幽门螺杆菌感染和喉鳞状细胞癌致病因素的研究

目的:探讨幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)在喉鳞状细胞癌(简称喉癌)患者中的感染情况,分析HP感染是否为喉癌的致病因素。方法:采用巢式聚合酶链反应(nested PCR,nPCR)技术和Hp培养、鉴定对30例喉癌患者和15例喉良性疾病(声带息肉和会     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

喉癌喉咽癌P-GP定量分析及临床意义

应用流式细胞仪结合计算机辅助行数据、图像分析,用荧光标记抗体(MDR1-PE,Clone UIL2)定量检测34例喉癌、喉咽癌组织和18例癌旁组织的P-GP含量,并与肿瘤病理、生物学特性进行比较分析,研究喉癌、喉咽癌细胞MDR1基因产物P-GP的表达及临床意义.结果显示,喉癌、喉咽癌P-GP阳性表达率为58.8%(22/34);P-GP表达与喉癌、喉咽癌患者的临床分期无关(P＞0.05),与病理组织学分级及有无颈淋巴结转移有关(P＜0.01).提示P-GP检测有助于估计肿瘤的生物学特性;P-GP有可能成为有效的预后指标.     

喉癌及癌旁组织CD95、CD95L的表达及意义

目的研究喉癌组织及癌旁组织CD95、CD95L的表达,了解喉癌细胞的生物学特性,指导临床治疗.方法取23例喉癌手术患者的喉癌组织及癌旁组织,用免疫组化法确定CD95、CD95L的分布及强度.结果喉癌组织及癌旁组织的Fas,FasL均有不同程度的表达.Fas的表达在喉癌组织为52.17%,癌旁组织为73.91%(P<0.05).喉癌组织与癌旁组织比较明显地呈低表达.FasL表达在喉癌组织为82.61%,癌旁组织为56.52%(P<0.05),喉癌组织与癌旁组织比较明显地呈高表达.结论Fas,FasL在喉癌的细胞凋亡调节过程中具有重要作用.肿瘤细胞FasL高表达有利于肿瘤细胞逃逸机体的免疫监视.癌旁2mm处的组织有被肿瘤浸润的可能.     

微管相关蛋白1轻链3在喉癌中的表达及其意义

目的:探讨微管相关蛋白1轻链3(LC3)在喉癌中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学染色方法检测LC3蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中的表达情况.采用RT-PCR法检测LC3 mRNA和蛋白在41例喉癌组织、41例癌旁组织及11例声带息肉组织中的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果:免疫组织化学结果显示LC3蛋白在喉癌组织、癌旁组织、喉乳头状瘤、声带息肉中的阳性率分别为60.0%、93.3%、90.0%、93.8%.LC3在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁及声带息肉组织(χ2=18.135,P＜0.01).RT-PCR检测结果显示LC3 mRNA在喉癌组织中相对表达量为0.57±0.08,与癌旁组织(0.99±0.11)及声带息肉组织(1.07±0.05)中的相对表达量比较差异亦有统计学意义(F=255.872,P＜0.01).LC3在喉癌中的蛋白表达与肿瘤部位、病理学分级有关(P＜0.05),与患者的年龄、T分期、临床分期及淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:LC3在喉癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与喉癌发生、发展有关.     

p16与Rb基因在喉癌中的表达及其临床意义

目的:探讨抑癌基因p16和Rb在喉肿瘤中的表达及其相互关系 .方法:用免疫组织化学方法观察40例喉鳞状细胞癌p16和Rb基因的表达. 结果:喉癌标本中p16和Rb阳性表达率分别为42.5%和57.5%,其中7例肿瘤组织(17.5%)p16和Rb基因均阳性表达,未见同一肿瘤组织中两者均缺失.在喉癌的临床类型、分期及组织分化程度方面p16和Rb基因的阳性表达率差异有显著性(P＜0.05). 结论:p16和Rb在喉肿瘤的发生发展过程中起重要作用;但两者同时表达缺失较少见.     

IDO和BIN1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

摘要：目的通过检测喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma)患者肿瘤组织中吲哚胺2,3 双加氧酶(indoleamine 2,3 dioxygenase,IDO)和桥接整合因子1(bridging integrator 1,BIN1)的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学染色法检测50例喉鳞状细胞癌肿瘤组织和23例正常喉黏膜组织中IDO和BIN1的表达,并分析两者表达的相关性及其与患者临床特征的关系。结果IDO在50例喉癌中阳性表达率为60%,而在癌旁正常喉黏膜组织中IDO表达为17.39%,与癌旁正常喉黏膜组织比较,喉癌IDO阳性表达率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);BIN1在50例喉癌中阳性表达率为50%,而在癌旁正常喉黏膜组织中BIN1蛋白阳性表达率为95.65%,与癌旁正常喉黏膜组织比较,BIN1阳性表达率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);而且IDO在原发灶和转移灶中的表达显著增高,BIN1在原发灶和转移灶中的表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。在喉癌肿瘤组织中,IDO表达与有无淋巴结转移、临床分期相关;BIN1表达与肿瘤分化程度、有无淋巴结转移、临床分期相关。结论喉癌患者肿瘤组织和颈部转移淋巴结中IDO表达水平明显提高,而BIN1表达水平显著降低,并且与患者临床特征紧密相关,这两者可能是影响喉癌发生发展的重要因素。     

DNMT1基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测96例喉鳞状细胞癌中DNMT1基因蛋白的表达,其中66例喉癌组织同时进行实时定量PCR,并分析其DNMT1 mRNA的表达与临床病理因素的关系.结果:DNMT1 mRNA在喉鳞状细胞癌组织中表达上调(P<0.05).96例喉癌鳞状上皮细胞中DNMT1蛋白表达全部为阳性(96/96),36%(8/22)癌旁组织的鳞状上皮细胞中DNMT1蛋白表达为阳性,二者差异有统计学意义(P<0.05).DNMT1 mRNA在喉癌组织中表达上调,和患者年龄、性别、临床分期、淋巴结转移情况无关,但与患者吸烟史有显著相关性(P<0.05).结论:DNMT1可能在喉癌中表达增高从而引起肿瘤的发生,吸烟可能诱导DNMT1的表达增高.     

抑癌基因CX26在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:观察抑癌基因CX26的mRNA和蛋白质在喉鳞状细胞癌中的表达情况,探讨CX26基因与喉鳞状细胞癌生物学行为的关系,及其与喉鳞状细胞癌发生和发展的分子机制。方法:38例喉鳞状细胞癌患者,每例患者均同时在喉癌切除手术时从喉癌肿瘤组织中心部位取癌组织(喉癌组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取喉癌旁组织(对照组),分别采用半定量RT-PCR检测CX26mRNA的表达水平,冷冻切片免疫组织化学方法检测CX26蛋白的表达情况。结果:RT-PCR结果显示,CX26mRNA在喉癌组和对照组中均呈阳性表达;经半定量分析,CX26mRNA在喉癌组中的表达较对照组明显降低(P<0.05);免疫组织化学发现,CX26蛋白在18例(47.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在34例(89.5%)患者的喉癌旁组织呈强阳性表达,CX26蛋白在两者中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05),并且伴有细胞内定位的改变;同时发现,CX26蛋白阳性表达率和CX26基因mRNA的表达水平在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显低于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05),有颈淋巴结转移者明显低于无转移者(P<0.05),并且其表达水平随病理分化程度的降低而降低(P<0.05)。结论:CX26与喉癌的发生和发展关系密切,并可能与喉癌的预后有关。     

MIF、GSK-3β在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性研究

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及糖原合成激酶-3(GSK-3β)在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性。 方法 采用免疫组化法检验30例喉癌患者癌组织及相应癌旁组织中MIF、GSK-3β的表达情况,并以10例非喉鳞状细胞癌患者喉部正常黏膜组织作对照;分析喉组织中MIF、GSK-3β表达与患者临床病理因素之间的关系,探讨喉鳞状细胞癌中MIF与GSK-3β表达的相关性。 结果 喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中MIF表达率分别为73.33%,40.00%,20.00%,喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中GSK-3β阳性表达率分别为70.00%,13.33%,20.00%;MIF、GSK-3β在喉癌中表达与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移均相关(P<0.05);与患者年龄、性别、吸烟史和饮酒史均无相关性(P>0.05)。MIF、GSK-3β在喉癌中的表达具有相关性(r=0.592,P=0.003)。 结论 喉鳞状细胞癌中MIF、GSK-3β的高表达可促进喉癌的发生及发展,MIF、GSK-3β可作为喉癌的潜在的组织生物标志物和喉癌患者疾病进展监控及预后观测的指标。     

The presence of Helicobacter pylori in the larynx pathologies

Objective

The well-known relation of Helicobacter pylori to the MALT-lymphoma and gastric carcinoma suggested a possible presence in the laryngeal tissues of patients with squamous cell carcinoma of the larynx by using Polymerase Chain Reaction (PCR) investigations, and PCR results of benign laryngeal pathologies were compared.

Methods

Polymerase Chain Reaction investigations were carried out in biopsy samples of 21 patients with squamous cell carcinoma of the larynx and of 19 patients with benign laryngeal pathologies like vocal polyp and nodules.

Results

The PCR results of 17 out of the 21 samples (80.9%) of the patients with laryngeal squamous cell carcinoma were positive for H. pylori. Moreover, any genomic material of H. pylori was not found in the PCR results of the 19 patients with benign laryngeal pathology. It was also determined that the presence of the H. pylori in the patients with laryngeal squamous cell carcinoma was statistically significant (p = 0.0001).In the patients with laryngeal squamous cell carcinoma, the comparison of the H. pylori presence within the normal and tumoral tissues revealed that 16 normal tissue samples (76.19%) were positive, while 9 of the tumoral tissue samples (42.85%) were positive. The ratio of bacterial presence in both the normal and tumor tissue samples was 38.09% (8 patients). The rates of presence revealed a statistically significant difference between the normal and tumoral tissue samples (p = 0.039).

Conclusions

The presence of the genomic material of H. pylori within the laryngeal tissue of patients with squamous cell carcinoma of the larynx is a proof of the colonization of the bacterium in that tissue. While this may suggest a possible relation of the bacterium to the development of laryngeal squamous cell carcinoma, no conclusion is possible to be drawn about the mechanism of the process.     

α-甲基酰基辅酶A消旋酶在喉癌中的表达

目的研究α-甲基酰基辅酶A消旋酶(AMACR)在喉癌中的表达,初步探讨AMACR在喉鳞癌生物学行为中的意义。方法用免疫组织化学EliVisionTMplus二步法(福州迈新)检测40例原发喉鳞癌、20例声带息肉及10例癌旁组织中AMACR的表达情况。结果40例喉癌中13例(32.5%)存在不同程度的AMACR表达,在20例声带息肉和10例正常喉组织中无AMACR表达,差异有统计学意义(P<0.01)。AMACR在高分化鳞癌和中、低分化鳞癌中表达的阳性率分别为50%、15%,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期喉癌AMACR阳性率无统计学意义,AMACR表达与性别、肿瘤部位、颈淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。结论AMACR在喉鳞癌中有阳性表达,其表达可能与分化有关,与性别、部位、临床分期、颈淋巴结转移无明显相关性。     

一氧化氮合酶(NOS)在喉鳞癌中的表达及意义

目的：检测喉鳞状细胞癌组织中一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase,NOS）的表达,并分析其表达与喉鳞癌病理特性的关系。方法：应用免疫组织化学技术对42例喉鳞癌,15例喉乳头状瘤,5例声带息肉组织中的iNOS,eNOS表达情况进行对比。结果：喉鳞癌中iNOS的阳性表达率为83．3％（35／42）,喉乳头状瘤阳性表达率为40．0％（6／15）,二者比较有显著性差异（x2＝9．47,P＜0．05）;eNOS在喉鳞癌组阳性表达为52．4％（22／42）,喉乳头状瘤组为6．7％（1／15）,二者比较有显著性差异（x2＝9．59,P＜0．05）;iNOS和eNOS的表达与喉鳞癌的临床分期无显著相关性（P＞0．05）。iNOS在低分化癌表达率为86．7％（13／15）,在高分化癌为75．0％（12／16）,但iNOS强阳性表达在高分化型鳞癌中为12.6％（2／16）,在低分化鳞癌中为53．3％（8／15）,其差异显著;eNOS在低分化和高分化癌中的表达率分别为73．3％（11／15）和31．3％（5／16）,其差异均有显著性（P＜0．05）。结论：NOS在喉鳞癌有较高的表达,可能为肿瘤细胞间的异常介质信号,与喉癌的发生和分化有关,肿瘤组织内有新生血管形成,其血流由一氧化氮（nitricoxide,ON）调节,明确其作用机理,将可能为喉癌的生物治疗提供理论依据。     

Prevalence of Herpes Simplex Virus in Malignant Laryngeal Lesions

Objective: To determine the prevalence of herpes simplex virus (HSV) in malignant laryngeal lesions. Study Design: Retrospective review. Materials and Methods: Paraffin‐embedded, histologically confirmed specimens containing benign laryngeal lesions, squamous cell carcinoma of the larynx, and squamous cell carcinoma of the oral cavity were identified from archived surgical specimens. Biopsies of normal‐appearing oral cavity tissue were also obtained from fresh‐frozen cadavers. These tissues were analyzed for the presence of HSV DNA using polymerase chain reaction techniques. Patient charts were reviewed for patient demographics, risk factors, stage, clinical course, treatment, and outcome. Results: HSV was detected in nine laryngeal squamous cell carcinomas (75%) and in none of the benign laryngeal lesions (P = .0001). HSV was also found in three oral cavity squamous cell carcinomas (25%) and in none of the controls (P = .049). Conclusion: HSV is more prevalent in squamous cell carcinoma of the larynx and oral cavity than in their respective control groups, suggesting a role for carcinogenesis. HSV is more prevalent in squamous cell carcinoma of the larynx than of the oral cavity. Further studies to determine the role of HSV as a cocarcinogen and its interrelationship with other environmental factors in laryngeal cancer are warranted.     

喉鳞状细胞癌中Snail mRNA表达及临床意义

目的 探讨Snail mRNA在人喉鳞状细胞癌(简称喉癌)组织中的表达及与临床病理特征的关系,并探讨它在喉癌发生、发展中的作用及其临床应用价值.方法 应用原位分子杂交方法检测Snail mRNA在60例喉癌、30例喉不典型增生和20例喉慢性炎症组织中的表达.结果 60例喉癌组织中Snail mRNA的阳性表达率为70%...     

Investigation of<Emphasis Type="Italic"> Helicobacter pylori</Emphasis> colonization in laryngeal neoplasia

Helicobacter pylori has been investigated in several other organ systems and localizations such as the oral cavity, but has not been investigated extensively in squamous cell carcinoma of the larynx, a region that could be directly exposed to the bacterium by the oral route or gastro-esophageal reflux. Only serological studies are available regarding the relation between H. pylori and laryngeal cancer, yielding conflicting results. To our knowledge, there is no study investigating the presence of H. pylori in laryngeal squamous cell carcinoma tissue. The purpose of this study was to investigate the presence of H. pylori in laryngeal squamous cell carcinoma tissue and to investigate the possible role of this organism in the etiopathogenesis of laryngeal cancer. Specimens from 50 patients with laryngeal cancer who underwent total or partial laryngectomy between March 1999 and December 2002 were examined by histopathological and immunohistochemical methods to detect H. pylori. The presence of H. pylori was also investigated histopathologically in 50 benign laryngeal biopsy specimens. In our study, we demonstrated that H. pylori was not present in laryngeal squamous cell carcinoma tissue or in the benign lesions. We could not find any evidence indicating that H. pylori played a role at the tissue level in the pathogenesis of laryngeal carcinoma.     

喉癌组织中热休克蛋白和人乳头状瘤病毒的相关性

目的 探讨喉鳞状细胞癌（简称喉癌）组织中热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）和人乳头状瘤病毒1 6E7（human papiloma-virus 1 6E7,HPV16E7）蛋白的表达及其在喉癌发生和发展过程中的相互关系.方法 用免疫组织化学方法检测78例喉癌、24例声带息肉和10例癌周喉组织标本中HSP70和HPV16E7蛋白的表达.结果 在喉癌组织、声带息肉和癌周喉组织中HSP70的阳性表达率分别为69.2%,8.3%和0%,HPV16E7蛋白的阳性表达率分别为43.6%,4.2%和0%,HSP70和HPV16E7蛋白的阳性表达在喉癌组织与声带息肉、癌周喉组织之间均有显著性差异（P＜0.05）;HPV16E7阳性的喉癌组织中HSP70的阳性表达率为85.3%,HPV16E7阴性的喉癌组织中HSP70的阳性表达率为56.8%,二者之间有显著性差异（P＜0.05）.结论 HPV16E7可以诱导喉癌组织中HSP70的高表达,二者在喉癌的发生和发展过程中发挥重要作用;检测HSP70和HPV16E7蛋白的表达可用于喉癌恶性程度的评定.     

Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义

目的:探讨Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测50例喉鳞状细胞癌组织和10例癌旁正常组织中Jab1和p27kip1的表达。采用人工合成Jab1siRNAⅡ用脂质体2000包裹后转染Hep-2细胞,用RT-PCR方法分析转染后喉癌细胞中Jab1和p27kip1基因的表达情况。结果:Jab1和p27kip1蛋白的阳性表达定位为细胞核中,Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中高表达,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1在人喉癌组织中弱表达,正常喉黏膜中强表达;两者呈负相关。Jab1siRNAⅡ可降低Jab1mRNA表达,并且随着时间的延长,Jab1mRNAⅡ在Hep-2细胞中的表达逐渐减弱,而p27kip1 mRNA的表达则无明显变化。结论:Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中表达增强,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1则正好相反。两者在喉癌中的表达呈负相关。Jab1siRNAⅡ可以特异性降低Jab1mRNA在喉癌Hep-2细胞中的表达,为进一步研究Jab1基因在喉癌中的作用奠定了基础。