糖皮质激素性白内障研究进展

长期全身或局部应用糖皮质激素可发生激素性白内障，激素性白内障作为后囊下白内障的一种类型．其组织形态学表现、临床特点等有其特殊性。有关激素性白内障的发病机制较复杂且不明，有多种假说．都不能很好地解释后囊下混浊的形成过程，因而在预防及治疗上无有效手段。一种新的观点认为，激素可能通过生长因子影响晶状体上皮细胞分化，导致激素性白内障形成，因此．研究生长因子对晶状体上皮细胞增殖和分化的影响，可能是研究激素性白内障发病机制一个新的方向．     

晶状体上皮细胞异常分化对皮质类固醇性白内障后囊下混浊的影响

目的 探讨地塞米松(DEX)对大鼠晶状体上皮细胞(LECs)分化的影响及其在皮质类固醇性白内障(GIC)后囊下混浊(PSO)形成中的作用.方法 大鼠双眼应用DEX 6个月,ELISA法检测各时段房水碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)质量浓度的变化,行后囊膜铺片,观察组织学改变;不同浓度DEX作用于培养的大鼠LECs,采用RT-PCR和Western blot方法,检测LECs中β-晶状体蛋白表达的变化.结果 DEX组各时段房水bFGF质量浓度与正常对照相似(P＞0.05),部分后囊膜见上皮样细胞堆积,提示来自赤道部的LECs;DEX可抑制LECs中β-crystallin的表达,转录水平分别为0 mol/L组2.07,10-8 mol/L组1.48,10-7ml/L组1.06,10-6 mol/L组0.78,蛋白水平各组分别为1.38、1.03、0 60和0.45.结论 DEX抑制LECs分化可能在GIC的PSO形成中起重要作用.     

兔眼晶状体再生模型的建立及观察

目的:建立兔眼晶状体再生模型,探讨晶状体上皮细胞生长及晶状体再生的机制。方法:在8只新西兰白兔兔眼上行超声乳化晶状体吸除术,建立晶状体囊袋模型,术后裂隙灯观察晶状体再生并行再生晶状体的组织学检查。结果:术中撕囊口较小并有相对完整囊袋结构的实验兔眼可观察到晶状体再生;再生晶状体周边及前囊下有较好的透明性,越接近中央及后囊越混浊;组织学研究表明再生晶状体的赤道部晶状体上皮细胞增殖分化形成晶状体纤维,中央区LEC未参与增殖分化;再生晶状体的混浊部位其晶状体纤维排列混乱;囊膜皱折区有大量细胞增殖。结论:保留晶状体囊袋空间结构的相对完整性,可使兔眼晶状体再生;晶状体再生是赤道部晶状体上皮细胞增殖分化形成,囊膜形态结构影响细胞的增殖和分化。眼科学报 2002;18:230-234,248.     

地塞米松对人晶状体上皮细胞中波形蛋白表达的影响

目的 探讨地塞米松(dexamethasone,Dex)对人晶状体上皮细胞系(human lens epithelial cells,HLEC)中波形蛋白表达的影响以及波形蛋白表达变化在糖皮质激素性白内障形成中的作用.方法 对HLEC进行传代培养,应用DMEM和DMEM+1μmol·L-1Dex作用于HLEC 7 d,采用实时PCR和Western-blot从基因水平和蛋白水平检测波形蛋白的表达变化,采用免疫荧光染色法检测波形蛋白在细胞中的分布及表达变化.结果 实时PCR结果显示,Dex组较对照组波形蛋白mRNA表达减少,组间差异有统计学意义(P＜0.05).Western-blot检测结果显示,Dex组较对照组波形蛋白含量减少,组间差异有统计学意义(P＜0.05),提示Dex可降低波形蛋白的表达.免疫荧光染色结果显示Dex组较对照组波形蛋白表达减少,与Western-blot检测结果一致.结论 Dex可诱导HLEC中波形蛋白表达减少,从而引起HLEC异常的增殖和分化,最终导致糖皮质激素性白内障的形成.     

糖皮质激素性白内障的流行病学及发病机制

长期全身应用及眼局部应用糖皮质激素可引发糖皮质激素性白内障(glucocorticoid induced cataract,GIC),增加白内障患病风险。不同给药方式、剂量、剂型及合并不同全身性疾病引发白内障的风险不同,玻璃体注射长效缓释糖皮质激素患白内障的风险约为口服的3~5倍,口服累积每增加等效1 g泼尼松的糖皮质激素,白内障的患病风险为之前的1.03倍,服用第3代糖皮质激素地夫可特的患者发生白内障的风险比服用泼尼松的患者高2.4倍。GIC的发病可能与糖皮质激素受体介导的蛋白质结构及功能改变、生长因子引起的细胞异常分化、细胞凋亡的激活、晶状体蛋白结构功能的改变及氧化应激等有关。     

糖皮质激素受体与糖皮质激素性白内障发病的关系

长期全身或局部使用糖皮质激素容易发生晶状体后囊膜下混浊,导致糖皮质激素性白内障,机理尚不清楚.目前对两者关系的研究主要集中在糖皮质激素与晶状体的结合和糖皮质激素使用后晶状体蛋白的氧化两方面.近期研究发现在人、鼠的晶状体上皮均存在有功能活性的糖皮质激素受体,其在细胞信号、细胞通讯、细胞代谢和细胞增殖等方面有非常重要的作用...     

波形蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞中的表达及其意义

目的 :进一步明确波形蛋白的异常表达在老年性白内障形成中所起的作用。方法 :用链酶菌抗生物素蛋白 碱性磷酸酶 (streptavidin alkalinephosphatase,S P)免疫组化方法检测波形蛋白在 31例皮质性白内障、2 0例核性白内障及5例正常透明晶体上皮中的表达情况。结果 :波形蛋白在皮质性白内障晶体上皮中的表达比在核性白内障及正常透明晶状体中高。结论 :老年性皮质性白内障与老年性核性白内障的发生有不同的发病机制 ,皮质性白内障的发生与波形蛋白的过度表达有关     

地塞米松对体外大鼠晶状体上皮细胞增殖与分化的影响

目的:探讨地塞米松对大鼠晶状体上皮细胞增殖与分化的影响以及异常增殖与分化在激素性白内障形成中的作用。方法:对大鼠晶状体上皮细胞进行原代培养,应用不同浓度的地塞米松作用于2代上皮细胞24h,采用MTT方法检测地塞米松对上皮细胞增殖的影响,采用RT-PCR和Westernblotting方法,在转录及蛋白水平检测晶状体上皮细胞分化标志蛋白(β-晶状体蛋白)表达的变化,了解地塞米松对上皮细胞分化的影响。结果:地塞米松在一定范围内对晶状体上皮细胞有促进增殖的作用,其增殖率分别为10-8mol/L组131.9%,10-7mol/L组142.5%,10-6mol/L组183.4%;地塞米松在转录及蛋白水平可降低晶状体上皮细胞中β-晶状体蛋白的表达,在转录水平的表达分别为对照组2.07±0.26,10-8mol/L组1.48±0.07,10-7mol/L组1.06±0.16,10-6mol/L组0.78±0.16,在蛋白水平的表达分别为对照组1.38±0.16,10-8mol/L组1.07±0.11,10-7mol/L组0.97±0.04,10-6mol/L组0.62±0.12,说明地塞米松对晶状体上皮细胞的分化有抑制作用。结论:地塞米松对晶状体上皮细胞促进增殖和抑制分化的作用可能在激素性白内障形成机制中有一定的作用。     

激素性白内障的发病机制研究

糖皮质激素在许多生理过程中发挥重要作用,并被广泛应用于临床,在器官移植、战伤和免疫性疾病等救治过程中使用剂量更大。流行病学资料已证实长期全身、局部应用及吸入糖皮质激素治疗均可引起以晶状体后囊混浊为特征的激素性白内障。激素性白内障的发病机制复杂。主要形成了氧化损伤学说、蛋白加和物学说、激素通过受体途径而发挥作用的受体学说、离子转运障碍学说、晶状体结构蛋白和酶功能损害学说、细胞黏附分子异常学说。激素不仅可能直接攻击晶状体蛋白质,而且也可能通过受体、细胞调控、黏附调节等间接发挥作用。最近研究已证实晶状体上皮细胞中存在糖皮质激素受体,这将有助于阐明激素性白内障发生机制,为药物预防和治疗白内障提供新思路。     

EGCG抗兔晶状体上皮细胞增殖机制中p38激酶作用的研究

目的:研究p38激酶在绿茶提取物中的表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG]抗晶状体上皮细胞增殖机制中的作用。 方法:用噻唑蓝比色法(MTT比色法)研究p38的特异性抑制剂SB203580对EGCG抑制晶状体上皮细胞增殖作用的影响;用Western Blot法研究EGCG对p38激酶的磷酸化和非磷酸化水平的影响。 结果:(1)预先加入25μmol/L,50μmol/L的SB203580孵育1h后,100μmol/L EGCG对晶状体上皮细胞增殖的抑制率低于对照组,但这种差别没有统计学上的意义(P>0.05);200μmol/L EGCG组对晶状体上皮细胞的抑制率低于对照组,有统计学的意义(P<0.05);(2)在晶状体上皮细胞,磷酸化的p38基础水平很低。p38的磷酸化水平随EGCG浓度的增加逐渐增加,而非磷酸化的p38的水平与基础水平一样保持不变。以200μmol/L EGCG作用15min来研究其对p38的磷酸化和非磷酸化影响的时-效规律发现,加药后初期,p38的磷酸化水平很高,随后逐渐下降。同时,非磷酸化p38的水平保持不变。 结论:(1)EGCG对晶状体上皮细胞的增殖抑制作用可能通过p38通路;(2)EGCG对p38影响主要在于调节蛋白激酶的磷酸化与去磷酸化水平,不影响总蛋白含量。眼科学报 2003;19:236-238。     

晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成的影响研究

目的 :为研究晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成的影响。方法 :对 14例老年性白内障晶状体前囊上皮细胞进行角质蛋白 -8、波形纤维蛋白和纤维粘连蛋白表达的免疫组化研究。结果 :皮质性白内障晶状体上皮的波形纤维蛋白表达明显强于核性白内障 (P <0 0 5 ) ;角质蛋白 -8在皮质性白内障晶状体上皮的表达比核性白内障弱 ((P <0 0 1) ;纤维粘连蛋白在皮质性白内障晶状体上皮的表达明显强于核性白内障 ,而在正常晶状体上皮不表达。结论 :晶状体上皮细胞具有转分化为成纤维样细胞的双向化潜能。晶状体上皮获得转分化能力后而失去原来的细胞学特性。在老年皮质性白内障中 ,晶状体上皮细胞转分化成为成纤维样细胞 ,伴随波形纤维蛋白的过度表达和角质蛋白表达下降。同时合成包括纤维粘连蛋白在内的细胞外基质增多 ,而纤维粘连蛋白能促进晶状体上皮的增殖、迁移及粘附 ,因而晶状体上皮细胞转分化对老年性白内障形成及后囊混浊的形成发挥重要作用。     

人原代晶状体上皮细胞中PEDF基因下调引起波形蛋白和αB-晶状体蛋白含量的变化

目的　研究人原代晶状体上皮细胞中,下调色素上皮衍生因子（ｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ－ｄｅｒｉｖｅｄｆａｃｔｏｒ,ＰＥＤＦ）的表达对波形蛋白和αＢ－晶状体蛋白表达的影响。方法　取２０～３５岁青年人晶状体上皮细胞进行原代培养。构建三种短发卡ＲＮＡ（ｓｈｏｒｔｈａｉｒｐｉｎＲＮＡ,ｓｈＲＮＡ）以特异性下调原代人晶状体上皮细胞中的ＰＥＤＦ基因ＲＮＡ表达水平。感染细胞后,用Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ检测ＰＥＤＦ基因ｍＲＮＡ的表达水平,确定ＲＮＡ干扰效率。人原代晶状体上皮细胞ＰＥＤＦ基因ＲＮＡ干扰４８ｈ后,用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测其中波形蛋白以及αＢ－晶状体蛋白表达水平的变化,以ｓｈＲＮＡ－ｓｃｒａｍｂｌｅ组为阴性对照组。结果　人原代晶状体上皮细胞被成功分离培养,带有绿色荧光蛋白的表达ＰＥＤＦｓｈＲＮＡ的病毒载体对人原代晶状体上皮细胞的感染效率都在８０％左右。Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ结果显示ＰＥＤＦ基因ｍＲＮＡ的表达明显被三种ｓｈＲＮＡ下调。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ结果显示ＰＥＤＦ基因的表达下调引起了波形蛋白的表达下降（在三个实验组中分别下降了７２％、７９％和９３％）以及αＢ－晶状体蛋白的表达增加（在三个实验组中分别增加了２１９％、２０４％、９３％）。结论　人原代晶状体上皮细胞中ＰＥＤＦ基因下调可引起维持晶状体透明性的两种重要蛋白的改变,提示ＰＥＤＦ与白内障形成有一定的联系。     

Differential protein expression in lens epithelial whole-mounts and lens epithelial cell cultures

PURPOSE: Lens fibergenesis is a problem in several types of cataract and in the posterior capsular opacification following cataract surgery. To correct improper fiber differentiation or to prevent unwanted growth on the posterior capsule following cataract surgery requires a thorough understanding of normal and abnormal fiber formation. To this end, studies were initiated to characterize fiber differentiation in the bovine lens and in lens epithelial cell cultures. METHODS: Indirect immunofluorescence and immunoblot analysis were employed to study the expression of vimentin, beta-crystallin, gamma-crystallin, filensin, aquaporin 0 and the Na, K-ATPase catalytic subunit isoforms (alpha1, alpha2, alpha3) in bovine lens epithelium whole-mounts as well as lens epithelial cell cultures propagated in medium containing 10% bovine serum or in medium supplemented with bovine serum concentrations < or =4%. RESULTS: Three distinct cell types were observed in the bovine lens epithelium. The cells of the central zone were identified by a polarized distribution of two distinct Na, K-ATPase catalytic subunit isoforms, alpha1 to the apical (fiber side) and alpha3 to the basal (aqueous humor side) membranes. Lateral to the polarized central zone, was the germinative zone of cells, best characterized by perinuclear vimentin basket-like structures and the loss of polarized Na, K-ATPase catalytic subunit isoforms. Lateral to the germinative zone were the cells of the transition zone (meridinal rows) where expression of the lens specific proteins beta-crystallin, gamma-crystallin, filensin and aquaporin 0 as well as the lens fiber-, adipocyte- and brain glia-specific Na, K-ATPase catalytic subunit, alpha2 are expressed. The cultured cells propagated in medium supplemented with 10% serum bore no resemblance to any of the cells of the bovine lens epithelium whole-mounts. The cells propagated in the medium supplemented with the lower bovine serum levels resembled the differentiating fibers of the transition zone of the bovine lens epithelium whole-mounts as well as superficial cortical fibers. CONCLUSIONS: Since the low-serum lens epithelial cell cultures bear a remarkable resemblance to early differentiating fibers, they are reasonable models for the study of early fiber differentiation or prevention of differentiation. The culture conditions employed do not yield the polarized cells of the central zone. Nor has the function of these polarized cells in lens fluid, nutrient and ion homeostasis been determined.     

波形纤维蛋白在其转基因小鼠晶状体的表达

目的 观察波形纤维蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ）在转基因小鼠晶状体的表达,探讨波形纤维蛋白与内障形成的关系。方法 用显微注射法将鸡的１２．７ｋｂ波形纤维蛋白基因导入小鼠受精卵的雄前核内,经培育、杂交传代得到２０只波形纤维蛋白内障小鼠。取４只白内障眼球及４只正常眼球,制备石蜡切片,采用ＡＢＣ免疫组化方法,观察波形纤维蛋白在晶状体的表达。再分别正常、分部混浊和完全混浊的小鼠晶状体各１只,经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺     

后发性白内障的发病机制和药物防治的研究现状及前景

后发性白内障是现代白内障术后最常见的并发症。术后晶状体囊残留的晶状体上皮细胞的增殖、迁移、纤维化生是形成后发性白内障的主要原因。目前防治后发障的研究主要集中在药物除去或破坏残留晶状体上皮细胞。实验研究许多细胞毒药以及抑制晶状体上皮细胞生长和纤维化药物可以预防后发障,但目前临床上还没安全、有效的防治白内障方法。     

囊袋阻滞综合征患者囊袋内积聚液体及后发性白内障囊膜的蛋白质组成分析

目的　鉴定白内障术后囊袋阻滞综合征（capsular block syndrome,CBS）患者囊袋内积聚液体以及后发性白内障囊膜的蛋白质组成。方法　选取我院就诊的5例白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入术后CBS患者,继发青光眼且合并后发性白内障,吸出人工晶状体和后囊之间积聚的液体,撕除混浊的后发性白内障囊膜,用强裂解液提取蛋白质,进行液相色谱串联质谱鉴定分析,确定蛋白质组成,并根据Mascot搜索数据结果估算各成分的相对含量。所得蛋白质组成数据与同龄白内障患者晶状体皮质和晶状体上皮细胞的蛋白质主要组成进行比较及分析。结果　本研究中CBS患者人工晶状体和后囊之间积聚的液体和后发性白内障囊膜蛋白质组成中,含量较高（前10种）有细胞骨架类蛋白:晶纤蛋白、肌动蛋白、波形蛋白、锚蛋白2;晶状体蛋白:αA-晶状体蛋白、βB1-晶状体蛋白、αB-晶状体蛋白;葡萄糖代谢相关蛋白:三磷酸甘油醛脱氢酶、促进性葡萄糖转运蛋白;热休克蛋白A5。晶状体上皮细胞含量丰富的蛋白质（前15位）包含上述成分中的αA-晶状体蛋白、αB-晶状体蛋白、波形蛋白、肌动蛋白以及三磷酸甘油醛脱氢酶;而晶状体皮质检测到的含量较高的蛋白主要是各种晶状体蛋白,包含CBS患者囊袋内积液和后发性白内障囊膜组成中的βB1-晶状体蛋白、αA-晶状体蛋白、αB-晶状体蛋白。结论　CBS积聚的液体和后发性白内障囊膜主要蛋白质组成与晶状体上皮细胞更加相似,它们可能参与CBS囊袋内液体的积聚以及此种后发性白内障的形成。     

Vimentin synthesis by ocular lens cells

A study of the synthesis of the intermediate filament protein, vimentin, is reported here. The following systems were examined: the epithelial cells of the organ-cultured rabbit lens, the epithelial and cortical fiber cells of the organ-cultured adult chicken lens and the epithelial cells of the rabbit lens grown in tissue culture. Vimentin is actively synthesized by all of the above mentioned cells.     

波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达

目的观察波形纤维蛋白在老年性白内障晶状体上皮细胞的变化.方法用卵白素-生物素过氧化物酶法对22例老年性白内障患者晶状体前囊膜上皮细胞进行波形纤维蛋白染色,采用包埋前免疫酶电镜技术处理6个晶状体前囊膜标本,并观察其超微结构;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westemnblot法分析4个晶状体表层组织(前囊膜、上皮细胞和表层皮质)中的波形纤维蛋白.结果老年性白内障晶状体上皮细胞的波形纤维蛋白表达减弱,与对照组比较差异有显著性(t=2.0948,P<     

Pathogenesis of pupillary capture after posterior chamber intraocular lens implantation.

Pupillary capture is an unusual complication of posterior chamber intraocular lens implantation and may occur in the early or late postoperative period. We describe a series of patients with early or late onset pupillary capture and describe the pathogenesis. Early capture results from mechanical factors and is usually preventable. Late capture may be mechanical but is usually a sequel to the formation and subsequent contraction of iridocapsular synechiae. Synechiae result from lens epithelial or iris stromal hyperplasia and myofibroblastic metaplasia; they may be minimised by an atraumatic technique and adequate control of postoperative inflammation. The effect of pupillary capture is largely cosmetic, and we encountered no specific complications attributable to it.