过氧化物酶6肺部抗氧化应激的研究进展

氧化应激诱导的肺泡上皮细胞凋亡和损伤在肺部疾病中的作用受到了广泛的关注和重视。过氧化物酶6（Prdx6）兼有谷胱甘肽（GSH）过氧化物酶和磷脂酶A2（PLA2）活性,能有效对抗氧化应激,减轻氧化应激诱导的肺部损伤,在肺部疾病中扮演重要角色。本文对Prdx6肺部抗氧化应激研究进展进行综合论述。     

阴道毛滴虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的cDNA克隆及序列分析

目的获取阴道毛滴虫硫氧还原蛋白过氧化物酶的cDNA克隆,研究其还原烷基氢过氧化物和氢过氧化物的抗氧化作用,以及调节由氢过氧化物介导的信号转换. 方法提取阴道毛滴虫的总RNA,用λTripIEx2噬菌体载体构建cDNA表达文库,阳性质粒cDNA克隆进行测序,并用生物软件RPS-Blast,NCBI Blast和ClustalW等对6个读码框架进行序列分析. 结果获得一株开放阅读框为588对碱基的cDNA克隆,推测肽链有196个氨基酸.序列分析表明,该肽链与衣滴虫过氧化物氧化还原酶(Prx1蛋白)及人的自然杀伤增强因子B分别有56%和61%的同源性;除了两个高度保守的半胱氨酸作用基序外,还有蛋白激酶C磷酸化和酪氨酸激酶磷酸化作用基序,N-豆蔻酰化作用位点,脂质运载蛋白信号位点等. 结论该蛋白有＞56%的可能性位于胞浆,和典型2-Cys Prx亚家族有很高(56%～62%)的同源性,很可能是其中的一个新成员.     

硫氧还蛋白结合蛋白与肺部疾病的研究进展

硫氧还原蛋白相互作蛋白(TXNIP)是硫氧还蛋白(Trx)的内源性抑制剂,它通过与Trx活性部位结合而抑制其活性,破坏细胞内氧化还原平衡,促进氧化应激,最终可诱导炎症或细胞凋亡。TXNIP作为机体内主要的氧化应激相关因子,有可能成为干预治疗的靶点,在肺部疾病中发挥了一定作用,本文对TXNIP在肺部疾病中的表达与哮喘、慢性阻塞性肺疾病、急性肺损伤、肺癌的关系进行简述。     

硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ诱饵质粒的构建和检测

目的 构建硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ(PrxⅡ)诱饵质粒,同时检测其在酵母菌内的表达和对酵母细胞的毒性.方法 提取人前列腺癌细胞系PC-3M-1E8细胞的RNA,利用RT-PCR获得其cDNA, PCR方法扩增PrxⅡ基因片段,纯化后以内切酶双酶切PrxⅡ和酵母表达载体pGBKT7,回收产物并连接,重组质粒命名为pGBKT7-PrxⅡ, 将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用.结果 构建的诱饵载体pGBKT7-PrxⅡ测序结果表明序列完全正确,融合区域的读码框正确.将pGBKT7-PrxⅡ成功转化入酵母感受态AH109,并证明PrxⅡ蛋白对酵母无毒性作用.结论 证实了PrxⅡ蛋白无酵母毒性,诱饵质粒pGBKT7-PrxⅡ可以用于酵母双杂交研究前列腺癌发病机制.     

华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶的表达定位及其酶活性的研究

目的克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶(CsTPx),并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础。方法利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测。从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测。结果华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1~17位氨基酸为其信号肽序列,第51~74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶。重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中。酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性。抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性。结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性。     

髓性过氧化物酶与动脉粥样硬化相关性研究进展

髓性过氧化物酶是由活化的吞噬细胞分泌的相对分子质量为 75× 2kDa的一种血红素蛋白。它能通过作用于氯化物和酪氨酸 ,分别生成次氯酸和酪氨酰基 ,启动低密度脂蛋白的过氧化 ,产生氧化型低密度脂蛋白 ,从而促进动脉粥样硬化的发展     

过氧化物酶6与肺部炎症性疾病关系的研究进展

机体发生氧化应激时,大量的超氧阴离子和活性氧（ROS）会在肺内沉积,当其含量超出机体抗氧化酶清除能力时,会引起多种肺部炎症性疾病,如急性肺损伤（ALI）、哮喘、特发性肺间质纤维化（IPF）和慢性阻塞性肺疾病（COPD）等。为了对抗氧化应激导致的不良后果,机体细胞会释放大量抗氧化物酶。过氧化物酶6（Prdx6）同时具有谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和磷脂酶A2（PLA2）活性,能够维持机体氧化还原平衡,修复由氧化应激引起的膜损伤,调节肺泡表面活性物质的新陈代谢,改善肺泡上皮细胞凋亡程度,从而在肺部炎症中扮演重要角色。本文对Prdx6在肺部炎症性疾病中的作用进行综述。     

中国青岛文昌鱼硫氧还蛋白过氧化物酶表达、纯化及活性特征

目的:将编码青岛文昌鱼硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)的基因克隆于原核表达载体,并通过表达获得重组的TPx蛋白.方法:将已获得的TPx cDNA片段克隆于原核表达载体pET-32a( )M,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组表达质粒pET-32a( )M-TPx.37℃下经IPTG诱导,该融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.获得的重组TPx蛋白再经过纯化,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白.并对重组蛋白进行活性鉴定和结构分析. 结果:构建的重组质粒pET-32a( )M-TPx在大肠杆菌中高效表达,经纯化后的重组TPx蛋白纯度可达90%以上,其单体相对分子质量为24 460.重组TPx蛋白是以同源二聚体和单体混合的形式存在,在二硫苏糖醇(DTT)存在时具有还原H2O2活性和对超螺旋DNA或对硫醇基敏感蛋白的保护作用. 结论:本实验在大肠杆菌表达系统中高效表达了重组TPx蛋白,并且证实其活性与其高级结构紧密相关.     

第三丁基过氧化氢诱导MIN6细胞损伤

目的 通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导小鼠胰腺β细胞,模拟体外氧化应激的细胞模型,观察氧化损伤对β细胞生长的影响.方法 体外培养小鼠β细胞株MIN6,MTT法测定细胞存活率,AO-EB荧光显微镜观测,Annexin-Ⅴ-PI染色流式细胞技术定量定性分析细胞凋亡率及坏死率. 结果 MTT显示,t-BHP(12.5～200 μmol/L)作用不同时间后可明显抑制MIN6细胞的生长,并呈现一定的时效和量效关系;AO-EB荧光显微镜及Annexin-Ⅴ-PI流式细胞检测证实,25μmol/L浓度的t-BHP诱导β细胞的损伤作用以凋亡为主,而更高浓度的t-BHP使细胞由凋亡转向坏死.结论 t-BHP可用于体外模拟β细胞氧化应激损伤的模型.     

髓过氧化物酶及其基因多态性的研究进展

髓过氧化物酶作为一种白细胞酶,具有介导炎性反应、调节免疫应答等多种功能,并可参与疾病的发生发展过程。同时,髓过氧化物酶基因存在基因多态性,影响机体对疾病的易感性。本文就髓过氧化物酶结构、生物学功能、基因结构及多态性与相关疾病的研究进展简要综述。     

肺外成体干细胞移植治疗急性肺损伤研究进展

肺外成体干细胞移植治疗急性肺损伤具有巨大的应用前景。移植入体内的肺外成体干细胞首先在损伤肺组织细胞释放的一系列信号因子的引导下归巢到肺损伤和炎症部位,分化为肺组织细胞(肺上皮细胞、血管内皮细胞等)并发挥相应功能。干细胞移植后不仅具有分化能力,还具有抗炎效应和免疫调节功能,成为目前新的研究热点。     

白介素6在肺癌中的作用研究进展

T细胞作为细胞免疫疗法的核心,在肺癌研究及治疗中占据着重要地位。IL-6是目前已知的肺癌干细胞直接靶向的重要T细胞共刺激信号因子,其作为肺癌细胞中高表达的细胞因子,在肿瘤的发生、发展、侵袭、转移等一系列生物学行为中发挥着重要作用。本文对近年来IL-6在肺癌领域的研究进展,包括IL-6在肺癌发生和进展中的作用及其在肺癌治疗敏感性中的作用进行了综述。     

人工心脏瓣膜-患者不匹配现象研究进展

人工心脏瓣膜-患者不匹配是指植入瓣膜的有效开口面积相对于患者体型过小,术后残留明显的跨瓣压差进而影响患者预后。目前认为术后经胸超声测得的瓣膜有效开口面积指数是唯一可准确描述该现象的指标。各类瓣膜的有效开口面积差异较大,其不匹配发生率亦不相同。近年来介入置换主动脉瓣后的不匹配现象亦日益为人们所重视。人工瓣膜不匹配的临床意义目前争议仍较大。由于描述指标,定义标准及其他混杂因素不同,加之患者年龄、术前心功能状态、瓣膜病变类型等因素对其意义的影响,既往很多研究结论出入较大。左心功能不良及非高龄患者受其不良影响更为显著。手术时选用型号合适的瓣膜或在必要时实施根部拓宽术可有效预防不匹配的发生,具体采用何种策略须根据患者情况权衡利弊,但重度不匹配及心功能不良者的不匹配应尽力避免。本文就人工心脏瓣膜-患者不匹配现象近年来的研究进展作一综述。     

细胞焦亡在代谢性疾病中的研究进展

细胞焦亡是一种程序性细胞死亡形式,细胞焦亡导致细胞内容物与炎性因子的释放参与许多疾病的发生发展过程,是目前学术界研究的又一热点。本文旨在阐述细胞焦亡与代谢性疾病关系的研究进展,进一步拓宽对该类疾病发病机制的认识,为治疗提供新的思路。     

哮喘治疗进展

随着对哮喘发病机制的不断深入研究,哮喘的治疗也有了很大的进展和突破。20世纪70年代认为支气管哮喘的原因是支气管平滑肌痉挛,因此短效β2受体激动剂(SABA)成为当时哮喘的主导治疗,其虽能短期改善哮喘患者的症状,但病     

术后认知障碍研究新进展

虽然目前人们对术后认知障碍(post-operative cognitive dys-function,POCD)仍存有困惑,但2005-2010年关于POCD的研究无论从广度还是从深度都取得了很大的进步.作为一项世界性的难题,POCD的研究任重而道远.     

过氧化物酶1,6和GFAP在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及临床意义

目的确定星形胶质细胞瘤中过氧化物酶1(Prx1)、过氧化物酶6(Prx6)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,探讨其表达水平与星形胶质细胞瘤恶性程度的关系。方法采用Western blot、RT-PCR和免疫组化检测52例星形胶质细胞瘤(Ⅱ级23例、Ⅲ级15例、Ⅳ级14例)和12例正常脑组织标本中Prx1、Prx6和GFAP的表达情况。结果 Prx1、Prx6在正常脑组织、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平逐渐升高,具有统计学意义(P<0.05);GFAP在Ⅲ、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平低于Ⅱ级星形胶质细胞瘤和正常脑组织(P<0.05)。结论 Prx1、Prx6和GFAP可能是临床评价星形胶质细胞瘤恶性程度和侵袭性的潜在生物标志物,可作为星形胶质细胞瘤生物治疗的潜在靶分子。     

快速的长时遗忘在癫痫中的研究进展

近年来越来越多的研究发现癫痫患者存在一种新型的遗忘形式——快速的长时遗忘(ALF),即初始的学习和记忆正常,但会在随后的几天或几周出现异常.虽然ALF从发现至今已经近30年,但仍有很多问题不明确.本文就ALF定义、神经生物学基础、影响因素、在其他疾病中的研究、目前文献中的评定方法进行综述.     

白假丝酵母菌GPI锚定蛋白的研究进展

GPI锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored protein)是白假丝酵母菌重要的细胞表面蛋白,对白假丝酵母菌的黏附、形态转换和细胞壁合成等有着重要影响.近年来,随着对白假丝酵母菌研究的深入,GPI锚定蛋白越来越多的重要功能逐渐被发现.本文从白假丝酵母菌GPI锚定蛋白的概念入手,从家族分类和功能分类两个角度对GPI锚定蛋白的研究现状进行综述,并对GPI锚定蛋白未来的研究方向进行展望.     

miRNA分子在近日节律调节中的作用

miRNA是近几年来发现的一类小RNA,它们在调节基因和蛋白质的表达中发挥重要作用。这些小RNA(-22nt)与3′端的非翻译区(3′-UTRs)结合,从而导致靶mRNA的降解、抑制蛋白质的表达。miRNAs在发育和正常的细胞功能中发挥重要作用。最新研究发现miRNA可能是近日节律的重要调节因子,从而为我们提供了一个新的理解调控生物钟的层面。本文对miRNA在近日节律调节中的功能进行综述。