异黄酮的Papp>10-6 cm/s,表明其吸收性良好,羟基红花黄色素A的Papp为10-6cm/s,表明其吸收性一般;且三者的转运量随浓度升高和时间延长而显著升高,BL→AP的转运量与AP→BL的转运量的比值小于1.5,其中芒柄花素、毛蕊异黄酮的转运都受到P-gp外排蛋白的外排作用;补阳还五汤黄酮类有效成分明显降低了CYP2E1、CYP1A2酶探针底物的代谢量(P<0.05)。结论 3种黄酮类有效成分在Caco-2细胞模型的转运方式均为被动转运,毛蕊异黄酮与芒柄花素明显受到P-gp的外排作用,补阳还五汤黄酮类有效成分可以增加主要通过CYP2E1、CYP1A2酶代谢的药物浓度。     

低氧微环境对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及HIF-1α表达的影响

目的观察低氧微环境对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响;探索不同时间梯度和细胞密度在低氧微环境下对HIF-1α表达的影响。方法 (1)构建脑胶质瘤细胞(T98G)生长的缺氧微环境,将细胞设为低氧组(1%氧气含量)和常氧组(21%氧气含量),在不同氧浓度下培养4～72 h后观察细胞生长情况;利用western blot印迹法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达情况;(2)将低氧组T98G细胞设计为四组不同细胞密度,在1%O2的低氧浓度下培养24 h,通过Western blot检测四组细胞HIF-1α表达情况。结果 (1)倒置显微镜和Hoechest染色均未见低氧组和常氧组细胞发生明显的细胞凋亡,MTT法检测二组细胞均呈增殖状态。与常氧组相比,低氧组细胞HIF-1α蛋白明显高表达(P <0.001)。低氧组细胞在4、6、12、24 h (<24 h) HIF-1α蛋白表达量快速升高(P <0.05),24、48、72 h (> 24 h) HIF-1α蛋白表达量逐渐下降;(2)低氧微环境下四组不同细胞密度中,24 h后高密度组(8.5万个细胞/cm2)细胞的HIF-... 更多     

缺氧对合体滋养细胞胞外体分泌和Rab11蛋白表达的影响

目的 探讨缺氧条件下,Rab11蛋白的表达变化及其在合体滋养细胞胞外体(syncytiotrophoblast exosome,STBEX)过度分泌中的作用.方法 将传代培养的BeWo细胞分为4组(n=24),①BeWo常氧组:BeWo细胞在普通培养基、常氧条件下培养;②BeWo低氧组:BeWo细胞在普通培养基、低氧条件下培养(92％ N2、5％CO2、3％ O2);③融合BeWo常氧组:BeWo细胞以佛司可林(Forskolin)合体化刺激48 h后,常氧条件下培养;④融合BeWo低氧组:BeWo细胞以Forskolin合体化刺激48 h后,低氧条件下培养(92％ N2、5％ CO2、3％O2).收集各组细胞上清液并检测STBEX蛋白浓度,采用Western blot检测各组细胞HIF-1α、Rab11蛋白的表达.结果 与融合BeWo常氧组比较,融合BeWo低氧组上清液中STBEX的蛋白浓度升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);与BeWo常氧组比较,BeWo低氧组上清液中STBEX蛋白浓度升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);Western blot检测结果:与常氧培养组相比,低氧培养组细胞中HIF-1 α与Rab11蛋白表达升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 缺氧条件下Rab11蛋白可能促进合体滋养细胞胞外体的过度分泌.     

低氧对非小细胞肺癌细胞PDHA1表达及生物学行为的影响

目的:观察低氧对非小细胞肺癌细胞丙酮酸脱氢酶E1α亚单位(PDHA1)表达及生物学行为的影响。方法:肺鳞状细胞癌细胞株LC-42和肺腺癌细胞株SELS分别在常氧及低氧条件下培养6 d,每天计数细胞,绘制生长曲线,计算细胞倍增时间。两种细胞分别在低氧和常氧条件下培养72 h,采用Transwell侵袭实验测定细胞侵袭能力,采用克隆形成实验观察克隆形成能力,采用Western blot法检测细胞中PDHA1蛋白的表达水平。采用Pearson相关分析低氧条件下两种细胞PDHA1蛋白表达与穿膜细胞数及克隆形成率的相关性。结果:与常氧组相比,低氧组的两种细胞株均出现生长缓慢、细胞倍增时间延长,体外侵袭能力及克隆形成能力增强,PDHA1蛋白表达降低(P<0.05)。LC-42、SELS缺氧组细胞中PDHA1蛋白的表达与穿膜细胞数及克隆形成率均呈负相关(LC-42:r=-0.951、-0.758,SELS:r=-0.803、-0.791,P均<0.05)。结论:低氧导致肺鳞状细胞癌及腺癌细胞PDHA1蛋白表达下降,恶性生物学行为增强。     

低氧环境对创面修复主要效应细胞表达MMP-9的作用

目的 探讨低氧(2％O2)对创面修复主要效应细胞(表皮细胞及真皮成纤维细胞)表达MMP-9的影响.方法 常规培养人表皮细胞及人真皮成纤维细胞,分为常氧组和低氧组(设低氧培养3h和6h两个组),采用Western blot、明胶酶谱法和荧光定量PCR法检测人表皮细胞和真皮成纤维细胞MMP-9细胞蛋白表达、MMP-9细胞外分泌和MMP-9转录水平变化.结果 常氧培养的表皮细胞中,MMP-9呈一定程度的基础表达和细胞外分泌.与常氧组比较,低氧能明显促进表皮细胞MMP-9的蛋白表达(6h时增强约20％,P＜0.01)和MMP-9的细胞外分泌[(44.03±3.00)vs(60.64±3.77),P＜0.01].常氧与低氧条件下真皮成纤维细胞极少表达和分泌MMP-9.荧光实时定量PCR结果显示,低氧培养条件下表皮细胞MMP-9 mRNA水平显著增高,常氧对照组为(1.67±0.69),低氧6h组为(5.47 ±0.51),两者比较差异有统计学意义(P =0.002).结论 低氧刺激能显著诱导表皮细胞,而非真皮成纤维细胞,表达和分泌MMP-9,这一作用可能与低氧刺激促进MMP-9的转录有关.     

关于Caco-2细胞构建肠粘膜屏障模型的相关研究

目的 通过用Caco-2细胞的体外培养,建立肠粘膜屏障的模型。方法 通过对Caco-2细胞在体外transwell小室中连续培养21 d,并对培养的细胞进行形态学观察、跨膜电阻测定、inulin-FITC通透率测定,评估肠屏障模型是否构建成功。结果 通过体外连续培养Caco-2细胞形成了致密单层,可见细胞层单层排列,相互融合,边界清晰,细胞间紧密连接清晰可以见,21 d TER值为496.32±6.02(Ω·cm2),inulin-FITC的通透率<0.5%。结论通过细胞形态学观察,跨膜电阻测定及inulin-FITC的通透率显示Caco-2细胞体外构建肠屏障模型成功,此模型对于相关疾病的研究具有一定意义。     

低氧依赖低氧诱导因子-1α增强卵巢癌细胞SKOV3中乙酰肝素酶的表达及其侵袭力

目的研究低氧条件下卵巢癌细胞株SKOV3中乙酰肝素酶(HPA)的表达及其侵袭力的变化,探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)与SKOV3细胞侵袭力变化的关系。方法将SKOV3细胞分为常氧组、低氧组和低氧加雷帕霉素组。低氧组细胞在5%CO2 1%O2的条件下培养;在低氧培养前30min,向低氧加雷帕霉素组细胞培养基中加入终浓度为10ng/ml的雷帕霉素。分别于低氧培养12、24、36h收集细胞,采用Western bloting和RT-PCR方法检测HIF-1α和HPA的表达,基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭力。结果低氧条件下,HIF-1α的蛋白表达显著高于常氧组(P<0.05),而HIF-1αmRNA的表达不随氧浓度的降低而改变。低氧组HPAmRNA和蛋白质的表达量均显著高于常氧组(P<0.05)。雷帕霉素能抑制低氧导致的HPA mRNA和蛋白质表达的升高,HPA mRNA和蛋白质的表达均显著低于低氧组(P<0.05)。低氧组细胞的侵袭力显著高于常氧组(P<0.05)。SKOV3细胞HPA的表达与细胞侵袭力呈正相关(r=0.9863,P<0.01)。结论低氧可能依赖HIF-1α途径显著增强SKOV3细胞HPA的表达及其细胞的侵袭力。     

RNA干扰HIF-1α对人子宫颈癌裸鼠移植瘤多药耐药相关蛋白表达的影响

目的 通过RNA干扰技术沉默人子宫颈癌HeLa细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,在细胞及移植瘤水平研究低氧对子宫颈癌HeLa细胞多药耐药的影响.方法 ①将人子宫颈癌HeLa细胞株(记为HO细胞)、转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞株(记为H1细胞)及转染HIF-1α-shRNA质粒的Hel.a细胞株(记为H2细胞)分别行不同时间低氧培养,应用免疫印迹法分析每组HeLa细胞中HIF-1α及多药耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)在蛋白水平的表达情况.②应用免疫组织化学法检测HIF-1α及P-gp在上述3种HeLa细胞裸鼠移植瘤模型组织水平的表达情况.结果 ①免疫印迹法检测发现H0和H1组低氧24 h后HIF-1α、p-gp呈强阳性表达,常氧状态下HO、H1和H2组及低氧24 h后H2组未见HIF-1α表达,P-gp呈弱阳性表达.②HO、H1、H2组移植瘤中HIF-1α的平均吸光度值分别为(0.550 8±0.077 1)、(0.573 1±0.053 8)、(0.1701±0.088 4),P-gp的平均吸光度值分别为(0.697 62±0.114 0)、(0.696 4±0.107 2)、(0.213 8±0.035 1).结论 RNA干扰技术沉默人子宫颈癌HeLa细胞低氧诱导因子HIF-1α,可显著降低人子宫颈癌HeLa细胞中H1F-1α及P-gp表达,且二者有明显的相关性.     

低氧上调人脐静脉内皮细胞胶原ⅩⅧ和内皮抑素的表达

目的探讨低氧对体外培养的人脐静脉内皮细胞胶原ⅩⅧ和内皮抑素表达的影响。方法取体外原代培养的人脐静脉内皮细胞,分为对照组、低氧组、复氧组,对照组细胞正常培养24h,低氧组细胞放入氧浓度为2．5％低氧箱中培养24h,复氧组细胞于低氧培养24h后继续正常培养24h,采用ELISA法和RT-PCR技术检测内皮细胞胶原ⅩⅧmRNA和内皮抑素的表达。结果各组内皮细胞中均存在胶原ⅩⅧmRNA和内皮抑素的表达。与对照组比较,低氧组细胞胶原ⅩⅧmRNA和内皮抑素的表达明显增加,复氧组细胞胶原ⅩⅧmRNA和内皮抑素的表达较低氧组细胞明显降低,但高于对照组。结论低氧增加入脐静脉内皮细胞胶原ⅩⅧ和内皮抑素的表达,低氧可能是影响胶原ⅩⅧ和内皮抑素表达的因素之一。     

Caco-2细胞与肠道菌共培养初建体外模拟肠道共生模型

 【目的】构建体外模拟肠道共生系统,用于评价食源性抗菌药及其耐药菌作用于肠道菌群时对人体健康造成的危害风险。【方法】21d体外培养构建Caco-2细胞三维肠上皮,分成无菌对照组、混合的正常菌群组、沙门氏菌组、混合菌群-沙门氏菌组4组,制备混悬液,各组分别单独和混合培养4h,荧光定量PCR法测试共培养前后各菌16SrDNA菌量变化,电阻仪测试跨膜上皮电阻(TEER)数量;免疫荧光染色观察紧密连接蛋白ZO-1变化,评价三维肠上皮屏障功能的改变。【结果】 在体外共培养模型内,4种肠道菌混合培养4h后同单独培养组间比较,细菌量增长无统计学差异（P＞0.05)）;需氧菌的增长速度明显高于厌氧菌(P＜0.01),厌氧菌:需氧菌浓度比接近100:1,厌氧菌仍为优势菌。TEER和ZO-1免疫荧光染色结果均提示混合肠道菌群对Caco-2细胞三维肠上皮无明显破坏,侵入性沙门氏菌可显著降低TEER值,并观察到模型的ZO-1结构受到破坏。这种破坏作用在混合肠道菌群加沙门氏菌群组较轻。【结论】 Caco-2细胞三维肠上皮同乳双歧杆菌、植物乳酸杆菌、大肠杆菌和粪肠球菌组成的混合菌群体外共培养能建立稳定的体外肠上皮模型,并具有生物学活性;正常肠道菌群对侵入性沙门氏菌有拮抗作用。该模型可进一步完善作为食源性抗菌药、耐药菌与肠道系统相互作用研究模型的基础。     

低氧下沉默HLA-G对JEG-3细胞、EPAS1表达及其生物学行为的影响

目的 探讨在低氧条件下，沉默绒毛膜滋养细胞系JEG-3细胞的人类白细胞相关抗原-G(HLA-G)表达对JEG-3细胞生物学功能的影响和通过内皮PAS1区域蛋白1(EPAS1)低氧反应通路参与高原低氧条件下子痫前期发病的分子机制。方法 通过转染小干扰RNA(siRNA)抑制JEG-3细胞中HLA-G的表达，将转染后的JEG-3细胞分为4组：常氧对照组、低氧对照组、常氧抑制组、低氧抑制组。采用CCK-8实验及体外侵袭实验法检测4组细胞的增殖及侵袭能力；用流式细胞术检测4组细胞凋亡和细胞周期的影响；通过qPCR技术及Western blot法检测4组细胞中HLA-G和EPAS1 mRNA及蛋白的表达水平。结果 (1)与常氧对照组相比，低氧对照组及常氧、低氧抑制组均可使JEG-3细胞的增殖活性、侵袭能力降低，使得细胞凋亡率显著升高，低氧对照组与低氧抑制组产生了明显的坏死细胞群。低氧条件下，降低HLA-G的表达会提高细胞坏死率。无论在常氧还是低氧下，抑制HLA-G表达均使细胞被阻滞在G1期。(2)与常氧对照组相比，低氧对照组及常氧、低氧抑制组均降低HLA-G蛋白表达，且低氧和抑制HLA-G蛋白表...     

低氧对复合培养的平滑肌细胞中白细胞介素-6表达的影响

目的：研究低氧对复合培养的平滑肌细胞中白细胞介素6（IL－6）表达的影响。方法：低氧处理与肺微血管内皮细胞复合培养的鼠肺动脉平滑肌细胞，采用RT－PCR方法检测常氧组、低氧2、6、12h组IL－6基因的表达水平，并测定细胞培养上清中IL－6的活性。结果：低氧复合培养2h组肺动脉平滑肌细胞中IL－6　mRNA表达水平升高，在低氧6h组达最高，低氧12h组有所降低，但与常氧组比较有明显差别。低氧复合培养2h组肺动脉平滑肌细胞上清中IL－6的活性明显升高，6h组细胞上清中IL－6的活性水平最高，12h组的活性降低，24h组的水平低于2h组。IL－6活性水平与其基因表达的水平一致。结论：低氧可以增强复合培养的肺动脉平滑肌细胞中IL－6基因的表达，使细胞培养上清中IL－6活性升高，进有可能激活其它一些信号转导相关基因调节细胞的低氧反应。