ApoE血清水平及基因多态性与冠心病痰瘀证候关系的研究

目的：从基因多态性角度探讨冠心病（CHD）痰瘀证的实质。方法：将97例冠心病患者分为痰证组、瘀证组、痰瘀讧组;另设体检健康人群对照组35例。应用聚合酶连反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）核苷酸分型技术检测冠心痛痰瘀证ApoE的基因型。结果：CHD组与对照组ApoE血清水平比较,差异有非常显著性意义（P〈0．01）;CHD组各证型ApoE血清水平均明显高于对照组,差异有非常显著性意义（P〈0．01）：各证型比较,痰瘀证组较其他2证型高,差异有非常显著性意义（P〈0．01）,瘀证亦高于痰证,差异有显著性意义（P〈0．05）。E3／4基因型和E4等位基因频率在痰证患者中明显高于痰瘀证及瘀证患者（P〈0．05）,而E3／3基因型及E3等位基因在痰瘀证及瘀证患者中的频率则明显高于痰证患者（P〈0．05）。结论：ApoE第4外显子的基因型及等位基因频率在冠心病不同中医证候中的分布有明显差异,变异等位基因E4携带者更倾向于发生疾证,表明E4等位基因,特别是E3／4基因型可能是CHD及中医痰证的主要易感基因之一。     

缺血性中风阴阳类证与细胞间黏附分子-Ⅰ基因多态性的相关性研究

目的：观察缺血性中风阳类证、阴类证与细胞间黏附分子Ⅰ（ICAM-Ⅰ）基因K469E多态性的相关性。方法：选择缺血性中风患者（设为观察组）177例，其中中医辩证属阳类证57例，阴类证120例。另同期选择健康体检者112例设为对照组。运用多聚酶链式反应技术（PCR）检测ICAM-Ⅰ基因K469E多态性基因型和等位基因分布频率，并观察各项危险因素与缺血性中风相关性及与中医辨证关系。结果：观察组KK纯合子频率低于对照组，KE杂合子频率、E等位基因频率均高于对照组，2组比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）。观察组中阴类证KK纯合子频率显著低于对照组，与对照组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01）；KE杂合子频率、E等位基因频率均显著高于对照组，与对照组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。观察组高血压病、糖尿病、吸烟个体比例以及血糖、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平均高于对照组，高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）水平低于对照组，2组比较，差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05，P〈0．01）。观察组中阴类证HDL—C水平低于阳类证患者，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：ICAM—Ⅰ基因K469E多态性的E等位基因携带者可能导致患脑梗死的风险增加，而在阴类证个体中，该风险进一步增强，提示缺血中风阴类证和阳类证患者具有不同的遗传体质特征．     

FIB与冠心病中医证型及体质量的相关性研究

目的：探讨纤维蛋白原（FIB）与冠心病中医证型、体质量的关系。方法：选择符合气虚血瘀型或痰瘀互阻型的CHD患者161例,检测FIB并作比较。结果：CHD男性患病率明显较女性高,两组性别分布有显著差异（P=0．001）;痰瘀互阻组体质量、FIB显著偏高,统计学差异显著（P〈0．01）。结论：CHD痰瘀互阻型患者男性较多;体质量、FIB升高可作为CHD痰瘀互阻型的临床客观参考指标。     

冠心病痰瘀证候与载脂蛋白E第一内含子增强子基因多态性关系的研究

目的:探讨冠心病(CHD)不同的痰瘀证候与载脂蛋白E基因第一内含子增强子(ApoE IE1)多态性的关系.方法:选择符合条件的CHD中医痰证、瘀证、痰瘀互阻证和非痰非瘀证(其他证型)患者200例,另选100例健康对照,常规检测所有样品的血脂水平.提取全血DNA,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测apoE IE1的基因型.采用SAS软件进行相关性分析.结果:各基因型间血脂水平的差异未达到显著性意义,但C/C,C/G,G/G基因型患者的总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平顺序有依次升高的趋势.CHD患者中的G/G基因型显著多于健康对照,并在痰证和痰瘀互阻证中的分布多于瘀证和非痰非瘀证.G等位基因与apoE第四外显子ε4等位基因密切相关.结论:ApoE第一内含子增强子BspLI位点的G/G基因型可能是冠心病痰证及痰瘀互阻证的易感基因型之一.     

痰瘀同治方治疗冠心病心绞痛的临床研究

目的：探讨痰瘀同治方治疗冠心病心绞痛痰瘀互结证的临床作用机理。方法：对冠心病心绞痛痰瘀互结证、瘀血证、痰浊证110例随机对照观察。结果：痰瘀互结组心绞痛缓解率、中医症状改善率明显优于瘀血组和痰浊组（P＜0．05～0．01）,并具有较好的改善血脂代谢、血液流变性和抗氧化作用。结论：痰瘀互结是冠心病心绞痛的主要病机,痰瘀同治方是治疗冠心病心绞痛痰瘀互结证的有效方药。     

血管内皮生长因子与胃癌中医证型关系的研究

目的检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth fator,VEGF）在胃癌不同中医证型的表达,探讨VEGF与中医证型的关系,揭示病与证之间的内在联系。方法手术前至床边辨证并详细记录有关资料。术后标本常规病理检查,并用免疫组化S—P法检测脾胃虚弱、肝胃不和、痰瘀毒结三证型胃癌104例和对照组浅表性胃炎30例组织中VEGF蛋白的表达,结合相关临床病理特征及VEGF在各个证型的表达情况进行分析。结果（1）实验组胃癌组织VEGF蛋白阳性表达率为81．7％（85／104）,对照组无VEGF蛋白阳性表达,两组比较差异有显著性（P〈0．01）。（2）VEGF表达强度与胃癌浸润深度、淋巴结转移及病理分期呈正相关（P〈0．01）,与肿瘤的大小、分化程度无明显相关（P〉0．05）。（3）胃癌不同证型之间VEGF蛋白表达水平差异有显著性（P〈0．01）,痰瘀毒结证组高于脾胃虚弱证组,差异有显著性（P〈0．01）,肝胃不和证组高于脾胃虚弱证组,差异有显著性（P〈0．05）,痰瘀毒结证组高于肝胃不和证组,差异有显著性（P〈0．05）。结论（1）VEGF可作为胃癌浸润、转移及预后的指标之一。（2）VEGF差异表达在不同证型转移的过程中所起作用不同,不同证型的转移机制可能存在差异。VEGF是胃癌肝胃不和证和痰瘀毒结证的相关基因。（3）VEGF高表达与肝胃不和证和痰瘀毒结证胃癌的转移存在显著正相关,提示胃癌邪实越明显,其浸润转移的机率越高,预后越差。     

痰、瘀与原发性血脂异常的相关性研究

目的：探讨痰、瘀与原发性血脂异常及患者年龄、病程、体质量指数、血脂水平、颈动脉斑块形成之间的相关性。方法：收集2012年2月至10月就诊的185例血脂异常患者,根据临床症状、体征（包括舌象、脉象）将其分为痰瘀互结证和气血两虚证。记录其年龄、病程、身高、体质量、血脂水平及颈动脉血管超声结果,并进行统计分析。结果：185例血脂异常患者中医辨证分型中痰瘀互结证占161例,气血两虚证占24例。两种中医证型比较：痰瘀互结证低密度脂蛋白一胆固醇（LDL—C）显著升高（P〈0．05）,气血两虚证高密度脂蛋白一胆固醇（HDL—C）显著降低（P〈0．01）,而年龄、病程、体质量指数、颈动脉斑块形成之间比较,无显著性差异（P〉0．05）。结论：原发性血脂异常患者以痰瘀互结证更为常见,且与LDL—C水平呈显著相关性,为中医辨证分型客观化提供证据,为从痰瘀辨证治疗血脂异常提供理论依据。     

载脂蛋白E基因多态性与原发性高脂血症中医辨证的相关性研究

目的 探讨载脂蛋白E（ApoE）基因多态性与原发性高脂血症中医辨证的相关关系。方法 采用基因测序法检测102例高脂血症患者的ApoE基因型。结果 共检出5种基因型,分别是E2/2、E3/3、E4/4、E2/3、E3/4;肝肾阴虚证E3/4＋E4/4基因型频率和e4等位基因频率明显高于脾肾阳虚证和痰浊阻遏证（P〈0．05,P〈0．01）,气滞血瘀证E3/4＋E4/4基因型频率和ε4等位基因频率也明显高于痰浊阻遏证（P〈0．05）。结论 ApoE基因多态性与原发性高脂血症中医辨证具有一定的相关性。     

急性冠脉综合征痰瘀证候若干炎症因子的临床研究

目的：从炎症角度探讨急性冠脉综合征（ACS）痰瘀证的实质以及痰瘀证、血瘀证2种证型血清炎症和血脂指标的变化规律。方法：将124例患者分为痰瘀证组77例，血瘀证组47例，另设健康对照组10例。通过检测比较痰瘀证组与血瘀证组的炎症和血脂指标，观察2组各项指标的差异和变化的规律。结果：2证型组与健康对照组的C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、纤维蛋白原（FIB）、CD40配体（sCD40L）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的水平比较，差异均有显著性意义（P〈0．05），痰瘀证组IL-6、sCD40L和CRP的血清水平均高于ACS血瘀证组，2组IL-6和sCD40L比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01），2组CRP比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C），2证型组与健康对照组的各项指标比较，差异均无显著性意义（P〉0．05）。结论：ACS痰瘀证组的炎症因子水平高于血瘀证组，提示前者的炎症活动可能更为活跃，支持了中医认为ACS痰瘀证比血瘀证更为严重的辨证规律，同时为“同病异证”的理论提供依据。     

三维益心方调节冠心病患者sICAM-1、sVCAM-1的临床研究

目的：观察中药三维益心方对冠心病（CHD）患者可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）和可溶性血管细胞黏附分子-1（sVCAM-1）的调节作用。方法：选择80例西医诊断CHD且中医辨证分型为痰瘀互结型的患者,随机分为2组,并筛选健康对照组40例。中药组服用三维益心方,西药组给予辛伐他汀片,疗程4周,比较治疗前后sICAM-1和sVCAM-1水平。结果：CHD患者血浆sICAM-1和sVCAM-1水平显著高于健康对照组（P〈0．05）;中药组和西药组治疗后sICAM-1和sVCAM-1水平均下降,与治疗前比较有显著性差异（P〈0．05）;中药组sICAM-1和sVCAM-1下降程度优于西药组（P〈0．05）。结论：三维益心方可有效调节ICAM-1和VCAM—1分泌水平,从而抑制病变局部的炎症反应。     

老年冠心病痰瘀证ApoE基因多态性分布特点研究

目的：探讨载脂蛋白E（ApoE）基因多态性在老年冠心病痰瘀证的分布特点。方法：选择50例冠心病痰瘀证型患者及30例健康老年人对照者，进行ApoE基因型检测。结果：发现6种基因型，分别为E3／3、E4／3、E4／4、E4／2、E2／2、E2／3，老年冠心病痰瘀证型患者ApoE4／3基因型和84等位基因频率均高于健康老年对照组；ApoE基因型分布不存在性别差异。结论：ApoE基因多态性与老年冠心病痰瘀证有一定关系，FA／3基因型与中医痰瘀证有一定关系。     

缺血性中风中医辨证分型与ICAM-1和CD62P表达水平的相关性

目的观察缺血性中风中医证型与血中性粒细胞表面细胞间黏附分子(ICAM-1)和血小板膜上P选择素(CD62P)变化的关系,探讨缺血性中风的发病机理。方法将72例缺血性中风患者按中医辨证分为3个证型组：即痰瘀阻络型组、痰热腑实型组和气虚血瘀型组,每组24例,另设一健康人对照组(24名)、用流式细胞仪测定各组患者的ICAM-1、CD62P的表达水平。结果缺血性中风患者ICAM-1、CD62P水平均显著高于健康人对照组(P<0．01),其中痰瘀阻络型组ICAM-1的表达水平显著高于气虚血瘀型组和痰热腑实型组(P<0．01);痰瘀阻络型组和气虚血瘀型组CD62P的表达水平显著高于痰热腑实型组(P<0．01)。结论缺血性中风不同证型的ICAM-1、CD62P表达水平存在一定的差异性,ICAM-1反映了体内痰阻或痰瘀互结的病理状态,而CD62P则反映了体内血瘀状态。提示痰瘀阻络可能是缺血性中风的病机关键．     

冠心病血瘀证患者血管紧张素转换酶基因多态性的检测分析

目的探讨血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与冠心病（CHD）心血瘀阻证候及血管紧张素Ⅱ（AgⅡ）的相关关系。方法检测CHD心血瘀阻证组、CHD非心血瘀阻证组、非CHD心血瘀阻证组和健康人对照组ACE基因型（DD、ID、II和等位基因（D、I）及AgⅡ活性。结果CHD心血瘀阻证组DD基因型和D等位基因的频率显著高于其他3组；4组中ACE基因DD型的AgⅡ活性比ACE基因Ⅱ型显著增高（P＜0．05或P＜0．01）；CHD心血瘀阻证组ACE基因DD型亦较ID基因型患者的AgⅡ活性显著增高（均P＜0．01）。两个心血瘀阻证组3个基因型的AgⅡ活性均明显高于健康人对照组（P＜0．01）。结论提示ACE—DD基因型和D等位基因的频率增高可能与CHD心血瘀阻证有一定内在联系，可能与D等位基因导致AgⅡ异常增多有关。     

冠心病痰瘀证型的胰岛素抵抗与单核细胞PPARγ mRNA表达

目的探讨冠心病（胸痹）痰瘀证型与胰岛素抵抗及外周血单核细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ信使核糖核酸（peroxisome proliferator activated receptor-γ messenger ribonucleic acid,PPARγ／mRNA）表达的关系。方法入选60例冠心病患者分为非痰非瘀组、痰凝心脉组及痰瘀互结组,每组各20例,另选健康志愿者20名为正常对照,测空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）,计算胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR）,分离外周血单核细胞,应用逆转录-聚合酶链反应法（RT—PCR）检测PPARγ mRNA的表达。结果与正常对照组比较,3个证型组患者FINS、HOMA—IR及PPARγ mRNA表达水平均增高（P〈0．01或P〈0．05）;与非痰非瘀组比较,痰凝心脉组及痰瘀互结组患者FINS、HOMA—IR和PPARγ mRNA表达水平逐渐增高（P〈0．05或P〈0．01）,且痰凝心脉组与痰瘀互结组的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胰岛素抵抗和单核细胞PPARγ mRNA的表达变化可能是冠心病（胸痹）痰瘀演变的机制之一。     

痰瘀互结证对高血压前期患者hs-CRP、TNF-α、IL-4、IL-6、ICAM-1水平的影响

目的:研究痰瘀互结证对高血压前期患者hs-CRP、TNF-α、IL-4、IL-6、ICAM-1水平的影响。方法:共纳入初诊为高血压前期患者133例,按照中医证型分为痰瘀互结证69例,非痰瘀互结证64例,同时纳入30例理想血压健康体检者30例作为对照组,测定其血清hs-CRP、TNF-α、IL-4、IL-6、ICAM-1水平,观察高血压前期与上述指标的相关性,并探讨痰瘀互结证对高血压前期患者炎症反应的影响。结果:①高血压前期组与对照组相比,hs-CRP、TNF-α、IL-4、IL-6、ICAM-1水平显著升高(P<0.01);②痰瘀互结组与非痰瘀互结组相比,hs-CRP、TNF-α、IL-4、ICAM-1水平显著升高(P<0.01)。结论:①作为高血压病的早期阶段,高血压前期就已经发生了炎症损伤,进而表明,炎症损伤贯穿了高血压病发生发展的整个过程,是高血压病发生发展的重要环节;②痰瘀互结组患者的炎症因子及hsCRP水平明显高于非痰瘀互结组,说明痰瘀互结组较非痰瘀互结组发生更明显的炎症损伤,为高血压前期中医辨证分型提供客观依据,并为中医药干预高血压前期提供研究方向。     

2型糖尿病痰(湿)热互结证与抵抗素的相关性研究

目的：探讨2型糖尿病患者痰（湿）热互结证与抵抗素的关系，以及抵抗素与其他指标的相关性。方法：将48例2型糖尿病患者，分为痰（湿）热互结组和非痰（湿）热互结组，另设20例正常对照组，测定其抵抗素水平及体重指数（BMI）、腰围（WC）、血脂（TC、TG）、空腹血糖（FBG）、胰岛素（FINS）、C肽。结果：痰（湿）热互结组、非痰（湿）热互结组与正常对照组各项指标比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）；抵抗素、WC、TC、FINS、HOMA—IR等指标痰（湿）热互结组与非痰（湿）热互结组比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）；痰（湿）热互结组患者抵抗素与糖尿病各项指标进行Spearman相关性分析，提示抵抗素与WC、FINS、HOMA—IR呈正相关，差异有显著性意义（P〈0．05）；与TG、TC等无明显相关。结论：2型糖尿病痰（湿）热互结证与血清抵抗素有关。     

分泌性中耳炎患者血清中炎性介质ET-1微观辨证价值研究

目的：探讨分泌性中耳炎（SOM）患者血清内皮素-1（ET-1）含量与其辨证分型的关系,为其微观辨证提供临床实验依据。方法：收集SOM不同辨证分型患者风热型36例、湿热型38例、痰瘀型20例,正常组40例,采用ELISA法测定SOM各证型患者血清中炎性介质ET-1含量。结果：各证型血清ET-1含量比较,正常组显著低于风热型和湿热型（P〈0．01）,但与痰瘀型无显著差异（P〉0．05）;风热型显著高于痰瘀型和正常组（P〈0.05,P〈0．01）;湿热型均显著高于风热型、痰瘀型和正常组（P〈0．05,P〈0．01,P〈0.01）;痰瘀型显著低于风热型（P〈0．01）,但与正常组比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：各证型SOM患者血清中ET-1含量以湿热型最高,风热型次之,痰瘀型最低,3型之间差异显著,可以作为辨证分型的微观依据,提示血清中炎性介质ET-1对SOM患者微观辨证分型具有一定的参考价值。     

先天性心脏病手术围手术期中医证候分布和演变规律的研究

目的：探讨先天性心脏病手术围手术期中医证候分布和演变规律。方法：总结230例先天性心脏病手术的患者的临床病案资料,分析围手术期中医证型的变化特点及其与临床客观指标的关系。结果：术后第1天气虚、阳虚、血虚、血瘀、痰浊、气阴两虚、气虚痰瘀与术前1天比较,差异有非常显著性意义（P〈0．01）;术后第3天阳虚、血虚、痰浊、气阴两虚与术后第1天比较,差异有非常显著性意义（P〈0．01）;术后第7天阳虚、血虚、血瘀、痰浊、气阴两虚、气虚痰瘀与术后第3天比较,差异有显著性意义（P〈0．05）。法乐氏四联征（TOF）术后发生气虚、血虚、气阴两虚的机会显著低于其他先天性心脏病（P〈0．05）,而阳虚、血瘀、痰浊发生机会较高（P〈0．01）。室间隔缺损（VSD）术后发生阳虚机会较高（P〈0．01）,房间隔缺损（ASD）术后出现气阴两虚证比例显著高于其他先天性心脏病（P〈0．01）,肺动脉狭窄（PS）术后发生痰浊、气虚痰瘀证机会较高（P〈0．01）。阳虚组年龄、体重显著低于其他证候组,肺动脉压／主动脉压（Pp／Ps）、心脏指数（CI）显著高于其他证候组（P〈0．01）;阳虚、血虚组体外循环时间显著长于其他证候组（P〈0．01）;而痰浊、气虚痰瘀组Pp／Ps显著低于其他证候组（P〈0．01）。结论：先天性心脏病手术围手术期中医证候分布有差异性。各客观指标与证型间有相关性,其演变有一定的规律性。     

非酒精性脂肪肝中医证候分布特点及相关因素的临床分析

目的：探讨非酒精性脂肪肝（NAFLD）中医证候分布特点及中医证型与年龄、性别、体重指数（BMI）、实验室结果等的相关性。方法：采用统一的量化表格,进行流行病学问卷调查,根据中医辨证分型标准判定证型,结合数理统计方法,比较各证型与年龄、性别、BMI、实验室结果等的相关性。结果：证型分布：肝郁脾虚型147例（52％）,湿热内蕴型81例（28％）,痰湿内阻型34例（12％）,痰瘀互结型21例（7％）,肝肾不足型2例（1％）。各证型出现的高峰期主要集中在30-50岁,男性发病率多于女性,但差异无显著性意义（P〉0．05）。BMI越大,脂肪肝检出比例越大,二者呈正相关,体重超重、肥胖是NAFLD的一个重要危险因素。谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）在痰瘀互结型、湿热内蕴型患者中升高较肝郁脾虚型、、痰湿内阻型明显,差异均有非常显著性意义护〈0．01）,提示这2种证型的患者肝脏炎症活动可能较明显。肝郁脾虚型患者的总胆固醇（TC）较其余3种证型降低,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）。结论：本研究中NAFLD中医证型主要为肝郁脾虚型、湿热内蕴型、痰湿内阻型、痰瘀互结型,中老年是NAFLD发病的高峰期,体重超重、肥胖是NAFLD的重要危险因素。     

冠心病痰瘀互结证的组学研究进展与思考

借助高通量测序的组学技术探讨冠心病痰瘀互结证的证候实质,主要集中在基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学4个方面.通过梳理目前冠心病痰瘀互结证组学研究文献,发现基因组学研究相对成熟,KDR等基因多态性位点、白细胞介素6等功能基因研究成果有利于揭示冠心病痰瘀互结证的内在遗传基础;转录组学研究以miRNA为机制研究的焦点...