丙型肝炎病毒酶切分型与干扰素治疗临床研究

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术对269例肝炎病人血清进行HCV NS5b区基因片段扩增,并对56例阳性PCR产物进行酶切分型,同时观察干扰素α-2b对其中48例慢性丙型肝炎的疗效。结果：HCV单纯1b型感染、1b与1b混合感染及2a型感染对干扰素的应答率分别为14／20、2／21、5／7;其中完全应答分别为9／20、1／21、4／7;部分应答分别为5／20、1／21、1／7。1b与1b混合感染组同单纯1b型及2a型感染组比较有显著性差异（P＜0．01及P＜0．05）,而单纯1b型感染组与2a型感染组比较无明显差异（P＞0．05）。结论：HCV单纯1b型感染或2a型感染者对干扰素敏感,而1b与1b混合感染者干扰素治疗效果极差,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标。     

甘肃省定西地区既往有偿献血员HCV基因型调查

目的:探讨HCV感染及其基因型与有偿献血的关系。方法:收集68例定西市安定区凤翔镇花坪村1997年以前长期有偿献血员血清,采用Stayver谱线探针杂交法检测HCV基因型。结果:68例慢性丙型肝炎患者HCV基因型表现为1a,1b,2a/2c三种亚型感染,以2a/2c为主,单纯2a/2c感染者达44.1%,合并其它感染者累计达69.1%。其次为1b型,其中单纯1b型感染者27.9%,合并其它型感染者亦为27.9%,累计55.8%,混合感染多见,其中1a,1b,2a/2c三种混合感染者居多,占20.6%。结论:当地既往有偿供血者HCV基因型以2a/2c为主,混合感染严重,后者可能与长期供血交叉感染有关。     

武威地区慢性丙型肝炎患者基因型分型与抗病毒治疗疗效分析

目的:了解武威地区丙型肝炎基因型与干扰素抗病毒治疗关系。方法:63例慢性丙型肝炎(CHC)患者,HCV-RNA采用荧光定量RT-PCR试剂盒,并对血清标本PCR扩增基因片段,测定核苷酸序列进行基因分型。采用IFN-α2b联合利巴韦林抗病毒治疗,疗程48周。全自动生化分析仪检测血清ALT。结果:63例患者基因型分型如下:HCV1b型36例,占57%;HCV2a型18例,占28%;HCV1b/2a混合型6例,占10%;HCV2b型3例,占5%。干扰素治疗中HCV1b型的SVR、RVR、EVR、ETVR的应答率分别是44.4%、55.6%、66.7%、61.1%,非HCV1b型的SVR、RVR、EVR、ETVR的应答率分别是74.1%、81.5%、92.6%、88.9%,两者分别进行χ2检验,有显著性差异(P<0.05)。结论:武威地区HCV基因型主要为1b型,其次为2a型,同时存在1b/2a混合型和2b型,干扰素对非1b型感染的疗效优于1b型,HCV基因分型有预测干扰素疗效的意义。     

云南省曲靖市非高危人群丙型肝炎病毒基因型分析

目的对曲靖市感染丙型肝炎的非高危人群进行丙型肝炎病毒(HCV)基因分型研究,寻找本地区流行基因型,为丙型肝炎的科学防治提供依据。方法采集住院病人血液,提取RNA,采用HCV特异性引物进行巢式RT-PCR扩增,PCR产物直接测序,采用生物信息学软件进行序列分析。结果共采集228例病人血清,排除具有高危因素影响的血清29例,非高危人群丙型肝炎病人血清199例。共检出4个基因型(1、2、3、6),5个基因亚型(1b、2a、3a、3b和6a),有37例不能鉴别的基因亚型。其中1b型78例(39. 2%)、2a型42例(21. 1%)、3a型15例(7. 5%)、3b型23例(11. 6%)、6a型4例(3. 0%)和未能分型37例(18. 6%)。根据文献检索提取云南省HCV基因分型流行情况,对于HIV/HCV共感染的静脉吸毒者(Intraductal Ultrasonography,IDUS)和静脉吸毒HCV感染者,前3位的基因亚型分别为3b、3a、1b;对于标本来源为医院病人,未进行感染途径分类,前3位的基因亚型分别为1b、3b、2a。结论曲靖市丙型肝炎非高危感染人群主要HCV基因亚型1b型和2a型与我国的主要基因亚型基本一致,与云南省主要的HCV基因亚型略有区别,但与同地区的HIV/HCV共感染的静脉吸毒者HCV基因型有着明显区别。     

rhIFNα_(2a)、IFNα_(2b)和IFNα_(1b)、IFNα_(1b)突变体的抗病毒效应的对比分析

目的　进一步研究不同亚型不同品牌基因工程干扰素的抗病毒效应。方法　采用微量细胞病变 (CPE)抑制法进行抗病毒试验。结果　不同品牌IFNα2a或IFNα2b5 0 0、5 0、5IU/ml在Vero细胞上分别可抗 10 0 0、10 0、10TCID50 的Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞 ;5 0 0、5 0、5IU/mlIFNα1b或IFNα1b突变体 ,在Vero细胞上分别也可抗8、4、2TCID50 的Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染细胞。结论　进口和国产不同品牌的IFNα2a或IFNα2b对上述 2种病毒具有同等抗病毒作用。IFNα1b突变体抗病毒效果和IFNα1b无明显差别。     

干扰素α_1b联合氧化苦参碱注射液治疗慢性乙型肝炎62例对照观察

目的　观察干扰素α1b(IFNα1b)与苦参素注射液联合治疗慢性乙型肝炎 (CHB)的疗效。方法　治疗组 6 2例用氧化苦参碱注射液 6 0 0mg每日 1次肌肉注射 ,4周后减为 4 0 0mg ,共16周 ;干扰素α1b 3MU每日 1次肌肉注射 ,2周后改为 3MU隔日 1次 ,共 2 4周。对照组 70例单用干扰素α1b ,用法同治疗组。观察两组疗效和不良反应。结果　疗程结束时治疗组HBVDNA和HBeAg转阴率分别为 6 9.4 % (43/ 6 2 )和 5 9.7% (37/ 6 2 ) ,均高于对照组 (P <0 .0 5 )。治疗结束后 1年治疗组HBVDNA和HBeAg均有 5 3.2 % (33/ 6 2 )持续阴性 ,明显高于对照组的 18.6 % (3/ 70 )(P <0 .0 5 )。治疗组HBVDNA和HBeAg转阴后复发率分别为 16 .3% (7/ 4 3)、13.5 % (5 / 37) ,低于对照组的 4 8.4 % (15 / 31)和 4 8.0 % (12 / 2 5 ) (P <0 .0 5 )。结论　干扰素α1b联合苦参素注射液治疗CHB可提高疗效 ,降低复发 ,减少或延迟耐药的发生。     

丙型肝炎病毒基因NS_5区酶切分型研究

目的 :了解丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与临床的关系。方法 :用逆转录套式聚合酶链反应 (RT PCR)和限制性片断长度多态性 (RFLP)分析的方法 ,对 78例HCV感染患者进行HCVNS5区基因分型。结果 :HCV 1b型感染 71例 (91% ) ,HCV 2a型 7例 (9% ) ,未发现其它基因型 ;丙型肝炎患者有无输血史、是否重叠HBV感染 ,其基因分型构成比均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;1b型HCV血清ALT异常者 (6 3.4% )明显多于 2a型(14.3 % ) (P <0 .0 5 )。结论 :本组HCV感染的基因型多数为 1b型 ,少数为 2a型 ,1b型更易致肝细胞损伤 ,并可能与活动性肝病有关     

中国不同基因型/亚型丙型肝炎病毒混合感染率的研究

目的了解我国慢性丙型肝炎病毒(heptitis C virus,HCV)感染者中不同基因型/亚型HCV混合感染率以及影响因素,为制定适合我国国情的HCV预防和治疗政策提供科学依据。方法从全国各省(台湾省除外)的省会城市、直辖市(重庆市除外)和自治区(新疆除外)的三级甲等综合医院和传染病专科医院,随机收集2009-2011年HCV RNA阳性血浆(血清)标本1 450份,记录相应的年龄、性别、民族、籍贯、职业和病毒滴度等。分别以C/E1和NS5B为目的基因进行巢式PCR扩增并克隆测序。根据感染情况分为单独感染组和混合感染组,用χ2检验及t检验比较两组性别、年龄、民族和滴度等差异(P<0.05为差异有统计学意义)。结果 C/E1和NS5B两个基因PCR扩增均为阳性的标本1 159个,HCV混合感染者为11个,其余1 148个均为单独感染。不同基因型/亚型混合感染率为0.95%。混合感染的基因型涵盖了1b、2a和6a。1b+2a混合感染9个(2a占优势的6个,1b占优势的3个);6a+2a混合感染1个(6a占优势);6a+1b混合感染1个(6a占优势)。年龄、性别、民族和滴度等两组之间差异均无统计学意义。结论全国HCV不同基因型/亚型混合感染率为0.95%。混合感染的基因型涵盖了1b、2a和6a。6a基因型在中国慢性丙型肝炎患者的混合感染中首次被报道。     

苦参碱联合α-1b干扰素治疗慢性乙型肝炎临床观察

目的 :观察苦参碱注射液和α 1b干扰素 (IFNα 1b)联合用药对慢性乙型肝炎的疗效。方法 :将 10 2例慢性乙型肝炎患者分为治疗组 5 6例和对照组 4 6例。治疗组采用α 1b干扰素 5 0 0万u ,三角肌注射 ,每周 3次 ,苦参碱注射液 15 0mg加入 10 0 g/L葡萄糖注射液 2 5 0ml中静滴 ,每日 1次 ;对照组单用α 1b干扰素 5 0 0万u ,三角肌注射 ,每周 3次。两组疗程均为 16周。治疗前后各检测肝功能、HBeAg及HBV DNA。结果 :治疗组谷氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)复常率显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;治疗组疗程结束时HBeAg、HBV DNA阴转率分别为 5 3.6 %(30 /5 6 )、 6 0 .7% (34/5 6 ) ,对照组分别为 39.0 % (18/4 6 )、 4 1.7% (19/4 6 ) ,两组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;治疗组治疗期间 ,头痛、发热、肢体酸软、白细胞减少等不良反应发生率显著低于对照组。结论 :苦参碱联合IFNα 1b可提高对慢性乙型肝炎的治疗效果 ,并且能够减轻不良反应     

聚乙二醇干扰素α联合利巴韦林治疗HCV基因3型感染者最适疗程的回顾性研究

目的 探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因3型感染者聚乙二醇干扰素α(pegylated interferon α,PEG-IFN-α)联合利巴韦林(ribavirin,RBV)抗病毒治疗的最适疗程.方法 收集PEG-IFN-α联合RBV治疗的HCV基因3型感染者临床资料,根据疗程、基因亚型分组,比较病毒学应答效果及不良反应.结果 纳入HCV基因3型感染者150例,快速病毒学应答(rapid virological response,RVR)、持续病毒学应答(sustained virological response,SVR)分别为78.52％、90.67％.HCV 3a型感染者60例,缩短疗程组、标准疗程组及延长疗程组RVR、SVR比较,无统计学差异(P＞0.05).HCV3b型感染者90例,缩短疗程组、标准疗程组及延长疗程组RVR分别为7/14 (50.00％)、51/62 (82.26％)、7/8(87.50％),缩短疗程组RVR较其他两组明显降低,有统计学差异(x2 =7.31,P＜ 0.05);SVR分别为8/15(53.33％)、63/67(94.03％)、8/8(100.00％),缩短疗程组SVR较其他两组明显降低,有统计学差异(x2=20.14,P＜0.01).延长疗程组较标准疗程组无明显差异.影响因素分析中,缩短疗程是获得SVR的独立不利因素(P＜0.01,OR=11.18,95％CI 3.79 ～ 32.92).此外,延长疗程骨髓抑制等不良反应发生率增加.结论 PEG-IFN-α联合RBV标准剂量,疗程24周,仍为HCV基因3型感染者最适治疗方案.缩短疗程会降低有效率,特别是HCV 3b型感染者.延长疗程疗效无显著提高,但骨髓抑制等不良反应增加.     

用套式RT-PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

目的　检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法　用ＲＴＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者血清ＨＣＶ,再以巢式ＲＴＰＣＲ法对ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。对多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫组化和原位杂交检测。结果　ＨＣＣ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％（３９／７８）,与ＨＢＶ者（６４．４％）差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）,两者重叠感染率３４％（２０／５９）。在１０例血清ＨＣＶ阴性ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶＲＮＡ。在ＨＣＣ组织中共检出３种ＨＣＶ基因型,其中２ａ、１ｂ、３ａ和混合型分别为１７例（４３．６％）、９例（２３．１％）、４例（１０．３％）和２例（５．１％）,各基因型间差异有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）,但２ａ型与１ｂ型间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,２ａ型与ＨＢＶ的重叠感染明显较其他ＨＣＶ基因型者常见（Ｐ＜０．０５）。结论　２ａ型ＨＣＶ是ＨＣＣ组织中最常见的基因型并易与ＨＢＶ重叠感染率,ＨＣＣ患者血清ＨＣＶ检测不一定能准确反映ＨＣＣ组织中的ＨＣＶ感染率,其所示基因型也有所不同。     

干扰素治疗丙型肝炎疗效预测因素的研究

目的：探讨能预测干扰素疗效的因素。方法：分别应用引物特异PCR法、信号引物能量转移技术、薄板层析技术、放免法及APAAP免疫桥联酶标法检测20例慢性丙型肝炎HCV基因型及干扰素治疗前后血清HCV－RNA水平，β2微球蛋白，2′－5′寡腺苷酸合成酶活性及外周血淋巴细胞亚群。结果：（1）疗前HCV－RNA量低者及治疗和随访过程中HCV－RNA量持续降低者对干扰素治疗反应好。（2）HCV－Ⅲ型患者对干扰素安全应答率高于HCV－Ⅱ型，P＜0.05。（3）疗前2′－5′寡腺苷酸合成酶活性低者对IFN治疗反应好。（4）治疗前后血清β2微球蛋白水平无显著变化，疗前不同应答组β2微球蛋白水平也无显著差异。（5）治疗后外周血CD3^ ,CD4^ 及CD4^ /CD8^ 升高，完全应答组疗前CD3^ ,CD4^ 及CD4^ /CD8^ 较部分应答组高，但无统计学差异。结论：IFN治疗前HCV－RNA水平、HCV基因型、2′－5′寡腺苷酸全盛酶活性测定可作为预测IFN疗效的指标。治疗期间及随访过程中血清HCV－RNA水平变化对IFN疗效评价有重要意义。疗前β2微球蛋白水平及淋巴细胞亚群检测不能作为预测IFN疗效的指标。     

保定市丙型肝炎病毒基因型分布特征及临床意义

目的 了解保定市丙型肝炎病毒（HCV）基因型分布特征及其与丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV-RNA）载量、肝病程度的相关性,为其防治提供依据。方法 对2010年1月—2017年9月758例HCV-RNA阳性者进行HCV的基因型检测,分析其基因型与HCV-RNA含量和肝病程度的相关性。结果 758例HCV感染患者中1b型和2a型分别为50.79%（385/758）和36.68%（278/758）。HCV基因型的分布特征与性别、感染途径及种族差异均无统计学意义（P>0.05）。1b型患者ALT、AST、GGT及HCV-RNA水平均高于2a型和其他型患者,差异有统计学意义（P<0.05）。不同程度肝病患者的HCV基因型分布差异有统计学意义（P<0.05）,1b型丙肝肝硬化及肝癌比例高于其他基因型,差异有统计学意义（P<0.05）。1b型患者对长效干扰素加利巴韦林治疗的ETVR应答率（57.92％ vs 83.09％）和SVR应答率（24.68％ vs 60.79％）均明显低于2a型患者（P<0.05）。相关分析显示,1b型患者ALT与HCV-RNA呈正相关（r=0.685,P<0.01）。结论 保定市丙型肝炎病毒基因型流行株为1b型和2a型,其中1b型与丙肝肝硬化、肝癌的产生有一定的相关性。     

丙型肝炎病毒准种复杂性与干扰素疗效关系的初步探讨

目的：探讨丙型肝炎病毒(HCV)1b型基因高变区1(HVR1)、非结构5A(NS5A)区准种复杂性及与干扰素(IFN)疗效关系。方法：应用SSCP法检测慢性丙型肝炎患者IFN治疗前后HCV准种的动态变化。结果：治疗前IFN治疗有效组HCV HVR1准种的复杂性(SSCP条带数)明显低于无效组，NS5A区两组无差异。无效组在治疗过程中，大部分患者HVR1 SSCP条带数较治疗前有所减少。结论：HVRl准种的低复杂性预示对IFN治疗产生应答，可以进行疗效预测。NS5A区准种的复杂性与IFN疗效无关，不能用于疗效预测。     

HCV基因型混合感染与干扰素疗效关系的初步探讨

目的了解丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)基因型与干扰素(interferon,IFN)疗效的关系,探索影响IFN疗效的指标。方法采用型特异性引物PCR法进行基因分型,Fisher'sexact法分析IFN的疗效。结果1b与1b 2型患者IFN疗效间差异无显著性,HCV1b感染者与合并HBV感染的HCV1b患者IFN疗效间差异无显著性。结论HCV1b患者IFN的疗效与其是否合并HCV2或HBV感染无关。     

淮北市HCV感染者基因亚型分布特征及1b型天然耐药突变分析

目的：分析淮北市HCV感染病人基因亚型分布特征及1b型天然耐药突变情况，为HCV临床抗病毒治疗和感染防控提供依据。方法：选取2019-2022年就诊于淮北矿工总医院住院的HCV感染者(未经任何DAAs治疗)HCV-RNA阳性血清样本，抽提RNA后逆转录，采用巢式PCR扩增NS5B、NS5A及NS3/4A区域基因序列，产物送交测序公司测序。采用Mega11.0软件对测序结果进行序列比对分析。结果：结果 HCV 1b型(68.63%)为主要亚型，2a型次之(29.41%),此外检出3a型2例(1.96%)。HCV亚型的分布与性别、年龄无明显相关(P>0.05),1b型多见于≥55岁年龄组中。RASs主要类型为：NS5B区C316N(100.00%);NS5A区Q54H(40.47%),Y93H(19.05%);NS3/4A区Q86P(30.88%),I71V+Q86P(19.12%),V170I+Q86P(14.71%)及T72I/A+Q86P(13.24%)。其中突变频率较高的RASs依次为：C316N(100.00%)、Q54H(60.00%)、Q86P(53.78%)、Y93H...     

聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的病毒学应答

目的研究聚乙二醇干扰素α-2b(PEG-IFNα-2b)联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的病毒学应答情况。方法回顾性分析40例接受抗病毒治疗的慢性丙型肝炎不同基因型患者的临床资料,根据患者体重给予剂量个体化的PEG-IFNα-2b和利巴韦林,hepatitisCvirus-1型感染者治疗48周,非HCV-1型感染者治疗24周。分别在治疗前、治疗后12周、治疗结束时及治疗结束24周后测定患者血浆HCVRNA水平。结果HCV-1型感染者24例(60.0%),非HCV-1型感染者16例(40.0%);HCV-1型和非HCV-1型患者早期病毒学应答(EVR)率分别为75.0%(18/24例)和87.5%(14/16例),治疗终点病毒学应答(ETVR)率分别为80.0%(16/20例)和85.7%(12/14例),持久病毒学应答(SVR)率分别为56.2%(9/16例)和78.5%(11/14例)。结论基于患者体重的剂量个体化PEG-IFNα-2b联合利巴韦林可有效治疗不同基因型慢性丙型肝炎。     

干扰素治疗丙型肝炎效果随访研究

目的：探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型与干扰素治疗后ＨＣＶＲＮＡ阴转远期效果的相关性。方法;采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法。结果：干扰素治疗后,经过１８ｍｏ－２６ｍｏ的随访,Ⅱ－１ｂ型ＨＣＶＲＮＡ持续阴转率为２０．０％;Ⅲ／２ａ型为７０．０％,两型疗效相差非常显。结论;干扰素治疗丙型肝炎的疗效与丙型肝炎病毒基因型有关,对Ⅲ／２ａ型的疗效优于Ⅱ／１ｂ。     

HCV/HBV共感染者抗病毒治疗疗效分析

目的探讨干扰素(IFN)联合利巴韦林治疗丙型肝炎病毒/乙型肝炎病毒(HCV/HBV)共感染患者的疗效。方法46例HCV/HBV共感染者、56例单独HCV慢性感染者及60例单独HBV慢性感染者使用聚乙二醇干扰素α-2a(其中HCV/HBV共感染者及单独HCV慢性感染者联合利巴韦林)治疗48周,停药随访24周,分析疗效。结果治疗后,HCV/HBV共感染者取得持续病毒学应答(SVR)13.04%与单独HCV慢性感染者取得SVR(48.21%)的差异有统计学意义(OR值:6.207,95%CI:1.655-23.28,χ2=8.562,P=0.003)。单独HBV慢性感染者取得SVR者(45.00%)与HCV/HBV共感染者取得SVR者(13.04%)的差异有统计学意义(OR值:5.455,95%CI:1.463-20.332,χ2=7.357,P=0.007)。结论HCV/HBV共感染比单独HCV或单独HBV慢性感染更难治,干扰素α联合利巴韦林治疗HCV/HBV共感染有疗效,但需要进一步优化治疗。