肺癌术后支气管切缘p53基因突变的临床研究

预测肺癌手术切除的效果和局部复发情况。方法滞酶链一单链构象多态吕手术切除标本的无癌支气管切缘和病灶癌组织ｐ５３基因突变的情况。结果１０例支气管切缘有Ｐ５３基因突变,阳性率２５．０％（１０／４０）。２１例病灶癌组织有Ｐ５３基因突变,阳性率５２．５％（２１／４０）。术后全部病例随访３－１４个月。在１０例支气管切缘Ｐ５３阳性者中,有４例发生支气管残端癌复发（复发率４０．０％）,而在３０例阴性者中,无１例     

肺癌患者癌组织和痰液细胞中p53和K-ras基因突变的研究

目的 检测肺癌组织和肺癌患者痰液脱落细胞中ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ基因突变情况,比较联合检测ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ和单一检测ｐ５３或Ｋ－ｒａｓ基因在肺癌诊断中的价值。方法 应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染法检测了５９例肺癌组织、癌旁肺组织、１４全肺部良性病变肺组织及患者痰液脱落细胞中ｐ５３基因第５～８外显子、Ｋ－ｒａｓ基因第１外显子突变。结果 肺癌组织中ｐ５３基因突变率为３７．３％（２２／５９）,痰液脱落细胞为３     

可疑肺癌病人纤支镜检查标本的p53基因突变检测

探讨行支镜检查标本的Ｐ５３基因突变检测用于肺癌早期诊断的可行性。方法：采用聚合酶链反应－单链构象记性分析银染技术,对３５例怀疑为肺癌病人的８５份纤支镜检查标本行Ｐ５３基因５－８号外显子突变检测。结果发现１０例病人有Ｐ５３基因突变（２８．６％）,其中以６号外显子突变率最高（１７．１％）。     

肺癌支气管活检组织及痰液中p53基因突变的检测及临床应用

采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法，从分子水平探讨了ｐ５３基因突变与肺癌发生之间的关系。对４３例肺癌支气管活检组织及１０例痰液标本进行了ｐ５３基因第５～８外显子突变的检测，发现４３例中有１７例发生了ｐ５３突变，突变率为３９．５％（１７／４３），其中鳞癌为３０．８％（４／１３），腺癌为３５．３％（６／１７），小细胞癌为５８．３％（７／１２），大细胞癌为０％（０／１）。本文对同一患者的痰液标本检测结果与组织标本中ｐ５３基因突变检出率一致，均为３０．０％（３／１０）。采用χ２检验表明，ｐ５３突变在性别构成、临床分期、组织类型及淋巴结转移等方面两组均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。但吸烟组ｐ５３突变率（５３．８％）明显高于非吸烟组（１７．６％）；低中分化组ｐ５３突变率（５１．７％）明显高于高分化组（１４．３％），提示ｐ５３基因突变与吸烟及细胞的分化程度存在相关性（Ｐ＜０．０５）。     

肺癌病人痰液标本p53基因突变临床流行病学分析

[目的]探讨痰液标本p53基因突变检测用于肺癌高危人群筛查和肺癌早期诊断方面的意义。[方法]应用PCR鄄SSCP对63例肺癌患者和30例肺良性疾病的肺组织和痰液细胞中p53基因5～8外显子的突变进行了检测,并采用临床流行病学的方法进行分析。[结果]肺癌病人组肺癌组织中p53基因突变率为49.2%(31/63),对照组组织中突变率为3.3%(1/30),两组差别有统计学意义(P<0.001)。肺癌组痰液标本中p53突变率为23.8%(15/63);肺良性疾病患者痰液中未发现p53基因突变。以痰液标本p53基因突变为诊断指标,诊断的敏感度为45.2%,特异度为96.8%,标化阳性预告值为93.5%,标化阴性预告值为63.9%,标化一致性为71.0%。[结论]检测痰液中p53基因突变能间接反映其在肺组织中的改变,该方法可作为肺癌高危人群筛查以及肺癌诊断的无创性手段之一。     

吸烟与肺癌p53基因突变相关性研究进展

从吸烟与肺癌的关系、肺癌p53基因突变、吸烟与肺癌p53基因突变的相关性研究等方面进行阐述，对吸烟患肺癌P53基因突变的频率和类型、吸烟与肺癌P53基因突变存在的量效关系、密切相关、相关、不确定和无关等内容进行了综述，以期对我国开展这些工作有所启示。     

高转移性人肺癌细胞系p53基因突变的研究

ＰＧ癌系为来自人巨细胞型肺癌的体外细胞系，具有生长快和成瘤率高的特性。裸小鼠移植后，肺和淋巴结的自发转移性频率高，而且稳定。为了深入了解其生物学特性的分子基础，对其细胞和分子生物学改变作了系统的分析。结果表明：免疫组化发现ｐ５３蛋白的异常高表达；用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法检测到第７外显子的单链多态性变化，提示有碱基组成的改变。对该外显子的两条链用热循环ＤＮＡ测序法分析后，证实第２４８密码子有ＣＧＧ→ＣＴＴ的碱基颠换；同时以上述方法检测了Ｋｉ－ｒａｓ癌基因的点突变，未发现ｋｉ－ｒａｓ突变。结合文献探讨了ｐ５３基因突变的生物学意义，这一研究为进一步研究ｐ５３基因与ＰＧ癌细胞生物学特性的关系奠定了基础。     

PCR-TGGE法检测p53基因突变诊断肺癌淋巴结微转移

背景与目的：转移是影响肺癌患者预后的重要因素之一,但在淋巴结内存在少量癌细胞时常规的检测方法难以发现。本研究的目的是探讨检测肺癌相关淋巴结内微转移存在的敏感方法。方法：利用温度梯度凝胶电泳(temperature gradient gel electrophoresis,TFGGE)方法,对39例原发性肺癌患者的肿瘤组织及其相关的110枚淋巴结,进行p53基因(外显子5,6,7,8)的突变检测,并对部分淋巴结采用无间隔连续切片,证实微转移存在。结果：在39例肺癌患者中,23例原发肿瘤检测出p53基因突变,在相应的67枚淋巴结中,40枚淋巴结显示p53基因突变,且与原发灶变化一致;而在常规病理组织学检查时,仅26枚淋巴结存在肿瘤转移。原发肿瘤无p53基因突变者的43枚淋巴结和10枚非瘤患者淋巴结,均无p53基因突变。对常规病理组织学检查阴性,PCR-TGGE检测有p53基因突变的14枚淋巴结,进行无间隔连续切片,在4枚淋巴结中证实有微转移存在。结论：p53基因突变的检测发现了肺癌淋巴结中微转移的存在,可以作为常规病理组织学检查的补充。     

胃癌组织中p53基因突变及p53和mdm2蛋白表达的研究

目的：探讨mdm2和p53基因异常在胃癌发生发展中的作用以及两者相关性。方法：应用免疫组化技术检测58例胃癌组织以及相应癌旁组织中mdm2和p53蛋白的表达；PCR-SSCP银染技术检测p53基因exon5～8突变情况。结果：胃癌组p53和mdm2蛋白阳性率分别为86．21％（50／58）和29．31％（17／58），癌旁组织组p53和mdm2蛋白均为阴性，胃癌组p53和mdm2蛋白阳性率明显高于癌旁组织组，两两间差异有统计学意义，P=0．0000、P=0．0001。胃癌组织中p53和mdm2蛋白表达率与肿瘤大小、组织学类型、分化程度、淋巴结转移以及患者年龄等无显著相关性，P〉0．05。mdm2蛋白阳性表达与p53蛋白过表达呈显著正相关,X^2=11．1839，P=0．0008，r=0．4391。2例胃癌组织检测到p53基因突变，突变均位于exon5，58例相应癌旁组织均禾检测到p53基因突变。结论：mdm2和p53蛋白异常表达与胃癌发生有关，p53基因突变可能并非胃癌组织中p53蛋白异常累积的主要原因，mdm2蛋白在胃癌发生发展中的作用可能与p53蛋白密切相关。     

肺癌中血管内皮生长因子及突变型p53基因表达及其临床意义研究

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）、突变型p53（rhtp53)基因表达水平与肺癌病理生理学特征之间的关系。方法 采用免疫组化方法（LSAB法）,检测120例肺癌组织及相应癌旁组织,40例肺良性病变组织中的VEGF、mtp53表达水平。结果 肺癌组织中VEGF、mtp53基因的表达水平显著高于癌旁肺组织和肺良性病变组织（P＜0．01）。VEGF、mtp53基因表达水平与肺癌患者在性别、年龄、吸烟史、组织学类型均无明显关系（P＞0．05）,与原发肿瘤大小、细胞分化程度、淋巴结转移状态、P－TNM分期均有密切关系（P＜0．01）。mtp53基因表达水平与VEGF表达水平呈显著正相关（P＜0．01）。结论 VEGF、mtp53基因可能参与了肺癌的发生、发展进程,可以作为肺癌生物学行为恶化的一项指标。     

中国人食管癌及肺癌发病风险与p53基因多态性

目的　比较中国北方人对食管癌及肺癌的易感性与p5 3基因第 72密码子多态性的关系。方法　应用序列特异性引物 ,以PCR方法检测 173例食管鳞状上皮癌、98例非小细胞肺癌患者及 136例健康对照者的p5 3基因第 72密码子的基因型。结果　食管癌与肺癌组p5 3等位基因及基因型分布无明显差异。食管癌和肺癌组的Pro等位基因频率明显高于对照组 (P值分别为 0 .0 2 4及0 .0 2 7)。Pro/Arg及Arg/Arg基因型频率在两肿瘤组及对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而食管癌和肺癌组的Pro/Pro基因型频率明显高于对照组 (P值分别为 0 .0 4 1及 0 .0 2 6 )。Pro纯合子患食管癌与肺癌的风险较Arg纯合子高 2倍左右 [校正比值比分别为 2 .12 (95 %CI=1.13～ 4 .0 1)和 2 .30 (95 %CI =1.13～ 4 .93) ],且与吸烟无协同作用。结论　Pro/Pro基因型为中国北方人患食管癌及肺癌的独立易感因素 ,两种肿瘤的发病可能有共同的遗传基础。     

检测外周血中p53基因突变诊断肺癌微转移的临床意义

目的 探讨检测肺癌患者外周血中p53基因突变的诊断意义。方法 应用PCR－SCCP方法，对28例肺癌患者，8例良性肺疾病患者和10例健康人外周血中的p53基因突变进行检测。结果 在28例肺癌患者外周血标本中，4例检测出p53基因突变，阳性率为14．29％。其中鳞癌1例，腺癌1例，小细胞癌2例；Ⅱ期患者1例，Ⅲ期1例，Ⅳ期2例。8例良性肺疾病患者和10例健康人的外周血均未检测出p53基因突变。结论 检测外周血中p53基因突变有助于肺癌的诊断和肺癌病理分期。     

Detection of p53 gene mutation of bronchoscopic samples in the patients suspected to lung cancer

Objective: To determine the feasibility of detecting p53 gene mutations for early diagnosis of lung cancer using the samples from bronchoscopic examination. Methods: Point mutations of the exon 5 – 8 of p53 gene were detected in 85 bronchoscopic samples of 35 patients suspected to be lung cancer using silver staining PCR-SSCP. Results: p53 gene mutations were founded in 10 of 35 patients(28.6%). The incidence of p53 gene mutations (14.9%) was obviously higher than the cytological positive incidence(2.9%) in samples of sputum, bronchoalveolar lavage and brush, especially for the sputum(27.7%). In the bronchoscopic biopsy specimens, the incidence of p53 gene mutations (12.5%) was lower than that of pathologic positive result (50.0%). However, in view of all the bronchoscopic samples, there was no statistically difference between cytopathologic positive results (11.8%) and the incidence of p53 gene mutations (14.1%). Although the p53 mutations were most common in the samples from the patients bronchoscopically manifested as neoplasm compared with other manifestations, there was no statistical difference. It is valuable to notice that 3 patients with p53 gene mutation merely presented as bronchial inflammation in bronchoscope. Conclusion: Results indicated that the value of detecting p53 gene mutation for the diagnosis of lung cancer using the bronchoscopic samples was more superior to cytological examination and detection of p53 gene mutations in post-bronchoscopic sputum was easy and effective, may be used as a valuable method for early diagnosis of lung cancer. This work was supported by the Research Foundation of the Ministry of Public Health of PR China (No. 94-1-316).     

p53PIN3基因多态性与食管癌及肺癌发病风险关系的研究

目的探讨食管癌及肺癌易感性与p53PPIN3基因多态性之间的关系.方法采用序列特异性引物,以PCR方法检测236例食管癌、104例肺癌和152例健康对照个体外周血DNA p53PIN3多态性分布情况.结果食管癌、肺癌患者与健康对照组间的p53PIN3等位基因型及基因型分布无统计学差异.当根据吸烟状态分组时,食管癌与健康对照组间的p53PIN3等位基因型及基因型分布也无显著差异.而肺癌患者不吸烟组的A'等位基因频率明显高于吸烟组患者(x2=4.29,P=0.03),较健康不吸烟个体也有明显增高趋势但无统计学差异.且A'A'基因型只在食管癌和肺癌患者中检测到.结论认为p53PIN3基因多态性与食管癌的发病风险无关,可能与肺癌患病易感性有关.     

肺癌患者手术前后血清p53抗体的动态变化及其临床意义

目的 探讨肺癌患者血清ｐ５３抗体与临床病理特征之间的关系,以及手术后ｐ５３抗体的动态变化规律。方法 采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）分别于术前１天、术后７、３０、９０天动态检测１２０例肺癌患者血清ｐ５３抗体,并以３０例肺部良性疾病患者和１２０例正常健康人作对照。结果 肺癌患者血清ｐ５３抗体水平和阳性率均明显６高于肺部良性疾病患者和正常人（Ｐ〈０．０５）,而正常人与肺部良笥疾病患者间无显著性差异（Ｐ     

p53调控的肺癌细胞顺铂敏感性相关基因片段的分离和克隆

目的 克隆野生型p53(wtp53)影响人大细胞肺癌801一D细胞系顺铂敏感性相关基因片段。方法 采用转基因方法补偿801-D细胞p53功能，分别提取经IC50浓度顺铂刺激的转染wtp53细胞、空载细胞和未经顺铂作用的转wtp53细胞RNA，用银染mRNA差异显示方法分离差异表达基因，反转录点杂交和巢式PCR进行确证。阳性片段进行克隆及序列分析。结果 获得6条阳性片段，2条含有开放阅读框架(ORF)，其中1条片段部分与核糖核苷还原酶α链有56％同源性，另一片段D1含有一个长ORF，与已知cDNA序列同源率很低。结论 p53对801-D细胞顺铂敏感性的影响有明显的基因水平改变，可能诱导了相关基因表达。     

非小细胞肺癌p16基因甲基化及缺失的研究

目的 研究p16基因在非小细胞肺癌组织中的甲基化和缺失情况，探讨其在肺癌诊断中的价值。方法 应用甲基化相关的PCR及双重PCR，检测50例肺癌组织和54例正常肺组织中p16基因第1外显子5′端启动子区域CpG岛甲基化及第2外显子缺失情况。结果 p16基因在非小细胞肺癌组织中甲基化率为32.0%(16/50)。缺失率为28.0%(14/50);54例正常肺组织甲基化率为3.7%(2/54)，缺失率为0，二组比较，甲基化率（Fisher's exact=0.000)及缺失率（Fisher's exact=0.000)均有显著性差异。结论 甲基化和缺失是非小细胞肺癌p16基因失活的主要形式，检测p16基因甲基化和缺失状态可能有助于肺癌的诊断。