人支气管上皮细胞体外炎症模型建立初探

目的:在体外建立人支气管上皮细胞(16HBE)的炎症模型,为研究中药组方抗炎机制提供实验模型。方法:采用完全培养液在体外培养人支气管上皮细胞,加入1mg/L的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用细胞不同时间(3、6、12、24h)后,测定细胞增殖活性,ELISA法检测上清液中IL-8和TNF-α含量。结果:脂多糖刺激12h后人支气管上皮细胞的增殖活性好、速度快,且炎性细胞因子TNF-α、IL-8分泌量与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:1mg/L脂多糖刺激12h可以成功建立体外人支气管上皮细胞炎症模型。     

中药止哮平喘方抗哮喘豚鼠模型气道炎症的实验研究

目的 :探讨中药止哮平喘方对哮喘豚鼠模型气道炎症的影响。方法 :复制卵蛋白致敏哮喘模型。实验动物分正常对照组、哮喘模型组、西药对照组、中药小剂量组、中药大剂量组 ,共 5组。第一次诱喘 2 4h后开始给药 ,共治疗 8d。采用光镜、电镜观察支气管及肺脏的组织形态学改变 ;测量全血及肺泡灌洗液 (BALF)中血细胞计数 ,以反映哮喘的炎症情况。结果 :病理研究显示 ,哮喘模型组豚鼠气道周围大量炎性细胞浸润 ,以嗜酸细胞和淋巴细胞为主。而正常对照组气道基本上无炎症反应。哮喘模型组全血及BALF中炎性细胞数显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ;中药大剂量组和西药对照组炎性细胞数均显著降低(P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :中药止哮平喘方能够降低气道及外周血炎性细胞的数量 ,具有抗气道炎症的作用。     

中药抗炎免疫药理研究进展

抗炎免疫药物是指对炎症反应具有抑制作用,对免疫反应具有抑制或增强和调节作用的一类药物,主要用于炎症免疫性疾病的治疗。由于中药清热解毒、祛风除湿、扶正固本等作用与现代医学的抗炎、免疫观念密切相关,因此从中药中寻找抗炎免疫活性成分已成为当前抗炎免疫研究的热点。笔者就近年来中药抗炎免疫药理的进展作一综述。1抗炎中药与免疫功能药理研究表明,很多抗炎中药具有免疫药理效应,抗炎与免疫有着密切的联系。炎症反应大多涉及到免疫机制,首先,炎症细胞属免疫细胞,如单核/巨噬细胞(M)、T细胞、B细胞、N K细胞等均属免疫细胞,均参与…     

双黄连粉针剂在内科中的应用

双黄连为一种纯中药粉针剂,由金银花、连翘、黄芩等组成,具有清热解毒、抗菌消炎作用。药理研究表明金银花对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌等G＋菌和绿脓杆菌、大肠杆菌等G-菌均有较强的抑制作用;并且金银花具有解热和抗炎作用。连翘体外抑菌作用与金银花相似,对金黄色葡萄球菌抑菌作用也较金银花强,对溶血性链球菌的抑菌作用比金银花弱。黄芩也具有较强的抗菌作用,且抗菌谱广,对多种G＋菌和G-菌均有作用,     

金银花抗内毒素、解热、抗炎作用研究

目的:探讨金银花水提取物及其有效成分绿原酸、木犀草素的抗内毒素、解热和抗炎作用。方法:采用体外鲎试剂法检测其抗内毒素活性,采用内毒素、2,4-二硝基酚所致发热模型大鼠检测其解热作用,采用二甲苯致耳廓炎症肿胀法、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性升高法所制炎症模型观察抗炎作用。结果:金银花水提取物于10mg/ml具有抗内毒素作用,金银花于5.625g/kg具有解热作用,金银花于45g/kg具有抗炎作用。。结论:金银花水提取物于较大剂量具有抗内毒素、解热和抗炎作用。     

温阳补肾方对哮喘小鼠骨髓树突细胞TLR信号的调节作用

目的通过观察哮喘小鼠骨髓树突细胞的表达,以及Toll样受体(TLR2和TLR4)在骨髓树突细胞中的表达,探讨温阳补肾方对TLR信号介导的骨髓树突细胞在哮喘发病机制中的作用。方法 50只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西医结合组,每组10只。各组进行相应干预。小鼠肺组织切片进行苏木素-伊红(HE)染色,观察形态结构及炎症浸润情况;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺泡灌洗液中的IL-4、IL-5、IFN-γ的含量;分离培养各组小鼠的骨髓树突细胞,在倒置相差显微镜和扫描电镜下观察树突细胞的形态变化;RT-PCR检测骨髓树突细胞中TLR2和TLR4 mRNA的表达。结果肺组织病理可见模型组小鼠气道黏膜层增厚,周围有明显的炎症细胞浸润,各治疗组炎症均有不同程度的减轻。与正常对照组比较,模型组小鼠肺泡灌洗液中IL-4表达水平上调,INF-γ水平下调,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,中药组、西药组、中西医结合组IL-4表达均下调,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,中药组和中西医结合组均可上调INF-γ水平,差异有统计学意义(P0.05)。模型组骨髓树突细胞中TLR2、TLR4 mRNA的表达明显高于正常对照组(P0.05),各治疗组均可下调骨髓树突细胞中TLR2、TLR4mRNA的表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论温阳补肾方可以降低哮喘小鼠的气道阻力和减轻气道炎性反应,这可能是温肾方通过介导BMDC-TLR2/TLR4通路的信号转导,从而显著上调Th1型细胞因子分泌,下调Th2型细胞因子表达,进而调节Th1/Th2的免疫平衡。     

氧化苦参碱对TNFα、IL-6和IL-8的影响

目的：研究氧化苦参碱对不同状态下的TNFα、IL-6和IL-8的影响。方法：利用脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞和人早幼粒白血病细胞作为过度炎症反应的体外模型，用角叉菜胶引起的小鼠足肿胀作为炎症反应的体内模型，采用生物学方法和放射免疫分析法测定体外细胞培养上清液和局部炎症渗出液中TNFα、IL-6和IL-8。结果：氧化苦参碱对体外细胞培养上清液和局部炎症渗出液中TNFα、IL-6和IL-8均具有一定的抑制作用。结论：氧化苦参碱的抗炎免疫作用可能与其抑制早期致炎性细胞因子的产生有关。     

抗炎-中药治疗动脉粥样硬化的有效途径

动脉粥样硬化发病机制的“炎症-损伤-反应”学说得到广泛支持和认可。炎性反应贯穿于动脉粥样硬化发生、发展的整个过程,并与急性心脑血管事件的发生密切相关;干预AS炎症反应可能是中药治疗动脉粥样硬化的有效途径。本文从动脉粥样硬化发生、发展过程的病理基础角度,总结了炎性反应在动脉粥样硬化形成早期、进展期、成熟期、破裂期的重要作用,并提出了从抗炎角度研究、筛选、治疗动脉粥样硬化中药的思路和方法。 更多还原     

止哮平喘方对哮喘豚鼠T淋巴细胞凋亡的作用

目的:探讨中药止哮平喘方对哮喘豚鼠炎性细胞的影响及诱导T淋巴细胞凋亡的作用.方法:复制卵蛋白致敏哮喘模型.实验动物分正常对照组、哮喘模型组、西药对照组、中药小剂量组、中药大剂量组,共5组.第一次诱喘24h后开始给药,共治疗8d.测量全血及肺泡灌洗液(BALF)中血细胞计数,以反映哮喘的炎症情况;原位末端标记(TUNEL)法检测外周单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞的凋亡情况.结果:哮喘模型组全血及BALF中炎性细胞数显著高于正常对照组;中药大剂量组炎性细胞数均显著降低).哮喘模型组T淋巴细胞凋亡率显著低于正常对照组;中药大剂量组T淋巴细胞凋亡率均显著降低.结论:中药止哮平喘方能够降低气道及外周血炎性细胞的数量,具有抗气道炎症的作用;T淋巴细胞凋亡减少是哮喘气道炎症中T淋巴细胞功能亢进、在气道浸润的主要原因之一;中药止哮平喘方是通过诱导或促进T淋巴细胞凋亡来实现调节哮喘T淋巴细胞免疫功能、抗气道炎症的作用.     

解热抗炎中药挥发性成分的药效学研究

解表清热抗感冒中药如柴胡、薄荷、连翘、金银花等均具有不同程度的解热、镇痛、抗炎、免疫增强、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等作用,临床上多用于治疗感冒[1]。这一类中药中多含有芳香刺激性的挥发性成分,2005版中国药典未明确这类成分入药与否。现代研究对于这一类成分是否具有解热、抗炎、镇痛等作用,针对感冒是否有效也未有统一的认识。本实验选择常用的解表清热中药(柴胡、金银花、连翘、板蓝根),在常用剂量基础上,观察不同提取物对实验性动物的解热、抗炎及镇痛作用,探讨这4种中药的挥发油是否具有解热抗炎活性,为临床上科学合理地利用中药…     

银翘药对的药效学研究进展

目的:总结近年来银翘药对的药效学研究进展。方法:对金银花、连翘以及银翘药对的国内外相关文献进行归纳。结果:金银花和连翘作用相似,组成药对配伍后在抗炎、解热、抗病毒方面都具有协同作用。结论:以方剂的最小单位——药对为对象开展研究,对于揭示中医药的科学性是一条可取的研究捷径。     

金银花、连翘对甲型H1N1流感免疫调节通路影响的生物信息学分析

目的:基于生物信息学方法分析金银花、连翘对甲型H1N1流感免疫调节通路的影响。方法:在台湾中医药资料库,Pub Chem及Gene公众网络平台数据库查找金银花、连翘的靶蛋白及甲型H1N1流感相关基因,运用生物信息软件对检索到的数据集进行分析,解读金银花、连翘单用和连用对甲型H1N1流感相关的免疫调节生物通路的影响。结果:金银花相关靶蛋白共16个,连翘相关靶蛋白共8个,甲型H1N1流感相关基因32个;生物信息分析发现金银花和连翘有各自作用的特异性的免疫调节通路;对于巨噬细胞中白介素-12信号的生成通路和白介素-8信号通路,二者作为药对使用后,代表药物靶蛋白与生物通路相联性的-log P大于单独使用金银花或连翘;金属蛋白酶家族(MMPs)参与了多数金银花特异性作用的通路,蛋白激酶C-α(PRKCA)参与了连翘特异作用的通路。结论:对于甲型H1N1流感相关的免疫通路,金银花和连翘有各自的调节特点,作为药对使用对对巨噬细胞中白介素-12信号的生成通路和白介素-8信号通路调节更有优势,MMPs和PRKCA可能是金银花和连翘分别作用于免疫通路的关键蛋白。     

金银花、连翘药对配伍挥发油成分的GC-MS分析

目的 考察金银花、连翘药对配伍对挥发油化学成分的影响.方法 采用气-质联用系统对金银花、连翘药材以及药对配伍中的挥发油进行分析,评价配伍对挥发油成分及含量的影响.结果 采用GC-MS对金银花、连翘药材和药对挥发油的成分进行分析比较,发现金银花挥发油中检出的香叶醇、十四烷酸甲基酯、十六烷酸乙基酯、荧蒽、9,12,15-十八碳三烯酸甲基酯、亚油酸等成分和连翘挥发油中检出的樟脑烯、α-松油烯、紫苏醇、蒎烯、棕榈醛、β-水茴香萜等成分在药对挥发油中未检出,而相对于单煎所得的挥发油,药对挥发油中新增成分有柠檬烯、异长松叶烯、十九烷等.结论 金银花、连翘药对配伍对所提挥发油的成分和含量都有较大的影响.     

金银花、连翘对大肠杆菌感染模型小鼠血清Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的探讨金银花、连翘对大肠杆菌感染小鼠的保护作用机制。方法将雌性昆明种小白鼠随机分为金银花组和连翘组,每组再分为正常组、中药组、模型组和治疗组4个亚组进行处理,观察小鼠的临床状态,双抗体夹心法酶联免疫吸附实验(Elisa)检测血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果金银花(0.01 kg/L)、连翘(0.01 kg/L)水煎液对小鼠大肠杆菌的感染有保护作用。与正常组及中药组比较,模型组与治疗组小鼠血清IFN-γ、IL-4表达及IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10比值均显著升高(P均<0.01);金银花治疗组较模型组IL-10表达显著升高(P<0.05),IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,IL-4表达和IFN-γ/IL-10比值有下降趋势;连翘治疗组较模型组IFN-γ和IL-4表达以及IFN-γ/IL-10比值有下降趋势,IL-10表达和IFN-γ/IL-4比值有升高趋势,但均无显著性差异(P>0.05)。结论感染模型小鼠辅助性T淋巴细胞1型/2型(Th1/Th2)细胞因子分泌亢进,Th1/Th2平衡有向Th1型漂移的特点。金银花、连翘水煎液均能有效保护感染模型小鼠,其调节小鼠的免疫功能可能与调节Th1/Th2平衡相关。     

梯度洗脱法同时测定不同配比金银花连翘药对中绿原酸、连翘脂素

目的 采用梯度洗脱法测定不同配比金银花、连翘药对中绿原酸和连翘脂素.方法 采用Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相,体积流量1.0 mL/min,进行梯度洗脱,检测波长330 nm.结果 不同配比金银花连翘中两种成分的量差异明显.结论 金银花连翘的配比对于其中的有效成分量有显著影响.     

基于甲型H1N1流感病毒致MDCK细胞损伤保护作用的双黄连组方HPLC特征图谱谱效关系研究

构建双黄连组方HPLC特征图谱与甲型H1N1流感病毒致MDCK(Madin-Darby canine kidney)细胞损伤保护作用的相关性。在双黄连原方的基础上按正交法L₉(3⁴)组成9个不同配比的组方,分别进行HPLC分析和MDCK细胞损伤的保护作用试验,采用细胞病变效应法(cytopathic effect, CPE)观察病毒感染力,MTT染色结果作为浓度筛选和细胞损伤保护作用的判定指标。除组方1外,其他各组方对甲型H1N1流感病毒致MDCK细胞损伤均具有显著的保护作用(P<0.01,P<0.001),对所获得的HPLC数据和药效数据应用SPSS软件进行逐步回归分析,结果双黄连各组方17个特征共有色谱峰中与甲型H1N1流感病毒致MDCK细胞损伤的保护作用相关性较大的组分为2,3,6,8和12号峰。将组方数据与药效数据进行逐步回归分析,发现金银花、连翘与细胞损伤的保护作用呈正相关。通过HPLC图比对,2,3和12号峰来自金银花,而6和8号峰来自连翘。通过对照品保留时间进一步比较,确定了其中4个色谱峰分别为绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷B和3,4-二咖啡酰奎宁酸。推测双黄连组方中与甲型H1N1流感病毒致MDCK细胞损伤保护作用相关性较大的的主要成分为金银花和连翘中咖啡酰类衍生物。     

连翘抗炎活性成分及作用机制研究进展

连翘属中医清热药,具有清热解毒、消肿散结、疏散风热等功效,为"疮家圣药",目前在临床上广泛用于溃疡、疥疮等与炎症相关疾病的治疗。研究显示连翘多种提取物以及多种活性成分如连翘酯苷A等均具有抗炎作用。连翘主要通过影响NF-κB、JAK/STAT、MAPK等炎症相关信号通路从而影响体内相关酶的活性、炎症介质的合成发挥抗炎作用,还能通过影响与能量代谢、脂质代谢和蛋白质代谢相关的代谢物发挥抗炎作用。通过查阅连翘抗炎作用相关文献,对连翘的抗炎活性成分、作用机制及主要相关信号通路进行综述,从而为连翘抗炎作用的进一步研究提供参考。     

多指标综合评分法考察金银花连翘药对最佳提取工艺

目的:确定金银花连翘药对的最佳提取工艺。方法:以绿原酸、木犀草苷、槲皮素和连翘脂素为考察指标,采用综合评分法,对采用乙醇回流的提取时间、提取次数、溶剂浓度和用量进行考察。结果:金银花连翘药对的最佳提取工艺为8倍量60%乙醇提取3次,每次提取2 h。结论:本结果可为金银花连翘药对的提取工艺研究提供参考。     

复方金银花冲剂的质量分析

采用薄层层析、薄层色谱法对复方金银花冲剂中的主药金银花、连翘进行了定性定量分析。检测方法较简便、专属性强，可作为该冲剂的质量控制指标。     

咳喘平口服液质量控制方法研究

目的：建立咳喘平口服液质量控制方法,方法：采用薄层色谱法对其中五味子,麻黄、金银花和连翘进行鉴别。结果：方法简便、快速、易操作,具有专属性。结论：为,制剂质量控制提供了实用方法。