应用电化学测菌法检测变形链球菌的初步探讨

目的:探讨应用电化学测菌法检测变形链球菌的可行性。方法:利用本课题组前期建立的电化学测菌法检测变形链球菌,记录检测参数,并将电化学测菌法的检测结果与细菌培养结果进行比较。结果:①微流芯片样本通道内层流形成时间为(3.17±0.16)min,从进样到获得稳定电阻抗数据的时间为(10.20±0.16)min。②当变形链球菌浓度为104～109cells/mL时,细菌浓度C的对数与系统阻抗值Z呈良好的线性关系(R2=0.98)。③与细菌培养的检测结果相比,电化学测菌法获得的细菌数多,差异有统计学意义(P<0.05)。④变形链球菌浓度为105cells/mL时,电化学测菌法检测值与细菌培养法检测值之间的线性函数关系式为:y=0.94x+0.32E4(R2=0.95),两种方法的检测值高度正相关(P=0.001<0.01)。结论:电化学测菌法能为变形链球菌的快速检测提供新的思路。     

应用电化学测菌法检测牙龈卟啉单胞菌的初步研究

目的:探讨应用电化学测菌法检测牙龈卟啉单胞菌的可行性。方法:应用电化学阻抗谱方法测量去离子水溶液中特定细菌(牙龈卟啉单胞菌)的电化学阻抗,获得针对特定细菌的敏感阻抗谱,建立特定频率下细菌浓度与系统交流阻抗值之间的函数关系,依据函数关系和测得的电化学阻抗值分析待检样品内特定细菌的浓度。结果:当频率低于104Hz时,系统的交流阻抗值随去离子水溶液中牙龈卟啉单胞菌浓度的增加而减小;当设定频率为1.2 kHz、待测细菌(牙龈卟啉单胞菌)浓度为103～109/mL时,牙龈卟啉单胞菌浓度C的对数与系统阻抗值Z呈良好的线性关系(R2=0.98),logC(细胞数/mL)=-0.007 Z(kΩ)+10.792;单一浓度检测用时约40 m in。结论:基于电化学阻抗原理的电化学测菌法有可能成为简便、快速检测牙周致病菌的新方法。     

三种牙周细菌定量方法的比较

目的分析电化学测菌法用于牙周细菌定量检测的实用价值。方法选择牙龈卟啉单胞菌ATCC33277作为质控标准菌株,采集40份慢性牙周炎患者的龈沟液样本,分别运用电化学测菌法、细菌培养和实时定量PCR法对龈沟液样本中的牙龈卟啉单胞菌进行定量,比较3种定量方法的检测结果。结果细菌浓度在一定范围内,细菌浓度的对数与电化学测菌法的标准化阻抗值呈良好线性关系;电化学测菌法获得的细菌数多于细菌培养,少于实时定量PCR方法;电化学测菌法检测结果与细菌培养、定量PCR检测结果正相关(P<0.01)。结论电化学测菌法在一定细菌浓度范围内可用于牙周细菌定量检测。     

应用电化学测菌法检测牙龈卟啉单胞菌的初步研究

应用电化学阻抗谱方法测量去离子水溶液中特定细菌(牙龈卟啉单胞菌)的电化学阻抗,获得针对特定细菌的敏感阻抗谱,建立特定频率下细菌浓度与系统交流阻抗值之间的函数关系,依据函数关系和测得的电化学阻抗值分析待检样品内特定细菌的浓度。结果:当频率低于104Hz时,系统的交流阻抗值随去离子水溶液中牙龈卟啉单胞菌浓度的增加而减小;当设定频率为1.2kHz、待测细菌(牙龈卟啉单胞     

微流芯片在口腔细菌定量检测中的初步应用

微流芯片定量测菌法是利用微加工技术在芯片上进行细菌定量检测的一种先进方法,关于口腔细菌学研究涉及的方法技术十分广泛,随着科技快速发展,微流芯片技术也引入到口腔细菌定量检测中,本文就该领域研究现状做一综述。     

免疫磁分离技术在电化学测菌法特异检测牙龈卟啉单胞菌中的应用

目的:探讨结合免疫磁分离技术实现电化学测菌法特异检测牙龈卟啉单胞菌的可行性。方法:利用结合特异抗体的磁颗粒捕获分离目的菌,观察免疫磁分离前、后检测样本的阻抗变化。分析磁颗粒、杂菌、抗体浓度、反应时间、温度、pH值对阻抗测量的影响。结果:与初始菌液相比,免疫磁分离后的阻抗值增加,但无统计学差异(P>0.05);磁颗粒和杂菌未对阻抗测量产生明显干扰;抗体浓度为1∶10稀释时系统阻抗变化最明显;抗原抗体结合30 min时系统阻抗变化最大,延长时间未见增加;温度在25～37℃范围内,系统阻抗变化较平稳,超过37℃时,系统阻抗值出现下降趋势;pH在7.0～7.5之间时,系统阻抗值较平稳。结论:免疫磁分离技术能够与电化学测菌法结合,实现细菌的特异检测。     

唾液、血清和脓液对电化学测菌法检测牙龈卟啉单胞菌的影响

目的:观察唾液、血清和脓液对电化学测菌法检测牙龈卟啉单胞菌的影响。方法:利用免疫磁分离捕获牙龈卟啉单胞菌后进行电化学阻抗测量,观察唾液、血清和脓液对电化学测菌法检测限和检测灵敏度的影响。结果:唾液对电化学测菌法的检测限无影响,但可降低其检测灵敏度;血清对电化学测菌法的检测限和检测灵敏度均无明显影响;脓液明显影响电化学测菌法对牙龈卟啉单胞菌的检测。结论:应用电化学测菌法检测样本时应避免脓液的污染。     

中文文摘

1．唾液、血清和脓液对电化学测菌法检测牙龈卟啉单胞菌的影响／裴振华…／／实用口腔医学杂志．-2012，28（6）．-699-702 利用免疫磁分离捕获牙龈卟啉单胞菌后进行电化学阻抗测量，观察唾液、血清和脓液对电化学测菌法检测限和检测灵敏度的影响。结果：唾液对电化学测菌法的检测限无影响，但可降低其检测灵敏度；血清对电化学测菌法的检测限和检测灵敏度均无明显影响；脓液明显影响电化学测菌法对牙龈卟啉单胞菌的检测。结论：应用电化学测菌法检测样本时应避免脓液的污染。     

姜黄素对变形链球菌和溶血链球菌黏附能力的分析研究

目的:探讨姜黄素对变形链球菌和溶血链球菌的黏附能力改变.方法:采用基因工程的方法体外制备和纯化变形链球菌和溶血链球菌的Sortase A酶,荧光记录分析的方法检测姜黄素对纯化的Sortase A酶的IC50值.微量肉汤稀释法检测姜黄素对这两种细菌的最低抑菌浓度(MIC),统计细菌计数的方法检测姜黄素对这两种细菌单菌种黏...     

五倍子对菌斑生物膜内细菌的抑制作用

目的:应用人工口腔观察五倍子对菌斑生物膜内细菌的抑制作用。方法:采用液体二倍稀释法测定与致龋病关系较密切的4种细菌的最小抑菌浓度,并进一步在人工口腔中形成各实验菌的单一细菌菌斑生物膜,应用菌落计数技术观察五倍子水提取物对菌斑生物膜内细菌的抑制作用。结果:五倍子水提取物对变形链球菌、粘性放线菌、血链球菌、口腔链球菌的生长均有抑制作用,其中对变形链球菌、粘性放线菌和血链球菌的最小抑菌浓度(MIC)为64mg/ml,口腔链球菌为8mg/ml;不同浓度的五倍子水提取物对各实验菌形成的单一细菌菌斑生物膜均有一定的抑制作用,并呈浓度依赖性;即使采用大于MIC的浓度,也不能把釉质表面形成的生物膜完全抑制,釉质表面仍有细菌生长。结论:五倍子水提取物对菌斑生物膜内细菌具有良好的抑制作用;与浮游细菌相比,生物膜中的细菌对五倍子水提取物具有较强的抵抗力。     

白屈菜红碱对变形链球菌表面疏水性及黏附作用的影响

目的：测定白屈菜红碱对变形链球菌表面疏水性及黏附作用的影响,研究其对变形链球菌黏附的作用机制。方法：将白屈菜红碱对倍稀释为不同浓度的溶液,浓度范围为24．4～781．3μg／ml。采用微生物黏着碳氢化合物法（MATH）测定白屈菜红碱对变形链球菌的细胞表面疏水性,并测定不同浓度的白屈菜红碱溶液对变形链球菌在玻璃表面黏附作用的影响。使用SPSS13．0统计软件包对结果进行处理,各浓度组总体均数之间比较采用单因素方差分析。结果：变形链球菌表面疏水性随白屈菜红碱溶液浓度的升高而逐渐下降,各浓度实验组与对照组均数之间均具有高度显著性差异（P〈0．01）,24．4—195．3μg／ml4个浓度组之间均无显著性差异（P〉0．05）;变形链球菌对玻璃表面的黏附抑制率随白屈菜红碱浓度的升高逐渐增高。195．3μml和390．6μg／ml2个浓度组与对照组和其余浓度组之间均有高度显著性差异（P〈0．01）。结论：白屈菜红碱对变形链球菌细胞表面疏水性和黏附具有抑制作用,提示其具有良好的防龋应用前景。     

美兰对变形链球菌及菌斑抑制的实验研究

的　研究美兰对变形链球菌生长和产酸代谢的作用以及对体外菌斑糖酵解模型产酸代谢的作用,以探讨美兰防龋的可行性。方法　采用比浊法测定不同培养条件下变形链球菌培养液的OD值;采用气相色谱法检测不同培养条件下变形链球菌培养液中有机酸的种类和数量;测定不同处理条件下体外菌斑糖酵解模型产酸液的 pH值。结果　(1)美兰组细菌OD值低于生理盐水组,二者之间的差异具有统计学意义;(2)不同血清型变形链球菌的3个处理组中均可检测到有机酸的产生,葡萄糖组有机酸的总量最多,美兰组有机酸的总量最少;(3)美兰组产酸液的pH值与阴性对照组之间的差异有统计学意义,与阳性对照组之间的差异无统计学意义。结论　美兰可以抑制变形链球菌的生长、产酸代谢以及菌斑的产酸代谢。     

在不同浓度蔗糖条件下变形链球菌对镍铬合金腐蚀性能的影响

目的 探讨不同浓度的蔗糖条件下,变形链球菌与镍铬合金共同培养后,合金耐蚀性能受到的影响。方法 将镍铬合金制作12个试件,随机分为5.0%蔗糖实验组、5.0%蔗糖培养基对照组、1.0%蔗糖实验组及1.0%蔗糖培养基对照组。8周后分别取出做电化学实验和扫描电镜实验进行耐腐蚀性能的研究。结果 电化学实验结果显示:5.0%蔗糖实验组与1.0%蔗糖实验组相比,自腐蚀电位与自腐蚀电流密度差异均不显著;5.0%蔗糖培养基对照组与1.0%蔗糖培养基对照组相比,自腐蚀电位绝对值减小,自腐蚀电流密度减小(差异均有统计学意义)。扫描电镜实验结果显示:两实验组试件表面无明显差别,与1.0%蔗糖培养基对照组比较,5.0%蔗糖培养基对照组表面出现斑块状花纹,无明显腐蚀痕迹。结论 蔗糖浓度的增加对变形链球菌的生长繁殖有利,但未必会增强变形链球菌对镍铬合金表面腐蚀性的影响。     

In vitro hydrolysis of monofluorophosphate by dental plaque microorganisms

Enzymic hydrolysis of sodium monofluorophosphate by suspensions of dental microorganisms has been demonstrated at pH 5.1, pH 7.0, and pH 8.4, using a fluoride-selective electrode. The extracellular medium from viable Streptococcus mutans K1R cells contained low MFPase and paranitrophenyl phosphatase activity. It is hypothesized that the enzymes responsible for MFP hydrolysis by S. mutans K1R are intracellular, and that cell disruption is necessary for hydrolysis to be manifested; this question requires further study. In vitro MFPase activity was of a magnitude consistent with the hypothesis that it may significantly raise the fluoride ion concentration of plaque within the several minutes MFP would be in the mouth during toothbrushing.     

酪蛋白磷酸肽钙磷复合体对变形链球菌生长的实验研究

目的：研究酪蛋白磷酸肽钙磷复合体（CPP—ACP）对变形链球菌生长的影响。方法：将变形链球菌ATCC25175（血清型c）加入实验组即含不同浓度（0．5％～5．0％。W／V）CPP-ACP溶液和对照组（不含CPP—ACP溶液）的BHI培养基中厌氧培养48h。采用噻唑蓝（MTT）比色分析法测定细菌浓度的吸光度A值（λ=550nm）。结果：随CPP—ACP浓度的升高,变形链球菌甲胎产物的二甲亚砜溶液的吸光度值降低,即变形链球菌的活菌数减少（P〈0．01）。结论：CPP—ACP对变形链球菌生长具有抑制作用。且随CPP—ACP浓度的升高抑制作用增强。     

黄芩苷对变异链球菌UA159体外的抑制作用

目的 探讨黄芩苷对变异链球菌国际标准株UA159的体外抑制作用.方法 采用液体倍比稀释法结合酶标仪测OD600值测定黄芩苷对变异链球菌UA159的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC).利用酶标仪测定不同浓度的黄芩苷药液中变异链球菌UA159的OD600值,绘制生长曲线...     

白屈菜提取物抑制变形链球菌的实验研究

目的:研究白屈菜提取物白屈菜碱和白屈菜红碱对变形链球菌的抑制作用,探讨其防龋机制。方法:用二倍稀释法将白屈菜碱和白屈菜红碱等倍稀释为不同的浓度,用纸片扩散法测定其对变形链球菌的抑制作用,并用液体培养基测定其最低抑菌浓度(MIC),0.16%氯已啶溶液作为阳性对照。采用Spearman相关检验进行两组样本之间的相关分析。结果:白屈菜红碱乙醇溶液出现抑菌圈,而白屈菜碱乙醇溶液的各个浓度则无抑菌圈;100mg/ml的白屈菜红碱抑菌圈(25.8mm)大于对照组氯已啶溶液的抑菌圈(19.4mm);白屈菜红碱溶液浓度与变形链球菌抑菌圈大小之间具有高度相关性(r=0.99,P<0.01)。白屈菜红碱的最低抑菌浓度为0.78mg/ml。结论:白屈菜提取物白屈菜红碱有明显的抗菌作用,提示其可能具有较强的防龋作用。     

NAF与EGCG联合应用对变异链球菌的作用研究

摘要：目的：研究氟化钠（Sodium fluoride,NAF）与表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechingallate,EGCG）联合应用对变异链球菌的影响。方法：采用微量稀释法分别测量NAF与EGCG对变异链球菌的最小细菌抑制浓度MIC值,采用棋盘微量稀释法测量NAF与EGCG联合作用于变异链球菌的MIC值,并计算FIC指数。结果：NAF单独作用于变异链球菌MIC值为100ppm, EGCG单独作用于变异链球菌的MIC值为500ppm,NAF与EGCG联合应用时MIC值分别为25ppm和62.5ppm,FIC指数为 0.375,FIC指数小于0.5。结论：NAF与EGCG联合应用具有协同抑制变异链球菌的作用。