地塞米松对老龄大鼠术后认知功能的影响

目的 评价地塞米松对老龄大鼠术后认知功能的影响.方法 雄性SD大鼠180只,18 ～ 20月龄,体重400 ～ 600 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=60)∶对照组(C组)、手术组(S组)和地塞米松组(D组).采用大鼠剖腹探查手术模型.D组于麻醉开始时腹腔注射地塞米松10 mg/kg.C组不进行手术,腹腔注射生理盐水2 ml/kg.于术后3h、7d时测定海马OX42(小胶质细胞激活特异性标志物)的表达水平；于术后3h、1d、3d和7d时测定海马IL-1β mRNA和TNF-α mRNA的表达水平.采用Morris水迷宫实验和条件恐怖适应实验检测大鼠术后认知功能.结果 与C组比较,S组和D组逃逸潜伏期延长,穿越原平台次数减少,术后僵直时间缩短,海马OX42表达、IL-1β mR-NA和TNF-α mRNA表达上调(P＜0.05或0.01)；与S组比较,D组逃逸潜伏期缩短,穿越原平台次数增多,术后僵直时间延长,海马OX42、IL-1β mRNA和TNF-α mRNA表达下调(P＜0.05或0.01).结论 地塞米松可抑制海马小胶质细胞过度激活,减轻炎性反应,从而改善老龄大鼠术后认知功能.     

术后认知功能障碍老龄大鼠海马神经元缝隙连接蛋白36表达的变化

目的 评价术后认知功能障碍老龄大鼠海马神经元缝隙连接蛋白36(Cx36)表达的变化.方法 健康雄性SD大鼠90只,20月龄,体重500～600 g,按随机数字表法,将其随机分为3组(n=30):正常对照组(C组)、假手术组(S组)和术后认知功能障碍组(POCD组).采用脾脏切除术制备老龄大鼠术后认知功能障碍模型,分别于脾脏切除术后1、3、7 d(T1-3)时每组各取10只大鼠,经旷场分析和Y型迷宫实验测试大鼠认知功能,随后处死大鼠取海马,采用免疫组化法检测海马神经元Cx36的表达.结果 与C组比较,S组各项认知功能指标和海马神经元Cx36表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),POCD组中央格停留时间延长,跨格次数、站立次数和正确反应次数减少,全天总反应时间增加,海马神经元Cx36表达水平降低(P＜0.05);与S组比较,POCD组大鼠T1时中央格停留时间延长,跨格次数、站立次数和正确反应次数减少,全天总反应时间增加,海马神经元Cx36表达水平降低(P＜0.05),T2,3时各项认知功能指标及海马神经元Cx36表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 术后认知功能障碍可能与老龄大鼠海马神经元Cx36表达下调有关.     

手术创伤对老龄大鼠海马环氧化酶-2和前列腺素E2的影响

目的 探讨手术创伤对老龄大鼠海马环氧化酶-2(COX-2)和前列腺素E2(PGE2)的影响.方法 健康雄性SD大鼠45只,月龄18月,体重500～600 g,随机分为3组(n=15):对照组(C组)腹腔注射生理盐水3 ml;麻醉组(A组)和手术组(S组)腹腔注射1%戊巴比妥钠50 mg/kg(稀释至3 ml)麻醉,S组麻醉下行腹腔探查+阑尾切除术+脾切除术.于麻醉或术后1、3、7 d(T1～3)时测定认知功能、海马COX-2 mRNA表达和PGE2含量.结果 与C组和A组比较,S组中央格时间延长,跨格及站立次数和正确反应次数减少,全天总反应时间延长,海马COX-2 mRNA表达上调,PGE2含量增加(P＜0.05),C组和A组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论手术创伤导致老龄大鼠术后认知功能障碍的机制可能与上调海马COX-2 mRNA表达和增加PGE2含量有关.     

参麦注射液预处理对老龄大鼠术后认知功能的影响

目的观察参麦注射液预处理对老龄大鼠术后炎症反应水平和认知功能的影响。方法健康雄性老龄SD大鼠72只,月龄约20个月,体重500~600g。按随机数字表法分为对照组(C组)、参麦注射液组(S组)和布洛芬组(I组),每组24只。S组腹腔注射参麦注射液,I组给予布洛芬悬液灌胃,C组腹腔注射等量生理盐水。七氟醚麻醉下行脾切除术建立老龄大鼠POCD模型。三组大鼠分别于麻醉后即刻、术后即刻和术后1d采集颈静脉血,采用ELISA固相夹心法测定IL~(-1)β、IL-6和TNF-α浓度。于术前、术后1、3和7d进行Morris水迷宫实验和旷场实验,记录大鼠的逃避潜伏期、平台穿越次数、中央格停留时间、修饰次数和直立次数。结果术后即刻,S组和I组IL~(-1)β、IL-6和TNF-α浓度均明显低于C组(P0.01或P0.05);术后1d,I组IL~(-1)β与S组和I组IL-6的浓度均明显低于C组(P0.01或P0.05)。与术前比较,术后1、3dC组和S组的逃避潜伏期明显延长(P0.05),平台穿越次数明显减少(P0.01或P0.05),中央格停留时间明显延长(P0.01或P0.05),修饰和直立次数均明显减少(P0.01或P0.05)。与C组和S组比较,术后1、3dI组逃避潜伏期明显缩短(P0.01或P0.05),平台穿越次数均明显增多(P0.01或P0.05),中央格停留时间明显缩短(P0.01),修饰次数和直立次数均明显增多(P0.01或P0.05)。结论参麦注射液预处理可减轻手术后炎症反应,但对POCD无明显影响。     

手术创伤对老龄大鼠海马CA3区突触结构的影响

目的 探讨手术创伤对老龄大鼠海马CA3区突触结构的影响.方法 健康SD大鼠56只,月龄18月,随机分为3组,对照组(C组,n=8)腹腔注射生理盐水0.8 ml/kg;麻醉组(A组,n=24)腹腔注射氯胺酮40 mg/kg;手术组(O组,n=24)腹腔注射氯胺酮40 mg/kg,翻正反射消失后行脾脏切除术.A组和O组于麻醉或术后1、3,7 d(T_(1～3))时取8只大鼠行Morris水迷宫实验测试认知功能,并测定海马CA3区突触结构各指标.结果 与C组和A组比较,O组T_(1,2)时通过原平台次数、突触数减少,突触间隙增宽,突触后膜致密物厚度变薄,突触活性带长度缩短,突触界面曲率减小(P<0.05或0.01).与C组比较,A组T_1时、O组T_(1,2)时潜伏期及游泳距离延长(P<0.01);与A组比较,O组T_(1,2)时潜伏期延长,T_2时游泳距离延长(P<0.05).结论 手术创伤导致老龄大鼠术后早期认知功能减退的机制与海马CA3区突触结构改变有关.     

成年小鼠七氟醚麻醉手术后海马突触结合蛋白-Ⅰ表达的变化

目的 评价突触结合蛋白-Ⅰ(synaptotagmin-Ⅰ,syt-Ⅰ)在七氟醚麻醉的成年小鼠海马中的表达变化. 方法 成年雄性C57BL/6小鼠120只,16周龄,体重(21.2±2.2)g,采用随机数字表法分为4组(每组30只):吸氧+生理盐水+戊巴比妥钠组(C组)、吸氧+生理盐水+腹腔探查术+戊巴比妥钠组(S组)、七氟醚麻醉+腹腔探查术+生理盐水组(SS组)和七氟醚+腹腔探查术+地塞米松组(SD组).麻醉前1h,SD组腹腔注射地塞米松(2 mg/kg),余3组腹腔注射等量生理盐水.C组、S组1.5％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,SS组、SD组3.4％～3.6％七氟醚麻醉,S组、SS组、SD组行腹腔探查术.麻醉手术结束24 h后,水迷宫训练后测定各组的潜伏期、穿越平台次数、目标象限游泳时间.水迷宫测试结束后2h进行条件恐惧训练,条件恐惧训练结束24 h后进行场景恐惧和条件恐惧测试.行为学测试结束后取小鼠海马组织,Western blot检测syt-Ⅰ、IL-1β、S100A8含量,RT-PCR检测S100A8、Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、IL-6、IL-1β、TNF-α,mRNA含量. 结果 与C组比较,S组和SS组第3、4、5天潜伏期延长、穿越平台次数减少、目标象限游泳时间缩短、场景恐惧时间下降(P均＜0.05);与SS组比较,SD组潜伏期缩短、穿越平台次数增加、目标象限游泳时间增加、场景恐惧时间增加(P均＜0.05).4组条件恐惧僵直反应差异无统计学意义(P＞0.05).与C组比较:S组和SS组IL-1β和S100A8蛋白及其mRNA表达增加,TNF-α mRNA表达增加(P＜0.05);SS组syt-Ⅰ及TLR4 mRNA含量降低,IL-1β和S100A8蛋白及其mRNA表达增加(P＜0.05). 结论 syt-Ⅰ表达下降参与了七氟醚麻醉手术后成年小鼠认知功能障碍.     

氟比洛芬酯预先给药对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨氟比洛芬酯预先给药对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠84只,体重200～350 g,随机分为4组(n=21):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、氟比洛芬酯5 mg/kg组(F_1组)和氟比洛芬酯10 mg/kg组(F_2组).采用夹闭双侧颈总动脉联合低血压法建立全脑缺血再灌注模型.F_(1,2)组分别于缺血前15 min静脉注射氟比洛芬酯5、10 mg/kg.于再灌注6 h(T_1)、24 h(T_2)、72 h(T_3)时随机取7只大鼠行神经功能缺陷评分(NDS),采用放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的浓度,RT-PCR法测定海马组织核因子-κB(NF-κB)mRNA及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达水平,并观察海马CA1区病理学结果 .结果 与S组比较,其余3组T_(1～3)时NDS升高,海马组织ICAM-1 mRNA、NF-κB mRNA表达上调,T_(1,2)时血清TNF-α浓度升高,T_(1～3)时血清IL-1β浓度升高 (P<0.05或0.01);与IR组比较,F_(1,2)组T_(1～3)时NDS降低,海马ICAM-1 mRNA、NF-κB mRNA表达下调,T_(1,2)时血清TNF-α冉档停琓_(1～3)时血清IL-1β浓度降低(P<0.05或0.01);与F_1组比较,F_2组T_(2,3)时海马ICAM-1 mRNA表达下调,T_2时血清IL-1β浓度降低(P<0.05或0.01).IR组、F_1组及F_2组海马组织病理学损伤程度依次减轻.结论 氟比洛芬酯预先给药可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤,且呈剂量依赖性,其机制可能与抑制海马组织炎性反应有关.     

神经胶质源性神经营养因子经鼻给药对老龄大鼠术后认知功能障碍的影响

目的评价神经胶质源性神经营养因子(GDNF)经鼻给药对老龄大鼠术后认知功能障碍的影响。方法健康老龄SD大鼠40只,雌雄不拘,21～23月龄,体重480～600 g,采用随机数字表法将其分为4组(n=10):假手术组(S组)、外科手术组(O组)、低剂量GDNF经鼻给药组(G1组)和高剂量GDNF经鼻给药组(G2组)。O组、G1组和G2组于水合氯醛麻醉下行剖腹探查手术,S组仅行假手术。外科手术或假手术后连续3 d,G1组和G2组分别每天经鼻吸入GDNF 25和50 μg(溶于PBS 25 μl),S组和O组分别每天经鼻吸入PBS 25 μl。术后第3～7天行Morris水迷宫实验;实验结束后处死大鼠,取海马组织,采用Western blot法检测GDNF、高迁移率组蛋白B1(HMGB1)、IL-1β、TNF-α、活化的caspase-3和Bax的表达水平。结果与S组比较,O组术后第5～7天逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,目标象限停留时间缩短,海马GDNF表达下调,IL-1β、TNF-α、HMGB1、活化的caspase-3和Bax表达上调,G1组和G2组穿越平台次数减少,目标象限停留时间...     

手术对异氟醚麻醉下老龄大鼠术后认知功能的影响

目的 探讨手术对老龄大鼠异氟醚麻醉下术后认知功能的影响.方法 健康雄性老龄SD大鼠72只,年龄20月,体重500～600 g,随机分为3组(n=24):对照组(C组)、异氟醚麻醉组(I组)和手术组(O组).C组吸入30%氧气2 h,I组吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h,O组吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h,并实施腹部手术.于麻醉结束后或术后24 h时随机取8只大鼠,取海马组织,采用免疫组织化学法和RT-PCR法分别测定神经元胆碱乙酰转移酶(ChAT)及ChAT mRNA的表达水平,其余大鼠进行Morris水迷宫实验,测定认知功能.结果 与C组比较,I组和O组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台次数减少,海马神经元ChAT mRNA及其蛋白表达水平降低(P<0.05);与I组比较,O组术后第4、5天逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,海马神经元ChAT mRNA及其蛋白表达水平降低(P<0.05);与麻醉结束后或术后第3天比较,C组第4、5天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),I组和O组逃避潜伏期延长(P<0.05);I组和O组麻醉结束后或术后第4、5天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05).结论 手术操作可加重异氟醚引起的老龄大鼠术后认知功能障碍,其机制可能与海马胆碱能神经元受损有关.     

κ阿片受体激动剂对心肺转流大鼠术后认知功能及α7nAChR表达的影响

目的探讨κ阿片受体(kappa opioid receptors,KORs)激动剂U50488H对心肺转流(cardiopulmonary bypass,CPB)后大鼠认知功能及α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAChR)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠32只,体重400～450g,随机分为四组:Sham组(S组)、CPB组(C组)、CPB+U50488H组(K组)、CPB+KORs拮抗剂Nor-BNI+U50488H组(N组),每组8只。四组大鼠于术前5d开始进行水迷宫训练,每天4次。S组不建模型,动静脉穿刺后进行机械通气60min,其余三组心肺转流60min。术后1d进行Morris水迷宫实验,随后处死大鼠,采集血清,取海马组织。采用ELISA法检测血清IL-1β、TNF-α、S100-β浓度、海马ACh含量及ChAT和AchE活性;采用Western blot法检测海马α7nAChR蛋白含量。结果与S组比较,C、K和N组逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数明显减少,目标象限游泳距离和停留时间明显缩短(P0.05);血清IL-1β、TNF-α和S100-β浓度明显升高,海马α7nAChR蛋白含量明显降低(P0.05)。与C组比较,K组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数明显增多,目标象限游泳距离和停留时间明显延长(P0.05);血清IL-1β、TNF-α和S100-β浓度明显降低,海马α7nAChR蛋白含量明显升高(P0.05)。与S组比较,C组、N组海马Ach含量及ChAT活性明显降低,AchE活性明显升高。与C组比较,K组海马Ach含量及ChAT活性明显升高,AchE活性明显降低(P0.05)。结论 KORs激动剂激活胆碱能抗炎通路,上调α7nAChR的表达,减轻炎症反应,从而改善CPB后大鼠认知功能。     

异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响

目的 探讨异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响.方法 出生7 d的SD大鼠64只,随机分为2组(n=32):对照组(C组)和异氟烷麻醉组(I组).I组大鼠吸入1.5%异氟烷麻醉6 h,C组吸入空气.I组于麻醉前(T0,基础状态)、麻醉2 h(T1)、4 h(T2)、6 h(T3)、麻醉停止后4 h(L)、6 h(T5)、12 h(T6)、24 h(T7)时,C组在对应时点各取4只大鼠,测定海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA及TNF-α mRNA的表达水平.结果 C组各时点海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA比较差异无统计学意义(P＞0.05);与C组比较,I组海马T1～5 时IL-1βmRNA表达上调,T2,3 时IL-6 mRNA表达上调,T1～6时TNF-α mRNA表达上调(P＜ 0.05).结论 1.5%异氟烷麻醉可短暂上调发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA的表达.     

急性腹腔感染与胰岛素抵抗关系及炎症因子作用时间“窗”

目的 探讨急性腹腔感染大鼠早期葡萄糖代谢与炎症因子水平的关系.方法 SD大鼠随机分为4组:A组,盲肠结扎穿孔(CLP)组;B组,腹腔脂多糖(LPS)注射组;C组,CLP加LPS注射组;D组,对照组.A,B,C组均为急性腹腔感染模型.检测各组血浆中不同时间点葡萄糖、胰岛素、肿瘤坏死因子a(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的水平.HOMA法计算胰岛素抵抗指数(IRI),以此评价胰岛素抵抗(IR)程度.结果 大鼠急性腹腔感染组(A、B、C组)早期血浆中葡萄糖水平及IRI升高,6 h达峰值.IPd变化与TNF-α,IL-6水平的对数值之间呈正相关(r=0.609和0.755).接受LPS注射者(B、C组)IL-6升高较未接受LPS注射组(A组)升高明显.IL-6较TNF-α维持时间延长.结论 急性腹腔感染早期可出现IR;TNF-α和IL-6与IR的程度呈正相关,不同感染模型的炎症因子水平变化存在差异,其作用时间"窗"不同.     

七氟烷对血管性认知功能损害大鼠炎性反应的影响

目的 探讨七氟烷对血管性认知功能损害大鼠炎性反应的影响.方法 成年雌性Wistar大鼠42只,体重200～250 g,随机分为3组:假手术组(S组,n=6)、血管性认知功能损害组(VCI组,n=18)和七氟烷组(Sev组,n=18).采用永久结扎大鼠双侧颈总动脉法建立血管性认知功能损害模型.Sev组于双侧颈总动脉结扎后,持续吸入七氟烷(呼气末浓度1.8%)和氧气0.5 L/min 12 h.S组于干预结束后2 d,VCI组和Sev组于干预结束后2、14、26 d时进行水迷宫实验和穿梭箱实验,记录学习、记忆潜伏期和被动、主动逃避次数.S组于干预结束后12 d,VCI组和Sev组于吸入七氟烷后12、24、36 d时各取6只大鼠,心脏取血后处死,取皮质和海马组织,采用酶联免疫吸附法测定血清和脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,采用RT-PCR法测定脑组织IL-1β mRNA和TNF-α mRNA的表达.结果 与S组比较,VCI组和Sev组学习潜伏期延长,记忆潜伏期、被动和主动逃避次数降低,脑组织和血清IL-1β和TNF-α的水平升高,脑组织IL-1β mRNA和TNF-αmRNA的表达上调(P<0.01);与VCI组比较,Sev组学习潜伏期缩短,记忆潜伏期、被动和主动逃避次数增加,脑组织和血清IL-1β和TNF-α的水平降低,脑组织IL-1β mRNA和TNF-α mRNA的表达下调(P<0.01).结论 七氟烷可通过抑制炎性反应减轻大鼠血管性认知功能损害.     

地塞米松通过降低S100A8表达改善小鼠七氟醚麻醉手术后的认知功能障碍

目的 观察地塞米松对七氟醚麻醉手术后认知功能的改善及其作用机制. 方法 100只成年雄性C57BL/6小鼠,采用随机数字表法分为5组(每组20只):对照组(C组)、麻醉手术组(S组)、高剂量地塞米松治疗组(H组)、中剂量地塞米松治疗组(M组)和低剂量地塞米松治疗组(L组).C组不做处理,其余各组在麻醉后行腹腔探查术.H组、M组和L组分别给予20、2.0、0.2 mg/kg地塞米松,于术前1h经腹腔注射给药.术后24 h每组随机取10只小鼠海马组织,免疫组化检测海马小胶质细胞Iba1表达,RT-PCR检测S100A8、Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、IL-6、IL-1β、TNF~ mRNA含量,Western blot检测S100A8蛋白.剩余小鼠进行5d水迷宫训练后,测定逃避潜伏期、穿越平台次数、目标象限游泳时间. 结果 与C组比较,S组小鼠术后逃避潜伏期[5d,(26.5±3.8)s]延长,穿越平台次数[(1.24±0.21)次]减少,目标象限游泳时间[(9.1±1.7)s]缩短(P＜0.05),小胶质细胞Iba1表达增加,S100A8(3.10±0.18)、TLR4(2.903±0.021)、IL-6(2.63±0.13)、IL-1β(3.733±0.160)、TNF-α(1.924±0.038) mRNA含量增加(P＜0.05).与S组比较,M组小鼠给药后逃避潜伏期缩短[5d,(17.8±2.3)s],穿越平台次数增加[(2.38±0.33)次],目标象限游泳时间延长[(14.5±2.0)s](P＜0.05);H组、M组小鼠小胶质细胞Iba1表达减少,S100A8(1.11±0.12、1.35±0.08)、TLR4(0.872±0.112、1.149±0.060)、IL-6(1.13±0.06、1.32±0.08)、IL-1β(0.755±0.059、0.941±0.133)、TNF-α(1.081 ±0.052、1.041±0.021)mRNA含量减少(P＜0.05). 结论 腹腔注射地塞米松(2.0 mg/kg),可改善小鼠七氟醚麻醉手术后认知功能,其机制可能与减少S100A8蛋白,抑制小胶质细胞活化,减少炎症因子表达有关.     

脾切除术对大鼠海马tau表达的影响

目的 评价脾切除术对大鼠海马tau表达的影响.方法 SD大鼠105只,随机分为3组,正常对照组(A组,n=15)不给予任何处理,麻醉组(B组,n=45)仅吸入1.5%异氟醚2 h,手术+麻醉组(C组,n=45)吸入1.5%异氟醚(吸入2 h)麻醉下实施脾切除术.B组和C组分别于麻醉后或术后1、3、7 d时处死15只大鼠,取海马组织,测定海马IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、TNF-α、总tau、苏氨酸第205位点磷酸化tau(pT205 tau)、丝氨酸第396位点磷酸化tau(pS396 tau)、总糖原合成酶-3β(GSK-3β)和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的表达水平.结果 与A组比较,B组各时点IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、TNF-α、总tau、pT205 tau、pS396 tau、GSK-3β和p-GSK-3β的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),C组术后IL-1βmRNA、TNF-α mRNA、IL-1β、pT205 tau和pS396 tau的表达上调,p-GSK-3β表达下调(P＜0.05或0.01).结论 手术创伤可导致大鼠海马tau磷酸化,其机制与手术创伤诱发炎性反应,从而激活GSK-3β有关.     

腹腔注射右美托咪定对糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓胶质细胞活化的影响

目的 探讨腹腔注射右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠脊髓胶质细胞活化及炎症因子表达的影响. 方法 健康清洁级雄性SD大鼠32只,体重180～200 g,采用随机数字表法大鼠分为4组(每组8只):对照组(C组)、DNP组、Dex组和α2受体拮抗剂组(YOH组).采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射法建立大鼠DNP模型.从STZ注射28 d开始:Dex组连续7d腹腔注射Dex 50 μg/kg;YOH组连续7d腹腔注射育亨宾0.1 mg/kg,之后30 min腹腔注射Dex 50 μg/kg.于注射STZ后29～35 d测定各组大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT).于35 d测定MWT后处死大鼠,采用免疫荧光双标法测定各组大鼠脊髓内小胶质细胞和星形胶质细胞的活化情况,采用ELISA法检测各组大鼠脊髓内TNF-α和IL-1的含量. 结果 与C组比较,DNP组、Dex组、YOH组3组大鼠均体重下降、血糖升高(P＜0.05);DNP组、Dex组和YOH组3组大鼠组间比较,体重和血糖差异无统计学意义(P＞0.05).与C组比较,DNP组和YOH组术后各时点MWT均降低(P＜0.05);与DNP组比较,Dex组术后各时点MWT均升高(P＜0.05).与C组比较,DNP组和YOH组大鼠脊髓内小胶质细胞活化率、TNF-α和IL-1的含量均升高(P＜0.05);与DNP组比较,Dex组大鼠脊髓内小胶质细胞活化率、TNF-α和IL-1的含量均降低(P＜0.05);各组大鼠组间比较,脊髓内星形胶质细胞活化率差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 Dex能够缓解DNP大鼠的痛觉过敏,其机制可能与抑制小胶质细胞活化,从而减轻脊髓内炎症反应有关.     

富氢液联合浅低温对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 观察富氢液联合浅低温对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠50只,周龄9～10周,体重250～300 g,随机分为5组(n=10):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(IR组)、富氢液组(H组)、浅低温组(M组)、富氢液+浅低温组(HM组).IR组、H组、M组和HM组采用结扎双侧颈总动脉的方法制备大鼠脑缺血再灌注模型,缺血15 min,再灌注6 h.H组和HM组于再灌注即刻腹腔注射富氢液5 ml/kg,其余3组腹腔注射等容量生理盐水.同时S组、IR组和M组维持直肠温37～38 ℃;M组和HM组于15 min内将直肠温降至32～34 ℃,并维持6 h.再灌注6 h时处死大鼠,取一侧海马组织,分别行尼氏染色和HE染色,光镜下观察病理学结果;取另一侧海马组织,采用Western blot法测定CA1区HO-1表达、MDA和TNF-α的含量.结果 H组、M组和HM组病理学损伤较IR组减轻,其中HM组减轻最明显.与S组比较,IR组、H组、M组和HM组海马HO-1表达上调,MDA和TNF-α的含量增加(P＜0.05);与IR组比较,H组、M组和HM组海马HO-1表达上调,MDA和TNF-α的含量降低(P＜0.05);与H组和M组比较,HM组海马HO-1表达上调,MDA和TNF-α的含量降低(P＜0.05);H组和M组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 富氢液联合浅低温可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,可能与上调海马HO-1的表达,降低MDA和TNF-α的含量有关.     

骨癌痛大鼠脊髓NF-κB、IL-6和TNF-α表达的变化

目的 评价骨癌痛大鼠脊髓NF-κB、IL-6和TNF-α表达的变化.方法 雌性健康SD大鼠72只,体重150～180 g,随机分为3组(n=24):对照组(C组)、假手术组(S组)和骨癌痛组(BP组).BP组于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μl Walker 256(1×105)乳腺癌细胞制备骨癌痛模型,S组左胫骨上端注射Hank液5μl.分别于肿瘤细胞接种前、接种后2、4、6、9、12、14、16、18和21 d时测定机械阈值.分别于肿瘤细胞接种后6、12和18 d时,处死3只大鼠,取L4-6脊髓组织,采用RT-PCR法测定NF-κB p65 mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA的表达;另处死3只大鼠,取L4-6脊髓组织,计数NF-κBp65阳性细胞,采用免疫组化法测定NF-κB p65表达.结果 与C组和S组比较,BP组机械痛阈降低,脊髓NF-κB p65及其mRNA、IL-6 mRNA和TNF-αmRNA的表达上调,NF-κB p65阳性细胞计数增加(P＜0.05或0.01);C组和S组间上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大鼠胫骨骨髓腔内注射肿瘤细胞通过激活脊髓NF-κB,导致炎性细胞因子IL-6和TNF-α大量释放,从而诱发骨癌痛.