阿尔茨海默病患者细胞色素P450 1A1基因与载脂蛋白E基因多态性的关联分析

目的：探讨细胞色素P450 1A1（CP1A1）和载脂蛋白E基因多态性及其交互作用与阿尔茨海默病的关系。 方法：实验于2004—11／2005—05在南方医科大学珠江医院中心实验室进行。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测了135例散发性阿尔茨海默病患者和138例正常老年人细胞色素P450 1A1基因和载脂蛋白E基因多态性分布特征。 结果：阿尔茨海默病组135例，健康对照组138例，均进入结果分析。①细胞色素P450 1A1等位基因m1，m2频率：散发性阿尔茨海默病组分别为63％，37％，对照组分别为65．1％，31．9％，各等位基因频率分布差异无显著性（r=1．605，P〉0．05）。②些散发性阿尔茨海默病组载脂蛋白Eε4等位基因频率与对照组比较有统计学意义（10．74％，5．80％，χ^2=4．41，P〈0．05，OR=1．95），散发性阿尔茨海默病组和对照组各基因型分布差异无统计学意义（P〉0．05）。③研究对象按携带载脂蛋白E84状况分层后，在带有ε4等位基因的人群中，散发性阿尔茨海默病组细胞色素P450 1A1m2等位基因频率与对照组比较差异有显著性意义（7．4％，2．2％，r=6．825，P=0．009），患病风险增加3．417倍（OR=3．417）。 结论：细胞色素P450 1A1基因MSP1多态性与中国汉族人散发性阿尔茨海默病发病无明显关联。但在携带有载脂蛋白讲基因型的个体，细胞色素P450 1A1m2等位基因可能是散发性阿尔茨海默病的危险基因。     

失血性休克-再灌流后期大鼠肝脏细胞色素P450的变化

目的：研究大鼠在失血性休克－再灌流后期大鼠肝脏中细胞色素P450的变化，探讨细胞色素P450与肝脏在再灌注后期损伤的关系。方法：建立失血性休克大鼠模型，随机分为休克再灌流组、对照组和假休克组，检测肝脏的P450和细胞色素b5的含量、氨基比林－N－去甲基酶的活性水平、丙二醛。结果：休克再灌注组中的细胞色素P450的含量和氨基比林－N－去甲基酶的活性水平明显高于对照组和假休克组，丙二醛也高于其他组，而细胞色素b5各组无差异。结论：细胞色素P450也参与了失血性休克－再灌流后期大鼠肝脏的损伤。     

中国肾移植患者中细胞色素P450 3A4的新突变位点

背景：环孢素A在人体内主要经过细胞色素P450 3A4 代谢。已有研究表明细胞色素 P450 3A4 基因多态性影响环孢素A的药代动力学,而且环孢素A慢性肾毒性主要是由于环孢素A在体内的长期蓄积。因此推测细胞色素 P450 3A4 基因多态性可能是肾移植移植后环孢素A慢性肾毒性的主要原因之一。目的：分析细胞色素 P450 3A4 基因多态性与肾移植移植后环孢素A慢性肾毒性的相关性。方法：纳入 200 例服用环孢素A的肾移植患者参加此项研究,其中105例经肾活检和（或）血肌酐值的变化诊断为环孢素 A慢性肾毒性,其他 95 例未发生肾毒性）。采集受试者外周静脉血并提取基因组DNA,采用聚合酶链式反应和直接测序法检测细胞色素P450 3A4基因外显子5,7,9 和 12 的点突变。结果与结论：中国肾移植患者中发现 3 个细胞色素 P450 3A4 新突变位点,即 336A〉G,837 G〉A 和 406 A〉C。其中 3 例肾移植患者可检测出 336 A〉G,8 例肾移植患者可检测出 837 G〉A。新突变点 406A〉C 仅发现于 3 例环孢素A慢性肾毒性患者,在非肾毒性患者中未发现新突变位点,且 406 A〉C 可导致细胞色素 P4503A4 保守区 136 位苏氨酸（Thr）转变为苯丙氨酸（Phe）。文章未发现已报道的中国人群细胞色素P450 3A4基因在外显子5,7,9 和 12 的多态性。结果证实,文章在中国肾移植患者中发现了 3 个细胞色素P450 3A4 的新突变位点 336 A〉G,837G〉A 和 406 A〉C,其中 406 A〉C 可能引起细胞色素 P450 3A4 酶活性的改变。     

CYP3A4基因多态性与临床疾病易感性的研究进展

细胞色素P450 3A4(CYP3A4)作为人体内代谢药物的主要酶细胞色素P450超家族中的重要成员,参与多种内、外源性化学物质在人体内的转化代谢的过程,而其基因多态性也与多种临床疾病的易感性密切相关。本文就CYP3A4基因多态性与临床多种疾病的易感性作一综述。     

吡格列酮能部分抑制2型糖尿病大鼠肝脏微粒体细胞色素P450活性

目的:探讨吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏微粒体细胞色素P450 (CYP450)活性水平的影响。方法:40只大鼠随机均分为正常对照组、糖尿病组、低剂量(3 mg/kg)吡格列酮组、高剂量(6 mg/kg)吡格列酮组(n=10)。除正常对照组外,其余各组给予高脂饲料喂养4周,采用链脲佐菌素(50 mg/kg)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。造模成功后,低、高剂量吡格列酮组大鼠给予相应剂量吡格列酮灌胃治疗2周,提取大鼠肝脏微粒体并检测CYP450活性水平,同时进行大鼠体质量和血糖指标的检测。结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠血糖升高(P0.01),CYP450活性水平升高(P0.05),体质量下降(P0.01)。与糖尿病组相比,吡格列酮灌胃2周期间,大鼠血糖浓度随吡格列酮浓度升高显著降低(P0.01),低、高剂量吡格列酮组大鼠肝微粒体CYP450水平均明显降低(P0.01),体质量明显升高(P0.05)。相关分析显示,CYP450活性水平与大鼠血糖正相关(r=0.598,P0.01),而与大鼠体质量无明显相关性。结论:吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏微粒体CYP450酶活性有显著抑制作用,能改善其高血糖状态,增加大鼠体质量。     

细胞色素P450 1A1基因多态性与阿尔茨海默病遗传易感性的相关研究

目的：探讨细胞色素P4501A1基因MSP1的多态性与阿尔茨海默病的关系。方法：实验于2004-11／2005-05在南方医科大学珠江医院中心实验室进行。选择135例无阳性家族史的散发性阿尔茨海默病患者，以年龄和性别相匹配的138名正常健康成人为正常对照组。所有被试者抽全血2mL，枸橼酸钠抗凝后采用苯酚-氯仿抽提法提取外周血白细胞基因组DNA。利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分析其细胞色素P4501A1基因MSP1位点等位基因分布频率，比较基因型在阿尔茨海默病患者与正常人之间的分布差异。结果：按意向处理分析，135例阿尔茨海默病患者和138名正常健康人均进入结果分析。①细胞色素P4501A1等位基因频率分布：阿尔茨海默病组m1，m2分别为63．0％，37．0％，正常对照组的分别为68．1％，31．9％，两组比较差异不显著（χ^2=1．605，P〉0．05）。②细胞色素P4501A1基因MSP1位点基因型分布频率：阿尔茨海默病组m1／m1，m1／m2，m2／m2分布与正常对照组比较差异不明显（42．2％，41．5％，16．3％；49.3％，37．7％，13．0％，χ^2=1．483P〉0．05）。结论：细胞色素P4501A1基因MSP1的多态性与阿尔茨海默病的遗传易感性无关。     

中国成人肝微粒体P450酶活性研究

目的观察中国成人肝微粒体细胞色素P450（CYP450）、细胞色素b5（CYb5）的含量及常见几种药物代谢酶活性水平及在性别、民族间的分布差异。方法肝组织匀浆10000×g离心去除沉淀,再以100000×g超速离心60min,取沉淀加PBS甘油缓冲液,充分溶解制成微粒体悬液,用Lowry法测定蛋白含量;用双光道紫外分光光度计测定CYP450和CYb5的含量及P450酶活性。结果48例成人肝微粒体CYP450和CYb5含量分别为（0．46±0．07）nmol／mg和（0．44±0．04）nmol／mg;男性组CYP450和CYb5含量分别为0．49±0．05）nmol／mg和（0．46±0．06）nmol／mg,均高于女性组的（O．41±0．08）nmol／mg、（O．42±0．05）nmol／mg,P〈0．05;汉族、回族和壮族3个民族P450和CYb5含量作q检验进行两两比较,各组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。药物代谢酶NADPH细胞色素C还原酶（NR）、乙基吗啡N-脱甲基酶（EDM）、氨基比林N-脱甲基酶（ADM）、苯并芘羟化酶（BPH）和戊巴比妥侧链羟化酶（PSCH）等酶活性水平分别为（0．71±0．13）nmol／（mg·min）,（0．89±0．18）nmol／（mg·min）,（0．99±0．17）nmol／（mg·min）,（0．07±0．01）nmol／（mg·min）,（4．15土0．65）μmol／（mg·min）,其中EDM活性水平女性组高于男性组（P〈0．05）,PSCH活性水平男性组高于女性组（P〈0．05）,其他各种酶活性男女之间无显著性差异;上述5种酶活性水平经q检验,汉族、回族和壮族3个民族之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论测定了中国成人肝微粒体CYP450、CYb5含量及NR,EDM,ADM,BPH,PSCH等酶活性水平,男性组CYP450、CYb5含量及PSCH活性高于女性组,而EDM活性水平女性组高于男性组,上述7种指标在汉族、回族和壮族之间差异均无统计学意义。     

血塞通及川芎嗪对细胞色素P450不同亚型代谢酶影响的研究

目的 研究血塞通和川芎秦对肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系统不同亚型的影响,预测它们之间及与其他药物问的相互作用,并为临床合理用药提供参考.方法 通过研究CYP450亚型CYP1A2、CYP3A4的专属探针药物咖啡因、氨苯砜的体外代谢变化,评价血塞通和川芎秦对这两个酶的诱导或抑制作用.结果 对照组、血塞通组和川芎嗪组中咖啡因和氨苯砜的浓度均随时间延长而降低,3组间差异无统计学意义.血塞通组探针药物咖啡因体外半衰期明显短于对照组[(19.24±2.37)min比(25.15±2.02)min,P<0.01),川芎嗪组咖啡因体外半衰期[(27.67±4.64)min]与对照组无明显差异,说明血塞通对肝药酶CYP1A2有诱导作用,而对CYP3A4无影响;血塞通组和川芎嗪组探针药物氨苯砜体外半衰期与对照组比较差异均无统计学意义[(16.29±2.94)min、(15.16±1.67)min比(16.16±1.51)min,P均>0.05],说明川芎嗪对肝药酶CYP1A2和CYP3A4均无影响.结论 药物对CYP450各亚型酶的影响不同.血塞通在同CYP1A2代谢相关的药物合用时,应充分考虑其对CYP1A2的影响,以避免可能出现的毒性反应或不良反应.     

CYP450在SAP组织中的表达及对临床治疗的指导意义

目的：研究急性重症胰腺炎（SAP）模型中CYP450（细胞色素P450）在组织中的表达及对临床治疗的指导意义。方法：以3％牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备鼠SAP模型,检测血清淀粉酶,采用免疫组织化学方法分别对雄性SD大鼠SAP制备模型术后4h、12h及正常对照组标本中CYP450的表达进行检测。结果：CYP450主要表达于胞浆,SAP模型组空肠、肝脏组织中的CYP450表达均明显高于正常对照组（P〈0．001）。结论：CYP450在大鼠SAP中表达显著增强,提示其在SAP的疾病发展及临床治疗中都具有重要意义。     

细胞色素P4501A1基因多态性与阿尔茨海默病遗传易感性的相关研究

目的探讨细胞色素P450 1A1基因MSP 1的多态性与阿尔茨海默病的关系.方法实验于2004-11/2005-05在南方医科大学珠江医院中心实验室进行.选择135例无阳性家族史的散发性阿尔茨海默病患者,以年龄和性别相匹配的138名正常健康成人为正常对照组.所有被试者抽全血2 mL,枸橼酸钠抗凝后采用苯酚-氯仿抽提法提取外周血白细胞基因组DNA.利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分析其细胞色素P450 1A1基因MSP 1位点等位基因分布频率,比较基因型在阿尔茨海默病患者与正常人之间的分布差异.结果按意向处理分析,135例阿尔茨海默病患者和138名正常健康人均进入结果分析.①细胞色素P450 1A1等位基因频率分布阿尔茨海默病组m1,m2分别为63.0%,37.0%,正常对照组的分别为68.1%,31.9%,两组比较差异不显著(x2=1.605,P＞0.05).②细胞色素P450 1A1基因MSP 1位点基因型分布频率阿尔茨海默病组m1/m1,m1/m2,m2/m2分布与正常对照组比较差异不明显(42.2%,41.5%,16.3%;49.3%,37.7%,13.0%,χ2=1.483P＞0.05).结论细胞色素P450 1A1基因MSP 1的多态性与阿尔茨海默病的遗传易感性无关.     

血液中一种新的"濒亡标志物"(醇脱氢酶同工酶)的鉴定

目的 鉴定血清乳酸脱氢酶(LD)同工酶检测中出现的第6条带“LD6”的蛋白质性质。方法 用琼脂糖凝胶电泳分离、提纯“LD6”,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测“LD6”相对分子质量,免疫转移印迹法鉴定人血清中“LD6”抗原性。结果 测定人血清LD同工酶时出现的第6条带“LD6”为醇脱氢酶(alcohol dehydmgenase,AD)同工酶,相对分子质量为80000,用western免疫固定转印法鉴定核实。正常人肝组织匀浆、肝癌组织匀浆作琼脂糖凝胶电泳分离、提纯“LD6”,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,表明肝组织匀浆、肝癌组织匀浆的“LD6”与血清“LD6”为同一物质。100例患者有37例血清含有AD,其中34例AD活性≥LD总活性7．9％,病人1周内死亡,死亡率达91．9％。结论 正常人血清内不易检测出AD活性,而正常肝组织内有强的AD-Ⅱ活性。当肝脏受到严重损害时,AD从肝细胞内逸出,释放入血,导致血清AD活性明显升高。血清中AD活性上升可能是一种新的“濒亡标志物”。     

乳酸脱氢酶同工酶LD1/LD2比值在急性心肌梗死诊断中的意义

目的探讨乳酸脱氢酶同工酶LD1/LD2比值对急性心肌梗死(AMI)的诊断意义.方法用琼脂凝胶电泳法测定乳酸脱氢酶(LDH)同工酶LD1/LD2比值,探讨其对AMI的诊断价值.结果AMI组44例LD1/LD2比值为1.0464±0.2947(正常参考值为<0.1),非心肌梗死组35例为0.7690±0.1333,二者比较差异显著(P<0.01).首次血清LD1/LD2比值对AMI诊断的敏感性为47.7%(21/44),特异性为97.1%(34/35).结论血清LDH同工酶LD1/LD2测定有助于AMI早期诊断,系列测定还可提高AMI诊断的检出率.     

Cyclosporin-A-induced lipid peroxidation in human liver microsomes and its influence on cytochrome P-450

The present in vitro study using human liver tissue was performed to investigate the effect of cyclosporin A on lipid peroxidation and cytochrome P-450 concentration in isolated liver microsomes. Incubations were either carried out with cyclosporin A concentrations of 10, 30, 100 and 300 micrograms ml-1 for 1 h or for different time periods (15, 30, 60 and 90 min) with cyclosporin A 300 micrograms ml-1. Lipid peroxidation was monitored measuring the amount of malondialdehyde. In additional experiments the effect of reduced and oxidized glutathione (1 mM) on cyclosporin-A-induced lipid peroxidation in human liver microsomes was studied. Cyclosporin A caused a significant dose and time-dependent increase of the lipid peroxidation product malondialdehyde. At the highest cyclosporin A concentration (300 micrograms ml-1) malondialdehyde production increased 5-fold in comparison to corresponding control values. Incubations for different time periods resulted in a 5-fold net increase of malondialdehyde formation after 90 min. In the presence of reduced glutathione, cyclosporin-A-induced lipid peroxidation was significantly inhibited. Furthermore, cyclosporin-A-induced microsomal lipid peroxidation was accompanied by a significant dose-dependent decline of the microsomal cytochrome P-450 content. At a cyclosporin A concentration of 300 micrograms ml-1, cytochrome P-450 content was decreased to 49% in comparison to control values. In the presence of reduced glutathione, cyclosporin A decreased the cytochrome P-450 concentration only to 79% (P less than 0.05).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

改良琼脂糖电泳法分离碱性磷酸酶同工酶及其在肾脏疾病诊断中的应用

目的　用改良琼脂糖电泳法分离碱性磷酸酶同工酶并探讨在肾脏疾病诊断中的应用。方法　用改良琼脂糖电泳法对正常体检者和 16 2例肾脏疾病患者碱性磷酸酶 (ALP)同工酶进行分离和定量分析。结果　发现在慢性肾衰患者血清中存在胆汁型ALP ;肾小球肾炎和肾盂肾炎的ALP同工酶活性与正常者无显著性差异 ,慢性肾衰的ALP同工酶活性则显著高于正常体检者。在 6 9例慢性肾衰患者中 ,有 2 4例出现胆汁型ALP ,阳性率为 34 8%。结论　改良琼脂糖电泳法能定量分析肝、骨、胆汁等ALP同工酶 ,适合常规实验室应用     

急性冠状动脉综合征早期脂蛋白相关磷脂酶A2水平研究

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2（1ipoprotein-associated phospholipase A2,Lp—PLA2）在急性冠状动脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）早期诊断及严重程度评估中的临床意义。方法76例经冠状动脉造影确诊的ACS患者（ACS组）,其中不稳定性心绞痛患者42例（uAP组）、急性心肌梗死患者34例（AMI组）;同期体检健康者36例（对照组）。检测各组Lp—PLA2、肌酸激酶同工酶、肌红蛋白及肌钙蛋白T水平,采用ROC曲线分析正常人群与ACS最适界值点。结果AMI组和UAP组血清Lp—PLA2、肌酸激酶同工酶、肌红蛋白及肌钙蛋白T水平明显高于对照组（P〈0．05）,AMI组高于UAP组（P〈O．05）;Lp—PLA2的AUC为0．940时诊断ACS的敏感性为90．8％,特异性为91．7％;Gensini积分〉40分者血清Lp—PLA2水平明显高于〉20～40分者与0～20分者（P〈0．05）,冠状动脉3支病变者血清Lp—PLA2水平明显高于双支病变者和单支病变者（P〈O．05）。结论Lp—PLA2在ACS早期诊断中敏感性和特异性均较高,且与ACS患者冠状动脉病变严重程度有关。     

选择性抑制法测定AST线粒体同工酶的试验探讨

目的探讨AST线粒体同工酶(m-AST)测定的方法学评价.方法采用选择性抑制法使s-AST形成免疫复合物后失去活性,然后测出余下的m-AST.结果该法线性可达到200U/L,重复性试验批内CV＜6.5%,批间CV＜9.0%,回收率98.2%～104.4%,平均为101.4%;血红蛋白≤4 g/L,胆红素≤340 μmol/L,甘油三酯≤5.5 mmol/L和抗坏血酸≤6 g/L时对m-AST的活性测定不产生干扰作用;初步临床观察,其诊断心肌梗死的敏感性优于AST.结论m-AST测定的方法简便易行、结果准确可靠,该项目的开展对临床诊断起到了很大的促进作用.     

脑腱黄瘤病临床、影像学、病理和基因分析一家系报道并文献复习

目的 对一个脑腱黄瘤病家系进行临床、病理及基因的分析.方法 收集患者病史、家族史,进行影像学检查、神经肌肉活检.对患者及家族成员进行CYP27A1基因突变分析.结果 36岁女性患者,具有典型的脑腱黄瘤病临床表现,跟腱组织可见典型的胆固醇结晶,腓肠神经可见"洋葱皮样"髓鞘改变.CYP27AI基因新发现2种突变:1号外显子缺失一个鸟嘌呤(C.73delG),而2号外显子缺失一段7核苷酸序列(C.369-375delGTACCCA).家族成员为上述突变的单个突变携带者.结论 先证者可临床诊断脑腱黄瘤病,患者和无症状的家族成员均存在基因突变.     

m-AST检测对酒精性肝炎治疗预后判断的意义

目的观察m-AST活性测定对酒精性肝炎治疗预后的意义。方法观察了48例酒精性肝炎治疗前后m-AST,GGT活性变化,同时观察其他疾病治疗前后m-AST,GGT变化。结果酒精性肝炎治疗前m-AST和GGT100%增高(m-AST150±18U/L,GGT100±2U/L),治疗2～3w后,80%的患者m-AST降至30±14U/L,GGT治疗后略有下降(85±23U/L),大多数下降不明显;治疗4w后48例患者中46例m-AST降至15.0±7.5U/L,接近正常水平,GGT大多数患者仍持续在80±18U/L,2例患者m-AST持续不降,最后确诊为酒精性肝硬化;其他疾病组治疗前后无变化(m-AST6.9±2.5U/L,4.5±3.1U/L)。结论m-AST是酒精性肝炎恢复的一个较好的指标,治疗后m-AST大幅度下降,预后良好,否则病程迁延,最终变为酒精性肝硬化。